《了哥王苗木繁育技術(shù)規(guī)程》地方標(biāo)準(zhǔn)編制說明一、工作簡況（一）任務(wù)來源2018年12月20日，由江西省林業(yè)科學(xué)院申請地方標(biāo)準(zhǔn)的立項，根據(jù)江西省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局下達(dá)的2018年度江西省地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項目計劃，批準(zhǔn)《了哥王苗木繁育技術(shù)規(guī)程》地方標(biāo)準(zhǔn)的制定。（二）起草單位起草單位：江西省林業(yè)科學(xué)院、江西普正制藥有限公司、江西省標(biāo)準(zhǔn)化研究院、江蘇省中國科學(xué)院植物研究所（三）主要起草人姓名性別職務(wù)/職稱工作單位任務(wù)分工朱培林男所長/研究員江西省林業(yè)科學(xué)院負(fù)責(zé)標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)總體方案的制訂、標(biāo)準(zhǔn)的執(zhí)筆起草等鄧紹勇男副研究員江西省林業(yè)科學(xué)院試驗設(shè)計及研究、標(biāo)準(zhǔn)起草修改房海靈女副研究員江蘇省中國科學(xué)院植物研究所參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改繆延暉女研究員江西省標(biāo)準(zhǔn)化研究院參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改李康琴女副研究員江西省林業(yè)科學(xué)院參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改黃麗莉女教授級高工江西省林業(yè)科學(xué)院參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改李婷女研究實(shí)習(xí)員江西省林業(yè)科學(xué)院參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改胡小紅女高級工程師江西省林業(yè)科學(xué)院參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改龔斌男教授級高工江西省林業(yè)科學(xué)院參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改謝雄雄男研究實(shí)習(xí)員江西省林業(yè)科學(xué)院參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改朱靈芝女研究實(shí)習(xí)員江西省林業(yè)科學(xué)院參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改陳宜均女研究實(shí)習(xí)員江西省林業(yè)科學(xué)院參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改吳永忠男研究員江西普正制藥有限公司參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改梁呈元男研究員江蘇省中國科學(xué)院植物研究所參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改戈小燕女助理工程師江西省標(biāo)準(zhǔn)化研究院參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改劉玉芳女工程師江西省林業(yè)科學(xué)院參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改桂麗靜女工程師江西省林業(yè)科學(xué)院參與標(biāo)準(zhǔn)起草、修改二、制定（修訂）標(biāo)準(zhǔn)的必要性和意義了哥王（Wikstroemiaindica(L.）C.A.Mey)為瑞香科蕘花屬（Wikstroemia）植物，干燥根或根皮入藥。具清熱解毒、散淤消腫、利水功能，主治：風(fēng)濕痹痛，跌打損傷、毒蛇咬傷、高熱發(fā)痧等。臨床效果顯著。江西林地中原有大量野生分布，但近年來野生資源急劇下降。標(biāo)準(zhǔn)編制單位之一的企業(yè)是國內(nèi)了哥王相關(guān)產(chǎn)品的龍頭企業(yè)之一，為解決公司原材料的緊缺聯(lián)合編制單位對苗木繁育技術(shù)等進(jìn)行研究，據(jù)標(biāo)準(zhǔn)編制單位多年研究及使用成果，結(jié)合總結(jié)生產(chǎn)實(shí)踐經(jīng)驗，參考《中華人民共和國種子法》的有關(guān)規(guī)定、《中華人民共和國藥典》（2015版一部）的有關(guān)規(guī)定、外經(jīng)貿(mào)部頒布的《藥用植物及制劑進(jìn)出口綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》及有關(guān)研究文獻(xiàn)資料，參考國家藥品監(jiān)督管理局制定的《中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》要求，制訂本項技術(shù)規(guī)程。