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生物平安學(xué)教材課后習(xí)題參考答案
連賓整理
2014/11/10
第六章習(xí)題
1、什么是受體細(xì)胞?選擇受體細(xì)胞時應(yīng)重點考慮哪幾點?
受體細(xì)胞是指用于制備基因工程生物制品的表達(dá)系統(tǒng),具體可分為原核表達(dá)系統(tǒng)和真核表達(dá)系統(tǒng)兩大類。
P180-181
選擇受體細(xì)胞應(yīng)重點考慮以下幾點:
①平安性高,不會對外界環(huán)境造成生物污染;
②便于重組DNA分子的導(dǎo)入;
③便于篩選克隆子
(4)能使重組DNA分子在其細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定維持:
⑤適合于外源基因的高效表達(dá)和表達(dá)產(chǎn)物的分泌或積累;
⑥具有較好的翻譯后加工機制,便于真核生物目的基因的高效表達(dá);
⑦對遺傳密碼的應(yīng)用上無明顯偏倚性;
⑧遺傳性穩(wěn)定,易于擴(kuò)大培養(yǎng)或發(fā)酵:
⑨在理論研究或生產(chǎn)實踐上有較高的應(yīng)用價值
上述9個條件中,受體細(xì)胞表達(dá)的平安性是首要考慮條件,只有證明受體細(xì)胞表達(dá)的產(chǎn)物是沒有毒性的,
沒有潛在的致癌性、沒有其它病原體污染、遺傳背景較為明確,這樣才能考慮其能夠成為受體細(xì)胞的其
他條件。
2、對于基因操作平安性的要求是什么?P184-185
1)基因的分子特征:從基因水平、轉(zhuǎn)錄水平和翻譯水平,考察外源基因的整合和表達(dá)情況,包括:搜
集表達(dá)載體相關(guān)資料?:檢測目的基因在表達(dá)系統(tǒng)中的整合情況:外源插入片段的表達(dá)情況;基因的遺傳
穩(wěn)定性情況和重組載體平安性的檢測。
2)基因的遺傳穩(wěn)定性:遺傳穩(wěn)定性主要涉及質(zhì)粒的不穩(wěn)定性,主要考察目的基因整合的穩(wěn)定性,目的
基因表達(dá)的穩(wěn)定性和目標(biāo)性狀表現(xiàn)的穩(wěn)定性;
3)重組載體的平安性:檢測該載體能否向自然界中不含該類基因的微生物進(jìn)行轉(zhuǎn)移。檢測原因就是質(zhì)
粒具有遷移作用。
3,基因重組活疫苗的分類有哪些?P186-187
基因重組活疫苗可分為基因缺失疫苗與基因突變疫苗、復(fù)制性活載體疫苗和非復(fù)制型活載體疫苗三類。
4,獸用基因工程活疫苗的平安性存在哪些問題?和下一個問題一起答復(fù)。看P191
獸用基因工程活疫苗的平安性問題:
①對人類和動物健康的潛在危害:致病性、抗藥性、食品平安性
②對生態(tài)環(huán)境的潛在危害:致病性和毒性、生存競爭力、傳播擴(kuò)散能力、遺傳變異能力、遺傳轉(zhuǎn)
移能力
5,獸用DNA疫苗的平安性包括哪幾點?
