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生物化學(xué)分離技術(shù)試題姓名_________________________地址_______________________________學(xué)號(hào)______________________-------------------------------密-------------------------封----------------------------線(xiàn)--------------------------1.請(qǐng)首先在試卷的標(biāo)封處填寫(xiě)您的姓名,身份證號(hào)和地址名稱(chēng)。2.請(qǐng)仔細(xì)閱讀各種題目,在規(guī)定的位置填寫(xiě)您的答案。一、選擇題1.生物化學(xué)分離技術(shù)的基本原理包括()
a.相似相溶原理
b.分子篩原理
c.分子間作用力
d.以上都是
2.下列哪種物質(zhì)屬于疏水性物質(zhì)()
a.脂肪
b.蛋白質(zhì)
c.核酸
d.以上都是
3.離子交換層析的基本原理是()
a.利用分子大小差異進(jìn)行分離
b.利用電荷差異進(jìn)行分離
c.利用分子質(zhì)量差異進(jìn)行分離
d.以上都不是
4.下列哪種方法不屬于膜分離技術(shù)()
a.微濾
b.超濾
c.納濾
d.沉淀
5.等電點(diǎn)是指()
a.分子帶正電荷的點(diǎn)
b.分子帶負(fù)電荷的點(diǎn)
c.分子不帶電荷的點(diǎn)
d.分子電荷變化最劇烈的點(diǎn)
6.下列哪種物質(zhì)屬于兩性物質(zhì)()
a.蛋白質(zhì)
b.核酸
c.脂肪
d.以上都不是
7.下列哪種方法用于蛋白質(zhì)的純化()
a.離子交換層析
b.水解法
c.沉淀法
d.以上都是
8.下列哪種物質(zhì)屬于非極性物質(zhì)()
a.水分子
b.脂肪分子
c.核酸分子
d.以上都不是
答案及解題思路:
1.答案:d
解題思路:生物化學(xué)分離技術(shù)的基本原理涵蓋了多種物理化學(xué)原理,包括相似相溶原理、分子篩原理和分子間作用力等。
2.答案:a
解題思路:疏水性物質(zhì)是指那些不溶于水或極性溶劑的物質(zhì),脂肪是典型的疏水性物質(zhì)。
3.答案:b
解題思路:離子交換層析是基于物質(zhì)電荷差異進(jìn)行分離的,通過(guò)靜電相互作用來(lái)分離帶電分子。
4.答案:d
解題思路:膜分離技術(shù)包括微濾、超濾和納濾,沉淀不是一種膜分離技術(shù)。
5.答案:d
解題思路:等電點(diǎn)是指蛋白質(zhì)在溶液中不帶凈電荷的點(diǎn),此時(shí)分子電荷變化最劇烈。
6.答案:a
解題思路:兩性物質(zhì)是指既能與酸反應(yīng)也能與堿反應(yīng)的物質(zhì),蛋白質(zhì)具有這種性質(zhì)。
7.答案:d
解題思路:蛋白質(zhì)的純化可以通過(guò)多種方法實(shí)現(xiàn),包括離子交換層析、水解法和沉淀法。
8.答案:b
解題思路:非極性物質(zhì)是指分子內(nèi)部沒(méi)有電荷分離的物質(zhì),脂肪分子是典型的非極性物質(zhì)。二、填空題1.生物化學(xué)分離技術(shù)按分離原理可分為物理化學(xué)方法、物理方法和生物方法。
2.膜分離技術(shù)按孔徑大小可分為微濾、超濾、納濾。
3.離子交換層析中,陽(yáng)離子交換樹(shù)脂的基團(tuán)為帶負(fù)電荷的官能團(tuán),陰離子交換樹(shù)脂的基團(tuán)為帶正電荷的官能團(tuán)。
4.蛋白質(zhì)電泳的基本原理是蛋白質(zhì)在電場(chǎng)作用下,根據(jù)其分子大小、電荷和形狀的不同,在電場(chǎng)中遷移速率不同而實(shí)現(xiàn)分離。
5.膜分離技術(shù)中,微濾的孔徑范圍為0.11.0微米,超濾的孔徑范圍為1.010.0微米。
6.沉淀法中,常用的沉淀劑有硫酸銨、硫酸鈉、氫氧化鈉。
7.等電聚焦電泳的基本原理是利用pH梯度使蛋白質(zhì)在其等電點(diǎn)處聚焦,從而實(shí)現(xiàn)分離。
8.蛋白質(zhì)鑒定常用的方法有SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳、質(zhì)譜分析、Westernblot。
答案及解題思路:
1.答案:物理化學(xué)方法、物理方法、生物方法