通過標(biāo)準(zhǔn)制訂，對指導(dǎo)江西省了哥王藥材未來的生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)化，保障藥材質(zhì)量和提高農(nóng)民收入有重要意義。了哥王為瑞香科蕘花屬植物，廣泛分布于我國長江以南各省，主要生于丘陵草坡或灌叢中。根、莖、葉及果實(shí)入藥，有毒，具有清熱解毒、消腫散瘀、治瘰疬、腫痛的功效，用于治療惡瘡、扁桃體炎、支氣管炎、肺炎、腮腺炎、風(fēng)濕痛、跌打損傷、水腫膨脹等癥，為我國南方重要中藥之一。過去，了哥王藥材主要來源于野生資源，隨著研究進(jìn)一步深入，市場對了哥王藥材需求量急劇增加，加上生態(tài)環(huán)境的破壞，許多原豐產(chǎn)地資源面臨枯竭，開展了哥王野生變家種成為滿足市場需求的重要途徑。許多大型制藥廠通過收購農(nóng)民或藥農(nóng)在山上采集的了哥王植株制藥，但由于需求量大，許多原豐產(chǎn)地（如井岡山、南嶺等）面臨資源枯竭。為了保證制藥廠的原材料供應(yīng)和持續(xù)利用了哥王資源，一些廠家不得不開始人工培育。野生了哥王主要以種子進(jìn)行繁殖，據(jù)報道了哥王種子具有休眠的特征，種子發(fā)芽慢，發(fā)芽率低，自然成苗率低，嚴(yán)重影響了哥王的規(guī)?；缟a(chǎn)。在了哥王人工培育中，苗木繁殖困難是制約其規(guī)?；耘嗟闹匾蛩刂?，本規(guī)程在系列試驗的基礎(chǔ)上，包括扦插基質(zhì)、季節(jié)、插穗規(guī)格、外源激素種類及其濃度等，本規(guī)程在對了哥王種子特性、萌發(fā)條件及促萌技術(shù)研究的基礎(chǔ)上，總結(jié)一套適合于了哥王種子育苗技術(shù)操作規(guī)程，并結(jié)合生產(chǎn)經(jīng)驗，總結(jié)形成了哥王扦插育苗技術(shù)規(guī)程，為了哥王種苗繁育提供技術(shù)支撐，為進(jìn)一步推廣了哥王苗木生產(chǎn)技術(shù)提供參考。本標(biāo)準(zhǔn)的推廣應(yīng)用，預(yù)計可產(chǎn)生良好的經(jīng)濟(jì)效益。三、主要起草過程本標(biāo)準(zhǔn)通過總結(jié)相關(guān)科研項目的研究成果，申報前期主要對相關(guān)數(shù)據(jù)采集、匯總、分析、整理。項目立項后，主要起草標(biāo)準(zhǔn)文本、擬稿、反復(fù)修改、完善。征求意見稿完成后，主要是標(biāo)準(zhǔn)征求意見、審定、整理送審等。四、制定（修訂）標(biāo)準(zhǔn)的原則和依據(jù)，與現(xiàn)行法律、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系本標(biāo)準(zhǔn)編制應(yīng)用“了哥王苗木繁育關(guān)鍵技術(shù)研究”等項目的科研技術(shù)成果，結(jié)合對了哥王播種、扦插育苗實(shí)踐與實(shí)際，遵循科學(xué)性、系統(tǒng)性、可靠性、可操作性、規(guī)范性、程序性等原則制定本標(biāo)準(zhǔn)。1、科學(xué)性：在標(biāo)準(zhǔn)編制中充分吸收最新研究成果和先進(jìn)技術(shù)，制訂出更加科學(xué)、合理的指標(biāo)與技術(shù)措施。2、系統(tǒng)性：在標(biāo)準(zhǔn)編制過程堅持各個環(huán)節(jié)協(xié)調(diào)一致，保持良好的相容性。3、可靠性：堅持以數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，依托大量科研試驗數(shù)據(jù)和豐富實(shí)踐證明的數(shù)據(jù)編制標(biāo)準(zhǔn)，堅持各項指標(biāo)與措施來源于實(shí)地數(shù)據(jù)的分析與測算。4、可操作性：力求標(biāo)準(zhǔn)的條款表述明確無歧義，簡便明了易理解和操作，排除人為的隨意性。5、規(guī)范性：標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容的編寫順序、編排格式、章節(jié)劃分以及編號等力求符合GB/T1.1-2009給出的規(guī)則。6、程序性：按照標(biāo)準(zhǔn)編制過程要求的先后次序有序?qū)嵤?。五、主要條款的說明（一）主要條款1、圃地選擇及準(zhǔn)備本部分明確了了哥王播種、扦插育苗圃的土壤及環(huán)境要求，根據(jù)了哥王的生物學(xué)特性要求的適合生長發(fā)育自然條件，明確了了哥王播種、扦插繁育對氣候土壤等自然條件的要求，參考有關(guān)了哥王生物學(xué)特性等的文獻(xiàn)資料提出。2、種子、穗條的采集與處理本部分明確了種子、穗條來源，采穗、采種、時間、穗條規(guī)格、穗條修剪等內(nèi)容。3、播種、扦插方法本部分明確了播種、扦插時間，催芽、插穗處理，播種、扦插方法，扦插密度、用種量，插后處理等內(nèi)容。了哥王主要采取播種繁殖和扦插繁殖，對優(yōu)良種質(zhì)或品種類型進(jìn)行扦插繁殖育苗有利于保持其優(yōu)良特性。扦插繁殖過程中使用生根劑對扦插成活率有較大的影響。4、苗期管理本部分明確了了哥王播種、扦插后的水肥、溫度管理及草、病蟲害控制等技術(shù)要求。