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文檔簡介

課程筆記I免疫學(xué)筆記

?第一章緒論

?一免疫學(xué)的基本概念

?1、免疫的含義;

?免疫(immunity):①對微生物感染的抵抗力和對同種微生物感染的特異性的防疫能力

(古典概念)②機(jī)體對自身和非自身的識別,并清除非自身的大分子物質(zhì),從而保持機(jī)體

內(nèi)、外環(huán)境平衡的一種生理學(xué)反應(yīng)(現(xiàn)代概念)/免疫平衡

?immunis:免除^艮役——免除苛稅——免除疾病

?-免疫學(xué)的由來及發(fā)展

?L免疫學(xué)的由來;

?①經(jīng)驗免疫學(xué)階段

?實例:天花(smallpox)-終身免疫&唯一被消滅;痂皮-干燥-病毒活力弱且病毒量少-

通過研沫(少量)吸收-形成抵抗力;接種人痘:痘漿

法(鮮)、漿苗法(乳汁)、旱苗法、痘衣法(病毒T殳透不過皮膚;慢速過程;相對

安全);開創(chuàng)免疫學(xué)新階段生苗一>

熟苗豬瘟兔化弱毒苗

接種牛痘:天花疫苗(牛痘病毒而非天花病毒)免疫學(xué)的開端(預(yù)防);人都疫苗不符

合當(dāng)代疫苗標(biāo)準(zhǔn),而牛痘符合。第一個疫苗

?2、免疫學(xué)的發(fā)展;

?①經(jīng)典免疫學(xué)初期

?主動免疫:用人工接種方法輸入非自身物質(zhì),剌激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生相應(yīng)的免疫力

?實例:巴斯德禽霍亂減毒疫苗、狂犬病疫苗、炭疽疫苗

?雞霍亂疫苗研制過程

?被動免疫:向機(jī)體直接輸入免疫力,包括細(xì)胞和各種免疫物質(zhì)

?②經(jīng)典免疫學(xué)成熟期

?免疫生物學(xué):用生物學(xué)苜遍規(guī)律解釋免疫現(xiàn)象(免疫分子基因及發(fā)育)——機(jī)制

?免疫勿懵:——?應(yīng)用

。免疫化學(xué):—如何清除

?免疫生理學(xué):―生?理學(xué)變化

?③現(xiàn)代免疫階段

?三免疫的相關(guān)內(nèi)容

?L免疫學(xué)的基本特征;

?識別自身和非自身一類風(fēng)濕:免疫抑制劑

?特異性

?免疫記憶性

?適應(yīng)性

?自我調(diào)節(jié)性

?2、免疫學(xué)的基本功能

?免疫防御

?IK念:免疫系統(tǒng)通過正常免疫應(yīng)答阻止或清除非自身物質(zhì)的功能

?免疫監(jiān)視

?免疫系統(tǒng)識別,殺傷和及時清除體內(nèi)突變細(xì)胞,感染細(xì)胞的功能

?免疫穩(wěn)定

?免疫系統(tǒng)經(jīng)常的清除損傷或衰老的自身細(xì)胞,以維持免疫機(jī)能在生理范圉內(nèi)的相對穩(wěn)定

?3、免疫的相關(guān)概念

?主動免疫

?天然的-自然得病

?人工的-注#掖苗

?被動免疫

?天然的-母初乳中免疫蛋白

?人工的-抗血清

?免疫學(xué)的應(yīng)用

?1、積極的應(yīng)用

?診斷疾病

?免疫診斷:應(yīng)月免疫學(xué)理論技術(shù)和方法診斷各種疾病和測定免疫狀態(tài)。主要用于肝炎檢

測,性病監(jiān)測,腫瘤檢測,孕檢等

?治療疾病

?免疫治療:采月免疫制劑或相關(guān)產(chǎn)品,治療因疾病或機(jī)體低下或亢進(jìn)導(dǎo)致的各種疾病

?舉例

?抗蛇毒血清

?破傷風(fēng)抗體

?消滅疾病

?天花

?2、消極的應(yīng)用

?免疫排斥

?過敏反應(yīng)

?自身免疫病

?炎癥風(fēng)暴

?思考

?為什么免疫力是最好的醫(yī)生

?五免疫學(xué)科的發(fā)展

學(xué)二章免疫系統(tǒng)。

?-免疫器官

?1、中樞免疫器官(一級淋巴器官)

?免疫細(xì)胞分化成熟的場所

?類型

?(1)骨髓(Bonemarrow)

?B細(xì)胞成熟的場所,出生后所有血細(xì)胞的來源

?類型

?紅骨髓

?幼年個體主要是紅骨髓

?黃骨髓

?成年個體大部分轉(zhuǎn)換為黃骨髓

?功能

?紅骨髓具有造血功能。

?(2)胸腺(thymus)

?t細(xì)胞分化成熟的場所

?(3)法氏囊(bursaoffabricius)

?只存在于禽類的特有淋巴器官,來自骨髓的淋巴干細(xì)胞在法氏囊誘導(dǎo)分化為成熟B

細(xì)胞

?2、外周免疫器官(二級淋巴器官)

?(1)淋巴結(jié)

?淋巴結(jié)內(nèi)T細(xì)胞約占75%,B細(xì)胞占25%

?短期腫大是好喜,長期是壞事

?收分裂原或絲裂原刺激后開始分裂分化

?其他分子受體(細(xì)胞因子受體,EB病毒受體)

?淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化:當(dāng)淋巴細(xì)胞收到抗原刺激后,pr和核酸合成,體積變大,

