生物化學(xué)試題及答案(14)

第十四章基因重組與基因工程

［測試題］

一、名詞解釋:

1.基因工程(geneticengineering)。

2.接合作用(conjugation)<.

3.轉(zhuǎn)化作用(transforation)。

4.轉(zhuǎn)導(dǎo)作用(transduction).

5.轉(zhuǎn)座(transposition)。

6.轉(zhuǎn)座子(transposons)。

7.同源重組(homologousrecombination)。

8.基本重組(generalrecombination)。

9.DNA克隆(DNAcloning)?

10.復(fù)制子(replicon)°

II.限制性核酸內(nèi)切能(restrictionendonuclease)。

12.回文結(jié)構(gòu)(palindrome)。

13.配伍末端(compatibleend)。

14.日的DNA(targetDNA)o

15.互補DNA(complementaryDNA；cDNA)。

16.克隆載體(cloningvector)o

17.表達載體(expressionvector)。

18.質(zhì)粒(plasmid)?

19.u一互補(alphacomplementation)。

20.基因組DNA文庫(genomicDNAlibrary)。

21.標(biāo)志補救(markerrescue)。

22.轉(zhuǎn)染(transfection)?

23.基因組DNA(genomicDNA)<>

24.感受態(tài)細胞(competentcell)。

25.聚合前鏈反應(yīng)(polymerasechainreaclion)。

26.cDNA文庫(cDNAlibrary)。

27.保守性轉(zhuǎn)座(conservativetransposition)?

28.復(fù)制性轉(zhuǎn)庫(duplicativetransposition)。

29.溶菌生長途徑(lysispathway)。

30.溶源生長途徑(lysogenicpathway)。

二、填空題:

31.自然界的常見基因轉(zhuǎn)移方式有一、一、一、—o

32.不同DNA分子間發(fā)生的共價連接稱為一有一、一兩種方式。

33.某些基因可以從一個位置移動到另一個位置，這些可移動的DNA序列包括一和

34.由—和—介導(dǎo)的基因移位或重排稱為轉(zhuǎn)座。

35.反轉(zhuǎn)錄病毒整合前可特異地識別.整合反轉(zhuǎn)錄病毒的cDNA的一，轉(zhuǎn)座酶可特異

識別轉(zhuǎn)座子的一，發(fā)生特異性整合。

36.基因工程的載體必須具備的條件有一、一、一。

37.限制性內(nèi)切核酸酶識別的核甘酸序列的個數(shù)為一、一和一，其切口有一端和

____端。

38.基因工程常用的載體DNA分子有—、—.和—o

39.一個完整的DNA克隆過程應(yīng)包括、、、、o

40.目的基因獲取的途徑或來源有一、一、一、一。

41.基因工程過程中重組體直接篩選法的方式有一、―、―o

42.基因克隆的原核表達體系的E,coli表達體系的表達載體應(yīng)符合的標(biāo)準(zhǔn)有:

43.基因克隆真核生物表達體系常見的有一、一、—表達體系。

44._根據(jù)重組體DNA的性質(zhì)不同，將重組體DNA導(dǎo)入受體細胞的方式有、、

____等。

45.MI3噬菌體基因間隔區(qū)插入E,coli的一段調(diào)節(jié)基因及—的N端一個氨基酸殘基的

編碼基因，其編碼產(chǎn)物為的a片段，突變型lac二E,coli可表達該酶的3片段。當(dāng)宿主

細胞與克隆我體同時表達兩個片段時，宿主細胞可使特異的作用物變?yōu)樘m色化合物，即稱為

46.如果M13的外源基因被插入到lacZ基因內(nèi)，則在含有X-gal的培養(yǎng)基上生長時會

出現(xiàn)一色菌落，如果在lacZ基因內(nèi)無外源基因插入，在同樣的條件下呈現(xiàn)一色菌落。

47.典型的插入序列是由一序列和一個—編碼基因構(gòu)成。

48.插入序列發(fā)生的轉(zhuǎn)型有和兩種形式。

49.當(dāng)細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時，—就可以從?個細胞（細菌）轉(zhuǎn)移到另

一細胞（細菌），這種類型的DNA轉(zhuǎn)移稱為一作用。

50.重組DNA技術(shù)中常用的工具酶有、、、o

三、選擇題：

A型題

51.關(guān)于接合作用正確的是

A.與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時，染色體DNA從一個細胞（細菌）轉(zhuǎn)移至另一細胞

（細菌）

B.細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時，某些較大質(zhì)粒DNA從一個細胞（細菌）轉(zhuǎn)移

至另一?細胞（細菌）

C.細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時，噬菌體DNA從一個細胞（細菌）轉(zhuǎn)移至另一

細胞（細菌）

D.細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時，所有類型的質(zhì)粒DNA從一個細胞（細菌）轉(zhuǎn)

移至另一細胞（細菌）

E.細胞與細胞或細菌通過菌毛相互接觸時，所有類型的噬菌體DNA從?個細胞（細菌）

轉(zhuǎn)移至另一細胞（細菌）

52.下列那種方式保證了免疫球蛋白的多樣性？

A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)染

C.轉(zhuǎn)位D.轉(zhuǎn)導(dǎo)

E.接合

53.微切割技術(shù)使目的基因可來源于下列那種物資？

A.真核細胞染色體DNAB.人工合成DNA.

