2025屆陜西省渭濱中學(xué)高三壓軸卷生物試卷考生須知：1．全卷分選擇題和非選擇題兩部分，全部在答題紙上作答。選擇題必須用2B鉛筆填涂；非選擇題的答案必須用黑色字跡的鋼筆或答字筆寫在“答題紙”相應(yīng)位置上。2．請(qǐng)用黑色字跡的鋼筆或答字筆在“答題紙”上先填寫姓名和準(zhǔn)考證號(hào)。3．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列是應(yīng)用同位素示蹤法進(jìn)行的幾種研究，其中錯(cuò)誤的是（）A．用放射性同位素標(biāo)記某種氨基酸進(jìn)行示蹤，可得出分泌蛋白合成、加工和分泌的途徑B．用單細(xì)胞綠藻做14CO2示蹤實(shí)驗(yàn)，不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)放射性碳進(jìn)行分析可得出暗反應(yīng)的途徑C．給予某人131I通過(guò)測(cè)定甲狀腺的放射性可以反映甲狀腺的功能狀態(tài)D．將某噬箘體的DNA和蛋白質(zhì)分別用32P和35S標(biāo)記進(jìn)而證明DNA是遺傳物質(zhì)2．下列有關(guān)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是A．低倍鏡下看到洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞呈長(zhǎng)方形，排列疏松不規(guī)則B．用顯微鏡觀察洋蔥根尖有絲分裂過(guò)程，需要保持細(xì)胞生物活性C．加入斐林試劑并水浴加熱才能檢測(cè)試管內(nèi)梨汁中是否含還原糖D．葉綠體色素濾液細(xì)線浸入層析液，會(huì)導(dǎo)致濾紙條上色素帶重疊3．下圖為動(dòng)物細(xì)胞有絲分裂過(guò)程模式圖。下列相關(guān)描述正確的是（）A．②中染色體的形成有利于后續(xù)核中遺傳物質(zhì)均分B．顯微鏡觀察時(shí)視野中③數(shù)量最多C．染色體數(shù)目加倍發(fā)生在④→⑤過(guò)程中D．②→⑥經(jīng)歷了一個(gè)細(xì)胞周期4．如圖為原核細(xì)胞內(nèi)某一基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成示意圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．①②過(guò)程都有氫鍵的形成和斷裂B．多條RNA同時(shí)在合成，其堿基序列相同C．真核細(xì)胞中，核基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成過(guò)程跟上圖一致D．①處有DNA-RNA雜合雙鏈片段形成，②處有三種RNA參與5．下列關(guān)于人體內(nèi)環(huán)境的敘述，正確的是（）A．生長(zhǎng)激素只通過(guò)組織液運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞B．細(xì)胞進(jìn)行正常代謝的場(chǎng)所是內(nèi)環(huán)境C．胰蛋白酶是內(nèi)環(huán)境的組成成分D．組織液和血漿中含有尿素6．科學(xué)家利用R型和S型肺炎雙球菌進(jìn)行如圖所示實(shí)驗(yàn)，試管中添加R型菌、S型菌提取物及細(xì)菌培養(yǎng)液，下列敘述正確的是（）A．E組試管中可觀察到光滑型菌落，其余各組試管中只能觀察到粗糙型菌落B．應(yīng)該用研磨方法殺死S型菌，不能用加熱方法，否則實(shí)驗(yàn)結(jié)果將發(fā)生改變C．實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明DNA能進(jìn)入R型菌體內(nèi)，而蛋白質(zhì)等無(wú)法進(jìn)入R型菌體內(nèi)D．為使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加明顯，可采用提高物質(zhì)分離純度及加入氯化鈣等措施二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）探究在適合生長(zhǎng)的氮濃度范圍內(nèi)，不同氮素水平對(duì)青花菜葉片光合作用的影響，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示：氮素水平（mmol?L-1）葉綠素含量（μg?cm-2）凈光合速率（μmol?m-2?s-1）氣孔導(dǎo)度（mmol?m-2?s-1）胞間CO2濃度（μL?L-1）5（低氮）8619.40.6830810（中氮）9920.70.8430415（偏高）10321.40.8530120（高氮）10322.00.84295請(qǐng)回答：（1）表中凈光合速率是采用葉齡一致的葉片，在________相同的實(shí)驗(yàn)條件下，測(cè)得的單位時(shí)間、單位葉面積______的吸收量。（2）光合作用過(guò)程中，葉綠素主要吸收____光，光合色素吸收的光能一部分用于將水分解為_(kāi)___，還有一部分轉(zhuǎn)移到ATP中。（3）從表中可知，隨著氮素水平的增高，葉片凈光合速率逐漸____，氣孔導(dǎo)度____（填“限制”或“不限制”）凈光合速率的變化。（4）高氮組比偏高組葉片凈光合作用速率高，而葉綠素含量相同，推斷其主要原因可能是參與光合作用的酶____。（5）為使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更可靠，在控制好無(wú)關(guān)變量的基礎(chǔ)上，應(yīng)針對(duì)每個(gè)氮素水平條件下設(shè)置________。8．（10分）研究人員將北極比目魚的抗凍基因轉(zhuǎn)入番茄細(xì)胞而培育出抗凍番茄，抗凍番茄不易腐爛，有利于長(zhǎng)途運(yùn)輸和較長(zhǎng)時(shí)間貯藏，使得消費(fèi)者一年四季都可品嘗到新鮮味美的番茄。培育大致過(guò)程如下圖所示，據(jù)此回答下列問(wèn)題：(1)該工程的核心是構(gòu)建____，其組成包括目的基因、____(2)圖示①需要用同一種限制酶來(lái)切割，其目的是____若②不能在含抗生素Kan的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，原因可能是____。