微生物知識及消毒與滅菌知識培訓(xùn)一、前言什么是微生物微生物（microorganism,microbe）是一些肉眼看不見的微小生物的總稱。包括屬于原核類的細菌、放線菌、支原體、立克次氏體、衣原體和藍細菌（過去稱藍藻或藍綠藻），屬于真核類的真菌（酵母菌和霉菌）、原生動物和顯微藻類，以及屬于非細胞類的病毒、類病毒和朊病毒等。二、微生物特點種類多、分布廣微生物在地球上幾乎無處不有，無孔不入，人的皮膚上，口腔，腸道里都有許多微生物。微生物聚集最多的地方是土壤，土壤是各種微生物生長繁殖的大本營，約占微生物總量的70-90%，任意取一把土或一粒土，就是一個微生物世界，不論數(shù)量或種類均最多。在肥沃的土壤中，每克土含有20億個微生物，即使是貧瘠的土壤，每克土中也含有3－5億個微生物?？諝饫飸腋≈鵁o數(shù)細小的塵埃和水滴，它們是微生物在空氣中的藏身之地。哪里塵埃多，哪里的微生物就多。迄今為止，我們知道的微生物約有10萬種，目前已知的種類只占地球上實際存在的微生物總數(shù)的20%，人類生產(chǎn)和生活中僅開發(fā)利用了已發(fā)現(xiàn)微生物種數(shù)的1%。

吸收多、轉(zhuǎn)化快微生物有驚人的繁殖速度，大多數(shù)微生物幾十分鐘內(nèi)就可以繁殖一代，如細菌一般每20~30分鐘既可分裂一次；微生物的食譜非常廣泛，凡是動植物能利用的營養(yǎng)，微生物都能利用，大量的動植物不能利用的物質(zhì)，甚至劇毒的物質(zhì)，微生物照樣可以視為美味佳肴。如大腸桿菌在合適條件下，每小時可以消耗相當(dāng)于自身重量2000倍的糖，而人體則需要40年之久。

適應(yīng)強、易變異多數(shù)細菌能耐0～－196℃的低溫；在海洋深處的某些硫細菌可在250～300℃的高溫條件下正常生長；一些嗜鹽細菌甚至能在飽和鹽水中正常生活；產(chǎn)芽孢細菌和真菌孢子在干燥條件下能保藏幾十年、幾百年。由于微生物繁殖快，也可在短時間內(nèi)產(chǎn)生大量變異的后代。正是由于這個特性，人們才能夠按照自己的要求不斷改良在生產(chǎn)上應(yīng)用的微生物，如青霉素生產(chǎn)菌的發(fā)酵水平由每毫升20單位上升到近10萬單位，利用變異和育種得到如此大幅度的產(chǎn)量提高。

三、微生物的類群和形態(tài)結(jié)構(gòu)微生物按其結(jié)構(gòu)、化學(xué)組成及生活習(xí)性等分為三大類：原核細胞型：細菌、放線菌、支原體、衣原體、立克次氏體、螺旋體等真核細胞型：真菌非細胞型：病毒噬菌體

芽孢桿菌（細菌）蠟樣芽孢桿菌

蠟樣芽孢桿菌

蠟樣芽孢桿菌

蠟樣芽孢桿菌（細菌）

支原體掃描電鏡圖片支原體（mycoplasma）以前被認為是最小的能獨立存活的原核生物，以前也被認為是地球上迄今為止被發(fā)現(xiàn)的最小的細胞生物。全世界90%的豬體內(nèi)寄生著支原體。

立克次氏體（rickettsiae），一種微小的寄生的細菌。上圖是動物的淋巴細胞，紅色的是寄生的立克次氏體。青霉是種真菌，屬于子囊菌。有的能產(chǎn)生青霉素，救了無數(shù)人的命。產(chǎn)生無性孢子。根霉（Rhizopus)是種真菌，屬于接合菌。能產(chǎn)生無性孢子菌絲體的直徑約12um黑的是孢子囊粘質(zhì)沙雷氏菌的菌落特征

沙門氏菌的菌落特征

銅綠假單孢菌的菌落特征

弗氏志賀氏菌的菌落特征

粘質(zhì)沙雷氏菌的菌落特征

放線菌的菌落特征A：諾爾斯氏鏈霉菌；B：皮疽諾卡氏菌；C：酒紅指孢囊菌；D：游動放線菌；E：小單胞菌；F：皺雙孢馬杜拉放線菌產(chǎn)抗菌素的放線菌的菌落特征

A：卡特利鏈霉菌；B：弗氏鏈霉菌；C：吸水鏈霉菌金淚亞種；D：卡那霉素鏈霉菌；E：除蟲鏈霉菌；F：生磺酸鏈霉菌各種曲霉的菌落各種病原真菌的菌落青霉的菌落青霉的菌落