解題思路:根據(jù)生物化學(xué)分離技術(shù)的分類(lèi),物理化學(xué)方法包括離子交換、凝膠過(guò)濾等;物理方法包括離心、沉淀等;生物方法包括親和層析、酶聯(lián)免疫吸附等。
2.答案:微濾、超濾、納濾
解題思路:根據(jù)膜分離技術(shù)的孔徑大小分類(lèi),微濾用于分離較大的分子,超濾用于分離較小的分子,納濾介于兩者之間。
3.答案:帶負(fù)電荷的官能團(tuán)、帶正電荷的官能團(tuán)
解題思路:離子交換層析是基于離子交換樹(shù)脂的官能團(tuán)與蛋白質(zhì)電荷的相互作用,陽(yáng)離子交換樹(shù)脂吸附帶負(fù)電的蛋白質(zhì),陰離子交換樹(shù)脂吸附帶正電的蛋白質(zhì)。
4.答案:蛋白質(zhì)在電場(chǎng)作用下,根據(jù)其分子大小、電荷和形狀的不同,在電場(chǎng)中遷移速率不同而實(shí)現(xiàn)分離
解題思路:蛋白質(zhì)電泳是利用電場(chǎng)使蛋白質(zhì)帶電并在電場(chǎng)中遷移,不同蛋白質(zhì)的遷移速率不同,從而實(shí)現(xiàn)分離。
5.答案:0.11.0微米、1.010.0微米
解題思路:根據(jù)膜分離技術(shù)的孔徑范圍,微濾用于分離較大的分子,超濾用于分離較小的分子。
6.答案:硫酸銨、硫酸鈉、氫氧化鈉
解題思路:沉淀法是通過(guò)加入沉淀劑使蛋白質(zhì)從溶液中沉淀出來(lái),常用的沉淀劑包括鹽類(lèi)和堿類(lèi)。
7.答案:利用pH梯度使蛋白質(zhì)在其等電點(diǎn)處聚焦,從而實(shí)現(xiàn)分離
解題思路:等電聚焦電泳是利用pH梯度使蛋白質(zhì)在其等電點(diǎn)處聚焦,不同蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不同,從而實(shí)現(xiàn)分離。
8.答案:SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳、質(zhì)譜分析、Westernblot
解題思路:蛋白質(zhì)鑒定方法包括電泳、質(zhì)譜和免疫學(xué)方法,SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳用于分離和鑒定蛋白質(zhì),質(zhì)譜分析用于蛋白質(zhì)的定性和定量,Westernblot用于檢測(cè)特定蛋白質(zhì)的存在。三、判斷題1.生物化學(xué)分離技術(shù)僅用于蛋白質(zhì)的純化。(×)
解題思路:生物化學(xué)分離技術(shù)不僅用于蛋白質(zhì)的純化,還廣泛用于核酸、糖類(lèi)、脂類(lèi)等其他生物大分子的分離純化。
2.膜分離技術(shù)中,超濾的孔徑范圍比微濾小。(×)
解題思路:實(shí)際上,超濾的孔徑范圍比微濾大,超濾一般可以分離分子量在1000010000000Da的分子,而微濾的孔徑范圍通常在0.110nm。
3.離子交換層析中,陽(yáng)離子交換樹(shù)脂的基團(tuán)為負(fù)電荷。(×)
解題思路:在離子交換層析中,陽(yáng)離子交換樹(shù)脂的基團(tuán)是正電荷,它們會(huì)吸附帶負(fù)電荷的離子。
4.蛋白質(zhì)鑒定常用的方法有SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳、Western印跡和質(zhì)譜分析。(√)
解題思路:這些方法確實(shí)是蛋白質(zhì)鑒定中常用的技術(shù),它們各自用于不同層面的蛋白質(zhì)分析。
5.等電聚焦電泳的基本原理是電荷差異。(√)
解題思路:等電聚焦電泳是利用蛋白質(zhì)在其等電點(diǎn)時(shí)不帶電荷的特性,通過(guò)電場(chǎng)作用使蛋白質(zhì)聚焦在特定位置。
6.沉淀法中,常用的沉淀劑有硫酸銨、硫酸鈉和硫酸鎂。(√)
解題思路:硫酸銨、硫酸鈉和硫酸鎂都是常用的沉淀劑,用于蛋白質(zhì)的沉淀分離。
7.離子交換層析中,陰離子交換樹(shù)脂的基團(tuán)為正電荷。(×)
解題思路:陰離子交換樹(shù)脂的基團(tuán)是負(fù)電荷,它們會(huì)吸附帶正電荷的離子。
8.蛋白質(zhì)電泳的基本原理是分子大小差異。(×)
解題思路:蛋白質(zhì)電泳的基本原理包括分子大小差異、電荷差異等,不僅僅是分子大小差異。分子大小差異是SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳中的一個(gè)重要原理,但蛋白質(zhì)電泳還包括其他電泳類(lèi)型,如等電聚焦電泳。四、簡(jiǎn)答題1.簡(jiǎn)述生物化學(xué)分離技術(shù)的基本原理。