轉(zhuǎn)化為可分裂淋巴母細(xì)胞,進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為致敏淋巴細(xì)胞的現(xiàn)象

?淋轉(zhuǎn)實驗

?表面抗原

?主要組織相容性復(fù)合物抗原

?白細(xì)胞抗原

?白細(xì)胞分化抗原(leucocytedifferentiationantigen)

?CD分子(clusterofdifferentiation)

?以單克隆抗體鑒定為主的方法,將不同實驗單抗所識別的同一分化抗原歸

為同一分化群的簡稱

?特征

?B淋巴細(xì)胞(骨髓,法氏囊)

?分化-環(huán)境決定方向

?分化時期

?抗原非依賴期(造血干細(xì)胞-成熟B細(xì)胞)

?抗原依賴期(成熟B細(xì)胞-抗體)

?反正有IgGME

?NK細(xì)胞

?研究發(fā)現(xiàn)POMC可以刺激NK細(xì)胞的活性

?POMC含且受心恬形響

?NK細(xì)胞療法屬于免疫消滅

?NK細(xì)胞的激活

?抗原呈遞細(xì)胞()

?具有攝取,加工,處蜥原能力,并將抗原信息呈遞給其他免疫細(xì)胞(淋巴細(xì)胞),的一

類免疫細(xì)胞

?此處APC區(qū)別于細(xì)胞生物學(xué)中促進(jìn)分裂周期向后期轉(zhuǎn)移

?類型

?專職APC:單核細(xì)胞,巨噬細(xì)胞,樹突細(xì)胞,B細(xì)胞

?單核吞噬細(xì)胞系(粘附細(xì)胞)-主要的APC

?巨噬(mcccrophage)

?功能:直接消滅異物,并呈遞給T細(xì)胞

?極化

?Ml路徑-經(jīng)典活化路徑-介導(dǎo)處理外來異物,遞逞-與TH1有關(guān)

?M2路徑-免疫修復(fù),調(diào)節(jié)作用

?TH2相關(guān)

?不同位力中的名稱

?肺-塵細(xì)胞

?肝-枯否細(xì)胞(kupffer)

?骨-破骨細(xì)胞

?神經(jīng)-小膠質(zhì)細(xì)胞

?胎盤-霍大鮑爾細(xì)胞

?樹突狀細(xì)胞DC

?來源

?淋巴樣干細(xì)胞

?髓樣干細(xì)胞

?定義

?一類成熟時具有許多艇樣突起,能夠溺11、攝取和加工外源性抗原并將抗

原肽提呈給初始T繳胞并誘導(dǎo)T級稀舌化增殖的、功能最強(qiáng)的APCO

?非專職APC:內(nèi)皮細(xì)胞,上皮細(xì)胞,間皮細(xì)胞

?內(nèi)皮細(xì)胞,上皮細(xì)胞,間皮細(xì)胞

?血管內(nèi)皮細(xì)胞

?腸道上皮細(xì)胞-開放空間

?間皮細(xì)胞-封閉空間薄膜

?其他免疫細(xì)胞及結(jié)構(gòu)

?粒細(xì)胞

?一類細(xì)胞中含有特殊染色顆粒的白細(xì)胞

?類型

?中性顆粒細(xì)胞

?胞內(nèi)有磷酸酶,吞噬素,與細(xì)直感染有關(guān)

?嗜酸性粒細(xì)胞

?含磷酸酶,過氧化氫酶,與寄生3感染等免疫有關(guān)

?嗜堿性粒細(xì)胞

?含肝素,組胺等,與過敏等免疫有關(guān)

?辨別方式

?可用瑞氏染料分辨三種細(xì)胞

?中性隨胞染色后呈無色或淡紅色;嗜酸性細(xì)胞染色后呈紅色;嗜堿性細(xì)胞染

色后呈藍(lán)色。

?功能

?趨化作用

?白細(xì)胞沿濃度梯度向病毒,細(xì)菌等非己物質(zhì)定向移動

?吞噬作用

?機(jī)體免疫細(xì)胞識別異物并將其吞入和消滅的功能(嗜堿性粒細(xì)胞則往外排)

?殺菌作用

?肥大細(xì)胞

?紅細(xì)胞

?血液中數(shù)量最多一類血細(xì)胞

?攜帶氧氣和免疫功能

?參與凝血過程(免疫粘附-物理防御)

?Tip

?白細(xì)胞

?淋巴細(xì)胞

?單核細(xì)胞

?粒細(xì)胞

?三免疫分子

?類型

?干擾素,白介素,腫瘤壞死因子

?機(jī)體內(nèi)大都免疫因子屬于細(xì)胞因子

?細(xì)胞因子風(fēng)暴(炎癥風(fēng)暴的本質(zhì))

?了解-選擇題,判斷

?第三章抗原

?一抗原(antigen,Ag)概念;一類能刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)使之產(chǎn)生特異性免疫應(yīng)答,并能與相應(yīng)免

疫應(yīng)答產(chǎn)物在體內(nèi)外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)

?變應(yīng)原

?變態(tài)反應(yīng)(過敏反應(yīng))

?耐受原

?免疫耐愛反應(yīng)

?超抗原

?自身免疫病&t細(xì)胞免疫耐受

?金黃葡萄球菌A蛋白

?二抗原的性質(zhì)與相關(guān)名詞

?1、抗原的性質(zhì);