C.CDNAD.G一文庫

E.C一文庫

54.基因工程的特點是：

A.在分子水平上操作，在分子水平上表達B.在分子水平上操作，在細胞水平

上表達

C.在細胞水平上操作，在分子水平上表達D.在細胞水平上操作，在細胞水平

上表達

E.以上均可以

55.實驗室內(nèi)常用的連接外源性DNA和載體DNA的酶是:

A.DNA連接酹B.DNA聚合酶I

C.DNA聚合酶IID.DNA聚合酶HI

E.反轉(zhuǎn)錄酶

56.用來鑒定DNA的技術(shù)是:

A.Northern跡B.SouthernE[1跡

C.Western印跡D.親和層析

E.離子交換層析

57.用來鑒定DNA的技術(shù)是:

A.Northern印跡B.Southern印跡

C.Western印跡D.親和層析

E.離子交換層析

58.重組DNA技術(shù)中常用的工具能下列那項不是：

A.限制性核酸內(nèi)切酶D.DNA連接酶

C.DNA聚合酶ID.RNA聚合酶

E.反轉(zhuǎn)錄酶

59.F-細胞與F+細胞混合培養(yǎng)，產(chǎn)生F+細胞的過程為：

A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)導(dǎo)

C.接合D.突變

E.轉(zhuǎn)位

60.DNA致癌病毒感染宿主:細胞后，使之發(fā)生癌變是因為發(fā)生了：

A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)導(dǎo)

C.接合D.轉(zhuǎn)座

E.轉(zhuǎn)位

61.關(guān)于基因工程的敘述，不正確的是：

A.根據(jù)實驗?zāi)康倪x擇目的基因B.選擇一個適合的載體

C.把目的基因和載體分別用限制性核酸內(nèi)切酶切開D.連接前只連接目的基因和載體

E.把重組體轉(zhuǎn)化到細胞中去的過程不是絕對的

62.限制性核酸內(nèi)切酶不具有那項特點：

A.僅存在原核細胞中B.用于重組DNA技術(shù)中的為I類酶

C.能識別雙鏈DNA中特定的堿基順序D.具有一定的外切酶活性

E.辨認(rèn)的核甘酸序列常具有回文結(jié)構(gòu)

63.限制性核酸內(nèi)切酶識別DNA中核甘酸序列的個數(shù)為：

A.4、5、6B.5、6、7

C.6、7、8D.4、6、8

E.4?8

64.如果某限制性核酸內(nèi)切酶識別的堿基序列為6個，則24Kb的一段隨機的DNA序列可

出現(xiàn)的切口數(shù)為：

A.4次B.5次

C.6次D.7次

B.B.依賴本身的酶系進行其DNA的復(fù)制

C.C.依賴宿主的酶系進行其DNA的轉(zhuǎn)錄

D.D.依賴宿主的酶系表達其蛋白質(zhì)外殼

E.E.當(dāng)入噬菌體從宿主細胞釋放出來，再感染另外的宿主時，可發(fā)生轉(zhuǎn)導(dǎo)作用

75.有關(guān)噬菌體的敘述那項不符合：

A.感染大腸桿菌時僅把DNA注入大腸桿菌內(nèi)B.有溶源和裂解兩種生活方式

C.溶源和裂解兩種生活方式可以相互轉(zhuǎn)變D.噬菌體是由外殼蛋白和DNA組裝而

成

E.當(dāng)從一個宿.主細胞群放出來，再感染另外宿主時，一定發(fā)生轉(zhuǎn)導(dǎo)作用

76.DNA克隆不包括下列那項步驟？

A.選擇一個適合的載體B.限制性核酸內(nèi)切酶在特異位點裂解質(zhì)粒和目

的基因

C.用連接酶連接載體DNA和目的DNA,形成重組體D.用載體的相應(yīng)抗生素抗性篩選

含重組體的細菌

E.重組體用融合法導(dǎo)入細胞

77.下列那項不能作為表達載體導(dǎo)入真核細胞的方法？

A.磷酸鈣轉(zhuǎn)染B.電穿孔

C.脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染D.顯微注射

E.氯化鈣轉(zhuǎn)染

78.下列那項不能作為基因工程重組體的篩選方法

A.抗藥性標(biāo)志選擇B.宿主菌的營養(yǎng)缺陷標(biāo)志補救

C.原位雜交D.Southern印跡PCR技術(shù)

79.下列那項不是重組體篩選的免疫化學(xué)方法的工作原理及特點：

A.將瓊脂培養(yǎng)板上的轉(zhuǎn)化子菌落經(jīng)蒸汽裂解釋放抗原

B.將固定目的基因編碼蛋白質(zhì)的抗血清聚乙烯薄膜覆蓋在裂解菌落上

C.再使用32P標(biāo)記的DNA探針與薄膜反應(yīng)

D.經(jīng)放射自顯影檢出陽性反應(yīng)菌落

E.免疫學(xué)方法特異性強.靈敏度高，尤其適用于選擇不為宿主菌提供任何選擇標(biāo)志的基因

80.重組DNA技術(shù)不能應(yīng)用于：

A.疾病基因的發(fā)現(xiàn)B.生物制藥

C.DNA序列分析D.基因診斷

E.基因治療

81.基因重組是指DNA分子的：

A.共價連接B.氫鍵連接

C.離子鍵連接D.交換

E.退火

82.下列那種藥物不能用基因工程的方法生產(chǎn)？

A.胰島素B.干擾素

C.白細胞介素D.性激素

E.促紅細胞生成素

83.DNA重組技術(shù)不能應(yīng)用于下列哪個方面？

A.產(chǎn)前診斷B.攜帶者測試

C.癥候前診斷D.遺傳病的易感性

E.傳染病的傳染性

84.一種可靠的DNA診斷學(xué)方法，下列那項是不必符合的？

A.能正確擴增靶基因IB.能準(zhǔn)確區(qū)分單.個堿基的差別

C.本底或噪聲低，不干擾DNA的鑒定D.便于完全自動化操作

E.方法簡便，易于推廣應(yīng)用

85.關(guān)于轉(zhuǎn)化錯誤的是：

A.受體細胞獲得新的遺傳表型B.外源DNA一定整合進受體細胞基因組

C.自然界中較大的外源DNA轉(zhuǎn)化幾率較低D.自然界中較大的外源DNA轉(zhuǎn)化幾率

較高

E.越大的外源DNA與染色體整合幾率越低

86.關(guān)于同源重組不正確的是：

A.同源重組不需要特異的DNA序列B.同源重組要求兩分子間序列必須相同

C.RecB.C.D具有內(nèi)切酶和解旋酶活性D.Holliday中間體的形成，是同源重組

的重要步驟

E.需要DNA連接酶參與

87.下列那種的是重組DNA技術(shù)中最重要的？

A.反轉(zhuǎn)錄酶B.堿性磷酸酶

C.末端轉(zhuǎn)移酶D.DNA聚合酶I

E.DNA連接酶

88.在分子生物學(xué)中，基為克隆主要指:

