pcr考試試題及答案2020

一、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR的中文名稱(chēng)是（）A.基因克隆技術(shù)B.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)C.蛋白質(zhì)印跡技術(shù)D.核酸雜交技術(shù)答案：B2.PCR反應(yīng)中，哪種酶起關(guān)鍵作用（）A.逆轉(zhuǎn)錄酶B.RNA聚合酶C.TaqDNA聚合酶D.限制性?xún)?nèi)切酶答案：C3.PCR反應(yīng)的三個(gè)基本步驟不包括（）A.變性B.退火C.延伸D.轉(zhuǎn)錄答案：D4.在PCR反應(yīng)中，變性溫度一般為（）A.90-95℃B.50-55℃C.70-75℃D.30-35℃答案：A5.以下哪種物質(zhì)不是PCR反應(yīng)的必需成分（）A.模板DNAB.dNTPC.引物D.蛋白酶答案：D6.PCR反應(yīng)中，引物的長(zhǎng)度一般為（）A.10-20個(gè)核苷酸B.5-10個(gè)核苷酸C.20-30個(gè)核苷酸D.30-40個(gè)核苷酸答案：A7.PCR技術(shù)可用于（）A.基因檢測(cè)B.蛋白質(zhì)合成C.細(xì)胞培養(yǎng)D.光合作用研究答案：A8.下列關(guān)于PCR的說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）A.可以大量擴(kuò)增目的基因B.反應(yīng)體系中不需要緩沖液C.具有特異性D.靈敏度高答案：B9.在PCR反應(yīng)中，退火溫度主要取決于（）A.模板DNA的長(zhǎng)度B.引物的長(zhǎng)度和GC含量C.Taq酶的活性D.dNTP的濃度答案：B10.PCR反應(yīng)中，延伸時(shí)間主要取決于（）A.模板DNA的長(zhǎng)度B.引物的長(zhǎng)度C.反應(yīng)體系的體積D.退火溫度答案：A二、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)體系通常包括（）A.模板DNAB.引物C.TaqDNA聚合酶D.dNTPE.緩沖液答案：ABCDE2.影響PCR反應(yīng)特異性的因素有（）A.引物的特異性B.退火溫度C.模板DNA的純度D.Taq酶的活性E.dNTP的濃度答案：ABC3.以下哪些情況可能導(dǎo)致PCR失?。ǎ〢.引物設(shè)計(jì)不合理B.模板DNA降解C.Taq酶失活D.反應(yīng)體系中存在抑制物E.退火溫度過(guò)低答案：ABCDE4.PCR技術(shù)在以下哪些領(lǐng)域有應(yīng)用（）A.醫(yī)學(xué)診斷B.法醫(yī)鑒定C.基因工程D.農(nóng)業(yè)育種E.環(huán)境監(jiān)測(cè)答案：ABCDE5.關(guān)于PCR引物，以下說(shuō)法正確的是（）A.引物應(yīng)具有特異性B.引物長(zhǎng)度一般在10-20個(gè)核苷酸C.引物自身不能有互補(bǔ)序列D.引物的3'端要與模板嚴(yán)格互補(bǔ)E.引物的5'端可以修飾答案：ABCDE6.在PCR反應(yīng)中，提高退火溫度可能導(dǎo)致（）A.特異性增強(qiáng)B.產(chǎn)量降低C.非特異性條帶減少D.引物與模板結(jié)合困難E.延伸速度減慢答案：ABCD7.以下關(guān)于TaqDNA聚合酶的說(shuō)法正確的是（）A.具有熱穩(wěn)定性B.能催化DNA合成C.是PCR反應(yīng)的關(guān)鍵酶D.沒(méi)有校正功能E.最適反應(yīng)溫度為72℃左右答案：ABCDE8.PCR產(chǎn)物的分析方法有（）A.瓊脂糖凝膠電泳B.聚丙烯酰胺凝膠電泳C.測(cè)序D.酶切分析E.雜交分析答案：ABCDE9.為了提高PCR反應(yīng)的準(zhǔn)確性，可以采取以下哪些措施（）A.