…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人民版選擇性必修3生物下冊月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識點；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、在胚胎移植過程中，很多操作步驟都需要“檢查”，以避免后期人力、物力、財力的浪費(fèi)，下列相關(guān)說法錯誤的是（）A.體外受精的受精卵移入特定培養(yǎng)液中培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力B.胚胎移植前，要對胚胎進(jìn)行檢查以確定其是否發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段C.在胚胎分割時，應(yīng)取樣內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞做DNA分析，以檢查胚胎的性別D.胚胎移植入受體母畜的子宮后，還需對受體母畜進(jìn)行是否妊娠檢查2、下列關(guān)于目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的描述不正確的是A.基因槍法導(dǎo)入植物體細(xì)胞的方法比較經(jīng)濟(jì)有效B.顯微注射技術(shù)是轉(zhuǎn)基因動物中采用最多的方法C.大腸桿菌最常用的轉(zhuǎn)化方法是：使細(xì)胞的生理狀態(tài)發(fā)生改變D.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法是將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞最常用的方法3、植物被野生型農(nóng)桿菌感染后會產(chǎn)生瘤狀結(jié)構(gòu)（類似愈傷組織）；主要原因是農(nóng)桿菌附著植物細(xì)胞后，T-DNA首先在農(nóng)桿菌中從右邊界到左邊界被剪切；復(fù)制，然后進(jìn)入植物細(xì)胞并整合到染色體上，繼而誘發(fā)細(xì)胞異常生長和分裂，形成植物腫瘤。Ti質(zhì)粒中含有生長素合成基因、細(xì)胞分裂素合成基因和冠癭堿合成基因。冠癭堿是農(nóng)桿菌生命活動必需的有機(jī)物質(zhì)，而植物自身不能合成和利用。下圖為農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的T-DNA區(qū)段結(jié)構(gòu)示意圖。以下有關(guān)敘述正確的是（）

A.植物腫瘤的形成與生長素基因和細(xì)胞分裂素兩個基因的在農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)有關(guān)B.清除植物腫瘤組織中的農(nóng)桿菌后腫瘤不再生長C.利用T-DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)基因時不需保留左邊界和右邊界序列D.去除冠癭堿合成基因，農(nóng)桿菌在被感染植物體內(nèi)不能大量繁殖4、下列與動物細(xì)胞培養(yǎng)有關(guān)的敘述，不正確的是（）A.細(xì)胞體外培養(yǎng)需要糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)B.當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互抑制時，細(xì)胞就會停止分裂增殖C.需將細(xì)胞置于含有95%O2和5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.培養(yǎng)的動物細(xì)胞可用于檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)的毒性5、引物的設(shè)計是影響PCR擴(kuò)增反應(yīng)的效率和特異性的關(guān)鍵因素，相關(guān)敘述正確的是（）A.引物的堿基數(shù)量越少則退火溫度越低、目標(biāo)DNA獲得率越高B.根據(jù)需要可在引物的5’端添加限制酶識別序列、點突變序列等C.兩種引物的退火溫度差異較大，可減少引物與模板的非特異性結(jié)合D.引物的GC含量越高，結(jié)合特異性越強(qiáng)，越利于目標(biāo)DNA的擴(kuò)增6、下列關(guān)于質(zhì)粒的說法正確的是（）A.質(zhì)粒是獨立于原核細(xì)胞擬核DNA之外的雙鏈DNA分子B.基因工程操作中的質(zhì)粒一般都是天然存在的，無需改造C.質(zhì)粒具有某些標(biāo)記基因，便于對目的基因進(jìn)行檢測和鑒定D.質(zhì)粒上的基因表達(dá)不遵循中心法則，所以可用作外源DNA分子的載體7、植物細(xì)胞工程包括植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交等技術(shù)，具有廣泛的應(yīng)用前景和實用價值。下列對這些操作或應(yīng)用的描述錯誤的是（）A.可用PEG誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合，再生出細(xì)胞壁是融合成功的標(biāo)志B.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)去壁前，需對兩種植物細(xì)胞進(jìn)行滅菌處理，以防止雜菌污染C.植物培養(yǎng)基中常用的植物生長調(diào)節(jié)劑，一般可以分為生長素類，細(xì)胞分裂素類和赤霉素類D.獲取植物原生質(zhì)體時，需在與細(xì)胞液濃度相當(dāng)?shù)木彌_液中進(jìn)行8、人們可以運(yùn)用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得抗線蟲病的雜種蘿卜一油菜植株；已知蘿卜具有抗線蟲病基因，而油菜容易被胞囊線蟲侵染造成減產(chǎn)。科研人員以蘿卜和油菜為親本進(jìn)行體細(xì)胞雜交，以獲得抗線蟲病的雜種植株，具體操作流程如圖所示。下列說法錯誤的是（）

A.過程③中施加的生長素的含量要高于細(xì)胞分裂素的B.對雜種植株接種胞囊線蟲進(jìn)行個體水平上的鑒定C.可通過觀察是否含有葉綠體來對融合細(xì)胞進(jìn)行初步篩選D.過程④中需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)墓庹找源龠M(jìn)細(xì)胞中葉綠素的合成9、下列關(guān)于轉(zhuǎn)基因生物安全性的敘述，錯誤的是（）A.轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物，會導(dǎo)致昆蟲群體抗性基因頻率增加B.轉(zhuǎn)基因作物被動物食用后，目的基因會轉(zhuǎn)入動物體細(xì)胞中C.種植轉(zhuǎn)基因植物有可能因基因擴(kuò)散而影響野生植物的遺傳多樣性D.轉(zhuǎn)基因植物的目的基因可能轉(zhuǎn)入根際微生物評卷人得分二、多選題(共8題，共16分)10、表中生物工程實驗選擇的材料與實驗?zāi)康拇钆浜侠淼氖牵ǎ?/p>