A.DNA的復(fù)制B.DNA的轉(zhuǎn)錄

C.DNA的剪切D.RNA的轉(zhuǎn)錄

E.RNA的剪接

89.在分子生物學(xué)中，重組DNA又稱為:

A.酶工程B.蛋白質(zhì)工程

C.細胞工程D.基因工程

E.DNA工程

90.基因工程中，不常用到的的是；

A.限制性核酸內(nèi)切酶B.DNA聚合酶

C.DNA連接隨D.逆轉(zhuǎn)錄酶

E.DNA解鏈酶

91.限制性核酸內(nèi)切酶酶切后的DNA末端最常見的是:

A.平頭末端B.3'突出末端

C.5'突出末端D.粘性末端

E.缺口末端

92.能識別DNA的特異序列,并在識別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類酶稱為:

A.DNA內(nèi)切隨B.限制性內(nèi)切核酸防

C.非限制性內(nèi)切核酸酶D.限制性外切核酸酶

E.非限制性外切核酸酷

93.cDNA是指:

A.在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補的DNAB.在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與DNA互補

的DNA

C.在體外經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補的RNAD.在體內(nèi)經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補

的RNA

E.在體內(nèi)經(jīng)反轉(zhuǎn)錄合成的與RNA互補的DNA

94.基因工程中通常使用的質(zhì)粒存在于:

A.細菌染色體B.酵母染色體

C.細菌染色體外D.酵母染色體外

E.以上均不是

95.質(zhì)粒的分子結(jié)構(gòu)是：

A.環(huán)狀雙鏈DNAB.環(huán)狀單鏈DNA

C.環(huán)狀單鏈RNAD.線狀雙鏈DNA

E.線狀單鏈DNA

96.聚合酶鏈反應(yīng)常?？s寫為：

A.PRCB.PER

C.PDRD.BCR

E.PCR

97.在已知DNA序列的情況下，獲取目的基因的最方便的方法是:

A.人工化學(xué)合成B.基因組文庫法

C.cDNA文庫法D.PCR法

E.從染色體DNA直接提取

98.E.coRI切割DNA雙鏈產(chǎn)生:

A.平端D.5'突出的粘性末端

C.3'突出的粘性末端D.鈍性末端

E.配伍末端

99.用于PCR反應(yīng)的酶是:

A.DNA連接航B.堿性磷酸酶

C.逆轉(zhuǎn)錄酶D.限制性內(nèi)切核酸酶

E.TaqDNA聚合酷

100.PsiI內(nèi)切酶切割目的基因后產(chǎn)生:

A.5'——GIAATTC——3'B.5'——GTTIAAC——3'

3'——CTTAAtG——5'3'——CAAtTTG——5'

C.5'——CTGCAIG——3'

D.5'——CTGICAG——3'

3'——GtACGTC——5'3'——GACtGTC——5'

E.5'——GAAITTC——3'

3'——CTTtAAG——5'

101.將PstI切割后的目的基因與同樣切割的載體DNA連接是：

A.同聚物加尾連接B.人工接頭連接

C.平端連接D.粘性末端連接

E.非粘性末端連接

102.限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA后產(chǎn)生：

A.3'磷酸末端和5'羥基末端B.5'磷酸末端和3'羥基末端

C.3'磷酸末端和5'磷酸末端D.3'羥基末端和5'羥基末端

E.3,翔基末端.5,羥基末端和磷酸

103.基因工程中使目的基因與載體拼接的酣是：

A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶

C.DNA連接酶D.RNA連接替

E.限制性核酸內(nèi)切酶

104.以質(zhì)粒為載體，將外源基因?qū)胧荏w菌的過程稱為:

A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)染

C.轉(zhuǎn)導(dǎo)D.轉(zhuǎn)位

E.感染

105.最常用的篩選轉(zhuǎn)化細菌是否含有質(zhì)粒的方法是:

A.營養(yǎng)互補篩選B.抗藥性篩選

C.免疫化學(xué)篩選D.原位雜交篩選

E.Southern印跡篩選

106.a互補篩選屬于:

A.抗藥性標(biāo)志篩選B.酶聯(lián)免疫篩選

C.標(biāo)志補救篩選D.原位雜交篩選

E.免疫化學(xué)篩選

107.進行同聚物加尾法連接目的基因和載體DNA時，需要那種能？

A.DNA聚合酶B.RNA聚合酶

C.引物酷D.逆轉(zhuǎn)錄酶

E.末端轉(zhuǎn)移酶

108.確切的講，eDNA文庫包含:

A.一個物種的全部基因信息B.一個物種的全部RNA信息

C.一個生物體組織或細胞的全部基因信息D.一個生物體組織或細胞的全部RNA信息

E.一個生物體組織或細胞所表達mRNA信息

109.下列描述最能確切表達質(zhì)粒DNA作為克隆載體特性的是：

A.小型環(huán)狀雙鏈DNA分子B.攜帶有某些耐藥基因

C.在細胞分裂時恒定地傳遞給子代細胞D.具有自我復(fù)制能力

E.獲得目的基因

110.表達人類蛋白質(zhì)的最理想的細胞體系是：

A.E.coli表達體系B.原核表達體系

C.酵母表達體系D.昆蟲表達體系

E.哺乳類細胞表達體系

B型題：

(111-113)