項目組對了哥王苗期管理積累了一定的技術(shù)經(jīng)驗，同時采納已經(jīng)取得的成功經(jīng)驗和開展相關(guān)試驗結(jié)果提出。5、苗木分級和出圃本部分明確了了哥王播種、扦插苗木質(zhì)量等級，即將了哥王苗木分為三個等級，規(guī)定了地徑、苗高等質(zhì)量控制指標(biāo)范圍，及綜合控制指標(biāo)，各控制指標(biāo)均來源于實(shí)際播種、扦插苗木一定量的實(shí)際測量統(tǒng)計數(shù)據(jù)。苗木出圃部分明確了起苗、漿根、包裝、標(biāo)簽等苗木出圃必須的操作規(guī)程。（二）主要論據(jù)2013年開始，本項目組就開展了了哥王種質(zhì)資源收集、馴化繁育研究工作，承擔(dān)了江西省科技廳社發(fā)領(lǐng)域項目“了哥王苗木繁育關(guān)鍵技術(shù)研究”（20132BBG70046）項目，項目于2016年底完成驗收。該項目以江西省特色森林藥材了哥王為研究對象，研究了其種子、扦插、組培等育苗技術(shù)，包括（1）以千粒重、凈度、千粒重、含水量、生活力等為評價指標(biāo)，制訂了哥王種子質(zhì)量分級標(biāo)準(zhǔn)。同時對種子促萌技術(shù)和萌發(fā)抑制物質(zhì)進(jìn)行研究，確定了最佳促萌方法，初步明確了引起了哥王種子休眠原因；（2）比較扦插基質(zhì)、季節(jié)、插穗規(guī)格、外源激素種類及其濃度等因子對了哥王扦插繁殖的影響，篩選出了哥王扦插生根的因子、水平和技術(shù)方案；（3）初步掌握了哥王扦插繁殖技術(shù)；通過外植體的篩選、初代培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、生根培養(yǎng)以及苗木移栽等一系列的試驗，試圖掌握了哥王組織培養(yǎng)、快速育苗的技術(shù)和方法。在此基礎(chǔ)上制訂了哥王苗木繁育技術(shù)操作規(guī)程（SOP），為了哥王苗木繁育標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)?；霸趫@林中大面積的推廣應(yīng)用提供技術(shù)支撐。1、了哥王種子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究從表1-2可知，了哥王種子的凈度均在80%以上。來自湖南宜章的了哥王種子凈度最低，種子中含砂石較多，凈度僅為83.82%。表1-2不同居群了哥王種子凈度分析結(jié)果（n=3）Table1-2TheseedpurityofW.indicafromdifferentpopulation(n=3)編號No.凈種子Pureseed/g重型混雜物Heavyimpurity/g癟種及殘莖稈Unfilledseedandresidualstem/g其它植物種子Othersseed/g原重Originalweight/g分析后樣品重Finalweight/g凈度Neatness/%128.250.151.410.0430.0029.9294.42227.330.951.640.0030.0029.8991.44328.091.030.730.0230.0030.0093.63427.050.380.520.0030.0029.9590.32526.310.541.530.1530.0029.9087.99628.160.190.670.0230.0029.8794.28725.071.240.930.0030.0029.9183.82826.820.110.720.0030.0029.9289.64926.780.871.100.0030.0029.9389.489個居群了哥王種子千粒重在1.896～2.685g之間，其中廣東陽春了哥王居群種子最小，千粒重為1.896g，湖南祁東了哥王居群種子最大，千粒重為2.685g。從表1-3可以看出9個居群了哥王種子含水量在10.43%～12.17%之間。江西修水居群種子含水量最高，為12.17%；江西井岡山、湖南宜章居群種子含水量較低，分別為10.43%和10.85%。以了哥王種子凈度、千粒重、含水量、電導(dǎo)率和發(fā)芽率項指標(biāo)進(jìn)行K類中心聚類分析，最終類中心值見表1-5。凈度3個類中心值分別為94.42%、91.44%和89.64%；千粒重3個類中心值分別為2.27g、2.06g和2.00g；含水量的3個類中心值分別為11.06%、11.89%和12.02%；相對電導(dǎo)率3個類中心值分別為21.25%、30.13%和41.42%；發(fā)芽率的3個類中心值分別為39.33%、25.33%和14.67%。表1-5K類中心聚類的最終類中心值（n=9）Table1-5FinalclustercentersofK-centercluster類型Cluster發(fā)芽率Germinationpercentage/%千粒重1000seedweight/g凈度Neatness/%含水量Moisturecontent/%相對電導(dǎo)率Relativeconductivity/%139.332.2794.4211.0621.25225.332.0691.4411.8930.13314.672.0089.6412.0241.42以了哥王種子凈度、千粒重、含水量、電導(dǎo)率和發(fā)芽率項指標(biāo)的聚類中心值作為了哥王種子分級標(biāo)準(zhǔn)的參考值，結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際和可操作性，在此基礎(chǔ)上初步制定了了哥王種子質(zhì)量分級標(biāo)準(zhǔn)見表1-6。