2025年綜合類-病理學技術(shù)(主管技師)-細胞培養(yǎng)技術(shù)歷年真題摘選帶答案(5卷單選題100題)2025年綜合類-病理學技術(shù)(主管技師)-細胞培養(yǎng)技術(shù)歷年真題摘選帶答案(篇1)【題干1】細胞傳代過程中，若原代細胞貼壁后未及時更換培養(yǎng)液，可能導致以下哪種后果？【選項】A.細胞過度增殖形成單層B.細胞代謝產(chǎn)物積累抑制貼壁C.細胞形態(tài)異常并出現(xiàn)空泡D.細胞周期同步化加速【參考答案】B【詳細解析】未及時更換培養(yǎng)液會導致代謝廢物（如乳酸、氨）濃度升高，pH值下降，抑制細胞貼壁和生長。選項A錯誤因單層形成需傳代操作；選項C空泡多與氧化應激相關(guān)；選項D同步化需特定藥物干預?！绢}干2】維持貼壁細胞正常生長所需培養(yǎng)基中，哪種成分濃度過高會顯著抑制細胞增殖？【選項】A.青霉素（10μg/mL）B.谷氨酰胺（2mmol/L）C.胰島素（5μg/mL）D.胰島素樣生長因子（10ng/mL）【參考答案】C【詳細解析】胰島素濃度過高可能引發(fā)糖原合成異常，導致細胞能量代謝紊亂。選項A為常規(guī)抗生素濃度；選項B谷氨酰胺濃度在標準培養(yǎng)基中為1-2mmol/L；選項D生長因子濃度通常為1-10ng/mL?！绢}干3】支原體污染細胞系的特征性表現(xiàn)為：【選項】A.細胞核固縮且染色體呈細絲狀B.細胞表面出現(xiàn)多形性突起C.細胞周期時間延長至72小時以上D.堿性磷酸酶活性顯著升高【參考答案】C【詳細解析】支原體污染會導致細胞周期阻滯在G1期，典型表現(xiàn)為傳代時間延長3倍以上。選項A為病毒感染特征；選項B類似神經(jīng)細胞形態(tài)；選項D與分化狀態(tài)相關(guān)?！绢}干4】在單層細胞培養(yǎng)中，判斷細胞融合成功的可靠指標是：【選項】A.細胞密度達80%B.傳代后細胞存活率>95%C.熒光標記細胞融合率>85%D.細胞形態(tài)保持均一性【參考答案】C【詳細解析】熒光標記（如CFSE）能準確區(qū)分新生與原有細胞，融合率>85%為成功標準。選項A為常規(guī)傳代指標；選項B存活率標準不適用于融合操作；選項D可能因污染導致?！绢}干5】以下哪種技術(shù)能有效區(qū)分細胞凋亡與壞死？【選項】A.TUNEL染色檢測DNA斷裂B.臺盼藍染色拒染細胞計數(shù)C.膜完整性檢測結(jié)合PI染色D.堿性磷酸酶活性檢測【參考答案】C【詳細解析】膜完整性檢測（如TrypanBlue）結(jié)合PI染色可區(qū)分細胞凋亡（膜完整但DNA斷裂）與壞死（膜破裂PI染色陽性）。選項A適用于凋亡特異性檢測；選項B僅反映細胞活性；選項D與分化相關(guān)?！绢}干6】建立原代細胞系時，哪種細胞類型通常難以成功培養(yǎng)？【選項】A.骨髓間充質(zhì)干細胞B.肝細胞C.腎小管上皮細胞D.腦膠質(zhì)細胞【參考答案】D【詳細解析】腦膠質(zhì)細胞體外培養(yǎng)難度大，易出現(xiàn)形態(tài)異常和程序性死亡。選項A為易培養(yǎng)的干細胞類型；選項B肝細胞在特定培養(yǎng)基中可行；選項C腎小管上皮細胞有成功案例?！绢}干7】細胞凍存時，哪種添加成分能有效防止冰晶形成導致的細胞損傷？【選項】A.DMSO（10%）B.谷胱甘肽（1mmol/L）C.脂質(zhì)體（0.1%）D.脂肪酸（C16:0）【參考答案】A【詳細解析】DMSO作為滲透劑可降低冰晶體積，減少細胞膜損傷。選項B為抗氧化劑；選項C用于轉(zhuǎn)染輔助；選項D可能干擾脂質(zhì)代謝?！