微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)基管理規(guī)定

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編$0：__________日期:_________________

審定^_________________日期:_________________

批準(zhǔn):_________________日期:_________________

生效日期:_________________管理部門(mén):_________________

發(fā)放部門(mén)：

□生產(chǎn)部口質(zhì)管部口工程部口研發(fā)部口PMC□采購(gòu)部口倉(cāng)庫(kù)

□營(yíng)銷(xiāo)中心口人事行政中心口財(cái)務(wù)部

1.目的：

為了規(guī)范微生物檢驗(yàn)室所用的培養(yǎng)基的制備、貯藏、質(zhì)量控制及接收，確保

檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。

2.范圍：

適用于舒友儀器設(shè)備限公司實(shí)驗(yàn)室微生物培養(yǎng)基的使用與管理。

3.職責(zé)：

微生物室檢驗(yàn)人員負(fù)責(zé)培養(yǎng)基的接收、制備、貯藏、質(zhì)量控制及儲(chǔ)存工作。

4.管理內(nèi)容：

4.1定義：

4.1.1培養(yǎng)基(Media)：

是微生物試驗(yàn)的基礎(chǔ)，直接影響微生物試驗(yàn)結(jié)果。適宜的培養(yǎng)基制備方法、貯臧

條件和質(zhì)量捽制試驗(yàn)是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證C

4.2培養(yǎng)基的制備

微生物實(shí)驗(yàn)室使用的培養(yǎng)基可按處方配制，也可使用按處方生產(chǎn)的符合規(guī)定

的脫水培養(yǎng)基。

在制備培養(yǎng)基時(shí)，應(yīng)選擇質(zhì)量符合要求的脫水培養(yǎng)基或按單獨(dú)配方組分進(jìn)行

配制。脫水培養(yǎng)基應(yīng)附有處方和使用說(shuō)明，配制時(shí)應(yīng)按使用說(shuō)明上的要求操作以

確保培養(yǎng)基的質(zhì)量符合要求，結(jié)塊或顏色發(fā)生改變的脫水培養(yǎng)基不得使用。

脫水培養(yǎng)基或單獨(dú)配方組分應(yīng)在適當(dāng)?shù)臈l件下貯藏，如低溫、干燥和避光，

所有的容器應(yīng)密封，尤其是盛放脫水培養(yǎng)基的容器。商品化的成品培養(yǎng)基除了應(yīng)

附有處方和使用說(shuō)明外，還應(yīng)注明有效期、貯藏條件、適用性檢查試驗(yàn)的質(zhì)控菌

和用途。

為保證培養(yǎng)基質(zhì)量的穩(wěn)定可靠，各脫水培養(yǎng)基或各配方組分應(yīng)準(zhǔn)確稱(chēng)量，并

要求有定的精確度。配制培養(yǎng)基最常用的溶劑是純化水。應(yīng)記錄各稱(chēng)量物的重

量和水的使用量。

配制培養(yǎng)基所用容器不得影響培養(yǎng)基質(zhì)量，一般為玻璃容器。培養(yǎng)基配制所

用的容器和配套器具應(yīng)潔凈，可用純化水沖洗以消除清潔劑和外來(lái)物質(zhì)的殘留。

對(duì)熱敏感的培養(yǎng)基如糖發(fā)酵培養(yǎng)基其分裝容器一股應(yīng)預(yù)先進(jìn)行滅菌，保證培養(yǎng)基

的無(wú)菌性。

脫水培養(yǎng)基應(yīng)完全溶解于水中，再行分裝與滅菌。配制時(shí)若需要加熱助溶，

應(yīng)注意不要過(guò)度加熱，避免培養(yǎng)基顏色變深。如需要添加其他組分時(shí)，加人后應(yīng)

充分混勻。

培養(yǎng)基滅菌應(yīng)按照生產(chǎn)商提供或使用者驗(yàn)證的參數(shù)進(jìn)行。商品化的成品培養(yǎng)

基必須附有所用滅菌方法的資料。培養(yǎng)基滅菌一般采用濕熱滅菌技術(shù)，特殊培養(yǎng)

基可采用薄膜過(guò)濾除菌。

培養(yǎng)基若采用不適當(dāng)?shù)募訜岷蜏缇鷹l件，有可能引起顏色變化、透明度降

低、瓊脂凝固力或pH值的改變。因此，培養(yǎng)基應(yīng)采用驗(yàn)證的滅菌程序滅菌，

培養(yǎng)基滅菌方法和條件，應(yīng)通過(guò)無(wú)菌性試驗(yàn)和促生長(zhǎng)試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。此外，對(duì)高

壓滅菌器的蒸汽循環(huán)系統(tǒng)也要加以驗(yàn)證，以保證在一定裝載方式下的正常熱分

布。溫度緩慢上升的高壓滅菌器可能導(dǎo)致培養(yǎng)基的過(guò)熱，過(guò)度滅菌可能會(huì)破壞絕

大多數(shù)的細(xì)菌和真菌培養(yǎng)基促生長(zhǎng)的質(zhì)量?滅菌器中培養(yǎng)基的容積和裝載方式也

將影響加熱的速度。因此，應(yīng)根據(jù)滅菌培養(yǎng)基的特性，進(jìn)行全面的滅菌程序驗(yàn)證。

應(yīng)確定每批培養(yǎng)基滅菌后的pH值（冷卻至室溫25,（測(cè)定）。若培養(yǎng)基處

方中未列出pH值的范圍，除非經(jīng)驗(yàn)證表明培養(yǎng)基的pH值允許的變化范圍很寬，

否則，pH值的范圍不能超過(guò)規(guī)定值土0.2。

制成平板或分裝于試管的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行下列檢查：容器和蓋子不得破裂，

裝量應(yīng)相同，盡量避免形成氣泡，固體培養(yǎng)基表面不得產(chǎn)生裂縫或池漪，在冷藏

溫度下不得形成結(jié)晶，不得污染微生物等。應(yīng)檢查和記錄批數(shù)量、有效期及培養(yǎng)