?免疫原性

?有些外來物可能沒有

?定義:指一種物質(zhì)免疫機(jī)體后促使機(jī)體產(chǎn)生抗體或激活淋巴細(xì)胞產(chǎn)生免疫應(yīng)答的特性

?反應(yīng)原性

?免疫沉淀反應(yīng)實驗

0:標(biāo)準(zhǔn)抗體;1:標(biāo)準(zhǔn)抗原

2.3.4.5.6:待測血清

?血細(xì)胞凝結(jié)-免疫反應(yīng)

A抗體B抗體

?2、相關(guān)名詞

?完全抗原

?免疫原性和反應(yīng)原性

?半抗原(hapten)

?無免疫原性

?3、影響抗原免疫原性的因素

?抗原本身

?異物性

?種系關(guān)系越遠(yuǎn),抗原性越高

?抗原化學(xué)顆

?PR>脂,糖,核酸(免疫原性)

?物理狀態(tài)

?顆粒型>可溶性

?分子量大小

?>10kd,完全抗原

?4kd<,半抗原

?結(jié)構(gòu)復(fù)雜性

?含苯環(huán)AA-免疫原性強(qiáng)口

?苯環(huán):苯丙氨酸,酪氨酸,色氨酸;

?雜環(huán):組氨酸,絲氨酸,脯氨酸

?添力唯劑與否

?免疫方法

?口服,皮內(nèi),皮下,肌肉,靜脈,免疫次數(shù)

?機(jī)體方面有關(guān)因素

?種系,品系,年齡

?三抗原分類

?1、天然抗原

?自己抗原(免疫系統(tǒng))

?晶狀體

?大腦組織

?男性生殖系統(tǒng)

?非己抗原

?異原蛋白,糖類,脂類,核酸

?Lps脂多糖

?入侵微生物

?細(xì)菌:0、K、H抗原(菌體抗原、莢膜抗原、菌毛抗原)

?大腸桿菌0157血清型

?病毒

?無囊膜:甲肝病毒口,脊髓灰質(zhì)炎病毒口

?有囊膜:新冠病毒口,流感病毒口

?神經(jīng)氨酸酶蛋白NA

?血凝素HA

?其他

?2、人工抗原

?合成抗原:按一定aa序列合成具有抗原特性大分子多肽

?抗體制備:合成多肽抗原

?結(jié)合抗原:將半抗原與載體相連接使其具有完全抗原的特性

?基因工程抗原:將編碼免疫原性aa序列的基因進(jìn)行克隆并導(dǎo)入相應(yīng)表達(dá)載體,獲得基因工

程抗原

?在真核系統(tǒng)中進(jìn)行

?四抗原決定簇

?1、抗原決定簇定義

?AD/epitope

?離開載體變原,故不用來做一

四抗原決定簇

1概念

抗原決定簇:在抗原分子表面或其他部位的具有一定組成和結(jié)構(gòu)

的,能決定抗原特異性的特殊化學(xué)基團(tuán)。

Anantigenmayhavemorethanonedeterminant,

eachbindingaspecificantibodymolecule

一個多肽決定簇含5-6個氨基酸殘基;一個多概決定簇含

小_5-7金單班J一個核酸半抗原決定簇含6-8個核甘酸。

?2、抗原決定簇的特性

?不是整個分子起作用(抗原決定簇)

?決定簇決定抗原特異性

?抗原分子_L可能具有多個決定簇(交叉性)

?Ag的交叉反應(yīng)

?指抗體或致敏淋巴細(xì)胞對具雕同噓似硒的不同順均具有反應(yīng)性

?舉例鏈球菌

特算性反應(yīng)交叉反應(yīng)無反應(yīng)

抗體X抗體Y抗體Z抗體X抗體Y抗體Z抗體X抗體Y抗體Z

cnnribM”

友位X友也Y襄位Z友位Y友位Z'

?交叉反應(yīng)反應(yīng)程度較弱

?3、抗原決定簇種類

?結(jié)構(gòu)分類

?構(gòu)象決定簇

?序列上不相連的多糖或者多肽,由空間構(gòu)象形成的決定基,見王生細(xì)胞受體或叁抗體

識別的決定基,一般位于分子表面,主要是B細(xì)胞識SJJ

?JI質(zhì)序決定簇

?一段序列相連的氨基酸片段,又稱線性決定基,多位于抗原分子的內(nèi)部,主要是T

細(xì)胞識別基

?功能分類

?功能決定簇:位于分子表面易被B細(xì)胞受體或者抗體識SU的決定基

?隱蔽決定簇:位于分子內(nèi)部,不能與B細(xì)胞受冰或者抗體結(jié)合的表位

?識別細(xì)胞分類

?T細(xì)胞決定基:由T細(xì)胞的TCR識別結(jié)合的表位

?B細(xì)胞決定基:由B細(xì)胞的BCR識^結(jié)合的表位

?4、抗原決定簇的影響因素(qlbfx)

?親水特性

?兩親性

?表面可及性

?分子運動性

?序列多變性

?抗原漂移

?指由基因組發(fā)生突變導(dǎo)致抗原的小幅度變異,不產(chǎn)生新的亞型,屬于量變,沒有質(zhì)

的變化。

?抗原轉(zhuǎn)換

?指由基因組窗超I起的大幅度變異,導(dǎo)致新的亞型的出現(xiàn)

?五疫苗(vaccine)

?1、疫苗的定義

?疫苗:凡接種動物后能產(chǎn)生自動免疫、預(yù)防疾病的一類生物制劑均稱為疫苗

?疫苗(抗原物質(zhì)+佐劑)

?2、疫苗的分類(ccyd)

?常規(guī)疫苗(多)

