ICS65.020.20B05DB21遼寧省地方標(biāo)準(zhǔn)DB21/T3180—2019羊肚菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程遼寧省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布DB21/T3180—2019前言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則編寫。本標(biāo)準(zhǔn)由遼寧省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并歸口管理。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所。本標(biāo)準(zhǔn)起草人：張敏、李博、張季軍、李紅、李超、劉巖巖、劉國(guó)麗、劉娜、宋瑩、呂立濤、王紅。本標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布實(shí)施后，任何單位和個(gè)人如有問(wèn)題和意見建議，均可以通過(guò)來(lái)電和來(lái)函等方式進(jìn)行反饋，我們將及時(shí)答復(fù)并認(rèn)真處理，根據(jù)實(shí)際情況依法進(jìn)行評(píng)估及復(fù)審。歸口管理部門通訊地址：遼寧省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳（沈陽(yáng)市和平區(qū)太原北街2號(hào)），聯(lián)系電話標(biāo)準(zhǔn)起草單位通訊地址：遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所（沈陽(yáng)市沈河區(qū)東陵路84號(hào)），聯(lián)系電話DB21/T3180—2019羊肚菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了羊肚菌菌種生產(chǎn)的有關(guān)術(shù)語(yǔ)和定義，母種、原種和栽培種生產(chǎn)，質(zhì)量檢測(cè)、生產(chǎn)記錄與存檔留樣及標(biāo)簽、標(biāo)志、包裝、運(yùn)輸。本標(biāo)準(zhǔn)適用于羊肚菌菌種生產(chǎn)。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)GB/T8321農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則GB/T12728食用菌術(shù)語(yǔ)NY5099食用菌栽培基質(zhì)安全技術(shù)要求NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程N(yùn)Y/T1742食用菌菌種通用技術(shù)要求NY/T1846食用菌菌種檢驗(yàn)規(guī)程食用菌菌種管理辦法（中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部令第62號(hào)，2015年農(nóng)業(yè)部令第1號(hào)修訂）3GB/T12728界定的術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。為了便于使用，以下重復(fù)列出了GB/T12728中的一些經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物。也稱一級(jí)種、試管種。由原種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。栽培種只能用于栽培、不可再次擴(kuò)大繁殖菌種。也2DB21/T3180—20194生產(chǎn)環(huán)境場(chǎng)地選擇、廠房設(shè)置和布局、設(shè)備設(shè)施符合NY/T528的規(guī)定。5母種生產(chǎn)母種的生產(chǎn)應(yīng)符合NY/T528的規(guī)定。菌種來(lái)源符合《食用菌菌種管理辦法》的規(guī)定，從據(jù)相應(yīng)資質(zhì)的供種單位引進(jìn)，選擇抗逆性強(qiáng)、抗雜菌力強(qiáng)，優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)、適合當(dāng)?shù)卦耘嗟膬?yōu)良菌株，菌種質(zhì)量符合NY/T1742的要求。培養(yǎng)基的配方和配制方法按照NY/T528中4.6,4.7的規(guī)定。培養(yǎng)溫度20℃～23℃,3d～7d長(zhǎng)滿后備用。6原種生產(chǎn)6.1原料的選擇6.1.1主料選擇木屑、小麥、土等。