選修1專題2課題1微生物的實驗室培養(yǎng)（練）1.下圖是從葡萄果實上獲取酵母菌菌種的簡要操作步驟。在下列相關(guān)敘述中不正確的是（

）A.圖中接種的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法B.圖中①、②、③步驟都必須確保是無菌操作C.圖中選擇培養(yǎng)基為固體，而擴大培養(yǎng)的培養(yǎng)基為液體D.擴大培養(yǎng)酵母菌過程中為加快酵母菌繁殖需要通入空氣【答案】D【解析】微生物培養(yǎng)中常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，A項正確；微生物培養(yǎng)過程必須保證無菌操作以防止雜菌污染，B項正確；在進行酵母菌篩選時用MS固體培養(yǎng)基，而進行擴大培養(yǎng)時用的是液體培養(yǎng)基，C項正確；酵母菌為兼性厭氧菌，所以在擴大培養(yǎng)酵母菌過程中為加快酵母菌繁殖需要通入無菌空氣，否則會造成雜菌污染，D項錯誤。2.如圖是微生物平板劃線示意圖。劃線的順序為12345。下列操作方法正確的是（）A．操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B．劃線操作應(yīng)在火焰上進行C．在5區(qū)域中才可以得到所需菌落D．在12345區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌【答案】D【解析】進行微生物平板劃線操作之前，要將接種環(huán)放在酒精燈火焰上灼燒滅菌，直到接種環(huán)燒紅，A項錯誤；劃線操作應(yīng)在火焰旁進行，不能在火焰上進行，B項錯誤；平板劃線分離微生物的原理就是通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個菌落。5區(qū)域是最后一個區(qū)域，因此，有可能在5區(qū)域得到所需菌落，但在4區(qū)域也有可能得到所需菌落，C項錯誤；操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物，每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，因此，在12345區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌，D項正確。3.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是（）A．將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌B．接種純種細(xì)菌C．適宜環(huán)境條件下培養(yǎng)D．防止外來雜菌的入侵【答案】D【解析】獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌，只是防止外來雜菌入侵的一個方面，故A項錯誤，D項正確；接種純種細(xì)菌是獲得純凈培養(yǎng)物的前提，C項錯誤；培養(yǎng)環(huán)境不能防止雜菌的污染，C項錯誤。4.關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基，敘述錯誤的是（）A．操作順序為計算、稱量、熔化、倒平板、滅菌B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯C．待培養(yǎng)基冷卻至50℃D．待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過來放置【答案】A【解析】制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，A項錯誤；將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯，加入少量的水，加熱，當(dāng)牛肉膏融化并與稱量紙分離后，用玻璃棒取出稱量紙，B項正確；待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板，C項正確；待平板冷卻凝固約5～10min后將平板倒過來放置，使皿蓋在下，皿底在上，5.“做生物的分離與培養(yǎng)”實驗時，下列敘述正確是（）A.高壓滅菌加熱結(jié)束時，打開放氣閥使壓力表指針回到零后，開啟鍋蓋B.倒平板時，應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊，以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C.為了防止污染，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D.用記號筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時,應(yīng)標(biāo)記在皿底上【答案】D【解析】高壓滅菌加熱結(jié)束時，當(dāng)壓力表的壓力降到零時，打開排氣閥，打開蓋子，如果提前打開排氣閥，鍋內(nèi)壓力突然下降，滅菌容器內(nèi)液體會沖出容器，造成污染，A錯誤；倒平板時，培養(yǎng)皿蓋打開一縫隙，不能放到一邊，B錯誤；接種時，接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌冷卻后挑取菌落，不能趁熱挑取，以免殺死微生物，C錯誤；由于平板倒過來放置，則用記號筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時，應(yīng)標(biāo)記在皿底上，D正確。6.關(guān)于滅菌和消毒的不正確的理解是（）A.消毒和滅菌實質(zhì)上是相同的B.滅菌是指殺死環(huán)境中的一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子C.接種環(huán)用燒灼的方法滅菌D.常用滅菌方法有加熱法、過濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法【答案】A【解析】滅菌是將處理物體中的一切生物全部殺滅，在經(jīng)過滅菌后的物體中，不再存在任何活著的生命；消毒是將物體中的微生物減少到不再危害人體（或其他需要保護的生物體）的程度，A.錯誤；滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物細(xì)胞（包括芽孢和孢子），B.正確；金屬接種工具常用灼燒滅菌，C正確；生產(chǎn)中常用的滅菌方法有加熱法、過濾法、紫外線法、化學(xué)藥品法，D正確。7.有關(guān)稀釋涂布平板法，敘述錯誤的是（）A.首先將菌液進行一系列的梯度稀釋B.然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面C.在適宜的條件下培育D.結(jié)果都是可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落【答案】D【解析】稀釋涂布法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)，A、B、C正確；只有稀釋度足夠大，才可以在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落,D錯誤。