優(yōu)化引物設(shè)計(jì)B.提高模板DNA的純度C.使用高保真Taq酶D.精確控制反應(yīng)條件E.重復(fù)實(shí)驗(yàn)答案：ABCDE10.以下哪些是PCR反應(yīng)的特點(diǎn)（）A.特異性強(qiáng)B.靈敏度高C.操作簡(jiǎn)便D.可大量擴(kuò)增目的基因E.快速答案：ABCDE三、判斷題（每題2分，共10題）1.PCR反應(yīng)中不需要引物。（）答案：錯(cuò)誤2.TaqDNA聚合酶在高溫下會(huì)失活。（）答案：錯(cuò)誤3.任何DNA都可以作為PCR的模板。（）答案：錯(cuò)誤4.PCR反應(yīng)中，延伸時(shí)間越長(zhǎng)越好。（）答案：錯(cuò)誤5.引物的3'端可以不與模板互補(bǔ)。（）答案：錯(cuò)誤6.PCR只能用于擴(kuò)增DNA，不能用于RNA的檢測(cè)。（）答案：錯(cuò)誤7.退火溫度越高，PCR反應(yīng)的特異性就越高。（）答案：錯(cuò)誤8.PCR反應(yīng)體系中緩沖液的作用是維持反應(yīng)體系的pH值等條件。（）答案：正確9.高純度的模板DNA一定能保證PCR反應(yīng)成功。（）答案：錯(cuò)誤10.PCR產(chǎn)物的大小只取決于模板DNA的長(zhǎng)度。（）答案：錯(cuò)誤四、簡(jiǎn)答題（每題5分，共4題）1.簡(jiǎn)述PCR反應(yīng)的基本原理。答案：PCR反應(yīng)是一種體外模擬體內(nèi)DNA復(fù)制過(guò)程的技術(shù)。以DNA為模板，在TaqDNA聚合酶作用下，以dNTP為原料，按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則，通過(guò)引物引導(dǎo)合成新的DNA鏈。反應(yīng)包括變性（使模板DNA雙鏈解開(kāi)）、退火（引物與模板鏈結(jié)合）、延伸（合成新的DNA鏈）三個(gè)基本步驟，經(jīng)過(guò)多次循環(huán)實(shí)現(xiàn)目的DNA的大量擴(kuò)增。2.簡(jiǎn)述引物設(shè)計(jì)的基本原則。答案：引物應(yīng)具有特異性，與目的基因序列互補(bǔ)；長(zhǎng)度一般為10-20個(gè)核苷酸；引物自身不能有互補(bǔ)序列，尤其是3'端；3'端要與模板嚴(yán)格互補(bǔ)，5'端可修飾；引物的GC含量要適中，避免出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)等。3.說(shuō)出至少三種PCR產(chǎn)物的分析方法及其原理。答案：瓊脂糖凝膠電泳，根據(jù)DNA分子大小和電荷不同在電場(chǎng)中遷移速度不同來(lái)分離PCR產(chǎn)物；聚丙烯酰胺凝膠電泳，依據(jù)DNA分子大小、形狀等在凝膠中的不同遷移率來(lái)分析；測(cè)序，測(cè)定PCR產(chǎn)物的堿基序列來(lái)確定產(chǎn)物是否正確。4.簡(jiǎn)述影響PCR反應(yīng)的主要因素。答案：模板DNA（純度、完整性等）、引物（特異性、長(zhǎng)度、GC含量等）、Taq酶（活性、保真度等）、dNTP濃度、反應(yīng)體系的緩沖液（pH等）、退火溫度、延伸時(shí)間等。五、討論題（每題5分，共4題）1.討論如何提高PCR反應(yīng)的特異性。答案：可優(yōu)化引物設(shè)計(jì)，提高引物特異性；適當(dāng)提高退火溫度，減少非特異性結(jié)合；提高模板DNA純度，去除雜質(zhì)和干擾物；使用高保真的Taq酶，減少錯(cuò)配等。2.探討PCR技術(shù)在醫(yī)學(xué)診斷中的應(yīng)用及意義。答案：可用于檢測(cè)病原體核酸，如病毒、細(xì)菌等，快速診斷感染性疾?。粰z測(cè)腫瘤相關(guān)基因，輔助腫瘤診斷、預(yù)后評(píng)估等，有助于早期發(fā)現(xiàn)疾病，指導(dǎo)治療。3.如