ICS65.020

B16

備案號(hào)：60526-2018DB32

江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB32/T3489—2018

玉米粗縮病人工接種鑒定技術(shù)與抗性

評(píng)價(jià)規(guī)程

Technicalregulationforevaluatingmaizevarietiesresistancetomaizeroughdwarf

diseasebyartificialinoculation

2018-11-09發(fā)布2018-11-30實(shí)施

江蘇省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

DB32/T3489—2018

玉米粗縮病人工接種鑒定技術(shù)與抗性評(píng)價(jià)規(guī)程

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了玉米品種粗縮?。ú≡核竞跅l矮縮病毒Riceblack-streakeddwarfvirus）抗性人工

接種鑒定的有關(guān)定義、技術(shù)規(guī)范及抗性評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于省級(jí)玉米品種試驗(yàn)，品種抗病性比較試驗(yàn)、主導(dǎo)品種的抗病性監(jiān)測(cè)等均可參照?qǐng)?zhí)行。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的的修改單）適用于本文件。

NY/T1209-2006農(nóng)作物品種試驗(yàn)技術(shù)規(guī)程玉米

NY/T2955-2016水稻品種試驗(yàn)水稻黑條矮縮病抗性鑒定與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)程

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

病株infectedplants

發(fā)生玉米粗縮病癥狀的玉米植株（病株標(biāo)準(zhǔn)見6.2）。

4接種用灰飛虱的準(zhǔn)備

4.1灰飛虱的來源

田間采集灰飛虱若蟲或成蟲。

4.2飼養(yǎng)灰飛虱的基本條件

可調(diào)控溫、光的養(yǎng)蟲室（光照每天12h，溫度控制在25℃±2℃范圍內(nèi)）、玻璃杯、尼龍紗布（網(wǎng)

眼規(guī)格1mm）、養(yǎng)蟲架、適宜灰飛虱繁殖的水稻種子；轉(zhuǎn)移灰飛虱用黑布、毛筆、吸蟲管等。

4.3灰飛虱群體的飼養(yǎng)

選取飼喂灰飛虱的水稻種子（宜選用武育粳3號(hào)）用水浸種24h后，紗布覆蓋25℃±2℃催芽24h，

選取發(fā)芽良好的種子25粒~30粒均勻播于盛有自然肥力土壤的玻璃杯(內(nèi)徑為60mm~200mm)中；大約

6d~7d后，待苗長(zhǎng)至一葉一心期時(shí)，將待產(chǎn)的單頭灰飛虱移入杯中進(jìn)行飼養(yǎng)，約3d后待灰飛虱產(chǎn)卵完

畢將成蟲移出，7d~10d后開始孵化出1齡若蟲備用。

4.4飼毒方法

1

DB32/T3489—2018

RT-PCR鑒定為攜帶水稻黑條矮縮病毒的小麥、水稻或玉米病株栽種于5000mL燒杯中（RT-PCR方

法按照NY/T2955-2016附錄B執(zhí)行），土面覆蓋濾紙，將4.3繁育的適量1齡~2齡灰飛虱移入其中,并用

紗布封口。飼毒2d后將蟲移入預(yù)先育有武育粳3號(hào)秧苗的1000mL燒杯中飼養(yǎng)，循回11d~13d后，每批隨

機(jī)取出100頭以上灰飛虱，按照NY/T2955-2016附錄A的要求檢測(cè)灰飛虱群體帶毒情況，計(jì)算灰飛虱群

體帶毒率，備用。

5接種

5.1育苗方法

參鑒品種（含試驗(yàn)預(yù)設(shè)對(duì)照，宜采用玉米品種鄭丹958為感病對(duì)照）經(jīng)浸種、催芽；選取50粒左右

發(fā)芽良好的種子，均勻播于盛有自然肥力土壤的內(nèi)徑為120mm~150mm玻璃杯中。

5.2接蟲數(shù)量

選取處于3齡～5齡的獲毒灰飛虱群體，按公式(1)計(jì)算接種數(shù)量：

IVSNPVS………………（1）

式中:

IVS—單株有效接種蟲量，單位為頭每株（頭/株）；

N—單株接種灰飛虱數(shù)量，單位為頭每株（頭/株）；

PVS—灰飛虱帶毒率。

按照4.4中灰飛虱群體帶毒率，計(jì)算每株接蟲數(shù)量，使IVS值控制在3頭/株。

5.3接種條件

于玉米苗二葉一心期選擇長(zhǎng)勢(shì)一致的30株苗用于接種（去除其它苗）。接種時(shí)間為1d～2d，接種

溫度25℃±2℃，每天上午和下午各趕蟲一次，使灰飛虱分布均勻。接種后趕出灰飛虱并噴施殺蟲劑，

保證玉米苗上的灰飛虱全部撲殺，噴藥后1d再將接種過的玉米苗移栽，15℃～30℃條件下培育。

5.4重復(fù)

重復(fù)三次。

6調(diào)查

6.1調(diào)查時(shí)間

在玉米吐絲抽穗期調(diào)查玉米病株數(shù)。

6.2調(diào)查標(biāo)準(zhǔn)

玉米粗縮病發(fā)病癥狀：植株葉色濃綠、節(jié)間縮短，植株矮化，高度常不及健株的一半；葉片變寬變

厚，葉片背面出現(xiàn)縱向蠟滴狀白色突起；植株根系少而短；雄穗不能抽出或無花粉、雌穗畸形不實(shí)或籽

粒減少。依據(jù)癥狀有無按附錄A記錄發(fā)病株數(shù)量。

6.3發(fā)病率計(jì)算

參照公式(2)方法計(jì)算發(fā)病率。若出現(xiàn)感病對(duì)照品種的發(fā)病率小于50％，則應(yīng)分析原因，并重新進(jìn)

行試驗(yàn)。

發(fā)病率Ri表示，數(shù)值以%計(jì)，按公式(2)計(jì)算：

2

DB32/T3489—2018

n

Rii100%

n

t…………（2）

式中:

Ri—發(fā)病率；

ni—病株數(shù)；

nt—總株數(shù)。

計(jì)算結(jié)果精確到小數(shù)點(diǎn)后一位。

7抗性評(píng)價(jià)

7.1抗性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)發(fā)病率進(jìn)行抗性評(píng)價(jià)，各級(jí)別評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)遵照附錄B（參照NY/T1209-2006農(nóng)作物品種試驗(yàn)技

術(shù)規(guī)程玉米）。

7.2抗性評(píng)定

當(dāng)品種抗性在不同批次間鑒定結(jié)果表現(xiàn)不一致時(shí)，以發(fā)病最重的結(jié)果為準(zhǔn)。

3

DB32/T3489—2018

附錄A

（規(guī)范性附錄）

玉米粗縮病品種抗性調(diào)查記載表

玉米粗縮病品種抗性調(diào)查記載表見表A.1。

表A.1玉米粗縮病品種抗性調(diào)查記載表

播種日期調(diào)查日期調(diào)查人記載人

品種編號(hào)總株數(shù)病株數(shù)發(fā)病率

…

感病對(duì)照

4

DB32/T3489—2018

附錄B

（規(guī)范性附錄）

玉米粗縮病品種抗性評(píng)價(jià)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

玉米粗縮病品種抗性評(píng)價(jià)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)見表B.1。

表B.1玉米粗縮病品種抗性評(píng)價(jià)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

病級(jí)發(fā)病率（%）抗性水平

0級(jí)0免疫

1級(jí)0.01～5.00高抗

3級(jí)5.01～15.00抗病

5級(jí)15.01～30.00中感

7級(jí)30.01～50.00感病

9級(jí)>50.00高感