。組別實驗?zāi)康膶嶒灢牧喜牧咸攸cA獲得生產(chǎn)人生長激素的轉(zhuǎn)基因動物乳腺細(xì)胞分泌乳汁將相應(yīng)產(chǎn)物排出體外B獲得脫毒苗莖尖分生區(qū)附近病毒極少，甚至不含病毒C獲得植物突變體愈傷組織細(xì)胞分裂能力強(qiáng)，易誘發(fā)突變D胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)能分化形成各種組織和器官A.AB.BC.CD.D11、運(yùn)用細(xì)胞工程技術(shù)獲得單克隆抗體時，必要的操作是（）A.對小動物注射特定抗原B.融合并篩選雜交瘤細(xì)胞C.原代培養(yǎng)效應(yīng)B細(xì)胞D.將胰蛋白酶注入小動物腹腔12、良種試管牛的繁殖過程是用激素促進(jìn)甲牛多排卵，然后把卵母細(xì)胞在體外與人工采集的乙牛的精子進(jìn)行受精，在特定培養(yǎng)基上培育成胚胎，再把胚胎送入經(jīng)過激素處理的丙牛的子宮內(nèi)，孕育成試管牛。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.“用激素促進(jìn)甲牛多排卵”的激素是孕激素B.產(chǎn)生試管牛的生殖方式屬于有性生殖C.甲牛、乙牛對試管牛核基因的貢獻(xiàn)相同D.該技術(shù)可應(yīng)用于加速優(yōu)良種畜的繁殖13、下列有關(guān)動物細(xì)胞工程操作的敘述，錯誤的是（）A.動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入瓊脂B.動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交都能形成雜種個體C.干細(xì)胞存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，有著自我更新能力及分化潛能D.動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植14、為保障公共健康；需要定期對公共飲用水進(jìn)行衛(wèi)生檢測。飲用水的衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)是100mL不得檢出大腸桿菌或者1000mL不超過3個大腸桿菌。若要確定飲用水是否合格，可采用膜過濾法檢測，過程如下圖所示。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

A.檢測前一般需要對水樣收集瓶、培養(yǎng)皿、鑷子等進(jìn)行干熱滅菌B.完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上，在25℃下培養(yǎng)觀察C.為減少實驗誤差，應(yīng)按照上述實驗步驟多次取樣重復(fù)進(jìn)行檢測D.可用血細(xì)胞計數(shù)板直接計數(shù)法替代膜過濾法檢測飲用水中的大腸桿菌數(shù)量15、關(guān)于現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用的安全性，下列說法正確的是（）A.對待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅定，即堅決禁止生物武器B.對轉(zhuǎn)基因植物的外源DNA要認(rèn)真選擇，避免產(chǎn)生對人體有害或過敏的蛋白質(zhì)C.我國不反對治療性克隆，允許有限制地進(jìn)行克隆人實驗D.一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題，要馬上停止實驗，并銷毀重組生物16、下列有關(guān)微生物的分離與培養(yǎng)實驗的敘述，正確的是（）A.倒平板前，為了防止雜菌污染，需要將錐形瓶口通過酒精燈火焰B.倒平板時，應(yīng)將培養(yǎng)皿打開一條略大于瓶口的縫隙，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌后應(yīng)立即挑取菌落D.用移液器吸取相應(yīng)的菌液前，需要將樣液充分搖勻17、蛋白質(zhì)工程就是通過對蛋白質(zhì)化學(xué)、蛋白質(zhì)晶體學(xué)和蛋白質(zhì)動力學(xué)的研究，獲得有關(guān)蛋白質(zhì)理化特性和分子特性的信息，在此基礎(chǔ)上對編碼蛋白質(zhì)的基因進(jìn)行有目的的設(shè)計和改造，通過基因工程技術(shù)獲得可以表達(dá)蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因生物，中華鱘是一種瀕危野生動物。研究者試圖通過蛋白質(zhì)工程改造中華鱘體內(nèi)的某些蛋白質(zhì)，使其更加適應(yīng)現(xiàn)在的水域環(huán)境。下列有關(guān)說法錯誤的是（）A.蛋白質(zhì)工程可定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)B.改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實現(xiàn)C.改造后的中華鱘和現(xiàn)有中華鱘不再是同一物種D.改造后的中華鱘的后代不具有改造的蛋白質(zhì)評卷人得分三、填空題(共9題，共18分)18、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？________19、平板劃線法是通過____________在_______________培養(yǎng)基表面______________的操作，將__________的菌種______________分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由____________繁殖而來的肉眼可見的_______________，這就是_______________________。稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的______________，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到_____________培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成____________，從而能在培養(yǎng)基表面形成___________________。20、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的______——“分子運(yùn)輸車”21、假設(shè)PCR反應(yīng)中，只有一個DNA片段作為模板，請計算在30次循環(huán)后，反應(yīng)物中大約有個這樣的_______個DNA片段，一共需要加入______________個引物。22、蛋白質(zhì)工程是指以______作為基礎(chǔ)，通過______，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行_____，或制造一種______，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)______的蛋白質(zhì)）

23、在我國市場上究竟有多少種轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品呢？一位同學(xué)帶著這樣的問題，進(jìn)行了調(diào)查并將結(jié)果歸納成下圖?

