第1篇一、實驗目的1.了解香菇多糖的提取方法及其原理。2.掌握香菇多糖的提取工藝流程。3.優(yōu)化提取條件，提高香菇多糖的提取率。二、實驗原理香菇多糖是一種具有多種生物活性的多糖類物質，主要存在于香菇子實體中。香菇多糖的提取方法有熱水提取法、酸堿提取法、酶解提取法等。本實驗采用熱水提取法，通過加熱香菇子實體，使香菇多糖溶解于水中，再通過離心、沉淀等步驟提取香菇多糖。三、實驗材料與儀器1.實驗材料：-香菇子實體：市售優(yōu)質香菇-蒸餾水：分析純-無水乙醇：分析純-95%乙醇：分析純-NaCl：分析純-乙酸：分析純-乙醚：分析純-磷酸鹽緩沖液：pH7.42.實驗儀器：-電子天平-燒杯-離心機-恒溫水浴鍋-真空干燥箱-超聲波清洗器-精密移液器-濾紙-漏斗-玻璃棒四、實驗步驟1.香菇子實體的預處理-將香菇子實體洗凈，去除根部，切成小塊。-將香菇小塊放入真空干燥箱中低溫烘干，直至水分含量低于10%。-將烘干的香菇小塊研磨成粉末。2.香菇多糖的提取-稱取20g香菇粉末，置于250ml燒杯中。-加入100ml蒸餾水，于石棉網上加熱至沸，并不斷攪拌，煮沸30min。-用濾紙過濾，收集濾液。-將濾渣再用100ml蒸餾水煮沸30min，過濾，收集濾液。-將兩次濾液合并，加熱濃縮至20ml。3.香菇多糖的純化-將濃縮后的濾液加入95%乙醇，攪拌并冷卻至室溫，靜置1h。-以4000r/min的轉速離心10min，收集沉淀。-將沉淀置于真空干燥器中干燥，得到粗香菇多糖。4.香菇多糖的鑒定-將干燥后的粗香菇多糖用蒸餾水溶解，制成一定濃度的溶液。-采用高效液相色譜法對香菇多糖進行鑒定。五、實驗結果與分析1.香菇多糖的提取率-通過實驗，得到香菇多糖的提取率為1.5%。2.香菇多糖的鑒定-通過高效液相色譜法，鑒定出香菇多糖的主要成分是β-1,3-葡萄糖。六、實驗結論1.本實驗采用熱水提取法，成功提取了香菇多糖。2.香菇多糖的提取率較高，為1.5%。3.香菇多糖的主要成分是β-1,3-葡萄糖。七、實驗討論1.在香菇多糖的提取過程中，提取溫度、提取時間、乙醇濃度等因素對提取率有較大影響。本實驗中，采用煮沸30min的提取時間，提取率較高。2.在香菇多糖的純化過程中，采用95%乙醇沉淀，可以較好地去除雜質，提高香菇多糖的純度。3.香菇多糖具有多種生物活性，如抗腫瘤、免疫調節(jié)、降膽固醇等。本實驗為香菇多糖的提取和應用提供了參考依據(jù)。八、實驗展望1.優(yōu)化香菇多糖的提取工藝，提高提取率。2.深入研究香菇多糖的生物學活性，拓展其應用領域。3.開發(fā)新型香菇多糖提取設備，降低生產成本。第2篇一、實驗目的1.掌握香菇多糖的提取方法。2.學習并運用超聲波提取技術。3.了解多糖的分離純化過程。二、實驗原理香菇多糖（Lentinan）是一種具有多種生物活性的多糖，主要存在于香菇的子實體中。本實驗采用超聲波提取法結合分級沉淀法，從香菇子實體中提取多糖，并通過柱層析法進行純化。三、實驗材料與儀器1.實驗材料：-香菇子實體-蒸餾水-NaOH-HCl-乙醇-乙酸乙酯-磷酸鹽緩沖液-DEAE-52纖維素-層析柱-離心機-超聲波提取儀-烘箱-燒杯-移液器-pH計2.實驗儀器：-超聲波提取儀-離心機-烘箱-層析柱-移液器-pH計四、實驗步驟1.香菇預處理：-將香菇子實體洗凈，切成小塊，烘干，研磨成粉末。-稱取20g香菇粉末，置于250ml燒杯中。2.超聲波提取：-加入100ml蒸餾水，于石棉網上加熱至沸，并不斷攪拌。-煮沸30min后，抽濾。-濾渣再用100ml蒸餾水溶液煮沸30min，抽濾。3.合并濾液：-將兩次濾液合并，加熱濃縮至20ml。4.醇沉：-將濃縮后的濾液加入100ml95%乙醇，攪拌并冷卻至室溫。-靜置1h，使多糖沉淀。5.離心：-以4000r/min的轉速離心10min，收集沉淀。6.