?活疫苗

?缺點:不安全

?風(fēng)疹毛

?死苗

?物理、甲醛

?乙腦疫苗

?對聯(lián)多價苗

?百白破三聯(lián)苗

?HPV二價苗,四價苗

?價:同種疾病不同血清型,抗原決定簇;聯(lián):不同疾病

?重組疫苗

?基因缺失苗

?將病原細(xì)胞或病毒中與致病性有關(guān)物質(zhì)的基因序列除去或失活,使之成為無毒株或

弱毒株

?載體疫苗

?腺病毒

?將編礙病原體有效免疫原的基因插入載體基因組中

?陳薇---新冠疫苗

?優(yōu)點,保護(hù)效力強(qiáng)

?缺點,安全問題

?亞單位疫苗

?基因工程抗原肽

?化學(xué)合成肽

?DNA疫苗

?工佐劑作用原理

?佐劑:單獨使用時一般沒有免疫原性,與抗原物質(zhì)合并使用時,能非待異性地增強(qiáng)抗原物

質(zhì)的免疫原性、增強(qiáng)機(jī)體的免疫應(yīng)答或改變機(jī)體免疫應(yīng)答類型的物質(zhì)

?類型(wyhy)

?無機(jī)物型

?氫氧化鋁,明研

?性價比高

?有機(jī)物型

?微生物及其代謝物

?合成佐劑

?油佐劑

?科研用多

?佛式佐劑

?完全(+死的分枝桿菌)

?不完全

?作用機(jī)理

?增加抗原分子的表面積,提高抗原物質(zhì)的免疫原性

?延長抗原在體內(nèi)的存留時間

?佐劑的炎癥效應(yīng)

?第四章抗體

?一、抗體與免疫球蛋白、佐劑的定義

?1、抗體(antibody,ab)的概念

?機(jī)體免疫細(xì)胞被抗原激活后,由分化成熟的終末b細(xì)胞(漿細(xì)胞~一核糖體旺盛)合成,分

泌的能與抗原特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白,是b細(xì)胞識別抗原之后增殖分化為漿

細(xì)胞所產(chǎn)生的一種蛋白質(zhì)

?2、免疫球蛋白概念

?發(fā)現(xiàn)

?北里

?白喉——白喉桿菌毒素

?Y區(qū)有明顯的上升

?定義(ig)

?具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的球蛋白

?存在形式

?膜型(mlg)b細(xì)胞膜上的抗原受體

?分泌型(sig)分泌進(jìn)入體液,介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答

?抗體只有一種哦

?與抗體的異同

?抗體針對抗原,需要抗原刺激,屬于球形蛋白

?免疫球蛋白不一定需要抗原刺激

?多發(fā)性骨髓瘤

?不具備免疫功能的球蛋白???

?3、抗體與免疫球蛋白的關(guān)系

?免疫球蛋白>抗體

?二、免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)與功能

?L免疫球蛋白的基本結(jié)構(gòu)

?兩種鏈

?ffil

?H

?2

?50-75kd

?不同類型

?丫、M&£

?G、A、M、D、E

?以上——對應(yīng)

?輕連

?L

?2

?25kd

?類型

?K、入

?三個結(jié)構(gòu)區(qū)

?A可變區(qū)(V區(qū))

?氨基酸多變性~結(jié)合

?cdr互補(bǔ)決定區(qū)和抗原決定簇特異性互補(bǔ)結(jié)合

?表位~抗原決定簇

?fr框架區(qū)為結(jié)合提供支撐

?B恒定區(qū)(c區(qū))

?c校鏈區(qū)

?指免疫球蛋白重鏈CHI和CH2功能區(qū)之間的區(qū)域。含大量脯氨酸,具有彈性和柔

韌性,便于抗體在不同的角度與抗原結(jié)合

?其他結(jié)構(gòu)(并非都有)

?連接鏈(j)

?能連接兩個或兩個以上免疫球蛋白單體成為多聚免疫蛋白的結(jié)構(gòu)體的多肽

?分泌片(sp)

?為一種含糖的肽鏈,由粘膜上皮細(xì)胞合成和分泌,以非共價形式結(jié)合到二聚體上,

并一起被分泌到粘膜表面。分泌片具有保護(hù)分泌型IgA的較鏈區(qū)免受蛋白水解酶降

解的作用,并介導(dǎo)IgA二聚體從粘膜下通過粘膜等細(xì)胞到粘膜表面的轉(zhuǎn)運

?iga——口控粘膜

?2、免疫球蛋白的功能區(qū)結(jié)構(gòu)

?①抗原結(jié)合區(qū)VH,VL

?②遺傳標(biāo)志區(qū)CH1,CL

?決定免疫球蛋白的遺傳特性

?③補(bǔ)體結(jié)合區(qū),決定免疫球蛋白穿過胎盤的區(qū)域CH2

?采價分子可與此區(qū)域結(jié)合,發(fā)揮清除抗原的免疫作用(本身不具有清除功能)

?④細(xì)胞結(jié)合區(qū)CH3

?調(diào)理作用

?ADCC作用

?抗原依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用

?介導(dǎo)1型超敏反應(yīng)

?肥大細(xì)胞、嗜堿性細(xì)胞~過敏

?二抗概念

?羊抗鼠抗

?3、免疫球蛋白的酶解結(jié)構(gòu)

?三、五種免疫球蛋白種類與特性

?IgG

?單體

?血液中最多

?四種亞型

?唯一可以通過胎盤的雷白,通過ch2補(bǔ)體結(jié)合區(qū)