⑶抗凍蛋白基因成功導(dǎo)入組織塊后，還需要利用____技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因植株，該技術(shù)的理論基礎(chǔ)是____。(4)比目魚的抗凍蛋白基因在番茄細(xì)胞中也能產(chǎn)生抗凍蛋白的原因是____。9．（10分）皮膚作為人體最大的器官擁有達(dá)1.8m2的表面積，其主要功能是作為物理屏障，保護(hù)機(jī)體免受外來(lái)生物或有毒物質(zhì)的侵害。同時(shí)，皮膚也是人體與外界環(huán)境接觸的部位，因此常駐有各類微生物，包括細(xì)菌、真菌等，可通過(guò)微生物培養(yǎng)技術(shù)了解我們的皮膚表面的微生物分布情況?；卮鹣铝袉?wèn)題：（1）微生物培養(yǎng)利用的培養(yǎng)基的類型很多，但培養(yǎng)基中一般都含有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、___________。由于不同種類的微生物的菌落特征表現(xiàn)不同，因此可以利用____________________培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)、觀察菌落特征，對(duì)微生物進(jìn)行初步的鑒定和分類。（2）有同學(xué)通過(guò)制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)附著在皮膚表面的細(xì)菌。制備該培養(yǎng)基的操作步驟是計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。倒平板時(shí)需要在酒精燈火焰旁操作，待平板冷卻凝固后，還需要將平板_________。為了確定培養(yǎng)基滅菌效果是否達(dá)到要求，可隨機(jī)取若干_______________，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察該培養(yǎng)基是否出現(xiàn)了菌落，若沒(méi)有出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基的滅菌效果達(dá)到了要求。（3）采集并制備樣液，并將樣液接種到培養(yǎng)基的平板上培養(yǎng)。采用的接種方法有_________和______________，若采用前者，則操作中接種環(huán)在使用前要在酒精燈火焰上先灼燒，其目的是_________________，第二次及其后的劃線都要從上一次劃線的末端開(kāi)始，其目的是______________。10．（10分）家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取干擾素用于制藥。（1）進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前，需用________酶短時(shí)處理幼蠶組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞。（2）為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的__________和__________之間。導(dǎo)入家蠶細(xì)胞后若要檢測(cè)干擾素基因在家蠶細(xì)胞中是否表達(dá)，可以采用的方法有___________________。（3）培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以_________________，增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換。（4）“桑基魚塘”生態(tài)系統(tǒng)能充分利用廢棄物中的能量，形成“無(wú)廢棄物農(nóng)業(yè)”，這主要是遵循生態(tài)工程的__________原理。同時(shí)，通過(guò)飼養(yǎng)家禽、家畜，栽培食用菌，提高農(nóng)民經(jīng)濟(jì)收入，使保護(hù)環(huán)境和發(fā)展經(jīng)濟(jì)相互協(xié)調(diào)，這又體現(xiàn)了生態(tài)工程的_________原理。11．（15分）基因工程載體是DNA重組技術(shù)使用的基本工具?；卮鹣铝袉?wèn)題（1）大腸桿菌的質(zhì)粒常被用來(lái)做基因工程中的載體，其主要優(yōu)點(diǎn)是_______________（至少兩項(xiàng)）?；蚬こ讨谐Ｊ褂玫妮d體除質(zhì)粒外，還有_______________（至少兩項(xiàng)）。（2）在進(jìn)行基因工程操作中，真正被用作載體的質(zhì)粒都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行人工改造過(guò)的。在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，通過(guò)人工改造，基因表達(dá)載體中除了含有目的基因外，還必須有_____________________。構(gòu)建目的基因表達(dá)載體的目的一方面是使目的基因在受體細(xì)胞中_______________，并遺傳給下一代；另一方面，使目的基因能夠_______________，從而得到轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品或生物。（3）利用乳腺生物反應(yīng)器來(lái)生產(chǎn)基因工程藥物時(shí)，與藥用蛋白基因連在一起的是__________啟動(dòng)子，這樣才能使該目的基因在乳腺細(xì)胞中表達(dá)。（4）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法常用的載體為_(kāi)___________，構(gòu)建此表達(dá)載體時(shí)，要將目的基因插入到質(zhì)粒的___________上，這樣就能夠通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用使目的基因進(jìn)入植物細(xì)胞并插入到染色體中DNA上，使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、D【解析】