各種酵母菌的菌落

啤酒酵母的菌落紅酵母的菌落四、微生物的營養(yǎng)水分：水占細胞漿的70%～90%，是細胞的重要組成成分。較普遍的觀點認為，只有在含水的環(huán)境中微生物才能存活。但也有人發(fā)現(xiàn)在無水碳氫化合物中微生物可長期存活。碳源：碳源是構(gòu)成細胞的重要物質(zhì)。有些微生物的碳源必須來自有機碳化合物如糖、蛋白質(zhì)、脂肪、有機酸等（同時利用其化學(xué)能），屬異養(yǎng)型；有些微生物不需有機碳化合物，以CO2為碳源，屬自養(yǎng)型（分為光能自養(yǎng)型和化能自養(yǎng)型）。五、微生物生長的影響因素1、營養(yǎng)物2、PH值3、溫度4、氧氣5、滲透壓6、表面張力六、消毒與滅菌消毒與滅菌是微生物實驗技術(shù)中最基本的操作，從事藥品生產(chǎn)和檢驗的人員都應(yīng)當(dāng)了解消毒與滅菌的方法及其意義，嚴格遵守操作規(guī)程，否則會影響產(chǎn)品質(zhì)量，危害患者安全。概念滅菌——使達到無菌狀態(tài)的方法（GMP指南）。用物理或化學(xué)方法殺滅傳播媒介上所有的微生物，使其達到無菌（GB）。通常是指殺滅或除去全部活的微生物（包括繁殖體和芽孢）。消毒——用物理或化學(xué)方法殺滅或清除傳播媒介上的病原微生物，使其達到無害化（GB）。通常是指殺死病原微生物的繁殖體，但不能破壞其芽孢。所以消毒是不徹底的，不能代替滅菌。概念無菌制劑——不存在活的微生物的制劑（GMP指南）。非無菌制劑——所含活的微生物量符合衛(wèi)生學(xué)標準的制劑（GMP指南）。常用消毒劑⑥新潔爾滅（苯扎溴銨）0.1%水溶液，用于皮膚、粘膜、器具等消毒，有清潔和消毒雙重功效，抗菌譜較窄；⑦杜滅芬（消毒寧）0.05%~0.1%水溶液，用于皮膚、器具等消毒；⑧過氧乙酸a、0.2%~0.5%水溶液；b、新配0.5%水溶液；c、1g/m3；用于器具等消毒，抗菌譜廣，可用于皮膚消毒殺滅某些病毒；熏蒸，但性質(zhì)不穩(wěn)定。⑨乳酸a、0.33~1mol/L；b、1~1.5ml/m3熏蒸或與等量苯酚合用熏蒸噴霧，用于空氣消毒，有強殺菌作用；熏蒸，密閉12h以上。⑩麝香草酚5%麝香草酚溶于50%乙醇，噴灑墻面、地面，殺霉菌。濕熱滅菌通過熱蒸汽或沸水使蛋白質(zhì)變性而殺滅微生物的方法。濕熱穿透力強，滅菌效果較干熱好。①煮沸或流通蒸汽滅菌：常壓下沸水和蒸汽的溫度是100℃，一般處理30~60min可殺死細菌繁殖體，但不能完全殺滅芽孢。此法適用于不能高壓蒸汽滅菌的物品。②低溫間隙滅菌（巴斯德滅菌法）：將物品先用60~80℃加熱（或煮沸）1h，然后置20~25℃保存24h（或常溫過夜），使其中殘存的芽孢萌發(fā)成繁殖體，再用以上條件滅菌，如此反復(fù)三次。本法適用于不耐高溫或高溫下易變質(zhì)的物品，但很費時。高壓蒸汽滅菌（熱壓滅菌）超過一個大氣壓時，水的沸點高于100℃，反之亦然。高壓蒸汽滅菌就是通過加壓提高蒸汽溫度，滅菌效果最好。它簡便、經(jīng)濟、可靠、無毒，是最可靠、應(yīng)用最廣泛的滅菌法。此法適用于耐高溫和潮濕的物品。常用條件為：115.5℃、30min；121.5℃、20min；126.5℃、15min。注意事項

a.必須完全排出滅菌器內(nèi)的空氣。否則會影響滅菌器內(nèi)溫度達到規(guī)定的要求。b.注意被滅菌物品的溫度。滅菌器內(nèi)溫度與被滅菌物品的溫度一般是一致的，但在蒸汽輸入過快時，后者可能低于前者，所以升溫時要有一定的預(yù)熱時間。另外，降溫過快易引起玻璃炸裂。因此，對于一種滅菌產(chǎn)品，應(yīng)制定一固定的滅菌曲線（像凍干曲線一樣）。c.定期檢查滅菌器內(nèi)溫度的準確性?；瘜W(xué)滅菌利用化學(xué)試劑形成的氣體來殺滅微生物的方法。常用的滅菌劑為環(huán)氧乙烷（又稱氧化乙烯）。環(huán)氧乙烷是廣譜殺菌劑，能殺滅細菌、芽孢和多種病毒，還能殺死昆蟲及蟲卵。但由于環(huán)氧乙烷易燃易爆且有毒（有致變異性），用于藥品方面極有限，多用于醫(yī)療器械、塑料制品等滅菌。（不能用于橡膠和乳膠手套，能將其溶解。濾過除菌利用細菌不能通過致密孔濾材的原理，除去對熱不穩(wěn)定的藥品溶液或液體物質(zhì)中的細菌的方法。過濾法一般只能除菌，不能除去支原體和病毒。過濾除菌的效果與濾膜的性能、孔徑的大小、密度、濾膜的厚度等因素有關(guān)。濾過