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什么是植物離體快繁技術(shù)植物離體繁殖(Propagationinvitro)又稱植物快繁或微繁(Micropropagation)是指利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)對外植體進行離體培養(yǎng),使其在短期內(nèi)獲得遺傳性一致的大量再生植株的方法。是工廠化育苗的技術(shù)基礎(chǔ)。植物快繁與傳統(tǒng)營養(yǎng)繁殖相比的優(yōu)點:◆繁殖效率高。生長速度快;◆培養(yǎng)條件可控制性強;◆占用空間小;◆管理方便,利于自動化控制;◆便于種質(zhì)交換和保存。第一、植物快繁的器官形成方式植物快繁的器官再生主要分為五種類型:1.短枝發(fā)生型
2.叢生芽發(fā)生型
3.不定芽發(fā)生型
4.胚狀體發(fā)生型
5.原球莖發(fā)生型一、短枝發(fā)生型類似于微型扦插,指外植體攜帶的帶葉莖段,在適宜的培養(yǎng)環(huán)境中萌發(fā),形成完整植株,再將其剪成帶葉莖段,繼代再成苗的繁殖方法。能一次成苗,遺傳穩(wěn)定,成活率高,但繁殖系數(shù)低。二、叢生芽發(fā)生型◆是大多數(shù)植物快繁的主要方式。指外植體攜帶的頂芽或腋芽在適宜培養(yǎng)環(huán)境(含有外源細胞分裂素)中不斷發(fā)生腋芽而呈叢生狀芽,將單個芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中,誘導(dǎo)生根成苗的繁殖方法?!舨唤?jīng)過愈傷階段,后代變異小,應(yīng)用普遍,也可用于無病毒苗的生產(chǎn)。三、不定芽發(fā)生型◆指外植體在適宜培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下,形成不定芽,后經(jīng)生根培養(yǎng),獲得完整植株的繁殖方法。分為通過愈傷組織產(chǎn)生不定芽,和直接產(chǎn)生不定芽兩種方式?!敉庵搀w涉及多種器官,如莖段、葉、根、花器官等。是植物快繁的另一種主要方式,繁殖系數(shù)高。但變異率較高,尤其是通過愈傷途徑產(chǎn)生的植株。紅掌葉片離體培養(yǎng)及植株再生四、胚狀體發(fā)生型◆指外植體在適宜培養(yǎng)環(huán)境中,經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生體細胞產(chǎn)生體細胞胚,從而形成小植株的繁殖方法。分為間接途徑(經(jīng)愈傷途徑)和直接途徑兩種?!舫擅鐢?shù)量大、速度快、結(jié)構(gòu)完整。但由于對其發(fā)生及發(fā)育過程了解不夠,應(yīng)用上還沒有前兩種廣泛。
菊花花瓣體細胞胚胎發(fā)生及體胚發(fā)育過程的掃描電鏡觀察五、原球莖發(fā)生型是蘭科植物特有的一種快繁方式。指莖尖或腋芽外植體經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生原球莖的繁殖類型。原球莖可以增殖形成原球莖叢。大花蕙蘭原球莖增殖與植株再生第二、植物快繁的程序植物快繁的程序包括四個階段:無菌(或初代)培養(yǎng)的建立、繁殖體增殖、芽苗生根、小植株的移栽馴化2.1無菌(或初代)培養(yǎng)的建立◆母株和外植體的選?。耗钢晷誀罘€(wěn)定、健壯、無病蟲害污染?!魺o菌培養(yǎng)物的獲得◆外植體的啟動生長:愈傷產(chǎn)生、不定芽發(fā)生或外植體芽直接生長。通過需要4-6周。2.2繁殖體增殖◆培養(yǎng)材料的增殖。主要增殖方式為誘導(dǎo)叢生芽或不定芽產(chǎn)生,再以芽繁殖芽的方式增殖,蘭科植物為原球莖增殖途徑。4-8周繼代一次。一個芽苗增殖數(shù)量一般為5-25個或更多,多次繼代可大量繁殖。◆增殖培養(yǎng)基:適當提高細胞分裂素和礦質(zhì)濃度◆增殖體的大小和切割方法2.3芽苗生根◆離體生根:也稱試管內(nèi)生根。降低無機鹽濃度,減少或去除細胞分裂素,增加生長素濃度?!艋铙w生根:也稱試管外生根。通常芽苗可先在生長素中快速浸蘸或在含有相對高濃度生長素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)5-10天,然后移到基質(zhì)中生根?!羯囵B(yǎng)時間一般為2-4周。2.4小植株的移栽馴化◆移栽:洗去根部的培養(yǎng)基,將小植株移栽入培養(yǎng)基質(zhì)中?!赳Z化管理
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