?出現(xiàn)在感染中,后期或恢復(fù)期

?感染后痊愈可以檢測igG,正在感染需要per?檢測核酸

?spa(葡萄球菌a蛋白)---親和層析

?IgD

?單體

?膜結(jié)合型,分泌型

?mlgd是b細(xì)胞成熟的標(biāo)志,激活后就沒有了

?IgA

?二聚體

?血清型、分泌型

?黏膜

?單體

?ch4結(jié)構(gòu)

?變態(tài)反應(yīng)

?:M

?五聚體分子量最大

?傳染病早期~檢測

?有一個CH4結(jié)構(gòu)(橙色)

?四、抗體的功能

?特異性結(jié)合抗原(中和)

?流感裂解苗

?免疫調(diào)理

?免疫溶解

?抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒作用(ADCC)

?五、人工制備的抗體

?1、單克隆抗體

?定義:由單一克隆B細(xì)胞產(chǎn)生的,只識別抗原分子某T定抗原決定簇的特異性拗|

?制備

?hat去除b細(xì)胞和sp20細(xì)胞?h:次黃噤吟,a:氨基喋吟,t:胸腺嚏嚏核首

②單克隆抗體的制備流程

1將抗原第白注tt于小鼠

2分再相應(yīng)的B淋巴韁蜒

3將小敏骨挈盲細(xì)!SSP2g2中B淋巴細(xì)胞射

色笠得融合后細(xì)推

4用HAT培除基在瞅含后細(xì)旭中暗選SP20與B

留范的融臺雜交信習(xí)范在法培養(yǎng)基上,未駐

臺的家豐祖悒和骷合的具有周件枝的緞范都奐

死亡,RWM臺的雜件細(xì)推才能生長

5大量培養(yǎng)雜交墻沮范培養(yǎng)

2M

也將.暗選能分注?目標(biāo)單競磯體的雜交信

習(xí)覽

7雜交?韁悒在體外或小鼠體內(nèi)大規(guī)樽培年或

叫標(biāo)i培增殖

8收集雜交后韁境的培養(yǎng)液井梃純.最終在西

大量的畢克國無悻

?dna合成:從頭合成(a可抑制),只能存在補(bǔ)救合成的生存

?關(guān)鍵環(huán)節(jié)

?只有雜交瘤細(xì)胞能在hat培養(yǎng)基存活

?b細(xì)胞是原代細(xì)胞,傳代后不久死亡

?sp20不能補(bǔ)救合成,因為沒有次黃瞟吟~鳥瞟吟磷酸轉(zhuǎn)移酶

?產(chǎn)多種抗體雜交瘤細(xì)胞篩選

?優(yōu)勢X缺點

?診斷單抗強(qiáng)于多抗,而治療弱之

?2、多克隆抗體

?定義:抗原免疫動物后,從動物血清中可以獲得含有不同B淋巴細(xì)胞克隆產(chǎn)生的一對抗原

上不同抗原決定簇的多種類型的抗體的總稱。

?3、基因工程抗體

?基因工程抗體

?嵌合型鼠源抗體

?基因工程人源化抗體

?單鏈抗體

?雙特異性抗體

?六、抗體的免疫學(xué)應(yīng)用

?免疫熒光技術(shù)

?直接免疫熒光法

?一抗熒光

?間接免疫熒光法

?二抗熒光

?原理

?酶聯(lián)免疫技術(shù)

?ELISA~雙抗體夾心法(直接)

?定義:指用偶聯(lián)酶的抗體或者抗原與待測樣品中抗原或者抗體進(jìn)行特異性結(jié)合,再在抗

原抗體反應(yīng)體系中加入酶相應(yīng)的底物,酶作用于底物顯示出顏色反應(yīng),最終根據(jù)反應(yīng)體

系顯色產(chǎn)物的量,從而對待測樣品中抗原或抗體進(jìn)行定性或者定量分析的一種免疫技術(shù)

?hrp辣根過氧化酶

?種類

?測定抗原

?直接法

?將抗原或者抗體先直接固定在固相載體上,之后加入酶標(biāo)記的抗體,從而測定

抗原或者抗體總量

?雙抗體夾心

?直接法

?間接法

?定義:將特異性抗體吸附在固相載體(聚率乙烯制成的96平板的孔內(nèi)),

然后加待測樣品,若樣品中有相應(yīng)抗原,則與抗體在載體表面形成復(fù)合物。

洗滌后加入酶標(biāo)抗體,后者通過抗原也結(jié)合到載體的表面。洗去過剩的標(biāo)

記抗體,加入酶的底物,在一定時間內(nèi),經(jīng)酶催化產(chǎn)生的有色產(chǎn)物的量與

溶液中抗原含量成正比,可用通過分析顏色計算樣品中抗原含量(直接

法)。

?金標(biāo)記抗體常偶聯(lián)老鼠蛋白,與老鼠蛋白抗體和整體結(jié)合

?c是對照,正常的

?競爭法

?常見于檢測抗原,待測抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合,根據(jù)結(jié)合于

固相的酶標(biāo)抗原量與受檢抗原的量呈反比,計算出樣品中待測抗原含量

?測定抗體

?間接法

?將抗原先直接固定在固相載體上,之后加入含抗體的待檢樣品,再用酶標(biāo)記

的抗抗體去辨識樣品抗體,從而測定樣品中抗體的含量。

?免疫放射技術(shù)

?單ma

?雙rna

?免疫膠體金技術(shù)

?應(yīng)用(可不在實驗室做)

?雙抗體夾心法(hiv,hcg)

?hcg絨毛促性腺激素~早早孕

?tip

?蜥毒素一抗破傷風(fēng)毒素一抗體

?第五章補(bǔ)體

?一補(bǔ)體的概述

?1、補(bǔ)體的發(fā)現(xiàn);