基的無(wú)菌檢查。

4.3培養(yǎng)基的貯藏

自配的培養(yǎng)基應(yīng)標(biāo)記名稱(chēng)、批號(hào)、配制日期、制備人等信息，并在已驗(yàn)證

的條件下貯藏。商品化的成品培養(yǎng)基標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)有名稱(chēng)、批號(hào)、生產(chǎn)日期、失效

期及培養(yǎng)基的有關(guān)特性，生產(chǎn)商和使用者應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)基使用說(shuō)明書(shū)上的要求進(jìn)行

貯藏，所采用的貯藏和運(yùn)輸條件應(yīng)使成品培養(yǎng)基最低限度的失去水分并提供機(jī)械

保護(hù)。

培養(yǎng)基滅菌后不得貯藏在高壓滅菌器中，瓊脂培養(yǎng)基不得在01或（TC以下

存放，因?yàn)槔鋬隹赡芷茐哪z特性。培養(yǎng)基保存應(yīng)防止水分流失，避光保存。瓊

脂平板最好現(xiàn)配現(xiàn)用，如置冰箱保存，一般不超過(guò)1周，且應(yīng)密閉包裝，若延長(zhǎng)

保存期限，保存期需經(jīng)驗(yàn)證確定。

固體培養(yǎng)基滅菌后只允許1次再融化，避免因過(guò)度受熱造成培養(yǎng)基質(zhì)量下降

或微生物污染。培養(yǎng)基的再融化一般采用水浴或流通蒸汽加熱，若采用其他溶解

方法，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行評(píng)估，確認(rèn)該溶解方法不影響培養(yǎng)基質(zhì)量。融化的培養(yǎng)基應(yīng)置

于45s50"的環(huán)境中，不得超過(guò)8小時(shí)。使用過(guò)的培養(yǎng)基（包括失效的培養(yǎng)基）

應(yīng)按照國(guó)家污染廢物處理相關(guān)規(guī)定進(jìn)行。

4.4培養(yǎng)基的質(zhì)量控制試驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)制定試驗(yàn)用培養(yǎng)基的質(zhì)量控制程序，確保所用培養(yǎng)基質(zhì)量符合相關(guān)

檢查的需要。

實(shí)驗(yàn)室配制或商品化的成品培養(yǎng)基的質(zhì)量依賴(lài)于其制備過(guò)程，采用不適宜方

法制備的培養(yǎng)基將影響微生物的生長(zhǎng)或復(fù)蘇，從而影響試驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

所有配制好的培養(yǎng)基均應(yīng)進(jìn)行質(zhì)量控制試驗(yàn).實(shí)驗(yàn)室配制的培養(yǎng)基的常規(guī)監(jiān)控項(xiàng)

目是pH值、適用性檢查試驗(yàn)，定期的穩(wěn)定性檢查以確定有效期。培養(yǎng)基在有效

期內(nèi)應(yīng)依據(jù)適用性檢查試驗(yàn)確定培養(yǎng)基質(zhì)量是否符合要求。有效期的長(zhǎng)短取決于

在一定存放條件下（包括容器特性及密封性）的培養(yǎng)基其組成成分的穩(wěn)定性。

除藥典附錄另有規(guī)定外，在實(shí)驗(yàn)室中，若采用已驗(yàn)證的配制和滅菌程序制備

培養(yǎng)基且過(guò)程受控，那么同一批脫水培養(yǎng)基的適用性檢查試驗(yàn)可只進(jìn)行1次。如

果培養(yǎng)基的制備過(guò)程未經(jīng)驗(yàn)證，那么每一滅菌批培養(yǎng)基均要進(jìn)行適用性檢查試

驗(yàn)。試驗(yàn)的菌種可根據(jù)培養(yǎng)基的用途從相關(guān)附錄中進(jìn)行選擇，也可增加生產(chǎn)環(huán)境

及產(chǎn)品中常見(jiàn)的污染菌株。

培養(yǎng)基的質(zhì)量控制試驗(yàn)若不符合規(guī)定，應(yīng)尋找不合格的原因，以防止問(wèn)題重

復(fù)出現(xiàn)。任何不符合要求的培養(yǎng)基均不能使用。

用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基須特別防護(hù)，最好要雙層包裝和終端滅菌，如果不能

采用終端滅菌的培養(yǎng)基，那么在使用前應(yīng)進(jìn)行100%的預(yù)培養(yǎng)，以防止外來(lái)的污染

物帶到環(huán)境中及避免出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。

4.5商品培養(yǎng)基的接收

所有商業(yè)培養(yǎng)基由實(shí)驗(yàn)室微檢人員進(jìn)行接收和檢查，接收時(shí)應(yīng)檢查培養(yǎng)基的

有效期、產(chǎn)品的外包裝等