對該同學(xué)的調(diào)查和歸納結(jié)果，有人表示認(rèn)同，有人提出質(zhì)疑?質(zhì)疑者認(rèn)為：目前我國市場上根本沒有大豆?玉米或甜菜的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?我們的觀點是什么_____？24、我國政府同樣禁止進(jìn)行治療性克隆實驗。（選擇性必修3P108）()25、科學(xué)家采用定點誘變的方法構(gòu)建T4溶菌酶的新蛋白質(zhì)，發(fā)現(xiàn)其中一種新蛋白質(zhì)的第9和第164位氨基酸殘基被轉(zhuǎn)換為半胱氨酸殘基，并形成一個二硫鍵。這種新蛋白質(zhì)的熱穩(wěn)定性會有什么變化？這項技術(shù)的要點是什么？_________26、某種微生物合成的一種蛋白酶與人體消化液中某種蛋白酶的結(jié)構(gòu)和功能很相似，只是前者熱穩(wěn)定性較差，進(jìn)入人體后容易失效。嘗試根據(jù)本節(jié)課所學(xué)知識提出改造該種微生物蛋白酶的思路_________。評卷人得分四、判斷題(共2題，共12分)27、基因工程技術(shù)已被廣泛用于改良動植物品種、提高作物和畜產(chǎn)品的產(chǎn)量等方面。（選擇性必修3P87）()A.正確B.錯誤28、“設(shè)計試管嬰兒”與“試管嬰兒”相比在植入前需要對胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實驗題(共3題，共21分)29、單克隆抗體在防治H7N9型禽流感上具有顯著療效。下圖是科研人員制備H7N9病毒的單克隆抗體X的過程?；卮鹣铝袉栴}：

（1）上圖中B淋巴細(xì)胞是取自______________的動物或人。融合的M細(xì)胞先用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，再進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和_______________以得到符合要求的N細(xì)胞，N細(xì)胞的名稱是______________。

（2）為了進(jìn)一步研究H7N9病毒的單克隆抗體X（以下簡稱抗體X）的效果及作用機(jī)制；科學(xué)家開展了如下實驗：

實驗一：在體外將抗體X與HA蛋白（H7N9病毒表面的一種蛋白）混合，檢測抗體X對HA蛋白的親和力。實驗結(jié)果如下表所示。（注：KD值越小，抗體和HA蛋白的親和力越高；機(jī)體Y為一種已知的H7N9病毒的抗體。）?？贵w種類KD抗體X5．32×10-9M抗體Y1．95×10-9M

實驗二：以一定濃度的H7N9病毒感染小鼠；一天后向小鼠腹腔分別注射一定劑量的抗體X；Y；14天后測定小鼠存活情況和體重變化。實驗結(jié)果表明：抗體X的體內(nèi)治療效果優(yōu)于抗體Y。

①實驗一結(jié)果表明：對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是__________。

②分析實驗一和實驗二的結(jié)果差異，研究人員提出假說：抗體除了中和病毒活性之外，還可以通過和巨噬細(xì)胞表面的受體相結(jié)合，從而增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，進(jìn)而清除被病毒感染的靶細(xì)胞。請以巨噬細(xì)胞、感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)液、抗體X、抗體Y和無關(guān)抗體等為材料，設(shè)計實驗驗證上述假說。寫出實驗思路__________。30、（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮______、______和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、______、______等優(yōu)點；因此常作為遺傳學(xué)研究的實驗材料。

（2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行________（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和______；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能__________。

（3）若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的_______。

（4）通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的____________。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_________。

（6）若用大腸桿菌進(jìn)行實驗，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_______處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。31、佩戴口罩是預(yù)防病原體感染的有效措施之一。使用過的口罩；如果沒有妥善處理會對生態(tài)環(huán)境造成巨大威脅。某科研團(tuán)隊欲從不同環(huán)境的土壤中篩選出能高效降解一次性口罩（主要成分是聚丙烯纖維）的細(xì)菌。請回答下列問題：

(1)該科研團(tuán)隊設(shè)計了一個對照實驗；請將以下實驗步驟補(bǔ)充完整：

①采集來自不同環(huán)境的等量土壤，編號為A、B、C、D。將同型號等量的一次性口罩經(jīng)___________處理后埋入各組土壤中。

②在相同且適宜條件下培養(yǎng)一段時間后；觀察各組中口罩的腐爛程度。

③從口罩腐爛程度_________的一組上采集細(xì)菌樣品。

(2)分離純化目的菌時，培養(yǎng)基以______________作為唯一的碳源。這樣的培養(yǎng)基按功能劃分，屬于_________培養(yǎng)基，其含義是指______________。

(3)若需進(jìn)一步對土樣中的細(xì)菌計數(shù)，上圖所示微生物接種的方法是_____________，在3個平板上分別滴加0.1mL稀釋液，經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上菌落數(shù)分別是65、66和67，則1g土壤中的活菌數(shù)約為__________個。該方法所得測量值一般比實際值偏低的原因是________________________。評卷人得分六、綜合題(共3題，共9分)32、某興趣小組為了檢測某品牌酸奶中乳酸桿菌的數(shù)量；進(jìn)行了如圖所示的實驗操作。回答下列問題。

（1）配制培養(yǎng)基時，培養(yǎng)基中的碳源是指_______________________________。

（2）圖示實驗中進(jìn)行接種的方法叫做______________法，①過程中10g酸奶相當(dāng)于被稀釋了______________倍。若培養(yǎng)基滅菌合格，培養(yǎng)適宜時間后A、B、C三個培養(yǎng)皿中的乳酸菌菌落數(shù)依次為45、48、42個，則該品牌酸奶中每10g樣品中的乳酸桿菌數(shù)量約為______________個。

（3）接種過程應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行，目的是______________。

（4）培養(yǎng)待測微生物時，培養(yǎng)皿需置于無氧環(huán)境中培養(yǎng)，原因是______________。33、新型冠狀病毒是一種單鏈RNA病毒；新型冠狀病毒感染的常規(guī)檢測方法是通過實時熒光PCR鑒定。

（1）首先，從樣本中提取病毒RNA，經(jīng)________酶作用生成cDNA。然后以cDNA為模板進(jìn)行實時熒光PCR擴(kuò)增；測定樣品中病毒核酸量。

（2）通過實時熒光PCR擴(kuò)增目的基因；需額外添加熒光標(biāo)記探針（一小段單鏈DNA，可與目的基因中部序列特異性結(jié)合）。當(dāng)探針完整時，不產(chǎn)生熒光。在PCR過程中，與目的基因結(jié)合的探針被TaqDNA聚合酶水解，R與Q分離后，R發(fā)出的熒光可被檢測到（如圖1）。