雖然DNA疫苗有著眾多的優(yōu)點和局部應(yīng)用,但是仍有些學(xué)者對于DNA疫苗的平安性存在疑慮,他們擔(dān)
憂DNA會整合到宿主細(xì)胞的染色體上而造成插入突變,進(jìn)而引發(fā)癌變或其他疾病。不過從目前研究數(shù)
據(jù)來看DNA疫苗整合危險性相當(dāng)?shù)?,但是由于沒有靈敏和有效的監(jiān)測手段,對于DNA整合危險性還不
能下完全的結(jié)論,仍有一系列問題需要說明。
①注射疫苗后究竟哪些細(xì)胞會攝取DNA,哪些細(xì)胞會表達(dá)該DNA,表達(dá)持續(xù)多久。
②DNA在這些細(xì)胞中的轉(zhuǎn)歸如何,DNA是否會進(jìn)入細(xì)胞核,是否會復(fù)制。
③外源抗原的長期表達(dá)可能導(dǎo)致不利的免疫病理反響。
④可能形成針對注射DNA的抗體出現(xiàn)不利的自身免疫反響。
⑤所表達(dá)的抗原節(jié)能具有生物學(xué)活性。
6、簡述善用基因工程生物制品的平安評價的要求??碢193-196
獸用基因工程生物制品的平安性評價要求包括以下幾點:
①通過對基因工程菌株及其產(chǎn)物的危害性分類,確定基因工程工作的生物平安等級;
②對獸用基因工程生物制品分類管理,確定第一、二和三類制品的平安性評價標(biāo)準(zhǔn),對生物體分
子特性,受體特性,基因特性等要有充分的了解;
③環(huán)境釋放的平安性評價和進(jìn)口獸用基因工程生物制品的平安性評價重點監(jiān)督;
④進(jìn)行復(fù)核檢驗,它是善用基因工程生物制品平安性評價的重要環(huán)節(jié),可以保證平安性評價的科
學(xué)性、公正性和準(zhǔn)確性。
7,簡述國內(nèi)外獸用基因工程生物制品平安管理概況??碢196-199
經(jīng)濟(jì)合作與開展組織、聯(lián)合國工業(yè)開展組織、世界衛(wèi)生組織、聯(lián)合國糧農(nóng)組織等國際組織積極進(jìn)行協(xié)調(diào),
試圖建立眾多國家都能接收的生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)統(tǒng)一管理的標(biāo)準(zhǔn)和程序。但由于各國國情不同,因此管理方
法各異。
國內(nèi)外獸用基因工程生物制品的平安管理首先都應(yīng)該法律法規(guī)體系;美國主要由農(nóng)業(yè)部動植物檢疫局和
國家環(huán)境保護(hù)局依據(jù)《病毒-血清-毒素法》、《國家環(huán)境政策法》、《聯(lián)邦法規(guī)》等有關(guān)法律、法規(guī)實施管
理。我國主要由由農(nóng)業(yè)部依據(jù)《基因工程平安管理方法》和《農(nóng)業(yè)生物基因工程平安管理實施方法》對
獸用基因工程生物制品實施平安管理
歐美各國對獸用或基因工程生物制品進(jìn)行分類管理,特別是對基因重組活疫苗的管理都極為嚴(yán)格,一般
不輕易批準(zhǔn)進(jìn)行大規(guī)模環(huán)境釋放或商業(yè)化生產(chǎn)生物制品,從封閉實驗室研究到不受限制投放市場的注冊
商品的過程分階段嚴(yán)格執(zhí)行;我國也實行分平安等級、分階段審批制度,但僅將獸用生物制品當(dāng)成一種
特殊商品管理,對上游實驗室研制和生產(chǎn)的平安性缺乏管理方法,同時缺乏環(huán)境釋放和商品化后的平安
監(jiān)控措施。
第五章習(xí)題
1.分別從動物、植物用轉(zhuǎn)基因微生物兩方面簡述受體微生物的平安性評價。PI38、P159
受體微生物的背景資料、受體微生物的生物學(xué)特性、受體微生物所適應(yīng)的生態(tài)環(huán)境、受體微生物的遺傳
變異
2?簡述對動物用轉(zhuǎn)基因微生物相關(guān)基因操作進(jìn)行的平安性評價,PI43
(I)動物用轉(zhuǎn)基因微生物中引入或修飾性狀的特性的描述
(2)實際插入或刪除序列的資料,插入序列的大小和結(jié)構(gòu),價定其特性的分析方法;刪除區(qū)域的大小
和功能:目的基因的核甘酸序列和推導(dǎo)的氨基酸序列;插入序列的拷貝數(shù)。
(3)目的基因與載體構(gòu)建的圖譜,載體特性和平安性,能否向自然界中不含該類基因的微生物轉(zhuǎn)移。
(4)載體中插入?yún)^(qū)域個片段的資料?,啟動子和終止子的大小、功能機供體生物的名稱:標(biāo)記基因和報
告基因的大小、功能及供體生物的名稱;其他調(diào)控序列的名稱及其來源。
⑸基因操作的方法
(6)目的基因表達(dá)的穩(wěn)定性,目的基因的檢測和鑒定技術(shù)
(7)重組DNA分子的結(jié)構(gòu)、復(fù)制特性和平安性
3.植物用轉(zhuǎn)基因微生物的平安等級分為幾種?