A.噬菌體感染宿主菌后核酸進入菌體的過程B.外來DNA引起生物類型改變的過程

C.溶源菌中的噬菌體全部基因都表達D.溶源菌中的噬菌體部分調(diào)控區(qū)的基因表達

E.帶有宿主DNA的噬菌體

111.溶源狀態(tài)是：

112.進入裂解周期是：

113.轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體是指：

(114-116)

A.接合作用B.轉(zhuǎn)化作用

C.轉(zhuǎn)導(dǎo)作用D.轉(zhuǎn)座作用

E.轉(zhuǎn)移作用

114.F因子陰性細胞與F因子陽性細胞形成F因子陽性細胞的是：

115.病毒從被感染的細胞釋放出來，再次感染另一細胞時，發(fā)生在供體細胞與受體細胞之

間的DNA轉(zhuǎn)移的是：

116.從一個染色體位點轉(zhuǎn)移至另一位點的分散的重復(fù)序列稱為：

(117-120)

A.插入序列轉(zhuǎn)座B.轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座

C.位點特異的重組D.同源重組

E.溶源

117.噬菌體DNA和宿主染色體的特異靶位點整合稱為：

118.噬菌體的生長方式是：

119.Tn3發(fā)生的DNA轉(zhuǎn)移的是：

120.夏制后的一個復(fù)制本遷移至新位，另一個仍保留在原位的是：

(121-123)

A.RecAB.E.coRI

C.RuvCD.LexA

E.Ffactor

121.有蛋白水解酶活性的是：

122.能使同源重組中單鏈DNA對另一雙鏈DNA的侵入的是：

123.切割Holliday中間體的內(nèi)切酶是：

(124-126)

A.RcpliconB.Cloning

C.InvertedrepealsD.Palindrome

E.Transposons

124.目的基因與載體連接形成：

125.來自同一始祖的相同副本或拷貝的集合稱為：

126.限制性內(nèi)切核酸酶識別的序列具有：

(127-129)

A.抗藥性篩選B.分子雜交篩選

C.RNA反轉(zhuǎn)錄D.免疫學(xué)方法

E.體外翻譯

127.用于鑒定質(zhì)粒是否轉(zhuǎn)化的一般方法是：

128.用于鑒定轉(zhuǎn)化子細胞是否含有R的基因的常用方法是：

129.利用目的基因表達產(chǎn)物的特異性抗體來篩選含有目的基因的轉(zhuǎn)化子細胞的方法是:

(130-132)

A.限制性核酸內(nèi)切酶B.DNA連接酶

C.反轉(zhuǎn)錄酶D.TaqDNA聚合酶

E.堿性磷酸酶

130.識別DNA回文結(jié)構(gòu)并對其雙鏈進行切割的是：

131.用于PCR反應(yīng)的酶是：

132.將目的基因與載體進行拼接的睡是：

(133-134)

A.支原體B.衣原體

C.噬菌體D.細菌

E.酵母

133.常用于原核表達體系的是：

134.常用于真核表達體系的是：

(135-137)

A.轉(zhuǎn)染B.轉(zhuǎn)化

C.感染D.轉(zhuǎn)導(dǎo)

E.轉(zhuǎn)位

135.以質(zhì)粒為載體，細菌為宿主的導(dǎo)入方式是：

136.以噬菌體為載體，細菌為宿主的導(dǎo)入方式是：

137.以病毒為載體，哺乳動物細胞為宿主的導(dǎo)入方式是:

(138?139)

A.抗藥性篩選B.RNA反轉(zhuǎn)錄

C.免疫化學(xué)方法D.體外翻譯

E.PCR

138.對重組體內(nèi)基因進行直接篩選的方法是：

139.通過鑒定基因表達產(chǎn)物篩選重組體的方法是:

(140-142)

A.RNA聚合酶B.末端轉(zhuǎn)移的

C.堿性磷酸酶D.反轉(zhuǎn)錄酶

E.核苜酸酶

140.能切除DNA末端磷酸基的足：

141.能在DNA3'羥基末端進行同聚物加尾的是:

142.合成cDNA用的是：

(143-145)

A.同聚物加尾連接B.人工接頭連接

C.粘性末端連接D.缺口末端連接

E.平端連接

143.外源基因和載體DNA經(jīng)過E.coRI切割后的連接屬于：

144.在外源基因和載體DNA末端加同聚物后進行連接屬于：

145.在外源基因和載體DNA末端添加短核甘酸序列，人為制造粘性末端后進行連接雇于:

X型題：

146.可用于基因工程載體的DNA分子有：

A.染色體DNAB.病毒DNA

C.細菌DNAD.噬菌體DNA

E.質(zhì)粒DNA

147.重組DNA技術(shù)的基本過程包括:

A.目的基因的獲取B.PCR反應(yīng)

C.克隆載體的構(gòu)建D.目的基因與載體的連接

E.重組體分子導(dǎo)入受體菌

148.基因克隆又稱為：

A.重組DNAB.重組RNA

C.DNA克隆D.RNA克隆

E.蛋白質(zhì)復(fù)制

149.組成PCR反應(yīng)體系的物質(zhì)包括:

A.RNA引物B.TaqDNA聚合酶

C.RNA聚合航D.DNA模板

E.ddNTP

150.而于重組體的篩選，屬于直接選擇法的是：

A.免疫化學(xué)法B.原位雜交法

C.Southern印跡D.補救標(biāo)志篩選

E.抗藥性標(biāo)志篩選

151.對于重組體的篩選，屬于非直接選擇法的是：

A.免疫化學(xué)法B.原位雜交法

C.Southern印跡D.補救標(biāo)志篩選

E.酶聯(lián)免疫篩選

152.限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA時可產(chǎn)生：

A.5'粘性末端B.3'粘性末端

C.平末端D.單鏈缺口

E.粘性末端

153.基因工程中目的基因的來源有：

A.化學(xué)合成B.PCR合成

C.CDNA文庫D.基因組文庫

E.組織細胞中染色體DNA直接提取

154.基因工程中外源性基因又稱為：

A.日的基因D.日的DNA

C.目的RNAD.targetDNA

E.外源RNA

155.重組DNA技術(shù)中常用的工具酶有：

A.限制性核酸內(nèi)切酶B.DNA聚合酶【

C.DNA連接酶D.反轉(zhuǎn)錄酶

E.末端轉(zhuǎn)移酶

156.使細胞獲取新的遺傳表型的方式有：

A.接合作用B.轉(zhuǎn)化作用

C.轉(zhuǎn)導(dǎo)作用D.轉(zhuǎn)座

E.以上均可以

157.作為基因工程的載體必須具備的條件是：

A.能獨立自主復(fù)制B.易轉(zhuǎn)化

C.易檢測（含有抗藥性基因等）D.具有限制性內(nèi)切核酸酶的切口

E.易提取獲得

158.限制性內(nèi)切核酸酶識別的核甘酸序列可以是：

A.4個B.5個

C.6個D.7個

E.8個

159.將表達載體導(dǎo)入真核細胞的轉(zhuǎn)染方法有：

A.磷酸鈣轉(zhuǎn)染B.DEAE葡聚糖介導(dǎo)轉(zhuǎn)染

C.電穿孔D.脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染

E.顯微注射

160.為保證轉(zhuǎn)錄和翻譯的順利進行，表達載體必須具備的DNA序列應(yīng)包括:

A.較強的啟動子B.較強的衰減子

C.較強的沉默子D.合適的SD序列

E.核糖體結(jié)合位點

161.融合蛋白的結(jié)構(gòu)中包含有：

A.N端為原核蛋白質(zhì)B.N端為真核蛋白質(zhì)

C.C端為原核蛋白質(zhì)D.C端為真核蛋白質(zhì)

E.N.C兩端為原核蛋白質(zhì)，中間為真核蛋白質(zhì)

162.可以連接的目的基因與載體的末端有：

A.同一限制性內(nèi)切核酸酹切割的粘性末端B.不同一限制性內(nèi)切核酸能切割的

配伍末端

C.不同一限制性內(nèi)切核酸解切割的不同類型的粘性末端D.同一限制性內(nèi)切核酸酶切

割的平端

E.不同一限制性內(nèi)切核酸酶切割的平端

四、問答題：

163.什么叫基因克??？簡述基因克隆的步驟。

164.限制性內(nèi)切核酸前有哪些特點？

165.簡述重組DNA技術(shù)中H的基因的獲取來源和途徑。

166.簡述a互補篩選重組體質(zhì)粒細菌的原理。

167.基因工程中重組體第選的方法有那些？

168.基因工程E.coli表達體系的表達載體必須符合那里標(biāo)準(zhǔn)？

169.常用的真核表達體系有哪些？常用于細胞轉(zhuǎn)染的方法有哪些？

170.已知有一mRNA分子，你怎樣才能使它翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)？簡述其過程。

171.一種可靠的DNA診斷學(xué)方法必須符合哪些標(biāo)準(zhǔn)？

172.作為基因工程的載體必須具備哪些條件？

173.什么叫基因重組？簡述沙門氏菌是怎樣逃避宿主免疫監(jiān)視的？

［參考答案］:

一、名詞解釋：

1.基因工程（genlicengineering）是指將DNA重組體引進受體細胞中，建立無性系的

過程。因此，又稱為基因克?。╣enecloning）o克隆某一基因或DNA片段過程中,將外源

DNA插入載體分子所形成的豆制子是雜合分子一嵌合DNA（DNAchimerase）,所以乂稱為

重組DNA（recombinantDNA）。

2.當(dāng)細胞（細菌）與細胞（細菌）相互接觸時，質(zhì)粒DNA就可以從一個細胞（細菌）

轉(zhuǎn)移到另一個細胞（細菌），這種類型的DNA轉(zhuǎn)移稱為接合作用。

3.由外源性DNA導(dǎo)入宿主細胞，并引起生物類型改變的過程［或使宿主細胞獲得新的遺

傳表型］稱為轉(zhuǎn)化作用。

4.當(dāng)病毒從被感染的（供體）細胞釋放出來，再次感染另一（受體）細胞時，發(fā)生在供

體細胞與受體細胞之間的DNA轉(zhuǎn)移及基因重組稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)作用?；驇в兴拗鱀NA的噬菌體

或病毒，再感染另外的宿主的過程中發(fā)生的DNA轉(zhuǎn)移及基因重組稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。

5.轉(zhuǎn)座即是指一個或一組基因從一個位置轉(zhuǎn)倒基因組的另一個位置?？梢苿拥腄NA序

列包括插入序列和轉(zhuǎn)座子，故由插入序列和轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移或重排稱轉(zhuǎn)座。

6.轉(zhuǎn)座子是可以從一個染色體位點轉(zhuǎn)移至另一個位點的分散的重復(fù)序列。轉(zhuǎn)座子也包

括含有兩個反向重復(fù)序列的側(cè)翼，內(nèi)有轉(zhuǎn)座酶基因，并含有抗生素耐藥基因等其他基因

7.

8.

9.

10.

11.

7.發(fā)生在同源序列間的重組稱為同源重組，又稱基本重組(generalrecombination)o

同源重組不需要特異DNA歹"，而是依賴兩分子間序列的相同或類似性。

8.發(fā)生在同源序列間的重組稱為同源重組，乂稱基本重組(generalrecombination)?