①當(dāng)樣本中有目的基因時，引物和探針與目的基因退火時，通過________原則而特異性結(jié)合。

②在PCR循環(huán)的延伸階段，TaqDNA聚合酶催化子鏈的合成并水解探針。檢測到的熒光強(qiáng)度與反應(yīng)體系中DNA分子數(shù)呈_________（正相關(guān)或反相關(guān)反）關(guān)系。

（3）通過實時熒光PCR檢測新型冠狀病毒感染時；檢測到的熒光強(qiáng)度變化如圖2所示。

①與指數(shù)增長期相比，線性增長期目的基因數(shù)量的增長率下降，原因有_________。

②Ct值的含義：在PCR擴(kuò)增過程中，每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號達(dá)到設(shè)定的熒光閾值時所經(jīng)歷的擴(kuò)增循環(huán)數(shù)。因此，當(dāng)樣本中初始模板越多時，Ct值就_________。

③某新型冠狀病毒核酸檢測說明書標(biāo)明，Ct≤37判定為陽性，Ct>40或無Ct值判定為陰性。圖2所示新型冠狀病毒核酸檢測結(jié)果應(yīng)判定為_________。

（4）陰性結(jié)果也不能排除新型冠狀病毒感染。可能產(chǎn)生假陰性的因素有________。

a．取樣太早；樣本中病毒量少，達(dá)不到實時熒光PCR檢測閾值。

b．樣本被污染；RNA酶將病毒RNA降解。

c．病毒發(fā)生變異34、土壤中的磷大部分以難被植物吸收利用的無效態(tài)（如磷酸鈣等難溶態(tài)；在水中呈白色沉淀）存在，溶磷菌能夠把無效態(tài)的磷轉(zhuǎn)化為可被直接利用的可溶性磷。

(1)磷是植物生長發(fā)育的必需元素，可組成______等化合物。（填出2種即可）

(2)從土壤中篩選溶磷菌的一般步驟如下：

溶磷菌的分離：依次配備濃度為10-3、10-4、10-5的土壤稀釋液，分別取0.1mL均勻涂布于含難溶磷的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)2d。待菌落長出后挑取______的菌落，于基礎(chǔ)培養(yǎng)基上采用______法進(jìn)行多次純化。溶磷菌的篩選：將分高獲得的溶磷菌分別配制成菌懸液，接入已滅菌的含難溶磷液體培養(yǎng)基中做實驗組，則對照組的培養(yǎng)基加入______，5d后測定培養(yǎng)液中可溶性磷含量。若接菌培養(yǎng)液可溶性磷含量為a，對照組可溶性磷含量為b，則菌株溶磷量為______。選擇溶磷量最大的菌種為目的菌。

(3)將適量目的菌接入己滅菌的含難溶磷的液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)；每天取樣測定溶磷量和pH變化情況，結(jié)果見下圖。

①結(jié)果表明目的菌分解難溶磷的能力呈現(xiàn)______的趨勢。

②根據(jù)培養(yǎng)液的pH變化情況，可對目的菌的解磷原理作出的推測是________________________。

(4)請預(yù)期該溶磷菌在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方面可能的應(yīng)用________________________。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、C【分析】【分析】

胚胎移植的基本程序主要包括：①對供；受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體；有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體。用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查，此時的胚胎應(yīng)發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進(jìn)行移植；⑤移植后的檢查。

【詳解】

AB；哺乳動物的體外受精主要包括卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能和受精等幾個主要步驟。精子與卵子在體外受精后；應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力，并將其培養(yǎng)至桑椹胚或囊胚進(jìn)行胚胎移植，所以胚胎移植前，要對胚胎進(jìn)行檢查以確定其是否發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段，AB正確；

C；在胚胎移植前；若要對胚胎的性別進(jìn)行鑒定，應(yīng)取囊胚的滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析，C錯誤；

D；胚胎移植入受體母畜的子宮后；還需對受體母畜進(jìn)行是否妊娠檢查，以保證其為移植的胚胎提供孕育的條件，D正確。

故選C。2、A【分析】【分析】

【詳解】

A；采用花粉管通道法將目的基因?qū)胫参矬w細(xì)胞的方法比較經(jīng)濟(jì)有效；故A錯誤；

B；將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；故B正確；

C；受體細(xì)胞是微生物時；采用鈣離子處理，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)（感受態(tài)），故C正確；

D；將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；故D正確。

故選A。3、D【分析】【分析】

由題意知：農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的基因被剪切后整合到植物的染色體上；因為其質(zhì)粒上的細(xì)胞分裂素和生長素基因，誘發(fā)細(xì)胞異常生長和分裂，產(chǎn)生了過量的細(xì)胞分裂素和生長素，導(dǎo)致細(xì)胞過度增殖形成植物腫瘤。

【詳解】

A；植物腫瘤的形成與生長素基因和細(xì)胞分裂素兩個基因在植物細(xì)胞內(nèi)表達(dá)有關(guān)；A錯誤；

B；清除植物腫瘤組織中的農(nóng)桿菌后；還有Ti質(zhì)粒整合到植物DNA上的，通過基因的復(fù)制表達(dá)也會導(dǎo)致腫瘤繼續(xù)生長，B錯誤；

C；T-DNA在轉(zhuǎn)移的過程中需要保留左邊界和右邊界序列；轉(zhuǎn)移結(jié)束后需要將左邊界和右邊界序列進(jìn)行剪切，C錯誤；

D；根據(jù)題干信息“冠癭堿是農(nóng)桿菌生命活動必需的有機(jī)物質(zhì)；而植物自身不能合成和利用”可知，去除冠癭堿合成基因，農(nóng)桿菌在被感染植物體內(nèi)不能大量繁殖，D正確。

故選D。

【點睛】4、C【分析】【分析】

動物細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)條件：（1）無菌無毒環(huán)境；（2）營養(yǎng)：所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同；例如需要有糖；氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分；（3）溫度和pH值：哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4；（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

【詳解】

A；動物細(xì)胞培養(yǎng)液的成分通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等此外還含有動物血清、血漿等；A正確；