?新鮮血清中加入細(xì)菌,細(xì)菌聚集,逐漸變形,溶解(血清無細(xì)胞~沉淀,離心)

?經(jīng)過60°c處理三十分鐘發(fā)現(xiàn)加入細(xì)菌,細(xì)菌凝集..未溶解

?經(jīng)過60°c處理三十分鐘發(fā)現(xiàn)加入其他血清,加入細(xì)菌,細(xì)菌凝集,溶解

?2、補(bǔ)體的概念;

?補(bǔ)體(c):存在于人、脊椎動物血清或組織液、細(xì)胞膜表面的一類不耐熱,非專一性的,活

化后具有酶活性,能補(bǔ)充完成抗體作用的蛋白質(zhì)的總稱

?區(qū)別:不需要抗體刺激,無特異性,是醐系統(tǒng)

補(bǔ)體與抗體的區(qū)別

抗體補(bǔ)體

產(chǎn)生方式抗原刺激產(chǎn)生體液中天然存在

免疫類型特異性非特異性

化學(xué)本質(zhì)主要是Y球蛋白主要是。球蛋白

組成類型不是酶系統(tǒng)是酶系統(tǒng)

?3、補(bǔ)體的成分;

?補(bǔ)體的固有成分

?經(jīng)典途徑

?旁路途徑

?甘露糖結(jié)合凝寞素激活途徑

?共同末端通路

?調(diào)節(jié)蛋白(負(fù)反饋)

?受體

?4、補(bǔ)體的命名;

?b大片段,a小片段

?5、補(bǔ)體的性質(zhì)

?糖蛋白

?溫度敏感

?含量穩(wěn)定,某種疾病變動

?含量物種種屬差異

?主要由肝細(xì)胞,巨噬細(xì)胞產(chǎn)生

?二補(bǔ)體的激活途徑

?1、經(jīng)典途徑;(cl激活途徑)

?識別階段

?ch2結(jié)合

?-表示有活性

?活化階段

?膜攻擊階段

?參與成分與Cl有差異

?經(jīng)典激活途徑:由抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合Clq啟動激活的途徑

?2、旁路途徑;(C3激活途徑)

?旁路途徑:

?3、MBL途徑;(甘露糖結(jié)合凝集素激活途徑)

?MBL激活途徑:指細(xì)菌、病毒表面的甘露糖殘基與血清中的甘露糖凝集素(MBL)結(jié)合,進(jìn)

而激活C4、C2、C3的活化途徑。

?補(bǔ)體激活三條途徑間的關(guān)系

?補(bǔ)體的激活:正常條件下以無活性狀態(tài)存在的補(bǔ)體,在某些補(bǔ)體激活物質(zhì)的作用下

的各成分發(fā)生了級聯(lián)反應(yīng),從而表現(xiàn)出補(bǔ)體的各種生物學(xué)特征。

?三補(bǔ)體激活途徑的調(diào)節(jié);

?補(bǔ)體的自身調(diào)控

?補(bǔ)體調(diào)節(jié)因子的調(diào)控

?mac

?四補(bǔ)體的生物學(xué)活性

?細(xì)胞毒和融菌,殺菌作用

?細(xì)胞毒作用(mac):

?調(diào)理作用,抗感染

?介導(dǎo)調(diào)理作用:

?免疫復(fù)合物清除作用

?清楚免疫復(fù)合物

?炎癥介質(zhì)作用

?參與炎癥反應(yīng):

?趨化作用

?過敏毒素

?激肽樣作用

?第六章免疫應(yīng)答(未)

?免疫應(yīng)答的含義和分類

?免疫應(yīng)答:指機(jī)體免疫系統(tǒng)受抗原剌激后,免疫細(xì)胞識別異己成分,發(fā)生活化、增殖、分化或

者凋亡等反應(yīng),最終產(chǎn)生一系列免疫學(xué)生物效應(yīng)的全過程。

?分類

?特異性免疫應(yīng)答

?體液免疫應(yīng)答

?體液免疫應(yīng)答:當(dāng)抗原進(jìn)人機(jī)體后,可剌激B淋巴細(xì)胞使惠嫩,發(fā)生增殖、分化

漿細(xì)胞,產(chǎn)生與該抗原結(jié)合的抗體,最終清除抗原的一種免疫應(yīng)答

?過敏反應(yīng)屬于體液免疫

?細(xì)包免疫應(yīng)答

?細(xì)胞免疫:當(dāng)機(jī)體受到抗原異物剌激后,T細(xì)胞會增殖、分化為效應(yīng)T細(xì)胞。當(dāng)相

同抗原再次入侵機(jī)體時,效應(yīng)T細(xì)胞對抗原產(chǎn)生直接暴傷并清除抗原的一種免疫應(yīng)

?非特異性免疫應(yīng)答(主要)

?物理防御屏障

?外在防御屏障

?皮膚(最大的非特異性免疫器官,黏膜

?腹瀉早期好,持續(xù)時間久不好

?纖毛的擺動

?胃酸

?內(nèi)部防御屏障

?血腦,血胎屏障

?炎癥,吞噬作月

?非特異性免疫分子的作用(分泌物)

?比較

兩種免疫應(yīng)答的比較

先天―挈一得性免痕應(yīng)家

長刖選化中連川號/抗原,JC

料系具有.可道傳個體構(gòu)有,不可遺傳

五比雙記憶,作用時間效有先提記憶.作用時間長

粘腹和上皮M般.4中僅地.NKiv也Tiwlt.BM電.APC

不什時將友抗原(反應(yīng)廣迂)針時將文抗原(反應(yīng)構(gòu)異代)