9.是指含有單一DNA重組體的無性系。或指將DNA重組體引進受體細胞中，建立

無性系的過程。因此，又稱為基因克隆(genecloning)。

10.外源DNA插入載體DNA分子所形成的具有自我復(fù)制能力的DNA分子稱為復(fù)制子

(replicon)。

11-限制性內(nèi)切核酸酶(Restrictionendonuclease)是指能識別DNA的特異序列，并在識

別位點或其周圍切割雙鏈DNA的一類內(nèi)切酶。

12.DNA的核甘酸序列呈二元旋轉(zhuǎn)對稱結(jié)構(gòu)即回文結(jié)構(gòu)Palindrome(或正讀反讀序列相同

的DNA序列)。

13.不同限制性內(nèi)切酹識別位點不同，但切割后產(chǎn)生相同類型的粘性末端，稱為配伍末端。

14.DNA重組技術(shù)中是我們所需要的DNA序列或基因，就稱為目的基因(targetgene域目

的DNA(targetDNA)。

15.以mRNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄酶合成與niRNA互補的DNA稱為cDNA

(complementaryDNA)o

16.克隆載體(cloningvector)足攜帶目的基因，實現(xiàn)目的基因的無性繁殖或表達有意義

的蛋白質(zhì)所采用的一些DNA分子。

17.為使插入的目的基因可轉(zhuǎn)錄.進而翻譯成多肽鏈，而特意設(shè)計的克隆載體又稱為表達

載體(expressionvector)。即具有轉(zhuǎn)錄和翻譯所必須的DNA序列的載體。

18.存在于細菌染色體以外的環(huán)狀DNA分子。

19.M13噬菌體的基因間隔區(qū)插入E.Coli的調(diào)節(jié)基因及LacZ(B-半乳糖甘酶基因)的

N-端146個aa殘基編碼基因，其產(chǎn)物為B-半乳糖昔酶的a-片段。而突變型Lac-E.coli

可表達8-半乳糖昔酶的3一片段(酶的C-端)，單獨的a-片段及3-片段均無B-半乳糖昔

酶的活性，當(dāng)含有LacZ的M13噬菌體轉(zhuǎn)化Lac—E.coli細菌時，a-片段及3-片段共

向表達，宿主Lac-E.coli細菌才有。-半乳糖甘語活性，使特異的作用物變?yōu)樘m色化合

物，(生長的細菌為蘭色)即a?互補。

20.把生物體全部的DNA提純后，用限制性內(nèi)切核酸酹，隨機切割成許多片段，招所有

片段均重組入同一類載體上，得到許多重組DNA分子，繼而全部轉(zhuǎn)入受體菌擴增，使每個

細菌內(nèi)都攜帶一種重組DNA分子的多個拷貝，這樣生長的全部細菌所攜帶的所有基因組

DNA片段，即為整個基因組。

21.如克隆基因能夠在宿主菌表達，且表達產(chǎn)物與宿主菌的營養(yǎng)缺陷互補，那么就可以利

用營養(yǎng)突變菌株進行篩選，即標(biāo)志補救。

22.將表達載體導(dǎo)入真核細胞的過程或方法。

23.一個細胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息，或整套基因的全部DNA片段。

24.具備接受外源DNA的能力的經(jīng)過特殊方法處理的受體菌。

25.PCR(polymerasechainreaction)是一種DNA迅速大顯擴增的方法，短時間內(nèi)獲得大

量DNA。有利目的基因的獲得。

26.以mRNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄酶合成與mRNA互補的DNA稱為cDNA,單鏈的cDNA

再復(fù)制成雙鏈cDNA片段，與適當(dāng)?shù)妮d體連接后，轉(zhuǎn)入受體菌，所建立的文庫稱為cDNA

文庫。

27.插入序列從原位遷至新位的轉(zhuǎn)座方式。

28.插入序列復(fù)制后，其中的一個復(fù)制本遷至新位，另一個保留在原位的轉(zhuǎn)座方式。

29.噬菌體DNA注入菌體內(nèi)后，在宿主內(nèi)迅速增殖，產(chǎn)生病毒顆粒，并溶解細菌。

30.噬菌體DNA注入菌體內(nèi)與細菌染色體重組成為細菌染色體的一部分。

二、填空題：

31.接合作用；轉(zhuǎn)化子用；轉(zhuǎn)導(dǎo)作用；轉(zhuǎn)座。

32.基因重組；位點特異的重組；同源重組。

33.插入序列；轉(zhuǎn)座子。

34.插入序列；轉(zhuǎn)座子。

35.長末端重復(fù)序列；反向末端重復(fù)序列。

36.能獨立復(fù)制：便于檢測：可導(dǎo)入宿主細胞。

37.4個；6個；8個；枯；平。

38.質(zhì)粒DNA；噬菌體DNA；病毒DNA。

39.目的基因的獲取：基因載體的選擇與構(gòu)建：目的基因與載體的拼接；重組體導(dǎo)入受體

細胞；篩選與鑒定出陽性克隆。

40.化學(xué)合成法；基因組DNA；cDNA；聚合酶鏈反應(yīng)。

41.抗藥性標(biāo)志選擇；標(biāo)志補救；分子雜交。

42.含有大腸桿菌適宜的選擇標(biāo)志；具有強的啟動子；含有適當(dāng)?shù)姆g控制序列;含有合

理設(shè)計的多接頭克隆位點，

43.酵母；昆蟲；哺乳動物細胞。

44.轉(zhuǎn)化：轉(zhuǎn)染；感染。

45.LacZ；146；B半乳糖俘酣；a互補。

46.白；藍。

47.反向重復(fù)；轉(zhuǎn)座前。

48.保守性轉(zhuǎn)座；復(fù)制性轉(zhuǎn)座。

49.質(zhì)粒DNA；接合作用。

50.限制性核酸內(nèi)切酶；DNA連接酶;DNA聚合酶I；反轉(zhuǎn)錄酶。

三、選擇題：

A型題

51.B52.D53.A54.B55.A56.B57.A58.D59.C60.A61.D

62B63D64C65E66B67C

68.E69.E70.C71.D72.A73.D74.B75.E76.E77.E78.E79

C80C81A82D83E84E

85.D86.B87.E88.A89.D90.E91.D92.B93.A94.C95.A96

E97D98B99E100C101D

102.B103.C104.A105.B106.C107.E108.E109.D110.E

B型題:

IIID112C113E114A

115.C116.D117.C118.E119.B120.A121.A122.A123.C124.A1

25.B126.D127.A128.B129.D130.A131.D132.B133.D134.E1

35.B136.A137.C138.A139.C140.C141.B142.D143.C144.A145.B

X型題：

146.B.D.E147.A.C.D.E148.A.C149.A.B.D.E150.B.C.