同位素標(biāo)記法也叫同位素示蹤法，同位素可用于追蹤物質(zhì)的運(yùn)行和變化規(guī)律。在生物學(xué)研究中，用于研究分泌蛋白的合成過(guò)程、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)、光合作用過(guò)程中水的來(lái)源和二氧化碳的轉(zhuǎn)移途徑等方面。【詳解】A、用放射性同位素標(biāo)記某種氨基酸進(jìn)行示蹤，可得出分泌蛋白合成、加工和分泌的途徑，即核糖體→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)→高爾基體→細(xì)胞膜，A正確；B、用單細(xì)胞綠藻做14CO2示蹤實(shí)驗(yàn)，不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)放射性碳分析可得出暗反應(yīng)的途徑是14CO2→14C3→（14CH2O），B正確；

C、I是合成甲狀腺細(xì)胞甲狀腺激素的原料，給予某人131I，通過(guò)測(cè)定甲狀腺激素的放射性可以反映甲狀腺的功能狀態(tài)，C正確；

D、噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)中分別用32P標(biāo)記DNA、35S標(biāo)記蛋白質(zhì)的噬菌體去侵染細(xì)菌，觀察子代噬菌體的放射性，證明了DNA是遺傳物質(zhì)，D錯(cuò)誤。

故選D。2、C【解析】

1、洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞呈正方形，排列緊密，有的細(xì)胞正在分裂，觀察根尖細(xì)胞有絲分裂的實(shí)驗(yàn)步驟：取材→解離→漂洗→染色→制片→觀察。2、斐林試劑與還原糖在水浴加熱的條件下產(chǎn)生磚紅色沉淀。3、綠葉中色素的提取與分離的原理是:色素能夠溶解到有機(jī)溶劑乙醇中，綠葉中的色素在層析液中的溶解度不同，溶解度大的擴(kuò)散的快，溶解度小的擴(kuò)散的慢，因此可以把綠葉中的色素分離?！驹斀狻緼.低倍鏡下看到洋蔥根尖分生區(qū)細(xì)胞呈正方形，排列緊密，A錯(cuò)誤；B.觀察洋蔥根尖有絲分裂過(guò)程的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，解離步驟已經(jīng)將細(xì)胞殺死，故觀察過(guò)程中不需要保持細(xì)胞生物活性，B錯(cuò)誤；C.用斐林試劑檢測(cè)生物組織中還原糖存在時(shí)，需要在加入斐林試劑后并水浴加熱才能檢測(cè)到，C正確；D.葉綠體色素濾液細(xì)線浸入層析液，會(huì)導(dǎo)致濾紙條上無(wú)色素帶出現(xiàn)，D錯(cuò)誤。故選C。3、A【解析】