Ⅰ級了哥王種子外形應(yīng)飽滿，有光澤，大小均勻，干燥，無雜質(zhì)；Ⅱ級種子外形較飽滿，略有光澤，大小較為均勻，有少許癟粒和雜質(zhì)；Ⅲ級種子瘦、癟，無光澤，大小不均勻，有癟粒和雜質(zhì)。表1-6了哥王種子質(zhì)量分級標(biāo)準(zhǔn)Table1-6TheseedqualityclassificationstandardofW.indica分級標(biāo)準(zhǔn)Classstandard發(fā)芽率Germinationpercentage/%千粒重1000seedweight/g凈度Neatness/%含水量Moisturecontent/%相對電導(dǎo)率Relativeconductivity/%1≥40≥2.3≥94.4≤11≤21225402.02.391.494.41111.921303<25<2.0<91.4>11.9>302、不同引發(fā)處理對了哥王種子萌發(fā)的影響（1）GA3處理對了哥王種子萌發(fā)的影響由表1-7可看出，用一定質(zhì)量濃度的GA3溶液對了哥王種子進(jìn)行浸種，可有效提高種子發(fā)芽率，縮短發(fā)芽所用時間、提高出苗整齊度，并有助于幼苗生長。在100~300mg·L-1GA3濃度范圍內(nèi)，了哥王種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)逐漸升高；但隨著GA3濃度的進(jìn)一步增加，4項指標(biāo)均呈極顯著降低趨勢（P<0.01）。與對照相比，300mg·L-1GA3處理組了哥王種子的萌發(fā)效果最好，發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)及活力指數(shù)高達(dá)36%、36%、4.54、12.52。與300~400mg·L-1GA3處理組相比，500mg·L-1GA3處理組的了哥王種子發(fā)芽率顯著降低(P<0.01)，表明GA3濃度過高對了哥王種子萌發(fā)有一定抑制作用。表1-7不同濃度GA3處理對了哥王種子萌發(fā)的影響Table1-7EffectofdifferentconcentrationsGA3treatmentsonthegerminationofW.indicaseeds(n=3)GA3/mg·L-1發(fā)芽率/%發(fā)芽勢/%發(fā)芽指數(shù)活力指數(shù)10023.33±1.15cC22.00±0.00cC2.52±0.13dC5.56±0.27dD20025.33±1.15cC24.00±2.00cC2.74±0.15cdC7.57±0.17cC30036.00±2.00aA36.00±2.00aA4.54±0.18aA12.52±0.31aA40030.67±3.06bB28.67±3.06bB3.62±0.30bB10.51±0.66bB50023.33±1.15cC23.33±1.15cC2.70±0.25cC7.58±0.89cCCK14.00±2.00dD7.33±1.15dD0.99±0.17eD2.10±0.35eE（2）PEG處理對了哥王種子萌發(fā)的影響由表1-8可看出，10%PEG處理條件下，除發(fā)芽勢外，了哥王種子發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)及活力指數(shù)均顯著高于對照，但未達(dá)到極顯著水平。20%~30%PEG引發(fā)處理可極顯著促進(jìn)了哥王種子萌發(fā)，4項指標(biāo)均達(dá)到極顯著差異水平（P<0.01），其中以25%PEG引發(fā)效果最佳，種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)及活力指數(shù)分別較對照提高44.73%、236.56%、212.12%、301.42%。35%PEG引發(fā)處理了哥王種子各生理指標(biāo)均低于對照，表明高濃度PEG對了哥王種子萌發(fā)具有抑制作用。表1-8不同濃度PEG處理對了哥王種子萌發(fā)的影響Table1-8EffectofdifferentconcentrationsPEGtreatmentonthegerminationofW.indicaseeds(n=3)PEG/%發(fā)芽率/%發(fā)芽勢/%發(fā)芽指數(shù)活力指數(shù)1515.33±1.15cBC14.00±2.00cCD1.43±0.16cC3.18±0.30dCD2022.67±2.31abA20.00±2.00bAB2.25±0.21bB5.66±0.43bB2525.33±3.06aA24.67±3.06aA3.09±0.30aA8.43±0.94aA3020.00±2.00bAB16.67±1.15cBC1.99±0.05bB4.25±0.11cC3510.67±1.15dC9.33±1.15dDE1.13±0.04cdC2.20±0.06eDCK14.00±2.00cdC7.33±1.15dE0.99±0.17dC2.10±0.35eD（3）NaCl處理對了哥王種子萌發(fā)的影響由表1-9可看出，在0.5%~1.5%NaCl浸種處理下，了哥王種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)均高于對照，且達(dá)到極顯著差異水平，說明0.5%~1.5%處理對了哥王種子萌發(fā)具有極顯著的促進(jìn)作用，且促進(jìn)效果隨NaCl濃度的升高促進(jìn)作用也隨之增加。