D.E151.A.E152.A.B.C.E153.A.B.C.D.E154.A.B.D155.A

.B.C.D.E156.A.B.C157.A.B.C158.A.C.E159.A.B.C.D.E

160.A.C.D161.A.D162.A.B.C.D

四、問答題：

163.基因克隆（genecloning）是指含有單一DNA重組體的無性系?；蛑笇NA重

組體引進受體細胞中，建立無性系的過程。一個完整的基因克隆過程包括：A.目的基因

和載體的選擇---分。B.限制性內(nèi)切酶處理的基因和載體------切。C.目的基因與載體的

連接……接。D.重組體導(dǎo)入受體細胞……轉(zhuǎn)。E.篩選轉(zhuǎn)化細胞一…篩。

164.限制性內(nèi)切核酸能分為三類，重組DNA技術(shù)的限制性內(nèi)切核酸酶為II類。其特

點為：①.識另UDNA位點的核昔酸序列呈二元旋轉(zhuǎn)對稱一即回文結(jié)構(gòu)（Palindrome）。②.一

些腦切割后產(chǎn)生粘性末端（StickyendorCohesiveend）。另一些酶切割后產(chǎn)生平端或鈍性末

端（bluntend）。③.不同的限制性內(nèi)切核酸酶識別DNA中的核甘酸長短不一，為4.6或

8個。

165.的基因的獲取：主要有以下幾種途徑：①.化學(xué)合成法：已知某種基因的核甘酸序列

或根據(jù)某種基因產(chǎn)物的aa序列推導(dǎo)出該多肽鏈編碼的核甘酸序列，再利用DNA合成儀合

成。②.基因組DNA：一個細胞或病毒所攜帶的全部遺傳信息，或整套基因的全部DNA

片段。從基因組DNA文庫中獲得。cDNA文庫。④.聚合酶鏈反應(yīng)——PCR（polymerase

chainreaction）。

166.13噬菌體的基因間隔區(qū)插入E.Coli的調(diào)節(jié)基因及LacZ（B-半乳糖甘酶基因）的N-

端146個aa殘基編碼基因，其產(chǎn)物為B-半乳糖苗酷的?-片段。而突變型Lac-E.coli可

表達6-半乳糖苗酶的3片段（酶的C-端），單獨的a-片段及3-片段均無B-半乳糖甘酶

的活性，當(dāng)含有LacZ的M13噬菌體轉(zhuǎn)化Lac—E.coli細菌時，a-片段及3.片段共同

表達，宿主Lac-E.coli細菌才有B-半乳糖甘酶活性，使特異的作用物變?yōu)樘m色化合物，

（生長的細菌為蘭色）這就是a-互補?？捎糜谥亟M體的篩選。如果H的基因插入LacZ基因

內(nèi)，則LacZ不表達，為白色菌落。

167.重組體的篩選方法有：①.直接法（directselection）：針對載體攜帶的某種或某曲標(biāo)

志基因和目的基因而設(shè)計的篩選方法稱直接法。其特點是：直接測定基因或基因表型。

A.抗藥性標(biāo)志篩選：如克隆載體攜帶有某個（些）抗藥基因，如：ampr.tetr等。只有

被轉(zhuǎn)化的細菌才能在含有該抗生素的培養(yǎng)基生長，并形成菌落，使轉(zhuǎn)化菌與非轉(zhuǎn)化菌區(qū)別開。

如重組體中的外源性基因插入到標(biāo)志性基因內(nèi)，標(biāo)志性基因則失活，通過有或無抗菌素培養(yǎng)

基對比培養(yǎng)，即可區(qū)分單純載體轉(zhuǎn)化菌和重組體（含目的基因的載體）轉(zhuǎn)化菌。如：招目的

基因插入teir基因中，該載體就失去tetr抗藥性，但仍有apmr抗藥性，被轉(zhuǎn)化的細菌（含重

組體）可在含有apmr培養(yǎng)基生長，而不能在teti?培養(yǎng)基生長。也叫插入滅活法。B.補

救標(biāo)志（markerrescue）篩選：如克隆基因能夠在宿主菌表達，且表達產(chǎn)物與宿主菌的營

養(yǎng)缺陷互補，那么就可以利用營養(yǎng)突變菌株進行篩選，這就是標(biāo)志補救。如：酵母味陛位

油磷酸脫水酶基因表達產(chǎn)物與細菌組氨酸合成有關(guān)。當(dāng)酵母DNA與X噬菌體載體結(jié)合后，

在轉(zhuǎn)染或感染組氨酸缺陷型大腸桿菌，在無組氨酸的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，只有含重組體的細菌能

生長（因有咪啤甘油磷酸脫水酶）。再如：a一互補也是一種標(biāo)志補救。C.雜交法：利用32P

標(biāo)記的探針與轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素膜上的轉(zhuǎn)化子DNA或克隆的DNA片段進行分子雜交，直

接選擇鑒定FI的基因。如：原位雜交Southernblotting〔DNA-DNA雜交；）。②.免疫學(xué)方

法（非直接法）：是利用特異抗體與目的基因的表達產(chǎn)物相互作用進行的篩選。分為：免

疫化學(xué)法和酶免疫檢測分析。免疫化學(xué)法：原理為：將培養(yǎng)的轉(zhuǎn)化子菌落，經(jīng)氯仿蒸汽裂解，

釋放抗原，再將固定有抗仙清（目的基因編碼蛋白特異的免疫血清）的聚乙烯膜覆蓋在裂解

菌落上，在膜上形成抗原抗體復(fù)合物，再與1251-IgG反應(yīng)，最后放射自顯影，檢出陽性

菌落。

168.含有大腸桿菌適宜的選擇標(biāo)志.具有強的啟動子.含有適當(dāng)?shù)姆g控制序列.含有合

理設(shè)計的多接頭克隆位點，

169.真核表達體系常見的有：醉母.昆蟲.哺乳類細胞等。重要的是將重組體導(dǎo)入細胞。

即轉(zhuǎn)染。（將表達載體導(dǎo)入真核細胞的過程）常見的轉(zhuǎn)染方法有：磷酸鈣轉(zhuǎn)染.DEAE葡聚

糖介導(dǎo)轉(zhuǎn)染.電竄孔.脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染.顯微注射等。