根據(jù)《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物平安評價管理方法》第十三條將植物用轉(zhuǎn)基因微生物的平安等級分為四個等級。
4.什么是基因工程亞單位疫苗?并說明其平安性評價內(nèi)容。P156
基因工程亞單位疫苗是指用基因工程方法構(gòu)建的在高效表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)出來的強病毒病原體的某種免
疫相關(guān)抗原。
亞單位疫苗是所有疫苗中最平安而實用的,具有如下優(yōu)點:1.亞單位疫苗防止了直接是用病原物而使接
受者可能致病的危險,因此疫苗也不必做無毒測試;2.亞單位疫苗利用純化的蛋白質(zhì)作為免疫原,可以
防止由于外源蛋白、核酸的混雜而造成的副作用。
5.如何對動物用轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品進(jìn)行平安性評價。P157
動物用轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品的平安性評價主要考慮以卜.幾個方面:
1)轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品的穩(wěn)定性
2)生產(chǎn)、加工、活動對轉(zhuǎn)基因微生物平安性的影響
3.1轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品與轉(zhuǎn)基因微生物在環(huán)境平安方面的差異
4)轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品與轉(zhuǎn)基因微生物在對人類健康影響方面的差異
6.如何對植物用轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品進(jìn)行平安性評價。PI7I
植物用轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品的平安性評價主要考慮以下幾個方面:
1)轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品的穩(wěn)定性
2)生產(chǎn)、加工、活動對轉(zhuǎn)基因微生物平安性的影響
3)轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品與轉(zhuǎn)基因微生物在環(huán)境平安方面的差異
4)轉(zhuǎn)基因微生物產(chǎn)品與轉(zhuǎn)基因微生物在對人類健康影響方面的差異
第四章習(xí)題
轉(zhuǎn)基因水生生物應(yīng)用包括哪些平安問題?P120-I22下面的答復(fù)不完整
?生態(tài)平安問題
目前,有關(guān)轉(zhuǎn)基因水生生物對生態(tài)環(huán)境的影響,令人擔(dān)憂的焦點集中在如下兩方面:一是如何防止轉(zhuǎn)基
因水生生物逃逸或釋放到外界環(huán)境后,與野生物種進(jìn)行交配,而導(dǎo)致外源基因的擴(kuò)散,改變物種原有的
基因組成,造成種質(zhì)資源的混亂;二是如何預(yù)防個體經(jīng)人工定向改造,產(chǎn)生抗逆、抗病性強的特性,
巨釋放到自然環(huán)境中,對環(huán)境具有更強的適應(yīng)性和競爭力,可能威脅現(xiàn)有的物種,破壞原有的種群生態(tài)
平衡。對此,研制轉(zhuǎn)基因的不育個體將成為解決這個問題的方法之一。
?食用平安性問題