以1.0%NaCl處理了哥王種子萌發(fā)效果最佳，發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù)分別較對照增加90.48%、263.85%、221.21%、313.33%，均呈極顯著水平。在2.0%和2.5%NaCl處理條件下，了哥王種子萌發(fā)各項指標(biāo)均低于對照，且隨NaCl濃度升高而呈下降趨勢，表明高濃度NaCl浸種對了哥王種子萌發(fā)具有一定抑制作用。表1-9不同濃度NaCl處理對了哥王種子萌發(fā)的影響Table1-9EffectofdifferentconcentrationsNaCltreatmentonthegerminationofW.indicaseeds(n=3)NaCl/%發(fā)芽率/%發(fā)芽勢/%發(fā)芽指數(shù)活力指數(shù)0.519.33±2.31bB19.33±2.31bB2.24±0.11bB5.45±0.19bB1.026.67±1.15aA26.67±1.15aA3.18±0.18aA8.68±0.34aA1.520.00±2.00bB17.33±1.15bB2.23±0.05bB5.51±0.22bB2.013.33±1.15cC11.33±1.15cC1.15±0.03cC2.04±0.08cC2.511.33±1.15cC6.00±0.00dD0.77±0.01cCD1.17±0.05dDCK14.00±2.00cC7.33±1.15dD0.99±0.17dD2.10±0.35cC（4）KNO3·KH2PO4處理對了哥王種子萌發(fā)的影響由表1-10可看出，0.5%~2.0%KNO3·KH2PO4溶液浸種處理對了哥王種子萌發(fā)及幼苗生長具有極顯著的促進(jìn)作用。與對照相比，種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)及活力指數(shù)等指標(biāo)均有不同程度的增加，且隨溶液濃度的增加呈先升高后下降的趨勢。當(dāng)KNO3·KH2PO4溶液濃度為1.0%時，對了哥王種子萌發(fā)促進(jìn)效果最佳，與對照相比，種子發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)及活力指數(shù)分別提高133.35%、291.13%、282.82%、380%；當(dāng)KNO3·KH2PO4溶液濃度為2.5%時，各指標(biāo)均處于最低值，與對照相比均明顯下降。表明適宜濃度的KNO3·KH2PO4溶液引發(fā)可顯著提高種子發(fā)芽率、縮短種子萌發(fā)時間，促進(jìn)幼苗生長。表1-10不同濃度KNO3·KH2PO4處理對了哥王種子萌發(fā)的影響Table1-10EffectofdifferentconcentrationsKNO3·KH2PO4treatmentonthegerminationofW.indicaseeds(n=3)KNO3·KH2PO4/%發(fā)芽率/%發(fā)芽勢/%發(fā)芽指數(shù)活力指數(shù)0.524.00±2.00bB22.00±2.00bB2.47±0.16bB6.20±0.46bB1.032.67±2.31aA28.67±2.31aA3.79±0.19aA10.08±0.35aA1.523.33±1.15bB20.67±1.15bB2.49±0.14bB6.01±0.26bB2.018.00±2.00cC15.33±2.31cC1.88±0.20cC4.28±0.46cC2.512.67±1.15dD6.67±1.15dD0.87±0.04dD1.66±0.12dDCK14.00±2.00dD7.33±1.15dD0.99±0.17dD2.10±0.35dD

3、了哥王種子萌發(fā)抑制物研究（1）果實(shí)及種子形態(tài)特征觀察發(fā)現(xiàn)，了哥王果實(shí)呈橢圓形，長約7~8mm，核果，成熟時呈紅色至暗紫色。果實(shí)內(nèi)含有1粒種子，種子卵圓形，呈灰白色；種皮較薄，種仁白色，種胚不明顯；雙子葉具胚乳。干燥果實(shí)出籽率為55%~58%，千粒質(zhì)量(21.35±1.30)g，優(yōu)良度為85%。（2）種子吸水曲線圖1-1了哥王種子吸水曲線Fig.1-1ThecurveofwaterabsorptionofW.indica由圖1-1可見，了哥王完整種子和破皮種子的吸水率存在一定差異，破皮種子在各個吸水階段的吸水率、吸水速率均明顯著高于完整種子。吸水的前2h是破皮種子和完整種子的快速吸水期，吸水率呈直線上升趨勢，破皮種子吸水率為42.41%，而完整種子僅為30.12%。此后，種子吸水率隨著時間的延長呈緩慢上升趨勢，破皮種子在吸水的6h已趨于飽和，8h達(dá)到飽和狀態(tài)，吸水率為61.53%。完整種子在24h吸水率上升仍較快，4h后吸水速率增速變慢，直至32h才達(dá)到飽和狀態(tài)，吸水率為60.29%。由此看出，了哥王種子的種皮對種子吸脹吸水具有一定的影響，在一定程度上阻礙了水分的自由流動。但是隨著時間的延長，完整種子的吸水率接近種仁，因此在實(shí)際生產(chǎn)過程中，可通過延長浸泡時間來提高種子吸水率，進(jìn)而促進(jìn)種子萌發(fā)。（3）不同溶劑了哥王種子浸提液對白菜和小麥種子萌發(fā)和幼苗生長的影響了哥王種子蒸餾水浸提液、甲醇浸提液對白菜、小麥種子的萌發(fā)和幼苗生長均有不同程度的抑制作用，但抑制效果存在差異。