DB13河北省市場監(jiān)督管理局發(fā)布I本標準起草單位：河北省環(huán)保產品質量監(jiān)督檢驗院、張家口翼華環(huán)境檢測技術有限責任本標準主要起草人：呂曉飛、蔡立鵬、耿曉紅、陳靜、劉肖肖、何淑娟、張玉、劉娜、1土壤中土霉素、金霉素、四環(huán)素、多西環(huán)素、美他霉素的測定高效液相色譜-串聯(lián)質譜法本標準適用于土壤中土霉素、金霉素、四環(huán)素、多西環(huán)素、美他霉素按稱樣量5g，50mL提取液中移取10mL凈化，凈化液濃縮、定容至1.0mL，下列文件對于本文件的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和HJ613土壤干物質和水分的測定重量法子化，通過保留時間和特征離子對豐度比定性，峰面積外標5試劑和材料2）：），）：）：）：5.15HLB固相萃取柱：二乙烯相）：57-62-5）、四環(huán)素（tetracycline，CAS：美他霉素（methacycline，CAS：914-0容量瓶中，用乙腈+甲酸水溶液（5.17）定容，此標準系列中各抗生素的濃度分別為：103運輸過程中應密封、避光、4℃以下冷藏。運至實驗室后，若不能及時分析，應于4℃以下冷將樣品混勻，除去樣品中的異物（枝棒、葉片、石子等），按照HJ/T166的要求，將采集的乙腈（7+35.12渦旋混勻1min使其分散，然后超聲提取30min、往復振蕩（100次/min）提取30min。取出離心管，5000r/準確移取10.0mL濾液，以0.5mL/min速度通過HLB固相），甲醇+水（5.13）淋洗，棄去淋洗液。2.0kPa以下減壓抽a)色譜柱：聯(lián)苯色譜柱（3.0m），4表1梯度洗脫程序時間/min乙腈/%甲酸水溶液/%0離子化模式：電噴霧電離正離子模式(ESI+);質譜掃描方式：多反應監(jiān)測(MRM);其他參待測樣品中化合物色譜峰的保留時間與標準溶液相比變化范圍應在±0.5譜定性離子必須出現(xiàn)，至少應包括一個母離子和兩個子離子，且同一檢測批次，對同一化合物，樣品中目標物的兩個離子的相對豐度比與濃度相當?shù)臉藴嗜芤合啾?，其允許偏差不超過表2規(guī)定的范圍。表2定性時相對離子豐度的最大允許偏差允許的相對偏差在8.1和8.2儀器條件下，對系列標準溶液(5.21)和試樣溶液(7.4.2)進行分析。以標準樣品中四環(huán)素類抗生素的濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，做線性回歸方程，計算出試樣溶液中四環(huán)素類抗按照與試樣測定(8.1)相同的儀器條件進行空白試樣(7.5)的測定。土壤中土霉素、金霉素、四環(huán)素、多西環(huán)素和美他霉素的含量X按式(1)計算：C——試樣溶液中各被測組分的濃度，單位為納克每毫升(ng/mL);5m——試樣質量，單位為克（g行了6次重復測定：實驗室間相對標準偏差范圍分別為7.7%～19.6%、1.9%～20%和1.8%室間加標回收率范圍分別為82.5%～94.6%、88.7%～103.8%和98.3%行了6次重復測定：實驗室間相對標準偏差范圍分別為6.1%～17.3%、4.1%～14.驗室間加標回收率范圍分別為80.7%～101.0%、94.2%～108.8%和94.2%～1室間加標回收率范圍分別為83.8%～100.7%%、93.9%～112.3%和99.8進行了6次重復測定：實驗室間相對標準偏差范圍分別為7.5%～18.1%、5.2%～23.5%和2.6%～13.2實驗室間加標回收率范圍差分別為83.5%～93.2%、84.4%～104.8和97.4%～10驗室間加標回收率范圍分別為86.1%～94.7%、91.2%～103.3%和90.2%～104613.2試驗所用的有機試劑有一定的毒性和揮7A.1參考質譜條件：）：）：）：）：母離子(m/z)子離子(m/z)8(資料性附錄)多反應監(jiān)測(MRM)色譜圖