作用迅速,篦國廣泛分抗原識別.增殖分化.政應(yīng)階段

?奐疫應(yīng)答的過程

?主要是提高特異性免疫應(yīng)答

?大部分特異性都需要t細(xì)胞

?TD抗原:需要T細(xì)胞輔助和巨噬細(xì)胞參與才能激活B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的抗原性物質(zhì)

?TI抗原:不需要胸腺輔助直接可以直接刺激B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的是TI抗原,也稱胸腺非依賴

性抗原。

?細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞(CTL)

?TDTH:效應(yīng)T細(xì)胞的一種,全名:遲發(fā)型超敏性T細(xì)胞

?初始t細(xì)胞的刺激(啟動階段)一t細(xì)胞增殖(活化增殖和分化階段)——活化的效應(yīng)細(xì)胞發(fā)揮

作用(效應(yīng)及穩(wěn)態(tài)復(fù)原階段)

?免疫應(yīng)答過程中抗原的遞呈

?流程

?抗原的攝取

?抗原的加工

?免疫原蛋白被泛素化,在蛋白水解酶下水解為免疫原性肽段

?免疫原性肽段與mhc分子的肽結(jié)合區(qū)形成螺旋結(jié)構(gòu),并被轉(zhuǎn)運到細(xì)胞膜表面供ter識

?抗原的遞呈

?麗類甄的

?內(nèi)源性~

?蛋白酶加工處理

?MHQ類分子結(jié)合

?刺激CD8+T組胞

?產(chǎn)生細(xì)胞免疫應(yīng)答

竭胞表面

TRM,QTAP.2MHCla.

?外源性~

?吞噬作用加工處理

?mheii類分子紜合

?刺激CD4+T組胞

?輔助b細(xì)胞產(chǎn)生抗體,參與體液免疫

?比較-

兩腫抗朦遞呈的比較

*”的外來機(jī)摩;?胞內(nèi)含成的自身執(zhí)

杭原的主要來源

再例環(huán)的KA面6身我身原質(zhì)餐生物機(jī)展

的白處理防加”中的*胞菜中的景自?體

抗原處理細(xì)胞?北APC所有的才械?電

■1C抗原肽結(jié)合部位存彳汨”敘面內(nèi)及網(wǎng)

MHC分子11<K

道呈對象CD4.TMit.CD8>T*胞

?細(xì)胞免疫應(yīng)答

?免疫效應(yīng)形式

?抗原刺激后致敏Tc細(xì)胞介導(dǎo)的特異性細(xì)胞毒作用(ct8)抗

原刺激后T細(xì)胞(Thl)引起的炎性反應(yīng)

w嬲蝴t

■(WTk-lILY

「、lb1。體液免疫

m-Q分*分懶肝丁2

1

■蚓喇《撕勰]Tm,(Q\

10?嵌氟引娜嬲在-D

z\細(xì)胞免疫IL2

_CD8*Tc-——m)-MM-J網(wǎng),

?CD4+T細(xì)胞活化的信號

?CD8+T細(xì)胞活化的信號

?生物學(xué)效應(yīng)

?抗腫瘤作用

?抗感染儂

?自身免疫

?組織移植拒絕反應(yīng)

?免疫排斥主要是細(xì)胞免疫

?過程

靜止Th

提呈

CTL一靶細(xì)胞]細(xì)胞

TD抗原+輔佐細(xì)胞TDTH-淋巴因子j[氫

活化Th

記憶T

輔助

靜止B細(xì)胞漿細(xì)胞

盛應(yīng)階段效應(yīng)階段

?體液免疫應(yīng)答

?過程

?初次活化

初次活化療止Th2

TD抗原一APC提呈—|

活化Th2—”記憶而|

1

砂止B細(xì)胞.?*漿細(xì)胞—*抗體?體液免疫

匚|記憶BhJfel

?再次活化

再次活化再次應(yīng)答

再次進(jìn)入機(jī)體記憶B細(xì)胞活化

TD抗原----作為APC廠漿細(xì)胞

為Th2為B細(xì)胞提供

提呈抗原活化的第二信號

靜止Th2及記憶Th2的活化

?B細(xì)胞活化的信號-雙信號刺激

?第一信號:抗原識別信號

?第二信號:協(xié)同剌激信號

胸膜依梭性抗原(TDAg)

?規(guī)律

?初次應(yīng)答在25天時接近低谷;再次應(yīng)答可以維持較高抗體量

?初次應(yīng)答

?①潛伏期長②產(chǎn)生的抗體濃度低③在體內(nèi)持續(xù)時間短④抗體與抗原的親和力低,以

IgM為主。

?再次應(yīng)答

?①潛伏期短,一般為1~3天,血液中即出現(xiàn)抗體②產(chǎn)生的抗體濃度高③在體內(nèi)持續(xù)時

間長④抗體與抗原的親和力高,以£為主。

?

?毒素中和

?調(diào)理作用

抗體與弱曹表川的展隔理的班旨絡(luò)合衫成吞耳體吞傻成.