為提高產(chǎn)出,目前轉(zhuǎn)入的基因大多數(shù)為生長激素類基因,由于其表達(dá)產(chǎn)物-生長激素對人體具有影響,
囚此引起全社會的普遍關(guān)注,以致對轉(zhuǎn)基囚產(chǎn)品的食用平安性評價的重要性口漸突顯出來。由于人們意
識到轉(zhuǎn)基因食品存在的問題較晚,所以研究才剛起步,其他方面的研究如營養(yǎng)學(xué)評價、過敏性評價及模
式蛋白的建立等更是仙劍報道,因此轉(zhuǎn)基因食用平安性評價的根底研究還有許多空白尚待填補
?基因操作工程的平安性
在行基因操作之初需詳細(xì)了解目的基因的來源、結(jié)構(gòu)、功能和用途;了解克隆載體的來源、特性及平安
性;了解重組DNA分子的結(jié)構(gòu)及復(fù)制特性,外源基因整合位點效應(yīng),確保重組體在使用過程中的平安
性。此外,還要選擇有效和平安的基因?qū)胪緩?,防止基因工程菌的流失和對環(huán)境的污染。
簡述水生生物轉(zhuǎn)基因的主要方法及目前存在的問題P112“17
魚基因轉(zhuǎn)移的主要方法
1.顯微注射法;2.電脈沖法;3.精子攜帶法。
存在的問題
1.基因來源;2.整合成功率;3.獲得純系個體;4.轉(zhuǎn)基因方法
蝦基因轉(zhuǎn)移的主要方法
1.顯微注射法;2.電脈沖法;3.基因槍法;4.病毒介導(dǎo)法:5.精子載體法
存在的問題
1.技術(shù)問題;2.材料問題;3.平安性問題
貝類基因轉(zhuǎn)移的主要方法
1.電脈沖介導(dǎo)的精子載體法;2.聚乙烯亞胺與精子載體法相結(jié)合
存在的問題
除上述提到的精子介導(dǎo)外源基因轉(zhuǎn)入卵子的機理較為復(fù)雜,此外在已有的貝類轉(zhuǎn)基因研究報道中,通過
對報告基因的檢測發(fā)現(xiàn)外源基因在幼蟲中能夠表達(dá),但其轉(zhuǎn)導(dǎo)率并不穩(wěn)定。所以,外源基因與貝類本身
基因的整合、互作等一系列問題還需要進(jìn)一步研究探討。
簡述轉(zhuǎn)基因水生生物擴(kuò)散途徑及防范措施P121-122第7和8條
擴(kuò)散途徑
?主動擴(kuò)散指轉(zhuǎn)基因水生生物為了適應(yīng)生存的需要,如索餌、繁殖、澗游等,從一個生活水域轉(zhuǎn)
移到另一個生活水域。
?被動擴(kuò)散主要是由人類有意或無意造成,包括:
通過航運將水生生物將一個水域帶到另一個水域;開挖運河和水渠,為水域向生物的遷移提供新通道:
國家或地區(qū)間的鮮水產(chǎn)品交易,不僅擴(kuò)散水生生物本身,還將有關(guān)病原帶到其他水域:欣賞魚類或其他
水生生物的逃逸或丟棄;人類有目的的放養(yǎng)和引種馴化。
防范措施
在開展轉(zhuǎn)基因水生生物研究前,首先應(yīng)中選擇平安的飼養(yǎng)場所。例如,建立室內(nèi)水循環(huán)養(yǎng)殖系統(tǒng),采取
隔離方式培育轉(zhuǎn)基因水生生物;盡可能使實驗型養(yǎng)殖場所遠(yuǎn)離自然水域或水產(chǎn)品生產(chǎn)單位。
控制進(jìn)出水系統(tǒng)途徑傳播,利用物理或化學(xué)方法,在出水口殺死全部逃逸的轉(zhuǎn)基因個體。例如,提高出
水溫度或pH值,利用高濃度氯、濱或臭氧來處理排出水。由于不同水生生物的致死條件不同,需要針
對不同對象采取不同的處理方法。飼養(yǎng)轉(zhuǎn)基因水生生物的水源也要經(jīng)過特殊處理,杜絕引進(jìn)其他水生生
物。同時,要有適當(dāng)?shù)臋C械設(shè)備對進(jìn)出水進(jìn)行過濾。
控制非水源途徑傳播。水生生物的傳播不僅通過水源途徑,還有非水源途徑。某些水生生物可以在水體