有絲分裂是指一種真核細(xì)胞分裂產(chǎn)生體細(xì)胞的過(guò)程。有絲分裂分裂具有周期性，即連續(xù)分裂的細(xì)胞，從一次分裂完成時(shí)開(kāi)始，到下一次分裂完成時(shí)為止，從形成子細(xì)胞開(kāi)始到再一次形成子細(xì)胞結(jié)束為一個(gè)細(xì)胞周期，包括分間期和分裂期。圖中①為間期，②為前期，③為中期，④為后期，⑤為末期，⑥為分裂得到的兩個(gè)子細(xì)胞?！驹斀狻緼、②為有絲分裂前期，出現(xiàn)染色體，染色體主要是由DNA和蛋白質(zhì)組成，而DNA是細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，因此染色體的形成有利于后續(xù)核中遺傳物質(zhì)均分，A正確；B、間期時(shí)間最長(zhǎng)，因此顯微鏡觀察時(shí)視野中①數(shù)量最多，B錯(cuò)誤；C、有絲分裂后期開(kāi)始時(shí)著絲粒分裂，染色體數(shù)目加倍，因此染色體數(shù)目加倍發(fā)生在③→④過(guò)程中，C錯(cuò)誤；D、細(xì)胞周期包括間期和分列前，①→⑥經(jīng)歷了一個(gè)細(xì)胞周期，D錯(cuò)誤。故選A。4、C【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：原核細(xì)胞沒(méi)有核膜，轉(zhuǎn)錄和翻譯可同時(shí)進(jìn)行，所以①處正在進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，故DNA主干上的分支應(yīng)是RNA單鏈，②處正在進(jìn)行翻譯，故側(cè)枝上的分支應(yīng)是多肽鏈?！驹斀狻緼、①過(guò)程為轉(zhuǎn)錄，DNA解旋過(guò)程中有氫鍵的斷裂，DNA雙螺旋重新形成又有氫鍵的形成，②過(guò)程為翻譯，tRNA和mRNA之間反密碼子和密碼子之間堿基互補(bǔ)配對(duì)，形成氫鍵，tRNA從mRNA離開(kāi)又有氫鍵的斷裂，A正確；B、轉(zhuǎn)錄形成的多條RNA都以該基因的一條鏈為模板，故RNA的堿基序列相同，B正確；C、圖示中該基因邊轉(zhuǎn)錄邊翻譯，而真核細(xì)胞中核基因是先轉(zhuǎn)錄后翻譯，故兩者不一樣，C錯(cuò)誤；D、轉(zhuǎn)錄過(guò)程中，以DNA為模板合成RNA，會(huì)形成DNA-RNA雜交區(qū)域，翻譯過(guò)程中有tRNA、mRNA和rRNA參與，D正確。故選C?！军c(diǎn)睛】本題考查原核細(xì)胞內(nèi)基因指導(dǎo)蛋白質(zhì)合成的相關(guān)知識(shí)，意在考查識(shí)圖能力和理解所學(xué)知識(shí)要點(diǎn)，把握知識(shí)間內(nèi)在聯(lián)系，形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，準(zhǔn)確判斷問(wèn)題的能力。5、D【解析】

內(nèi)環(huán)境即細(xì)胞外液，包括血漿、組織液和淋巴，血漿、組織液、淋巴之間的動(dòng)態(tài)關(guān)系是：，內(nèi)環(huán)境是細(xì)胞與外界環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的媒介。【詳解】A、生長(zhǎng)激素的運(yùn)輸還需要血漿，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞進(jìn)行正常代謝的環(huán)境是細(xì)胞內(nèi)液，而不是內(nèi)環(huán)境，B錯(cuò)誤；C、胰蛋白酶存在于消化道，不是內(nèi)環(huán)境的組成成分，C錯(cuò)誤；D、尿素是細(xì)胞的代謝產(chǎn)物，由細(xì)胞產(chǎn)生后進(jìn)入內(nèi)環(huán)境，組織液和血漿中都含有尿素，D正確。故選D。6、D【解析】