到M4的F#上,并殺傷細(xì)層

核合

如卿I

抗體介導(dǎo)的調(diào)理作用

?ADCC作用

IgG與靶細(xì)胞表面NK細(xì)胞借助其F/R活化的N儂胞臊放穿犯鈾胞凋亡

相應(yīng)抗原決定?特m與鰭合于垓患上孔素、般粒圖等紈胞

異性結(jié)合的IgGF點結(jié)合哥物質(zhì)殺傷同細(xì)胞

NK細(xì)胞介導(dǎo)的ADCC作用

?活化補(bǔ)體

?第七章細(xì)胞因子

?-細(xì)胞因子的概念;

?細(xì)胞因子*(cytokine):是由細(xì)胞分泌的具有生物活性的蛋白或者多肽的郵

?細(xì)咆因子分泌方式

?自分泌:細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子主要作用于產(chǎn)生細(xì)胞因子的細(xì)胞本身,調(diào)節(jié)細(xì)胞因子生產(chǎn)細(xì)

胞本身和臨近同類鄴胞的活性,多數(shù)在局部發(fā)揮作用。

自分分(autocrine)

?旁分泌

IL-2

旁分泌(paracrine)

?內(nèi)分泌:細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子通過血液循環(huán)作用于遠(yuǎn)端細(xì)胞,從而調(diào)節(jié)機(jī)體生長、發(fā)育和

生理機(jī)能的方式

內(nèi)分泌endocrine遠(yuǎn)距離作用

?

?正常靜止?fàn)顟B(tài)的細(xì)胞必須經(jīng)刺激和活化后,才合成和分泌CK()

?CK均為相對的分泌型糖蛋白或者多肽

?細(xì)胞因子可以旁分泌、自分泌或內(nèi)分泌的方式發(fā)揮作用

?CK的分泌是一個短促的、自我限量的過程

?CK需與靶細(xì)胞上特異的受體結(jié)合后,才能介導(dǎo)生物學(xué)效應(yīng)

?CK的作用方式具有多效性、重疊性、拮抗性、協(xié)同性等特點

?多效性:一種細(xì)胞因子可以作用于不同種細(xì)胞,發(fā)揮多重免疫學(xué)效應(yīng)

?IL4

??■性:不同細(xì)胞因子獨立作用對同種細(xì)胞蟒相似的作用

?IL2/IL4/IL5-B

?姆同性:不同細(xì)胞因子同時作用于同種細(xì)胞發(fā)揮相似作用且作用效果有所增進(jìn)

?IL4/IL5

?拮抗性:不同細(xì)胞因子作用于同種細(xì)胞發(fā)揮相反的作用

?IL4/INF-Y

三、一些主要類型的細(xì)胞因子(激素可以消炎)

?L干擾素(inf)

?定義:細(xì)胞在病毒或其他干擾素誘例的作用下,產(chǎn)生的一種低分子量的可溶性糖蛋白.進(jìn)

入其他未感染細(xì)胞時,可誘導(dǎo)該細(xì)胞產(chǎn)生抗病毒蛋白,從而抑制其他病毒的復(fù)制

?cona伴刀豆凝素A

?是一種植物血凝素

?分類

?對細(xì)胞表面干擾素受體的不同

?I型干擾素3、伉3)

?n型干擾素(丫)

?m型干擾素(入)

?根據(jù)產(chǎn)生細(xì)胞的不同

?a干擾素(白細(xì)胞產(chǎn)生)

?P干擾素(成纖維細(xì)胞產(chǎn)生)

?Y干擾素(淋巴細(xì)胞產(chǎn)生)

?活性

?抗病毒活性~間接

?抗細(xì)菌,寄生與活性

?抗腫瘤和抗增殖活性

?免疫調(diào)節(jié)活性

?機(jī)制

?干擾素甘方病毒,而是通過誘導(dǎo)細(xì)胞合成(AVP)發(fā)揮效應(yīng)。

素首先作用于細(xì)胞的干擾素受體,經(jīng)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等一系列生休過程,激活細(xì)胞基因表達(dá)多

o抗病毒蛋白主要包括7-5'A合成酶和蛋白激

酶等。前者降解病毒mRNA、后者抑制病毒多肽鏈的合成,使病毒復(fù)制終止。

干擾素合成干擾素作用

?2、白介素(il)

?定義:由白細(xì)胞產(chǎn)生的,能介導(dǎo)白細(xì)胞間及其他細(xì)胞間相互作用,具有免疫調(diào)節(jié)活性,調(diào)節(jié)細(xì)胞

的生長分化,介導(dǎo)嬸反應(yīng)的一類細(xì)胞因子.

?IL2JL6JL12較多

?3、TNF腫瘤壞死因子

?定義:由活化的單核/巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,能殺傷和抑制腫瘤細(xì)胞,促進(jìn)中性粒細(xì)胞吞噬,抗感

染等免疫功能的一類物質(zhì)

?4、群落刺激因子

?定義:一類能剌激不同的造血干細(xì)胞增殖、分化的一類免疫分子集落

?5、趨化性細(xì)胞因子

?定義:能吸引白細(xì)胞按照其濃度梯度進(jìn)行定向移行到發(fā)生免疫反應(yīng)部位的一類物質(zhì)的總稱

?第八章超敏反應(yīng)

?超敏反應(yīng)概念

?機(jī)體接受某些抗原剌激后,當(dāng)機(jī)體再次接觸同一抗原后,發(fā)生以生理功能紊亂或組織細(xì)胞病理

損傷為主的異常特異性免疫應(yīng)答(接觸過才會過敏)

?主要表現(xiàn)為對特定抗原的反應(yīng)增強(qiáng)

?超敏反應(yīng)類型

?i型(速發(fā)型)~普通過敏

?定義:由igE抗體介導(dǎo)的,肥大細(xì)胞及ms性粒細(xì)胞參與的,在再次接觸抗原后短時間內(nèi)發(fā)生

的超敏反應(yīng).

?特點

?發(fā)生快,消退快

?表現(xiàn)為生理功能紊SL,無嚴(yán)重細(xì)胞損傷

?明顯的個體差異和遺

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