生物化學(xué)分離技術(shù)是基于不同生物分子的物理和化學(xué)性質(zhì)的差異,利用特定方法將這些分子從復(fù)雜混合物中分離出來(lái)的技術(shù)?;驹戆ǎ?/p>
溶解度差異:利用分子在不同溶劑中的溶解度差異進(jìn)行分離。
分子大小差異:通過(guò)分子篩等手段根據(jù)分子大小進(jìn)行分離。
電荷差異:通過(guò)離子交換層析等利用分子電荷的不同進(jìn)行分離。
親和力差異:利用生物分子間的特異性結(jié)合進(jìn)行分離。
2.簡(jiǎn)述膜分離技術(shù)的基本原理。
膜分離技術(shù)是利用具有選擇性透過(guò)性的膜對(duì)混合物進(jìn)行分離的一種方法?;驹戆ǎ?/p>
過(guò)濾:根據(jù)分子大小,利用孔徑不同的膜過(guò)濾出不同大小的分子。
透析:小分子可以透過(guò)膜,而大分子被截留在膜的一側(cè)。
超濾:類(lèi)似于過(guò)濾,但膜的孔徑更小,可分離小分子和較大分子。
3.簡(jiǎn)述離子交換層析的基本原理。
離子交換層析是一種利用離子交換樹(shù)脂作為固定相,根據(jù)樣品中不同離子與樹(shù)脂間結(jié)合力強(qiáng)弱的不同進(jìn)行分離的方法?;驹戆ǎ?/p>
離子交換:帶電荷的離子與樹(shù)脂表面的離子發(fā)生交換反應(yīng)。
洗脫:通過(guò)改變?nèi)芤旱碾x子強(qiáng)度或pH值,使樹(shù)脂與目標(biāo)離子重新結(jié)合或解離,實(shí)現(xiàn)分離。
4.簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)電泳的基本原理。
蛋白質(zhì)電泳是一種利用蛋白質(zhì)分子在電場(chǎng)中泳動(dòng)速度的不同進(jìn)行分離的技術(shù)?;驹戆ǎ?/p>
電荷差異:蛋白質(zhì)帶電荷,在電場(chǎng)中向相反電荷的電極移動(dòng)。
分子大小差異:根據(jù)蛋白質(zhì)分子的大小,其在電場(chǎng)中的遷移速率不同。
5.簡(jiǎn)述沉淀法的基本原理。
沉淀法是一種利用沉淀劑將溶液中的目標(biāo)分子轉(zhuǎn)化為不溶狀態(tài),從而進(jìn)行分離的方法?;驹戆ǎ?/p>
形成沉淀:通過(guò)加入沉淀劑,使目標(biāo)分子從溶液中析出。
過(guò)濾:通過(guò)過(guò)濾或其他手段分離出沉淀物。
6.簡(jiǎn)述等電聚焦電泳的基本原理。
等電聚焦電泳是一種在電場(chǎng)中使蛋白質(zhì)根據(jù)其等電點(diǎn)位置聚集的技術(shù)?;驹戆ǎ?/p>
等電點(diǎn)聚焦:利用聚焦緩沖液形成線(xiàn)性pH梯度,蛋白質(zhì)根據(jù)等電點(diǎn)向相應(yīng)pH位置移動(dòng)并聚集。
固定位置:在電場(chǎng)作用下,蛋白質(zhì)被固定在特定pH位置。
7.簡(jiǎn)述蛋白質(zhì)鑒定常用的方法。
蛋白質(zhì)鑒定常用的方法包括:
質(zhì)譜分析:通過(guò)分析蛋白質(zhì)的分子質(zhì)量和肽段序列進(jìn)行鑒定。
Westernblot:利用抗體識(shí)別特異性蛋白質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)。
免疫印跡:類(lèi)似于Westernblot,但通常用于檢測(cè)抗體。
8.簡(jiǎn)述生物化學(xué)分離技術(shù)在生物制藥中的應(yīng)用。
生物化學(xué)分離技術(shù)在生物制藥中的應(yīng)用包括:
生物活性物質(zhì)的生產(chǎn):用于生產(chǎn)抗生素、激素等生物活性物質(zhì)。
生物制品的純化:如抗體、疫苗、血液制品等。
基因工程藥物的生產(chǎn):用于生產(chǎn)胰島素、干擾素等基因工程藥物。
答案及解題思路:
答案已根據(jù)上述每個(gè)問(wèn)題的解釋提供。解題思路主要包括:
理解每種分離技術(shù)的原理和步驟。
了解不同技術(shù)如何利用分子或離子的特性進(jìn)行分離。
掌握各種分離技術(shù)在生物化學(xué)研究中的實(shí)際應(yīng)用。五、論述題1.論述生物化學(xué)分離技術(shù)在生物制藥中的應(yīng)用及其重要性。