绢}干8】在細胞增殖曲線分析中，對數(shù)生長期細胞數(shù)達到對數(shù)期拐點時的倍增時間稱為：【選項】A.G0期B.GD期C.GS期D.G1期【參考答案】B【詳細解析】GD期（Gap1）是細胞從G0進入S期的過渡階段，此時DNA復制完成，準備進入分裂。選項A為休止期；選項C為S期；選項D為G1期。【題干9】細胞融合常用的聚乙二醇（PEG）處理中，哪種濃度范圍最安全？【選項】A.10-20%PEG1500B.5-10%PEG4000C.15-25%PEG10000D.2-5%PEG3000【參考答案】B【詳細解析】PEG4000濃度5-10%能有效促進融合且毒性最低。選項APEG1500濃度過高易導致細胞死亡；選項CPEG10000分子量過大；選項D濃度不足。【題干10】檢測細胞增殖的CCK-8法中，以下哪種試劑不可省略？【選項】A.谷胱甘肽B.水溶性四唑鹽C.胰島素D.脂質(zhì)體【參考答案】B【詳細解析】水溶性四唑鹽（WST-8）是CCK-8核心成分，通過還原反應顯色。選項A為抗氧化劑；選項C為促生長因子；選項D用于轉(zhuǎn)染輔助?！绢}干11】細胞傳代時，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶底部有大量細胞團塊狀聚集，最可能的原因是：【選項】A.細胞融合失敗B.細胞密度過高C.污染導致細胞聚集D.細胞周期阻滯【參考答案】B【詳細解析】密度過高（>80%）會導致細胞間接觸抑制，形成團塊。選項A多表現(xiàn)為細胞融合空泡；選項C需結(jié)合其他污染特征；選項D表現(xiàn)為周期同步化。【題干12】在血清依賴性細胞培養(yǎng)中，若培養(yǎng)基中血清濃度不足，可能導致：【選項】A.細胞周期停滯在G2/M期B.胰島素樣生長因子分泌增加C.細胞代謝速率降低D.細胞凋亡敏感性升高【參考答案】C【詳細解析】血清缺乏會導致能量代謝原料（如葡萄糖、氨基酸）不足，ATP生成減少。選項A需特定信號通路異常；選項B與血清中的生長因子有關(guān)；選項D與氧化應激相關(guān)?！绢}干13】細胞凋亡特異性檢測中，熒光標記物Hoechst33342主要檢測哪種結(jié)構(gòu)變化？【選項】A.細胞膜完整性B.DNA鏈斷裂C.線粒體膜電位D.膜表面受體表達【參考答案】B【詳細解析】Hoechst33342與細胞核DNA結(jié)合，凋亡時染色質(zhì)解聚呈熒光碎片。選項A檢測需PI染色；選項C用膜電位染色劑；選項D用熒光素標記抗體。【題干14】建立永生細胞系時，常用以下哪種病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)？【選項】A.腺病毒載體轉(zhuǎn)染B.慢病毒瞬時轉(zhuǎn)染C.逆轉(zhuǎn)錄病毒載體轉(zhuǎn)染D.脂質(zhì)體包裹轉(zhuǎn)染【參考答案】C【詳細解析】逆轉(zhuǎn)錄病毒載體可整合至宿主基因組，實現(xiàn)長期表達。選項A腺病毒為瞬時表達；選項B慢病毒需特定包裝細胞；選項D為通用轉(zhuǎn)染方法。【題干15】在細胞凍存解凍過程中，哪種操作順序最有利于細胞存活？【選項】A.-80℃→液氮→37℃水浴B.液氮→-80℃→37℃水浴C.-80℃→37℃水浴→液氮D.液氮→37℃水浴→-80℃【參考答案】A【詳細解析】先低溫速凍（-80℃）再液氮長期保存，解凍時快速復溫（37℃水浴）可減少冰晶損傷。選項B液氮直接解凍易導致細胞破裂；選項C順序錯誤；選項D解凍后再次冷凍?！绢}干16】檢測細胞外基質(zhì)成分的Masson三色染色中，哪種試劑特異性標記膠原纖維？【選項】A.天狼星紅B.龍膽紫C.苯胺藍D.蘇木精【參考答案】A【詳細解析】天狼星紅與膠原纖維結(jié)合呈紅色，龍膽紫為堿性染料，苯胺藍用于彈性纖維，蘇木精為核染色劑?！