與小麥相比，蒸餾水浸提液對白菜種子的抑制作用更加顯著，抑制強(qiáng)度與浸提液濃度呈明顯的線性關(guān)系，在試驗范圍內(nèi)最低濃度的浸提液處理可使白菜芽長較對照降低34.54%，主根長降低23.75%，發(fā)芽率也有顯著下降，降低76.0%；100%純浸提液處理使得白菜種子發(fā)芽率急劇降低，僅為42.67%，部分種子主根出現(xiàn)短粗的現(xiàn)象。蒸餾水浸提液對小麥種子的抑制主要表現(xiàn)在對發(fā)芽率、主根長方面，抑制強(qiáng)度隨浸提液濃度的升高而增加，對芽生長的抑制作用與浸提液濃度無關(guān)。甲醇浸提液對白菜的抑制作用亦強(qiáng)于小麥，但是抑制部位與水浸提液有所不同。甲醇浸提液對白菜芽長、發(fā)芽率表現(xiàn)出明顯的抑制作用，且抑制強(qiáng)度與抑制物質(zhì)濃度相關(guān)性不顯著；主根長與抑制物質(zhì)的濃度呈線性關(guān)系，最低濃度的甲醇浸提液可使白菜主根長度降低至2.15cm，甲醇浸提液對小麥種子的抑制作用主要體現(xiàn)在對發(fā)芽率、主根長，抑制強(qiáng)度隨浸提液濃度的升高而增強(qiáng)，25%浸提液處理可使小麥發(fā)芽率較對照降低4.28%，主根長降低9.27%。綜上研究發(fā)現(xiàn)，以蒸餾水為浸提液對2種植物種子萌發(fā)的抑制效果較甲醇明顯，說明了哥王種子中存在某種萌發(fā)抑制物質(zhì)，且該種物質(zhì)在蒸餾水中溶解度較大。（4）不同部位了哥王種子浸提液對小麥和白菜種子萌發(fā)和幼苗生長的影響由表2可知，了哥王種仁的水浸提液對小麥種子發(fā)芽率的抑制作用并不顯著，即使是浸提原液處理，小麥種子發(fā)芽率仍有80%，但是果肉、種皮對小麥種子萌發(fā)的抑制作用則隨著浸提液濃度的增加而增強(qiáng)。方差分析表明，了哥王果肉75%、100%水浸提液以及所有濃度種皮浸提液與對照組差異達(dá)到顯著或極顯著水平。不同濃度了哥王種子各部位浸提液對小麥幼苗苗高和根長的影響不同。種仁各濃度浸提液處理后的小麥芽長和主根長差異不顯著；果肉浸提液處理后對小麥主根生長抑制作用強(qiáng)于芽長，50%浸提液不影響芽的生長，但輕微抑制主根生長；種皮浸提液對小麥種子發(fā)芽率、主根長均有顯著的抑制作用，25%浸提液使發(fā)芽率較對照降低10.14%，主根長降低9.05%，為2.21cm。由表2還可見，了哥王種子各部分浸提液對白菜種子萌發(fā)、幼苗生長均有明顯的抑制作用，其中以種皮抑制效果最佳，果肉次之，種仁效果最差，并且各部位對白菜種子抑制效果不同。25%種仁浸提液對白菜種子的萌發(fā)和幼苗生長僅有輕微的抑制作用，與對照相比差異不顯著，其他濃度種仁浸提液對白菜發(fā)芽率、芽長抑制作用較為顯著，且抑制效果隨濃度的升高而增強(qiáng)。果肉浸提液對白菜發(fā)芽率、主根長抑制效果更為顯著，抑制強(qiáng)度與濃度無顯著相關(guān)性。種皮浸提液對白菜種子發(fā)芽率、芽長和主根長均有顯著的抑制作用，25%浸提液可使種子發(fā)芽率降低至66.67%，芽長和主根長也得到不同程度的抑制，100%浸提原液處理后，白菜種子發(fā)芽率僅為36.67%，幼苗出現(xiàn)子葉發(fā)黃、主根短粗等畸形苗的現(xiàn)象。以上結(jié)果表明，了哥王種子果肉、種皮、種仁中均含有抑制種子萌發(fā)和幼苗生長的抑制物質(zhì)，這種抑制物質(zhì)不僅可以抑制種子發(fā)芽，影響苗高和根的生長，甚至可以造成幼苗生長畸形，且在種皮中含量較高，對雙子葉植物抑制效果更為顯著。表1-11不同溶劑了哥王種子浸提液對白菜、小麥種子萌發(fā)和幼苗生長的影響Table1-11EffectofdifferentsolventsextractsfromW.indicaseedonseedgerminationandseedlinggrowthofwheatandcabbage處理白菜小麥發(fā)芽率/%芽長/cm根長/cm發(fā)芽率/%芽長/cm根長/cmCK(蒸餾水)90.00±1.00aA3.30±0.04aA2.40±0.06aA92.00±1.00aA3.25±0.08aA2.43±0.06aA25%水浸提液76.00±1.00bB2.16±0.04bB1.83±0.05bB86.00±1.73bAB3.06±0.05bB2.16±0.02bB50%水浸提液64.00±2.00cC2.05±0.04cBC1.58±0.06cC80.67±0.58cB2.86±0.09cC2.05±0.05cB75%水浸提液55.33±1.53dD1.92±0.03dC1.36±0.05dD68.00±2.00dC2.22±0.09eE1.87±0.07dC100%水浸提液42.67±1.15eE1.65±0.09eD1.09±0.04eE61.33±1.15eC2.54±0.08dD1.74±0.03eDCK(80%甲醇)88.00±1.00aA3.28±0.04aA2.31±0.05aA93.33±0.58aA3.35±0.03aA2.48±0.05aA25%醇浸提液82.67±1.53bA3.10±0.06bA2.15±0.04bB89.33±1.15abAB3.11±0.10bB2.25±0.07bB50%醇浸提液68.00±2.00cB2.86±0.09cB2.07±0.02bB84.67±1.53bcBC2.78±0.09cC2.10±0.06cB75%醇浸提液61.33±1.15dC2.54±0.