之外生活很長的時間。例如,當(dāng)環(huán)境溫度降低時,成年雙殼貝類可以離開水體生活3天以上『另外雙殼
貝類的幼蟲非常小,在孵化時幼蟲可通過空氣傳播。許多水生生物的卯黏附性強,容易隨網(wǎng)具或其他用
具帶出實驗場地。必須防止轉(zhuǎn)基因個體的上述非水源性傳播。
簡述轉(zhuǎn)基因水生生物平安等級的劃分程序P123-124
9轉(zhuǎn)基因水生生物平安性評價主要包括以下內(nèi)容:根據(jù)供體生物、受體生物和轉(zhuǎn)基因水生生物及
其產(chǎn)品的生物學(xué)特性、基因操作過程的特點、未來用途和釋放環(huán)境等對轉(zhuǎn)基因水生生物及其產(chǎn)
品對人類健康和生態(tài)環(huán)境可能產(chǎn)生的潛在威脅與影響進(jìn)行全面合理的評價,并且確定其平安等
級;在全面合理的平安評價的根底之上采用適當(dāng)?shù)募夹g(shù),制定對應(yīng)的檢測、監(jiān)測和控制措置。
具體的平安等級劃分程序如下:
第三章習(xí)題
1.P79:指利用轉(zhuǎn)基因活體動物的某種能高效表達(dá)外源蛋白的器官或組織,來進(jìn)行工業(yè)化生產(chǎn)活性功能蛋
白的技術(shù),這些蛋白一般是營養(yǎng)保健蛋白或藥用蛋白。
利用乳腺反響器不僅可以生產(chǎn)各種藥用蛋白和保健蛋白,還能改變?nèi)橹煞?/p>
2.P81-82:外源基因在宿主基因中插入的隨機性;制作轉(zhuǎn)基因動物效率低;轉(zhuǎn)基因的表達(dá)水平很低;基
因的整合得機制尚不清楚
3.P89:最大的不同在于動植物本身的特性。動物體內(nèi)存在內(nèi)源性病毒和病毒樣序列,以逆轉(zhuǎn)錄病毒為
教體時可能在轉(zhuǎn)基因動物體內(nèi)合成新的感染性病毒。轉(zhuǎn)基因動物在平安性評價上有一定優(yōu)勢,可以建立
一套較好的售后跟蹤系統(tǒng)。
4.P89-90:顯微注射法;精子載體法;逆轉(zhuǎn)錄病毒載體法;胚胎干細(xì)胞介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移;體細(xì)胞基因轉(zhuǎn)
移和克?。换虼虬蟹?;
5.P97-98:人類對轉(zhuǎn)基因動物食品影響人類健康和生態(tài)環(huán)境的認(rèn)識還缺乏知識和經(jīng)驗;轉(zhuǎn)基因食品研究
與生產(chǎn)迅速開展;對我國農(nóng)產(chǎn)品出口有重要意義。
第二章習(xí)題
1.抗草丁瞬轉(zhuǎn)基因作物的抗性機理是什么?(P31-32)
草丁瞬屬于有機磷類除草劑,是滅生型除草劑Liberty的活性成分,也被成為phosphinothricin(PPT,y-
羥基甲基亞瞬基-酪氨酸)。L-草丁瞬強烈抑制細(xì)菌和植物的氨基酸生物合成酶一一谷朝酰胺合成酶
(glutaminesynthetase,GS)。L-草J?瞬和L-谷氨酸的結(jié)構(gòu)類似物,在植物細(xì)胞內(nèi)與L-谷氨酸競爭谷氨酰
胺合成酶,導(dǎo)致NH:無法與L-谷氨酸結(jié)合形成谷氨酰胺,NH*的積累最終使植物細(xì)胞的生長受到抑制或
死亡。
Bar基因[Balaphosresistantgene)是吸水鏈霉菌防止自身產(chǎn)生雙丙氨瞬毒害的保護(hù)基因,編碼PPT乙酰
轉(zhuǎn)移酶(PAT),PAT催化乙酰輔酶A的乙?;D(zhuǎn)移到PPT的氨基上,形成乙酰PPT而使PPT失活。
通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法、基因槍法用電擊法
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