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文檔簡介

項目2蘆薈的組培快速繁殖主講人:呂曼01040302生根培養(yǎng)繼代培養(yǎng)煉苗初代培養(yǎng)任務是指初次用于培養(yǎng)的植物材料。包括植物體的各個器官、組織、細胞和原生質體等。什么是外植體(Explant)?1.1、外植體的選取任務一、初代培養(yǎng)外植體生理狀態(tài)發(fā)育年齡外植體大小外植體取材季節(jié)外植體的選擇有什么要求?外植體基因型外植體取材部位任務一、初代培養(yǎng)1.1、外植體的選取

外植體基因型基因型不同,組織培養(yǎng)的難易程度也不相同

草本植物比木本植物易于組織培養(yǎng);

雙子葉植物比單子葉植物易于組織培養(yǎng)。

如木本植物中獼猴桃易再生,而松樹、柏樹難再生?;蛐筒煌?,組織培養(yǎng)再生途徑不相同

十字花科的胡蘿卜易于誘導胚狀體,茄科的煙草、番茄、曼陀羅易于誘導愈傷組織。任務一、初代培養(yǎng)1.1、外植體的選取外植體取材部位不同種類的植物以及同一植物的不同器官對誘導條件反應是不一致的,有的部位誘導分化率高,有的部位很難脫分化,或者再分化頻率很低,甚至只分化出芽不長根或只分化出根而不長芽。

如百合科不同屬的植物:風信子、虎眼萬年青易于再生形成小植株、而郁金香較難;同種百合鱗莖的鱗片外層比內層再生能力強,下段比中上段再生能力強。取材部位選擇基本原則:在確定取材部位時,應考慮培養(yǎng)材料有來源有保證,易于再生、成苗。對于培養(yǎng)較困難的植物在培養(yǎng)材料較多的情況下,宜比較各部位的誘導及分化能力,然后擇優(yōu)選擇。任務一、初代培養(yǎng)1.1、外植體的選取外植體取材部位對于大多數(shù)植物來講,莖尖是最好的部位,由于其形態(tài)已基本建成,生長速度快,遺傳性穩(wěn)定,也是獲得無病毒苗的重要途徑,但莖尖往往受到材料來源的限制,而采用莖段可解決培養(yǎng)材料不足的困難。常用的外植體種類:①莖尖(園藝植物組織培養(yǎng)中應用最多,繁殖率高,不易發(fā)生遺傳變異,但取材有限)②莖段(采用嫩莖的切段促進腋芽萌發(fā),取材容易)③葉(幼嫩葉片組織通過愈傷組織或不定芽分化產(chǎn)生植株,取材容易,操作方便,但易發(fā)生變異)④花球和花蕾⑤種子、根、塊根、塊莖、花瓣、胚等任務一、初代培養(yǎng)1.1、外植體的選取外植體取材季節(jié)一般原則:

外植體最好在植物生長最適時期取材,即在其生長開始的季節(jié)采樣,若在生長末期或已經(jīng)進入休眠期取樣,則外植體會對誘導反應遲鈍或無反應。如蘋果芽在春季取材成活率為60%,夏季取材下降到10%,冬季取材在10%以下。百合鱗片外植體,春、秋季取材易形成小鱗莖,夏、冬季取材培養(yǎng),則難形成小鱗莖。馬鈴薯在4月和12月取的莖外植體有較高的塊莖發(fā)生能力,而2-3月或5-11月則很少有塊莖發(fā)生能力。任務一、初代培養(yǎng)1.1、外植體的選取外植體生理狀態(tài)發(fā)育年齡外植體的生理狀態(tài)和發(fā)育年齡直接影響離體培養(yǎng)過程中的形態(tài)發(fā)生。一般情況下,越幼嫩,年限越短的組織具有較高的形態(tài)發(fā)生能力,組織培養(yǎng)越易成功。沿植物的主軸,越向上的部分所形成的器官其生長的時間越短,生理年齡也越老,越接近發(fā)育上的成熟,越易形成花器官;反之越向基部,其生理年齡越小。煙草、西番蓮的組培中發(fā)現(xiàn),植株下部組織產(chǎn)生營養(yǎng)芽的比例高,而上部組織產(chǎn)生花器官的比例高;木本植物幼齡樹的春梢嫩枝段或基部的萌條做外植體效果較好。任務一、初代培養(yǎng)1.1、外植體的選取外植體的大小外植體的大小,應根據(jù)培養(yǎng)目的而定如果是胚胎培養(yǎng)或脫毒,則外植體宜??;如果是進行快速繁殖,外植體宜大。但外植體過大,殺菌不徹底,易于污染;過小離體培養(yǎng)難于操作、成活。一般外植體大小在0.5-1.0cm為宜。具體說葉片、花瓣等約為5mm2,莖段則長約0.5mm,莖尖分生組織帶1-2個葉原基,0.2-0.3mm大小等。任務一、初代培養(yǎng)

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