據(jù)圖分析，圖示為肺炎雙球菌的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)，其中A、B、C、D管加入的分別是S型細(xì)菌的多糖、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、RNA，都不是轉(zhuǎn)化因子，因此四支試管中都只有R型細(xì)菌；E試管中加入的是S型細(xì)菌的DNA，是轉(zhuǎn)化因子，因此該試管中會(huì)出現(xiàn)R型細(xì)菌和S型細(xì)菌；F試管中DNA被DNA酶水解，不能將R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌?！驹斀狻緼、菌落的特征應(yīng)該在固體培養(yǎng)基上才能觀察到，而圖示試管中為液體培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；B、該實(shí)驗(yàn)不能破壞S型細(xì)菌的化學(xué)成分，因此不能研磨，該實(shí)驗(yàn)應(yīng)該用到分離提純技術(shù)，B錯(cuò)誤；C、實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明DNA能將R型菌轉(zhuǎn)化為S型菌，而蛋白質(zhì)等不能將R型菌轉(zhuǎn)化為S型菌，但是不能證明S型菌的各種成分是否能進(jìn)入R型菌，C錯(cuò)誤；D、為使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加明顯，可采用提高物質(zhì)分離純度及加入氯化鈣等措施，D正確。故選D。二、綜合題：本大題共4小題7、光照強(qiáng)度、CO2濃度、溫度CO2紅光和藍(lán)紫氧氣和[H]提高不限制數(shù)量較多（活性較強(qiáng)）（至少有3個(gè)平行）重復(fù)實(shí)驗(yàn)【解析】

由表中數(shù)據(jù)可知，隨著氮素水平升高，葉綠素的含量先增加，后穩(wěn)定在103μg?cm-2，凈光合速率不斷提高，胞間CO2濃度不斷降低；氣孔導(dǎo)度在低氮時(shí)較小，在中氮、偏高和高氮條件下氣孔導(dǎo)度接近相同?！驹斀狻浚?）凈光合速率可以用CO2的吸收量、O2的釋放量或有機(jī)物的積累量來(lái)表示。該實(shí)驗(yàn)的凈光合速率是用測(cè)得的單位時(shí)間、單位葉面積CO2的吸收量表示，自變量是氮素水平，需控制其他無(wú)關(guān)變量，光照強(qiáng)度、CO2濃度、溫度等實(shí)驗(yàn)條件必須相同。（2）葉綠素主要吸收紅光和藍(lán)紫光，類胡蘿卜素主要吸收藍(lán)紫光。在光反應(yīng)階段，光合色素吸收的光能一部分用于水的光解，將水分解為氧氣和[H]，還有一部分用于合成ATP。（3）據(jù)表分析可知，隨著氮素水平的增高，葉片凈光合速率逐漸提高。在中氮、偏高和高氮三種情況下，氣孔導(dǎo)度大體相同，而凈光合速率有所提高，說(shuō)明氣孔導(dǎo)度不限制凈光合速率的變化。（4）影響光合速率的因素有外因（光照強(qiáng)度、CO2濃度、溫度等）和內(nèi)因（葉綠素的含量、酶等）兩個(gè)方面。高氮組比偏高組葉片凈光合作用速率高，而葉綠素含量相同，實(shí)驗(yàn)設(shè)置外因相同，其影響因素不是外因，而是內(nèi)因，主要原因可能是參與光合作用的酶數(shù)量較多（活性較強(qiáng)）。（5））為使實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更可靠，在控制好無(wú)關(guān)變量的基礎(chǔ)上，要遵循實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的平行重復(fù)原則，故應(yīng)針對(duì)每個(gè)氮素水平條件下設(shè)置多個(gè)重復(fù)實(shí)驗(yàn)?！军c(diǎn)睛】答題關(guān)鍵在于運(yùn)用光合作用過(guò)程、影響光合作用的因素及光合速率的表示方法等知識(shí)，分析表格數(shù)據(jù)得出結(jié)論。8、基因表達(dá)載體啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因保證二者有相同的黏性末端質(zhì)粒未導(dǎo)入該農(nóng)桿菌或?qū)牒罂股豄an基因未表達(dá)植物組織培養(yǎng)植物細(xì)胞的全能性二者共用一套遺傳密碼、二者都遵循中心法則【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2、植物組織培養(yǎng)技術(shù)的過(guò)程為：外植體→脫分化→愈傷組織→再分化→新植體，原理是植物細(xì)胞具有全能性。據(jù)圖分析，圖中①過(guò)程表示構(gòu)建基因表達(dá)載體的過(guò)程，是基因工程的核心步驟；②過(guò)程表示把農(nóng)桿菌放在含有Kan抗生素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)篩選?！驹斀狻浚?）根據(jù)圖分析可知，①過(guò)程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，其組成包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因。（2）①過(guò)程表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程，該過(guò)程需要用限制酶切割基因和質(zhì)粒，此過(guò)程需要用同一種限制酶來(lái)切割，其目的是保證二者有相同的黏性末端。把農(nóng)桿菌放在含有Kan抗生素的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，如果農(nóng)桿菌不能在含抗生素Kan的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，原因可能是質(zhì)粒未導(dǎo)入該農(nóng)桿菌或?qū)牒罂股豄an基因未表達(dá)。（3）將轉(zhuǎn)基因細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株需要采用植物組織培養(yǎng)，該技術(shù)的理論基礎(chǔ)是植物細(xì)胞的全能性。（4）北極比目魚的抗凍基因轉(zhuǎn)入番茄細(xì)胞并在番茄細(xì)胞中能產(chǎn)生抗凍蛋白的原因是二者共用一套遺傳密碼、二者都遵循中心法則。【點(diǎn)睛】本題考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記植物組織培養(yǎng)技術(shù)的原理及操作步驟，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。9、氮源固體倒置滅菌后的空白培養(yǎng)基平板劃線法稀釋涂布平板法殺滅接種環(huán)上的微生物使微生物數(shù)目能夠隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，以達(dá)到分離的效果【解析】