B；在進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中；經(jīng)常表現(xiàn)為接觸抑制的特征，即當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到表面相互抑制時，細(xì)胞就會停止分裂增殖，B正確；

C、動物細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；C錯誤；

D；檢測有毒物質(zhì)；判斷某種物質(zhì)的毒性，屬于動物細(xì)胞工程的應(yīng)用，D正確。

故選C。5、B【分析】【分析】

PCR技術(shù)：

1；概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)；是一項在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。

2；原理：DNA復(fù)制。

3；前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對引物。

4；條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）。

5；過程：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶；高溫條件下氫鍵可自動解開）；低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。

【詳解】

A；退火溫度與時間；取決于引物的長度、堿基組成及其濃度，引物的堿基數(shù)量越少變性時破開的氫鍵越少，則退火溫度越低，但能與引物發(fā)生配對的片段就越多，目標(biāo)DNA獲得率越低，A錯誤；

B；根據(jù)需要可在引物的5’端添加限制酶識別序列、點突變序列等；以便更加準(zhǔn)確地獲得目的基因，B正確；

C；兩種引物的退火溫度差異較大；導(dǎo)致不能同時退火，甚至一條鏈在延伸，一條鏈在退火，可增加引物與模板的非特異性結(jié)合，C錯誤；

D；引物的GC含量越高；結(jié)合特異性越強(qiáng)，但GC過高，不利用退火，從而阻礙目標(biāo)DNA的擴(kuò)增，D錯誤。

故選B。6、C【分析】【分析】

1；常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒。

2；質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細(xì)菌擬核DNA之外并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。

3；作為運(yùn)載體必須具備的條件：①要具有限制酶的切割位點；②要有標(biāo)記基因（如抗性基因）；以便于重組后重組子的篩選③能在宿主細(xì)胞中穩(wěn)定存在并復(fù)制；④是安全的，對受體細(xì)胞無害，而且要易從供體細(xì)胞分離出來。

4；天然的質(zhì)粒不能直接作為載體；基因工程中用到的質(zhì)粒都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過人工改造的。

【詳解】

A；質(zhì)粒是獨立于原核細(xì)胞擬核DNA之外的環(huán)狀DNA分子；可在體外進(jìn)行自我復(fù)制，A錯誤；

B；天然的質(zhì)粒不能直接作為載體；基因工程用到的質(zhì)粒都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過人工改造的，B錯誤；

C；質(zhì)粒具有某些標(biāo)記基因；如抗生素基因，用于對目的基因的檢測和鑒定，C正確；

D；質(zhì)粒上的基因表達(dá)遵循中心法則；D錯誤。

故選C。7、B【分析】1；植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細(xì)胞脫分化形成愈傷組織；然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細(xì)胞的全能性。2、植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性。

【詳解】

A；PEG可以破環(huán)細(xì)胞間相互排斥的表面作用力；從而使相鄰細(xì)胞聚集而促進(jìn)融合，故可用PEG誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合，再生出細(xì)胞壁是融合成功的標(biāo)志，A正確；

B；植物體細(xì)胞雜交技術(shù)去壁前；不能對兩種植物細(xì)胞進(jìn)行滅菌處理，因為滅菌后植物細(xì)胞會死亡而不能得到雜種細(xì)胞，B錯誤；

C；植物培養(yǎng)基中常用的植物生長調(diào)節(jié)劑一般可以分為生長素類、細(xì)胞分裂素類和赤霉素類；C正確；

D；獲取植物原生質(zhì)體時；除使用纖維素酶和果膠酶外，還需要在蔗糖濃度與細(xì)胞液濃度相當(dāng)?shù)木彌_液中進(jìn)行，以免細(xì)胞過度失水或吸水，此時原生質(zhì)體已無細(xì)胞壁，D正確。

故選B。8、A【分析】【分析】

題圖分析；圖中①過程為酶解法去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體的過程，②原生質(zhì)體融合成為雜種細(xì)胞的過程，③是雜種細(xì)胞脫分化形成愈傷組織的過程，④過程表示再分化成為雜種植株的過程。

【詳解】

A；過程③中施加的生長素的和細(xì)胞分裂素比例適中；可以誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織，A錯誤；

B；對雜種植株接種胞囊線蟲進(jìn)行個體水平上的鑒定；進(jìn)而檢測雜種植株是否達(dá)到預(yù)期，B正確；

C；由于用于融合的葉肉細(xì)胞中有葉綠體；而根細(xì)胞中沒有葉綠體，因此，可通過觀察是否含有葉綠體來對融合細(xì)胞進(jìn)行初步篩選，C正確；

D；過程④為脫分化形成再生植株的過程；該過程中需要進(jìn)行適當(dāng)?shù)墓庹找源龠M(jìn)細(xì)胞中葉綠素的合成，D正確。

故選A。9、B【分析】【分析】

轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)；過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。

【詳解】

A；轉(zhuǎn)抗蟲基因的植物；植物對昆蟲進(jìn)行選擇，會導(dǎo)致昆蟲群體抗性基因頻率增加，A正確；

B；動物取食轉(zhuǎn)基因作物后；要經(jīng)過消化吸收才進(jìn)入身體，目的基因不可能直接進(jìn)入動物細(xì)胞中，B錯誤；

C；轉(zhuǎn)基因植物可能與野生植物發(fā)生雜交而出現(xiàn)基因交流；影響野生植物的遺傳多樣性，C正確；

D；目的基因被微生物攝入細(xì)胞內(nèi)后；可能進(jìn)入這些微生物中，D正確。

故選B。二、多選題(共8題，共16分)10、B:C:D【分析】【分析】

囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞屬于胚胎干細(xì)胞；具有很強(qiáng)的分裂能力，可以用胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)；采用基因工程技術(shù)培養(yǎng)乳腺生物反應(yīng)器時，受體細(xì)胞是受精卵，因為受精卵全能性最高。