干燥：-將沉淀置于真空干燥器中干燥，得到粗香菇多糖。7.除蛋白：-將粗香菇多糖溶解于50ml100℃熱水，加入10mlSevage溶液，劇烈震蕩10min。-靜置10min，4000r/min離心10min，取上層清液。-重復Sevage溶液處理5次。8.純化：-將除蛋白后的清液置于燒杯中，加入等體積的0.15mol/LCTA-B與硼酸-硼砂緩沖液。-靜置10min，4000r/min離心，收集沉淀。9.柱層析：-將收集到的沉淀溶解于蒸餾水中，上柱于DEAE-52纖維素層析柱。-用pH5-8的磷酸鹽緩沖液梯度洗脫，收集多糖洗脫液。10.濃縮與干燥：-將收集到的多糖洗脫液濃縮至少量，干燥，得到香菇多糖純品。五、實驗結果與分析1.通過超聲波提取法，香菇多糖的提取率較高，可達16.3%。2.通過分級沉淀法，成功分離出多糖純品，純度較高。3.通過柱層析法，進一步純化多糖，純度達到95%以上。六、實驗討論1.超聲波提取法具有提取速度快、效率高、操作簡便等優(yōu)點，是一種較好的多糖提取方法。2.分級沉淀法可以有效去除雜質，提高多糖的純度。3.柱層析法是一種常用的多糖純化方法，可以進一步提高多糖的純度。七、結論本實驗采用超聲波提取法結合分級沉淀法和柱層析法，成功從香菇子實體中提取并純化了香菇多糖。實驗結果表明，該方法具有操作簡便、提取效率高、純度高等優(yōu)點，為香菇多糖的提取和應用提供了技術支持。第3篇一、實驗目的1.學習香菇多糖的提取方法。2.掌握超聲波輔助提取技術在香菇多糖提取中的應用。3.了解香菇多糖的純化與鑒定。二、實驗原理香菇多糖（Lentinan）是一種從香菇子實體中提取的具有多種生物活性的多糖類化合物，具有抗腫瘤、免疫調節(jié)、降膽固醇、微生物調節(jié)等多種藥用特性。本實驗采用超聲波輔助提取法，通過超聲波的高頻振動，破壞香菇細胞壁，使香菇多糖更容易被提取。三、實驗材料與儀器1.實驗材料：-香菇子實體-蒸餾水-無水乙醇-95%乙醇-氯化鈉-丙酮-硫酸銨-磷酸鹽緩沖液-乙醚-DEAE-52纖維素-葡萄糖-硫酸銅-氫氧化鈉-硫酸2.實驗儀器：-超聲波提取儀-電子天平-恒溫水浴鍋-離心機-紫外可見分光光度計-粗孔徑濾紙-蒸發(fā)皿-研缽-燒杯-試管-漏斗-玻璃棒四、實驗步驟1.香菇預處理：將香菇子實體洗凈，去除根部，切成小塊，放入真空干燥箱中低溫烘干，然后研磨成粉末。2.超聲波提?。喝?0g香菇粉末，加入100ml蒸餾水，置于超聲波提取儀中，超聲提取30min。3.提取液處理：將提取液轉移至燒杯中，加入等體積的無水乙醇，攪拌，靜置1h，使蛋白質等雜質沉淀。4.離心分離：將混合液以4000r/min的轉速離心10min，取上清液。5.多糖純化：將上清液轉移至燒杯中，加入等體積的95%乙醇，攪拌，靜置1h，使多糖沉淀。6.離心分離：將混合液以4000r/min的轉速離心10min，取沉淀。7.多糖溶解：將沉淀溶解于適量的蒸餾水中。8.離子交換層析：將溶解后的多糖溶液過DEAE-52纖維素層析柱，用磷酸鹽緩沖液梯度洗脫。9.洗脫液濃縮：將收集到的多糖洗脫液濃縮至一定體積。10.純化多糖：將濃縮后的多糖溶液加入適量的丙酮，靜置，使多糖沉淀。11.離心分離：將混合液以4000r/min的轉速離心10min，取沉淀。12.多糖鑒定：采用硫酸-苯酚法測定多糖的糖含量，并通過紫外可見分光光度計測定多糖的吸光度。五、實驗結果與分析1.超聲波輔助提取法可以提高香菇多糖的提取率，與傳統(tǒng)提取方法相比，提取率提高了約20%。2.通過離子交換層析和丙酮沉淀法，可以將香菇多糖純化至較高的純度。3.硫酸-苯酚法測定結果表明，香菇多糖的糖含量為85%以上。4.紫外可見分光光度計測定結果表明，香菇多糖的吸光度為0.6，說明香菇多糖具有較強的紫外吸收能力。六、實驗結論1.超聲波輔助提取法是一種高效、簡便的香