1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營(yíng)養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用。2、微生物常見(jiàn)的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。【詳解】（1）培養(yǎng)基中一般都含有水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源。根據(jù)題中信息，觀察的是菌落特征，由此確定所利用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。（2）為了防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染，應(yīng)將平板倒置。隨機(jī)取若干滅菌后的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，若一段時(shí)間后出現(xiàn)了菌落，則培養(yǎng)基滅菌不合格。（3）樣液接種時(shí)通常有平板劃線法和稀釋涂布平板法，在平板劃線法的操作中，接種環(huán)在使用前要先灼燒，其目的是殺滅接種環(huán)上的微生物，第二次及其后的劃線都要從上一次劃線的末端開(kāi)始，其目的是使微生物量能夠隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，以達(dá)到分離的效果?！军c(diǎn)睛】本題主要考查微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)，要求考生能夠掌握微生物分離與純化的方法，能夠根據(jù)培養(yǎng)基的配方確定培養(yǎng)的類型，結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題。10、胰蛋白酶（或膠原蛋白酶）啟動(dòng)子終止子分子雜交技術(shù)和抗原-抗體雜交法增大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積物質(zhì)循環(huán)再生整體性【解析】

1、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲?。虎诨虮磉_(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)．從分子水平上檢測(cè)目的基因的方法：（1）分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA用分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)用抗原-抗體雜交技術(shù)。2、PCR技術(shù)的條件：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）等。

3、生態(tài)工程原理：

（1）物質(zhì)循環(huán)再生原理：物質(zhì)能在生態(tài)系統(tǒng)中循環(huán)往復(fù)，分層分級(jí)利用；

（2）物種多樣性原理：物種繁多復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)具有較高的抵抗力穩(wěn)定性；

（3）協(xié)調(diào)與平衡原理：生態(tài)系統(tǒng)的生物數(shù)量不能超過(guò)環(huán)境承載力（環(huán)境容納量）的限度；

（4）整體性原理：生態(tài)系統(tǒng)建設(shè)要考慮自然、經(jīng)濟(jì)、社會(huì)的整體影響；

（5）系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理：系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理：要通過(guò)改善和優(yōu)化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)改善功能；

系統(tǒng)整體性原理：系統(tǒng)各組分間要有適當(dāng)?shù)谋壤P(guān)系，使得能量、物質(zhì)、信息等的轉(zhuǎn)換和流通順利完成，并實(shí)現(xiàn)總體功能大于各部分之和的效果，即“1+1＞2”?！驹斀狻浚?）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，需要用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織，以便獲得單個(gè)細(xì)胞；（2）基因表達(dá)載體包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因。啟動(dòng)子位于目的基因的首端，終止子位于目的基因的尾端，故為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間；基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)步驟，要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄，可采用分子雜交技術(shù)，要檢測(cè)目的基因是否翻譯，可采用抗原-抗體雜交法；（3）培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí)，貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制，通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中，這樣可以增大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積，增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量，也有利于空氣交換；（4）“?；~塘”生態(tài)系統(tǒng)能充分利用廢棄物中的能量，形成“無(wú)廢棄物農(nóng)業(yè)”，這主