08dC1.87±0.07cC80.00±2.00cdCD2.54±0.09dD1.83±0.07dC100%醇浸提液72.00±2.00cB2.62±0.10dC1.71±0.07dD74.67±1.53dD3.06±0.07bB2.21±0.07bcB表1-12了哥王種子不同部位浸提液對白菜、小麥種子萌發(fā)和幼苗生長的影響Table1-12EffectofextractsfromdifferentpartsofW.indicaseedonseedgerminationandseedlinggrowthofwheatandcabbage處理白菜小麥發(fā)芽率芽長/cm根長/cm發(fā)芽率芽長/cm根長/cmCK90.00±1.00aA3.30±0.04aA2.40±0.06aA92.00±1.00aA3.25±0.08aA2.43±0.06aA25%果肉浸提液76.00±1.00cBC3.10±0.07bB1.83±0.05eE88.00±1.00abcABC2.84±0.04dD2.42±0.01aAB50%果肉浸提液64.00±2.00eD2.55±0.04fEF1.58±0.06fF85.33±1.53cdBCD2.80±0.04dD2.33±0.02bBC75%果肉浸提液52.67±1.53fE2.65±0.09eDE1.36±0.05gG76.67±0.58fgEF2.49±0.04eEF2.23±0.05cdDE100%果肉浸提液56.00±1.00fE2.92±0.03cC1.09±0.04iI73.33±1.53gFG2.39±0.02fF2.07±0.07eF25%種皮浸提液66.67±2.08eD1.98±0.08gG1.55±0.07fF82.67±1.53deCDE3.10±0.06bBC2.21±0.04dDE50%種皮浸提液53.33±1.53fE1.70±0.08hH1.24±0.05hH76.67±0.58fgEF2.86±0.09dD2.17±0.02dE75%種皮浸提液44.00±2.65gF1.39±0.06iI0.95±0.06jJ68.00±2.00hG2.54±0.08eE2.05±0.05eF100%種皮浸提液36.67±1.53hG1.19±0.03jJ0.67±0.07kK61.33±1.15iH2.22±0.09gG1.87±0.07fG25%種仁浸提液88.67±1.53aA3.22±0.04aAB2.22±0.03bB90.00±1.00abAB3.26±0.03aA2.40±0.06aAB50%種仁浸提液80.00±2.00bB2.94±0.04cC2.06±0.04cC86.67±1.15bcdABC3.18±0.06abAB2.28±0.03bcCD75%種仁浸提液72.00±1.00dC2.75±0.06dD2.19±0.03bB84.00±1.00cdeBCD3.09±0.01bBC2.29±0.04bcCD100%種仁浸提液65.33±1.15eD2.50±0.04fF1.94±0.09dD80.00±2.00efDE3.00±0.03cC2.23±0.02cdDE4、了哥王扦插育苗技術(shù)研究（1）不同基質(zhì)處理對了哥王插穗生根的影響表2-1不同基質(zhì)處理的插穗生根指標(biāo)差異Table2-1Therootingcharactersofcuttingsondifferentsubstrate基質(zhì)類型Mediumtype生根指標(biāo)Index生根率Rootingrate/%生根數(shù)量Rootingnumber/條·株-1最大根長Longestroot/cm偏根率Hyponasticrootrate/%河沙39.58±4.122.56±0.214.40±0.1246.39±2.64蛭石48.39±3.053.65±0.154.31±0.2438.69±3.20河沙:蛭石=1:154.14±1.562.77±0.234.91±0.1940.53±1.63河沙:泥炭=1:144.11±2.563.02±0.245.31±0.2532.46±2.35泥炭;蛭石=1:155.56±4.034.71±0.454.76±0.3130.54±3.66泥炭:蛭石:河沙=2:1:180.88±3.214.84±0.345.66±0.2934.68±2.09泥炭:蛭石:河沙=1:2:170.32±3.863.98±0.26.03±0.3026.32±3.25泥炭:蛭石:河沙=1:1:256.79±2.654.49±0.265.05±0.2644.46±2.73扦插基質(zhì)的選擇直接關(guān)系到扦插苗木的成活，基質(zhì)理化性質(zhì)是影響插條生根成活的關(guān)鍵因素。從生根率看，以混合基質(zhì)泥炭:蛭石:河沙=2:1:1生根率最高，生根率達(dá)80.88%，顯著高于其他的基質(zhì)；混合基質(zhì)泥炭:蛭石:河沙=1:2:1次之，生根率為70.32%；生根率最低的基質(zhì)為河沙，僅為39.58%，且與其他基質(zhì)之間均存在顯著差異。從生根數(shù)量上看，混合基質(zhì)泥炭:蛭石:河沙=2:1:1和泥炭:蛭石=1:1的生根數(shù)量最多，每個插穗的平均生根數(shù)量分別為4.87條和4.71條，兩者之間差異不顯著；河沙的生根數(shù)量最少，每個插穗的平均生根數(shù)量僅有2.56條。在最大根長方面，以泥炭:蛭石:河沙=1:2:1混合基質(zhì)根最長的最大根長為6.03cm，顯著大于其他基質(zhì)；蛭石基質(zhì)的最大根長僅為4.31cm，顯著地低于其他處理。