【詳解】

A；采用基因工程技術(shù)培養(yǎng)乳腺生物反應(yīng)器時；受體細(xì)胞是受精卵而不是乳腺細(xì)胞，因為受精卵全能性最高，A錯誤；

B；植物分生區(qū)附近（如莖尖）含病毒極少；甚至不舍病毒，因此可采用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗，B正確；

C；愈傷組織分裂能力強(qiáng)；易發(fā)生突變，容易獲得突變體，C正確；

D；囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有很強(qiáng)的分裂能力；可以用于胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)，進(jìn)而誘導(dǎo)培養(yǎng)成各種組織和器官，D正確。

故選BCD。11、A:B【分析】【分析】

在制備單克隆抗體的過程中；需要先對小鼠進(jìn)行特定抗原免疫，使機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞；在誘導(dǎo)細(xì)胞融合時，除了異種細(xì)胞融合外，還有同種細(xì)胞融合，因此需要在培養(yǎng)基中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞；效應(yīng)B細(xì)胞不能分裂；在獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞時，可以將其注入小鼠腹腔中，以備獲得大量的單克隆抗體。

【詳解】

A；在制備單克隆抗體的過程中；需要先對小鼠進(jìn)行特定抗原免疫，使機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞，A正確；

B；在誘導(dǎo)細(xì)胞融合時；除了異種細(xì)胞融合外，還有同種細(xì)胞融合，因此需要在培養(yǎng)基中篩選出能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；

C；效應(yīng)B細(xì)胞不能分裂；C錯誤；

D；在獲得能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞時；可以將其注入小鼠腹腔中，以備獲得大量的單克隆抗體，而不需要將胰蛋白酶注入小動物腹腔，D錯誤。

故選AB。12、B:C:D【分析】【分析】

良種試管牛的繁殖過程：對供體和受體的選擇和處理（同期發(fā)情處理；超數(shù)排卵處理）；配種或進(jìn)行人工授精、對胚胎的收集檢查培養(yǎng)或保存、進(jìn)行胚胎移植。

【詳解】

A；處理供體甲牛的激素可能是促性腺激素；使其超數(shù)排卵，A錯誤；

B；產(chǎn)生試管牛的過程中經(jīng)過了兩性生殖細(xì)胞的融合過程；因此試管牛產(chǎn)生的生殖方式屬于有性生殖，B正確；

C；母本甲牛提供卵細(xì)胞、父本乙牛提供精子；試管牛細(xì)胞核中基因一半來源于父方，一半來源于母方，C正確；

D；體外受精和早期胚胎發(fā)育、胚胎移植等技術(shù)可以縮短繁殖周期；增加一生繁殖的后代數(shù)量，即該技術(shù)可充分發(fā)揮優(yōu)良雌性個體的繁殖潛力，D正確。

故選BCD。

【點睛】13、A:B【分析】【分析】

動物細(xì)胞工程技術(shù)包括動物細(xì)胞培養(yǎng)；動物細(xì)胞融合、核移植技術(shù)等技術(shù)；其中動物細(xì)胞培養(yǎng)是動物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入血清等天然成分。干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等，存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能。

【詳解】

A；在進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)時；培養(yǎng)基中除了加入細(xì)胞所需的各種營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要加入血清等天然成分，A錯誤；

B；動物細(xì)胞融合不能形成雜種個體；形成的是雜種細(xì)胞，而植物體細(xì)胞雜交能形成雜種個體，兩者都能形成雜種細(xì)胞，B錯誤；

C；干細(xì)胞包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等；存在于早期胚胎、骨髓和臍帶血等多種組織和器官中，有著自我更新能力及分化潛能，C正確；

D；動物體細(xì)胞分化程度較高；全能性較低，因此動物體細(xì)胞核移植的難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，D正確。

故選AB。14、B:D【分析】【分析】

細(xì)菌的數(shù)目可以通過濾膜法來測定。將已知體積的水過濾后；將濾膜放在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上培養(yǎng)。在該培養(yǎng)基上，大腸桿菌的菌落呈黑色，根據(jù)黑色菌落的數(shù)目，計算水樣中大腸桿菌的數(shù)量。微生物接種時，為了避免其它雜菌的污染，接種過程要進(jìn)行無菌操作。灼燒滅菌常適用于接種環(huán)；接種針；干熱滅菌常適用于玻璃器皿（吸管、培養(yǎng)皿）和金屬用具；高壓蒸汽滅菌常適用于無菌水、培養(yǎng)基。

【詳解】

A；檢測前需要對水樣收集瓶、濾膜、培養(yǎng)基、鑷子滅菌；防止雜菌干擾，A正確；

B；完成過濾后需將濾膜置于固體培養(yǎng)基上；在37℃下培養(yǎng)觀察，B錯誤；

C；為減少實驗誤差；按照上述實驗步驟多次取樣重復(fù)進(jìn)行檢測，取平均值作為實驗數(shù)據(jù)，C正確；

D；大腸桿菌較小；不能用血細(xì)胞計數(shù)板直接計數(shù)法替代膜過濾法檢測，D錯誤。

故選BD。15、A:B:D【分析】【分析】

1；生物武器是利用生物戰(zhàn)劑殺傷人員、牲畜、毀壞植物的武器。生物武器又是生物制劑、載體和分散手段的綜合利用。生物武器自誕生以來；給人類的生存安全構(gòu)成了嚴(yán)重威脅。

2；轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題包括食物安全、生物安全和環(huán)境安全。

3；“治療性克隆”將使人胚胎干細(xì)胞（簡稱ES細(xì)胞）造福于人類的一種非常重要的途徑。治療性克隆是指把患者體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中構(gòu)建形成重組胚胎；體外培養(yǎng)到一定時期分離出ES細(xì)胞，獲得的ES細(xì)胞定向分化為所需的特定類型細(xì)胞（如神經(jīng)細(xì)胞、肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞），用于治療。