8.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的下列操作中，錯誤的是（）A．操作流程是計算、稱量、溶化、滅菌和倒平板B．將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同倒入燒杯中再加水、去紙C．滅菌后向牛肉膏蛋白胨溶液中加2%瓊脂，并使其溶解D．將培養(yǎng)基冷卻到約50℃【答案】C【解析】制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的操作順序：計算、稱量、熔化、滅菌、倒平板,A正確；牛肉膏容易吸潮．所以當(dāng)牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻棒取出稱量紙，B正確；待培養(yǎng)基冷卻至50℃9.關(guān)于平板劃線法和涂布平板法的敘述不正確的是（）A．能應(yīng)用于固體培養(yǎng)基接種B．都可以用于微生物的計數(shù)C．接種培養(yǎng)后可獲得單菌落D．接種用具需進行嚴(yán)格滅菌【答案】B【解析】都能應(yīng)用于固體培養(yǎng)基接種，A正確。稀釋涂布平板法用于微生物的計數(shù)，B錯。單個微生物在培養(yǎng)基繁殖形成單個菌落，C正確。接種用具需進行嚴(yán)格滅菌，避免污染雜菌，D正確。10.在分離、純化大腸桿菌實驗中，劃線接種（甲）、培養(yǎng)結(jié)果（乙）如下圖，且甲乙的對應(yīng)位置不變。有關(guān)敘述，錯誤的是（）A.配制培養(yǎng)基時需進行髙壓蒸汽滅菌B.連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落C.圖示接種過程中接種環(huán)至少灼燒了5次D.甲中a區(qū)域為劃線的起始位置【答案】D【解析】為了能徹底滅菌，配制的培養(yǎng)基需進行髙壓蒸汽滅菌，A正確；連續(xù)劃線的目的是獲得單個細(xì)菌形成的菌落，B正確；由于每次使用接種環(huán)前后都要灼燒滅菌，從圖示甲中4次劃線接種就可推出，接種過程中接種環(huán)至少灼燒了5次，C正確；起始劃線的區(qū)域長出的菌落多且密，根據(jù)甲乙對應(yīng)區(qū)域?qū)Ρ?，甲中a區(qū)域為劃線的結(jié)束位置，D錯誤。11.在調(diào)查某湖水中H細(xì)菌指數(shù)（1升水中含有的H細(xì)菌個數(shù)）的實驗中，先將5升湖水水樣濃縮至5毫升，然后各取濃縮水樣l毫升，涂布到4個培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，培養(yǎng)后統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是42、38、55、18。請回答：（1）培養(yǎng)基中的蛋白胨和淀粉為細(xì)菌生長提供了_______________。（2）為了盡快觀察到細(xì)菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應(yīng)將接種了湖水水樣的平板置于____________中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在37℃。要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應(yīng)該同時在另一平板上接種__________作為對照。（3）細(xì)菌培養(yǎng)產(chǎn)生的單個菌落在生態(tài)學(xué)中稱為__________。根據(jù)上述結(jié)果計算，被檢樣的H細(xì)菌指數(shù)為_________。用這種方法測定密度，實際活菌數(shù)目要比測得的數(shù)目___________，原因是______________。（4）為了純化獲得的H細(xì)菌，在微生物的實驗室培養(yǎng)過程中，關(guān)鍵是________，而實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行_________________處理后才能倒掉?！敬鸢浮浚?）氮源、碳源（2）恒溫培養(yǎng)箱等量無菌水（3）種群45多當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時在平板上觀察到的是一個菌落（4）無菌操作（防止雜菌污染）滅菌【解析】（1）蛋白胨含有氮，通常作為氮源和提供微生物，淀粉通常作為碳源。（2）恒溫培養(yǎng)箱能夠保證細(xì)菌生長最適溫度，故細(xì)菌數(shù)量增長較快。在另一平板上接種等量無菌水作為對照，判斷細(xì)菌數(shù)量。（3）細(xì)菌培養(yǎng)產(chǎn)生的單個肉眼可見的子細(xì)胞群體稱為菌落，生態(tài)系統(tǒng)中稱為種群，去掉18這個偏差較大組，其他3組（42、38、55）取平均值為45。用稀釋涂布平板法進行微生物計數(shù)時，由于兩個或多個細(xì)胞連在一起時在平板上觀察到的是一個菌落，所以實際活菌數(shù)目要比測得的數(shù)目多。（4）為了純化獲得的H細(xì)菌，在微生物的實驗室培養(yǎng)過程中，關(guān)鍵是無菌操作；實驗結(jié)束，為避免微生物污染環(huán)境和操作者，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌后才能倒掉。12.工業(yè)上常用酵母菌來改善釀造醬油的風(fēng)味，在稀釋發(fā)酵階段，由于添加了較多的鹽，抑制了大部分微生物的生長，而一些耐鹽酵母菌會繼續(xù)生長，發(fā)酵產(chǎn)生乙醇、有機酸等小分子物質(zhì)，增加醬油的風(fēng)味。其實驗小組從傳統(tǒng)發(fā)酵醬油中篩選并分離耐鹽酵母菌，請回答下列問題：（1）將酵母菌用于醬油發(fā)酵過程中，密封的發(fā)酵罐要留有一定的空間，其目的是__________________。（2）若用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，則培養(yǎng)基的pH需要調(diào)至__________。實驗室對培養(yǎng)基滅菌的常見方法是____________________。（3）篩選耐鹽酵母菌的培養(yǎng)基中需要加入青霉素，其目的是____________________，為了保證篩選出的酵母菌具有耐鹽性，培養(yǎng)基中還需要加入_________。酵母菌發(fā)酵產(chǎn)生的乙醇與_________（試劑）反應(yīng)會呈現(xiàn)灰綠色，該反應(yīng)可用于乙醇的檢驗。（4）在對菌液中的耐鹽酵母菌進行計數(shù)時，一般要將多個稀釋倍數(shù)的菌液分別涂布在平板上培養(yǎng)，其目的是____________________________________?！敬鸢浮?1)為酵母菌提供氧氣，以促進酵母菌的繁殖(2)中性或微堿性高壓蒸汽滅菌法(3)抑制細(xì)菌的繁殖一定濃度的食鹽溶液酸性重鉻酸鉀(4)保證能從中篩選出菌落數(shù)在30?300的平板進行計數(shù)【解析】（1）將酵母菌用于醬油發(fā)酵過程中，密封的發(fā)酵罐留有一定的空間，可以為