偏根率最低的基質(zhì)為混合基質(zhì)泥炭:蛭石:河沙=1:2:1，偏根率僅為26.32%；偏根率最高的基質(zhì)為河沙，高達(dá)46.39%。綜合比較各基質(zhì)處理插穗生理指標(biāo)，確定了哥王最佳扦插基質(zhì)為混合基質(zhì)泥炭:蛭石:河沙=2:1:1，其次為混合基質(zhì)泥炭:蛭石:河沙=1:2:1。（2）不同部位插穗生根進(jìn)程比較不同部位了哥王穗條扦插生根發(fā)育情況，結(jié)果見表2-2。由表看出，不同部位的插穗生根率差異極顯著，上部和中部插穗的生根率顯著高于下部插穗，上部生根率為63.05%，下部的僅為48.26%。從生根數(shù)量上看，以中部插穗的生根數(shù)量最多，達(dá)到了5.29條，上部和中部插穗顯著高于下部。上部、中部和下部插穗最大根長分別為6.94cm、7.68cm和3.65cm，上部的最大根長大約是下部的1.8倍，表明源自枝條上部的插穗更有利于根系伸長。不同部位插穗之間的偏根率亦存在顯著差異，上部的偏根率顯著低于下部插穗，下部的偏根率最高，這可能是因為枝條的下部發(fā)育程度高，不利于不定根的形成。表2-2不同部位插穗生根指標(biāo)差異Table2-2Therootingcharactersofcuttingsondifferentpartsofcuttings插穗部位Cuttingposition生根指標(biāo)Index生根率Rootingrate生根數(shù)量Rootingnumber/條·株-1最大根長Longestroot/cm偏根率Hyponasticrootrate/%上部Toppart65.02±5.234.36±0.266.94±0.5731.54.08±2.64中部Middlepart58.61±4.255.29±0.317.68±0.6842.65±3.49下部Basalpart43.25±3.692.68±0.353.65±0.2953.97±3.98（3）不同留葉方式處理的插穗生根進(jìn)程由表2-3可看出，留2片1/2葉的了哥王插穗生根率最高，并且與其余處理都存在顯著差異，留2完整葉的插穗生根率次之，不留葉處理插穗的生根率最低，僅為36.54%。從生根數(shù)量上看，留2片完整葉及留1片1/2葉處理插穗生根數(shù)量之間無顯著差異，留2片1/2葉顯著高于其他3個處理。留2片完整葉插穗的最大根長為7.65cm，顯著高于其他3個處理，約是不留葉處理的1.6倍。在偏根率方面，留一片半葉的插穗顯著高于其它留葉處理，留2片完整葉與留2片1/2葉處理插穗差異不顯著。表2-3不同留葉方式插穗生根指標(biāo)差異Table2-3Therootingcharactersofcuttingsondifferentstyleofkeepingleaves留葉方式Styleofkeepingleaves生根指標(biāo)Index生根率Rootingrate生根數(shù)量Rootingnumber/條·株-1最大根長Longestroot/cm偏根率Hyponasticrootrate/%不留葉36.54±3.944.26±0.614.72±0.5031.64±2.981片1/2葉46.82±2.685.67±0.425.89±0.2946.42±3.092片1/2葉65.97±4.626.81±0.537.65±0.3525.72±4.132片完整葉55.64±3.195.89±0.375.97±0.1628.61±2.56（4）不同季節(jié)插穗的生根進(jìn)程植物扦插繁殖易受季節(jié)影響，在我國，一般以春插為宜。本試驗分別于4月5日（春季）、7月5日（夏季）、9月15日（秋季）進(jìn)行了哥王扦插生根試驗，結(jié)果表明，春季和秋季插穗的生根率均顯著高于夏季，其中以春季扦插生根率最高。這可能是插穗的發(fā)育程度以及當(dāng)?shù)貧夂蚬餐饔玫慕Y(jié)果。在生根數(shù)量上，夏季顯著低于其他兩個季節(jié)，為4.06條·株-1，春季和秋季之間的差異不顯著。春季處理插穗最大根長顯著高于其他季節(jié)，為7.60cm。不同季節(jié)的偏根率差異亦存在顯著差異，其中以春季扦插最低為26.34%，夏季扦插偏根率最高，為38.93%。，由此可見，春季為了哥王扦插的最適宜季節(jié)。表2-4不同季節(jié)處理插穗生根指標(biāo)差異Table2-4Therootingcharactersofcuttingsondifferentplantingseasons扦插時間Plantingtime生根指標(biāo)Index生根率Rootingrate生根數(shù)量Rootingnumber/條·株-1最大根長Longestroot/cm偏根率Hyponasticrootrate/%4月5日（春）67.02±3.645.92±0.317.60±0.9626.34±2.067月5日（夏）43.61±2.134.06±0.254.91±0.6438.93±1.919月15日(秋)56.72±4.065.38±0.436.51±0.4130.29±3.24（5）不同植物生長調(diào)節(jié)劑及濃度處理試驗插穗的生根進(jìn)程從表2-5可以看出，不同外源激素種類及濃度對插穗的生根率、偏根率、生根數(shù)量及最大根長均有顯著影響。三種激素處理后了哥王插穗生根率均有所提高，其中ABT處理效果最好，200mg·L-1ABT處理插穗生根率顯著高于其它處理，其次是150mg·L-1IBA和ABT，200mg·L-1和250mg·L-1NAA處