【詳解】

A；對待生物武器的態(tài)度應(yīng)明確而堅定；即在任何情況下都不發(fā)展、不生產(chǎn)、不儲存生物武器，堅決禁止生物武器，A正確；

B；轉(zhuǎn)基因要注意基因安全；對外源DNA要進(jìn)行認(rèn)真選擇，避免產(chǎn)生對人體有害的或過敏的蛋白質(zhì)，B正確；

C；中國對于克隆人的態(tài)度是不反對治療性克隆；禁止進(jìn)行克隆人的實驗，C錯誤；

D；一旦發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因生物出現(xiàn)了安全性問題；包括食品安全、生物安全和生態(tài)安全，要馬上停止試驗，并銷毀重組生物，D正確。

故選ABD。16、A:D【分析】【分析】

平板劃線的操作的基本步驟是：(1)右手持接種環(huán)；經(jīng)火焰滅菌，待涼后，在火焰旁打開盛有菌液的試管棉塞，并將試管口過火焰，將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液，沾取一環(huán)菌液，將試管口過火焰并塞上棉塞。(2)左手斜持瓊脂平板，皿蓋打開一條縫，右手于火焰近處將接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋，接種環(huán)不應(yīng)劃破培養(yǎng)基表面。(3)燒灼接種環(huán)，殺滅環(huán)上殘留菌液，待冷卻，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)內(nèi)劃線，重復(fù)以上操作，在第三四五區(qū)內(nèi)劃線，注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。(4)將平板倒置，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

【詳解】

A；倒平板前；需要將錐形瓶口通過酒精燈火焰，通過灼燒滅菌防止雜菌污染，A正確；

B；倒平板時；應(yīng)將培養(yǎng)皿打開一條略大于瓶口的縫隙，以免雜菌進(jìn)入，而不是為了防濺，B錯誤；

C；接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌后應(yīng)等到冷卻后再挑取菌落；否則高溫會使菌落死亡，C錯誤；

D；用移液器吸取相應(yīng)的菌液前；需要將樣液充分搖勻，保證菌液中微生物均勻分布，提高實驗的準(zhǔn)確性，D正確。

故選AD。17、C:D【分析】【分析】

蛋白質(zhì)工程是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)；通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。也就是說，蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，是包含多學(xué)科的綜合科技工程領(lǐng)域。

基本流程：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對應(yīng)的核糖核苷酸序列（RNA）→找到相對應(yīng)的脫氧核糖核苷酸序列（DNA）。

【詳解】

A；蛋白質(zhì)工程可以通過改造基因來定向改變蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)；A正確；

B；因為基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成；所以改造蛋白質(zhì)可通過改變基因結(jié)構(gòu)實現(xiàn)，B正確；

C；改造后的中華鱘具有新的性狀；但其和現(xiàn)有中華鱘之間沒有生殖隔離，仍是同一物種，C錯誤；

D；蛋白質(zhì)工程改造的是基因；可以遺傳給子代，因此改造后的中華鱘的后代也具有改造的蛋白質(zhì)，D錯誤。

故選CD。三、填空題(共9題，共18分)18、略

【解析】平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠。將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，又可避免培養(yǎng)基中的水分過快揮發(fā)19、略

【解析】①.接種環(huán)②.瓊脂固體③.連續(xù)劃線④.聚集⑤.逐步稀釋⑥.一個細(xì)胞⑦.子細(xì)胞群體⑧.菌落⑨.梯度稀釋⑩.瓊脂固體?.單個細(xì)胞?.單個的菌落20、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】載體21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2030×22030×2－222、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系基因修飾或基因合成改造新的蛋白質(zhì)自然界已存在23、略

【分析】【詳解】

目前我國市場上的轉(zhuǎn)基因食品，從原料來源看，進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜，故我國市場上有大豆等的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品?！窘馕觥磕壳拔覈袌錾系霓D(zhuǎn)基因食品，從原料來源看，進(jìn)口的主要有大豆、油菜籽和玉米及相關(guān)產(chǎn)品，國內(nèi)生產(chǎn)的有棉籽油和番木瓜。24、略

【分析】【詳解】

中國政府的態(tài)度：禁止生殖性克隆，不反對治療性克隆，該表述錯誤。【解析】錯誤25、略

【分析】【詳解】

蛋白質(zhì)形成二硫鍵，使蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)更加穩(wěn)定，因此T4溶菌酶的熱穩(wěn)定性會提高。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，其步驟為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥繒岣逿4溶菌酶的耐熱性。這項技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程技術(shù)，該技術(shù)的要點是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→獲得所需的蛋白質(zhì)。26、略

【分析】【詳解】

要提高酶的熱穩(wěn)定性，可采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，改善其功能，需要從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)?！窘馕觥坎捎玫鞍踪|(zhì)工程技術(shù)替換少數(shù)氨基酸，提高該酶的熱穩(wěn)定性，從改造控制該酶合成的基因著手，具體做法為從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到并改變相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列→獲得所需的蛋白質(zhì)。四、判斷題(共2題，共12分)27、A【分析】【詳解】

目前，基因工程技術(shù)已被廣泛用于改良動植物品種、提高作物和畜產(chǎn)品的產(chǎn)量等方面，例如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物；將植物花青素代謝相關(guān)的基因?qū)霠颗；ㄖ?，使其呈現(xiàn)自然界沒有的顏色，提高了觀賞價值；將外源生長素基因?qū)膈庺~體內(nèi)，轉(zhuǎn)基因鯉魚生長速率加快等，所以正確。28、A【分析】【分析】

“設(shè)計試管嬰兒”在植入前需要對胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷；而“試管嬰兒”是解決不孕不育等問題，不需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。

【詳解】

“設(shè)計試管嬰兒”與“試管嬰兒”相比在植入前需要通過多種技術(shù)手段對胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷；以便選擇合適的設(shè)計出來的試管嬰兒。

故正確五、實驗題(共3題，共21分)29、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：小鼠骨體瘤細(xì)胞和取自感染病毒的人體內(nèi)的漿細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合；M表示融合細(xì)胞，N表示篩選出的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