木屑為闊葉樹硬雜木粗木屑，顆粒在0.5cm×0.8cm左右，提前三個(gè)月堆放腐熟，土是植物枝葉在土壤中經(jīng)過(guò)微生物分解發(fā)酵后形成的營(yíng)養(yǎng)土或草炭土；小麥要求新鮮無(wú)霉變、無(wú)蟲害，顆粒度飽滿，質(zhì)量應(yīng)符合NY5099的規(guī)定。原料質(zhì)量及貯藏應(yīng)符合NY/T1935要求。6.1.2輔料選擇水按配方比例將木屑預(yù)濕，土預(yù)濕，小麥先用1%的石灰水浸泡12h，然后用水煮沸騰約15min，并攪動(dòng)，煮至麥粒保持完整，捏開后里面沒有“白芯”時(shí)撈出，稍控水，與木屑拌勻，加入配方中其他原料，攪拌均勻，使用水分速測(cè)儀測(cè)定其含水量達(dá)到60%～65%,pH值要求在6.5～7.5之間。采用規(guī)格為500mL或700mL的瓶子，或12cm～14cm×24cm～28cm×0.004cm～0.006cm的專用塑料菌袋，當(dāng)天拌好的料當(dāng)天裝完，裝好的瓶或袋要做到上緊下松，料面平整，打孔。瓶口用封口膜封口，袋口可用無(wú)棉蓋體封口，按常規(guī)方法進(jìn)行高壓或常壓滅菌，滅菌后當(dāng)瓶?jī)?nèi)溫度降至25℃以下接種。DB21/T3180—2019首先把冷卻好的菌袋或菌瓶、接種工具一起運(yùn)到接種室。接種人員要注意清潔衛(wèi)生，穿戴上經(jīng)消毒過(guò)的工作服、工作帽、口罩，按無(wú)菌操作要求，手部和試管菌種表面應(yīng)用75%酒精消毒，按無(wú)菌操作規(guī)程將母種接到菌袋或菌瓶?jī)?nèi)，接種量符合NY/T528的規(guī)定。6.1.8培養(yǎng)室環(huán)境管理培養(yǎng)溫度以袋內(nèi)中心溫度為標(biāo)準(zhǔn)，保持袋內(nèi)溫度20℃～23℃；當(dāng)菌絲長(zhǎng)滿菌袋后，降低空間溫度到15℃～20℃，繼續(xù)培養(yǎng)3d～5d；培養(yǎng)室內(nèi)空間相對(duì)濕度控制在45%～55%；培養(yǎng)室全程避光管理；保持發(fā)菌室通風(fēng)良好，每天通風(fēng)1次～2次，每次25min～30min。7栽培種的技術(shù)要求培養(yǎng)基的要求7.17.1.1主料選擇按6.1.1的規(guī)定。7.1.2輔料選擇按6.1.2的規(guī)定。7.1.3菌袋材料與規(guī)格根據(jù)滅菌方式不同，采用低壓聚乙烯或高壓聚丙烯塑料菌袋，規(guī)格為（15cm～17cm）×（28cm～33cm）×（0.004cm～0.005cm）。按配方比例將木屑預(yù)濕，土預(yù)濕，小麥用水浸泡。小麥浸泡時(shí)，小麥完全浸入水中，加入適當(dāng)?shù)氖液褪啵輹r(shí)間與浸泡溫度和小麥品種有關(guān)，浸泡至麥粒保持完整，含水量60%時(shí)撈出，稍控水，與配方中其他原料攪拌均勻、含水量達(dá)標(biāo)。按配方比例將木屑預(yù)濕，土預(yù)濕，小麥先用1%的石灰水浸泡12h，然后用水煮沸騰約15min，并攪動(dòng)，煮至麥粒保持完整，捏開后里面沒有“白芯”時(shí)撈出，稍控水，與木屑拌勻，加入配方中其他原料，攪拌均勻，使用水分速測(cè)儀測(cè)定其含水量達(dá)到60%～65%,pH值要求在6.5～7.5之間。當(dāng)天拌好的料當(dāng)天裝完，采用可調(diào)立式或臥式防爆袋裝袋機(jī)裝袋，裝好的袋要做到松緊一致、中間打孔，料面平整。袋口用無(wú)棉蓋體封口，按常規(guī)方法進(jìn)行高壓或常壓滅菌，滅菌后當(dāng)袋內(nèi)溫度降至25℃當(dāng)天拌好的料當(dāng)天裝完，裝好的瓶或袋要做到上緊下松，料面平整，中間打孔。瓶口用封口膜封口，袋口可用無(wú)棉蓋體封口，按常規(guī)方法進(jìn)行高壓或常壓滅菌，滅菌后當(dāng)瓶?jī)?nèi)溫度降至25℃以下可以接種。4DB21/T3180—2019按5.2.7規(guī)定執(zhí)行。7.7抽樣與檢測(cè)7.7.1抽樣按照NY/T1846中抽樣標(biāo)準(zhǔn)抽樣。7.7.2檢測(cè)按照NY/T1846中感官檢驗(yàn)、霉菌、細(xì)菌檢驗(yàn)、菌絲生長(zhǎng)速度測(cè)定進(jìn)行，任何一項(xiàng)不符合標(biāo)準(zhǔn)要求的，為不合格菌種，均符合要求的，為合格菌種。7.8貯藏備用將檢查合格的菌種放于潔凈的1℃~4℃冷庫(kù)中短期保存?zhèn)溆谩?生產(chǎn)記錄與留樣8.1生產(chǎn)記錄建立獨(dú)立、完整的生產(chǎn)記錄檔案，對(duì)生產(chǎn)過(guò)程中各環(huán)節(jié)進(jìn)行有效記錄，記錄保留二年。8.2留樣菌種來(lái)源、制作方法和接種時(shí)間分批編號(hào)。按批隨機(jī)抽取樣品留存，抽樣量分別為該批菌包量的1%，每批抽樣數(shù)量不少于10袋，保存于潔凈的1℃~4℃冷庫(kù)中，直到本次栽培種接種后正常出菇結(jié)束。9DB2