170.已知有一mRNA分子，你怎樣才能使它翻譯出相應(yīng)的蛋白質(zhì)呢？其過程如下：首先以

mRNA分子為模板，進行反轉(zhuǎn)錄，合成cDNA,再合成雙鏈cDNA,擴增后與載體連接形成

重組體，轉(zhuǎn)染表達載體，篩選出克隆，進行基因表達即可。

171.一種可靠的診斷學(xué)方法必須符合1）能正確擴增靶基因。2）能準(zhǔn)確區(qū)分單個堿基的差

別。3）本底和噪聲低，不干擾DNA鑒定。4）便于自動化操作，適合大面積.大人群普查。

172.作為基因工程的載體必須具備的條件是：能獨立自主復(fù)制。易轉(zhuǎn)化。易檢測（含有抗

藥性基因等）。

173.不同DNA分子間發(fā)生的共價連接稱基因重組。沙門菌為逃避宿主免疫監(jiān)視，其鞭毛

素蛋白的表達每經(jīng)歷1000代細胞即發(fā)生一次相變異（Phasevariation）o沙門菌鞭毛素基

因HIH2分別編碼鞭毛素HlH2,H2啟動序列同時啟動H2及一種阻遏蛋白的表達。阻

遏蛋白可阻H1的表達hin基因編碼一種重組酶，催化H2啟動序列與hin基因倒位，發(fā)生

基因重組（geneticrecombination）其結(jié)果是啟動序列方向改變，H2及阻遏蛋白表達關(guān)閉.H1

基因表達。

生物化學(xué)與分子生物學(xué)試題庫

0101A01在核酸中一般不含有的元素是（）

A、碳B、氫C、氧D、硫

0101A02通常既不見于DNA又不見于RNA的堿基是（）

A、腺噤吟B、黃喋吟C、鳥口票吟D、胸腺啥喔

0101A03下列哪種堿基只存在于mRNA而不存在于DNA中（）

A、腺嚓吟B、尿咤喔C、鳥瞟吟D、胞口密噴

0101A04DNA與RNA完全水解后，其產(chǎn)物的特點是（）

A、戊糖不同、堿基部分不同B、戊糖不同、堿基完全相同

C、戊糖相同、堿基完全相同D、戊糖相同、堿基部分不同

0101A05在核酸分子中核苦酸之間的連接方式是（）

A、3',3,，-磷酸二酯鍵B、糖昔鍵C、3’,5',磷酸二酯鍵D、肽鍵

0101A06核酸的紫外吸收是日哪一結(jié)構(gòu)所產(chǎn)生的（）

A、嚎吟和口密噴之間的氫鍵B、堿基和戊糖之間的糖昔鍵

C、戊糖和磷酸之間的酯鍵D、噫吟和啜口定環(huán)上的共匏雙鍵

0101A07含有稀有堿基比例較多的核酸是（）

A、mRNAB>DNAC、tRNAD、rRNA

0101A08核酸分子中儲存、傳遞遺傳信息的關(guān)鍵部分是（）

A、核昔B、戊糖C、磷酸D、堿基序列

0101A09按照結(jié)構(gòu)特征劃分，下列不屬于絲氨酸蛋白酶類的是：（）

A、胃蛋白酶B、胰蛋白酶C、胰凝乳蛋白酶D、彈性蛋白醐

0101A10關(guān)于氨基酸的脫氨基作用，下列說法不正確的是：（）

A、催化氧化脫氨基作用的酶有脫氫酶和氧化酶兩類；

B、轉(zhuǎn)氨酶的輔助因子是維生素氏；

C、聯(lián)合脫氨基作用是最主要的脫氨基作用；

D、氨基酸氧化醐在脫氨基作用中不起主要作用。

0101B01鳥類為了飛行的需要，通過下列哪種排泄物釋放體內(nèi)多余的氨（）

A、尿素B、尿囊素C、尿酸D、尿囊酸

0101B02胸腺啥口定除了在DNA出現(xiàn)，還經(jīng)常在下列哪種RNA中出現(xiàn)（）

A、mRNAB、tRNAC、5SrRNAD、18SrRNA

0101B03下列哪一個代謝途徑是細菌和人共有的（）

A、噂哈核昔酸的合成B、氮的固定C、乙醇發(fā)酵D、細胞壁粘肽的合成

0101B04脫氧核糖核酸（DNA）分子中堿基配對主要依賴于（）

A、二硫鍵B、氫鍵C、共價鍵D、鹽鍵

0101B05人細胞DNA22.9X10°堿基對，其雙螺旋的總長度約為（）

A、990mm580mmC、290mmD、9900mm

0101B06核酸從頭合成中，嚓吟環(huán)的第1位氮來自（）

A、天冬氨酸B、氨甲酰磷酸C、甘氨酸D、谷氨酰胺

0101B07012是（）

Ax含有2個甲基的鳥喋吟堿基B、雜環(huán)的2位上帶甲基的鳥苔

C、核糖2位上帶甲基的鳥苔酸D、鳥喋吟核昔磷酸二甲酯

0101B08核苔酸從頭合成中，口密呢環(huán)的1位氮原子來自（）

A、天冬氨酸B、氨甲酰磷酸C、谷氨酰胺D、甘氨酸

0101D09在適宜條件下，核酸分了兩條鏈通過雜交作用可自行形成雙螺旋，取決于（）

A、DNA的融點B、序列的重復(fù)程度C、核酸