（1）分析題圖：小鼠骨體瘤細(xì)胞和取自感染病毒的人體內(nèi)的漿細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞融合，M表示融合細(xì)胞，N表示篩選出的雜交瘤細(xì)胞；B淋巴細(xì)胞是取自感染H7N9病毒的動物或人；隨后將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，對融合后的細(xì)胞用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，挑選出B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞，然后再進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，以得到符合要求的N細(xì)胞，N細(xì)胞的名稱是雜交瘤細(xì)胞；

（2）①據(jù)題中圖表分析，KD值越小，抗體和HA蛋白的親和力越高；抗體Y的KD值小于抗體X的KD值，故對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是抗體Y；

②抗體X的體內(nèi)治療效果優(yōu)于抗體Y，但對H7N9病毒HA蛋白親和力更高的抗體是抗體Y，驗證抗體除了中和病毒活性之外，還可以通過和巨噬細(xì)胞表面的受體相結(jié)合，從而增強(qiáng)巨噬細(xì)胞的吞噬作用，進(jìn)而清除被病毒感染的靶細(xì)胞，需要進(jìn)行抗體X和抗體Y的對照實驗，并與無關(guān)抗體進(jìn)行比較，可以將巨噬細(xì)胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞分別加入A；B、C三組細(xì)胞培養(yǎng)液中；并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無關(guān)抗體、抗體X和抗體Y，一段時間后檢測并比較肺上皮細(xì)胞的裂解百分比。

【點睛】

對單克隆抗體制備流程、抗體效果檢測原理和實驗?zāi)康募坝闷返姆治?，是解決本題的關(guān)鍵?！窘馕觥竣?感染過H7N9病毒②.抗體檢測③.雜交瘤細(xì)胞④.Y⑤.將巨噬細(xì)胞及感染了H7N9病毒的肺上皮細(xì)胞分別加入A、B、C三組細(xì)胞培養(yǎng)液中，并向這三組培養(yǎng)液中分別加入無關(guān)抗體、抗體X和抗體Y，一段時間后檢測并比較肺上皮細(xì)胞的裂解百分比。30、略

【分析】【分析】

1；大腸桿菌屬于細(xì)菌；是原核生物。微生物營養(yǎng)成分主要有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等，另外還需要注意滲透壓、溫度、pH等條件。大腸桿菌常作為遺傳學(xué)研究的實驗材料．微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌技術(shù)，防止外來雜菌的污染。

2；微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作。使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌；常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。

【詳解】

（1）大腸桿菌具有體積??；結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點；培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。

（2）滅菌使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物；所以對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；消毒使用較為溫和的物理或化學(xué)方法，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。

（3）稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液，分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。

（4）對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀；大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時；在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（6）因為有的大腸桿菌會釋放一種強(qiáng)烈的毒素；并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

【點睛】

本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生能夠識記大腸桿菌的培養(yǎng)條件以及其作為遺傳實驗的優(yōu)點，區(qū)分掌握不同材料消毒和滅菌的方法，識記菌種鑒定的方法等，屬于基礎(chǔ)題?！窘馕觥竣?溫度②.酸堿度③.易培養(yǎng)④.生活周期短⑤.滅菌⑥.消毒⑦.損傷DNA的結(jié)構(gòu)⑧.比例合適⑨.鑒定(或分類)⑩.將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生.?.滅菌31、略

【分析】【分析】

篩選目的菌株的原理：在尋找目的菌株時；要根據(jù)它對生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。實驗室中微生物菌株的篩選，也應(yīng)用了同樣的原理，即人為提供有利于目的菌株生長的條件（營養(yǎng)；溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。而在篩選菌株的時候，常用到選擇培養(yǎng)基。在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。

【詳解】

（1）①不同類型土壤中微生物的種類和數(shù)量不同；可采集來自不同環(huán)境（不同地區(qū)）的等量土壤，編號為A；B、C、D。本實驗要篩選能高效降解一次性口罩（主要成分是聚丙烯纖維）的細(xì)菌，可人為制造有利于該菌生長的環(huán)境，因此將同型號的等量一次性口罩經(jīng)滅菌處理后埋入各組土壤中。

②一段時間后；觀察各組中口罩的腐爛程度。

③從口罩腐爛程度最大的一組上采集細(xì)菌樣品；該樣品即含有較強(qiáng)分解口罩能力的菌體。

（2）該目的菌是能高效降解一次性口罩（主要成分是聚丙烯纖維）的細(xì)菌；因此培養(yǎng)基以聚丙烯纖維作為唯一的碳源。這樣的培養(yǎng)基按功能劃分，屬于選擇培養(yǎng)基，在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。

（3）據(jù)圖可知，上述需要對土樣中的細(xì)菌計數(shù)，先將菌液梯度稀釋，然后涂布在平板上，該接種的方法是稀釋涂布平板法。據(jù)圖可知，1g土樣加入到99mL無菌水，稀釋了100倍，隨后取1mL的菌液分別加入9mL的無菌水，稀釋10倍，因此最后被稀釋了106倍，根據(jù)公式每克樣品中的菌株數(shù)=（C÷V）×M=（65+66+67）÷3÷0.1×106=6.6×108個。稀釋涂布平板法常用菌落數(shù)表示菌液中細(xì)胞數(shù)，當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時平板上觀察到的只是一個菌落，因此該方法所得測量值一般比實際值偏低?！窘馕觥?1)滅菌最大。

(2)聚丙烯纖維選擇在微生物學(xué)中；將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。

(3)稀釋涂布平板法6.6×108當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時平板上觀察到的只是一個菌落六、綜合題(共3題，共9分)32、略

【分析】【分析】

1、碳源：凡能為微生物提供所需碳元素的營養(yǎng)物質(zhì)，無機(jī)碳源：CO2、NaHCO3；有機(jī)碳源：糖類；脂肪酸、花生粉餅、石油等。

2；無菌技術(shù)的主要內(nèi)容。

①對實驗操作的空間；操作者的衣著和手；進(jìn)行清潔和消毒；

②將用于微生物培養(yǎng)的器皿；接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌；

③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染；實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行；

④實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相