解答:
生物化學(xué)分離技術(shù)在生物制藥中的應(yīng)用極為廣泛,主要包括蛋白質(zhì)的提取、純化以及活性保留等過(guò)程。其重要性體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:
提高藥物純度:通過(guò)分離技術(shù)可以去除雜質(zhì),提高藥物的純度,保證藥物的安全性和有效性。
提高生產(chǎn)效率:分離技術(shù)能夠快速有效地從發(fā)酵液中提取目標(biāo)蛋白,減少生產(chǎn)周期。
降低生產(chǎn)成本:優(yōu)化分離過(guò)程可以減少原料浪費(fèi),降低生產(chǎn)成本。
保持藥物活性:分離過(guò)程中需注意蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性,保證藥物活性不受損害。
2.論述膜分離技術(shù)在生物制藥中的應(yīng)用及其重要性。
解答:
膜分離技術(shù)在生物制藥中主要用于發(fā)酵液的處理和蛋白質(zhì)的濃縮。其重要性包括:
去除雜質(zhì):膜可以截留大分子雜質(zhì),提高產(chǎn)品純度。
濃縮蛋白:通過(guò)膜濃縮可以減少后續(xù)處理的體積,提高處理效率。
降低能耗:膜分離過(guò)程能耗較低,有助于降低生產(chǎn)成本。
易于操作:膜分離設(shè)備操作簡(jiǎn)單,易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。
3.論述離子交換層析在生物制藥中的應(yīng)用及其重要性。
解答:
離子交換層析是生物制藥中常用的蛋白質(zhì)純化技術(shù)。其重要性有:
選擇性高:根據(jù)蛋白質(zhì)的帶電性質(zhì)進(jìn)行分離,具有較高的選擇性。
操作簡(jiǎn)便:離子交換層析操作簡(jiǎn)單,易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。
適用范圍廣:可用于各種類(lèi)型蛋白質(zhì)的分離純化。
回收率高:能夠從復(fù)雜混合物中回收目標(biāo)蛋白。
4.論述蛋白質(zhì)電泳在生物制藥中的應(yīng)用及其重要性。
解答:
蛋白質(zhì)電泳技術(shù)用于蛋白質(zhì)的鑒定和分離。其重要性包括:
鑒定蛋白質(zhì):通過(guò)電泳分析蛋白質(zhì)的分子量和電荷,有助于蛋白質(zhì)鑒定。
分離蛋白質(zhì):不同蛋白質(zhì)在電泳中的遷移速度不同,可實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)的分離。
研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu):電泳結(jié)合其他技術(shù)可用于研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)。
質(zhì)量控制:電泳分析可快速檢測(cè)蛋白質(zhì)質(zhì)量。
5.論述沉淀法在生物制藥中的應(yīng)用及其重要性。
解答:
沉淀法是生物制藥中常用的蛋白質(zhì)純化方法。其重要性有:
簡(jiǎn)單易行:沉淀法操作簡(jiǎn)單,成本較低。
適用范圍廣:可用于不同類(lèi)型蛋白質(zhì)的純化。
去除雜質(zhì):沉淀法可以有效去除蛋白質(zhì)中的雜質(zhì)。
提高純度:沉淀法可以提高蛋白質(zhì)的純度。
6.論述等電聚焦電泳在生物制藥中的應(yīng)用及其重要性。
解答:
等電聚焦電泳是一種基于蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的電泳技術(shù)。其重要性包括:
分離效率高:等電聚焦電泳具有較高的分離效率,可快速分離蛋白質(zhì)。
操作簡(jiǎn)便:等電聚焦電泳操作簡(jiǎn)單,易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。
適用范圍廣:可用于多種蛋白質(zhì)的分離。
7.論述生物化學(xué)分離技術(shù)在基因工程中的應(yīng)用及其重要性。
解答:
生物化學(xué)分離技術(shù)在基因工程中的應(yīng)用包括目的基因的提取、表達(dá)蛋白的純化等。其重要性有:
目的基因提?。悍蛛x技術(shù)可從復(fù)雜
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