绢}干17】細胞培養(yǎng)中，判斷細胞匯合度（confluency）的常用標準是：【選項】A.細胞覆蓋面積達90%B.傳代后存活率>90%C.細胞形態(tài)保持均一性D.細胞周期時間縮短【參考答案】A【詳細解析】90%匯合度時細胞形成單層且接觸抑制明顯。選項B為傳代指標；選項C可能受污染影響；選項D與增殖狀態(tài)相關(guān)?！绢}干18】在細胞周期檢測中，流式細胞術(shù)分析DNA含量時，以下哪種細胞處于G1期？【選項】A.DNA含量為2nB.DNA含量為4nC.DNA含量為1nD.DNA含量為3n【參考答案】C【詳細解析】G1期細胞未復制DNA，DNA含量為1n（正常二倍體）。選項A為G0/G1期；選項B為S/G2期；選項C為G1期；選項D為異常增殖?！绢}干19】細胞融合后，篩選抗性細胞的常用抗生素是：【選項】A.卡那霉素（50μg/mL）B.琥珀酸紅（10μg/mL）C.鏈霉素（100μg/mL）D.甲基綠（2μg/mL）【參考答案】A【詳細解析】卡那霉素是常用的抗生素篩選劑，濃度50μg/mL有效。選項B為熒光標記染料；選項C用于鏈霉素抗性基因；選項D為核染色劑。【題干20】在細胞培養(yǎng)污染控制中，哪種方法能有效檢測支原體污染？【選項】A.熒光顯微鏡觀察菌絲B.PCR檢測特定基因序列C.酶標法檢測細胞增殖D.細胞形態(tài)學觀察【參考答案】B【詳細解析】支原體無細胞壁，常規(guī)染色不可見，需PCR檢測16SrRNA基因。選項A適用于真菌；選項C為增殖檢測；選項D無法區(qū)分支原體污染。2025年綜合類-病理學技術(shù)(主管技師)-細胞培養(yǎng)技術(shù)歷年真題摘選帶答案(篇2)【題干1】在配制RPMI-1640培養(yǎng)基時，若未添加青霉素和鏈霉素，可能導致以下哪種后果？【選項】A.細胞增殖速度加快；B.細胞易受細菌污染；C.細胞形態(tài)保持完整；D.細胞代謝活性增強【參考答案】B【詳細解析】未添加青霉素和鏈霉素會導致培養(yǎng)基無法抑制細菌和真菌的繁殖，使環(huán)境中微生物過度生長，污染細胞培養(yǎng)物。選項B正確。選項A錯誤，因抗生素缺失不會直接加速增殖；選項C錯誤，形態(tài)完整性與抗生素無關(guān)；選項D錯誤，代謝活性增強需依賴培養(yǎng)基成分而非污染控制。【題干2】細胞傳代時，原代細胞與繼代細胞的傳代間隔通常有何差異？【選項】A.原代細胞需更頻繁傳代；B.繼代細胞傳代間隔更短；C.原代細胞傳代間隔更長；D.兩者傳代間隔相同【參考答案】C【詳細解析】原代細胞首次傳代后，后續(xù)傳代需根據(jù)細胞生長狀態(tài)調(diào)整，通常每3-5天傳代；而繼代細胞因已適應培養(yǎng)條件，傳代間隔可延長至5-7天。選項C正確。選項A錯誤，原代細胞初期增殖快但穩(wěn)定性低；選項B錯誤，繼代細胞傳代間隔更長；選項D錯誤，兩者傳代間隔存在顯著差異?！绢}干3】以下哪種抗生素常用于病理學細胞培養(yǎng)，但需注意其對細胞增殖的潛在抑制作用？【選項】A.羧芐西林；B.琥珀酸紅霉素；C.放線菌酮；D.青霉素G【參考答案】B【詳細解析】琥珀酸紅霉素（一種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素）常用于抑制支原體污染，但高濃度可能干擾細胞蛋白質(zhì)合成，需嚴格調(diào)整濃度（通常50-100μg/mL）。選項B正確。選項A為β-內(nèi)酰胺類抗生素，主要用于革蘭氏陽性菌；選項C為蛋白合成抑制劑，非抗生素；選項D易被β-內(nèi)酰胺酶分解失效?！绢}干4】在細胞凍存過程中，加入DMSO的主要作用是什么？【選項】A.提高細胞增殖效率；B.抑制冰晶形成；C.增強細胞代謝活性；D.促進細胞分化【參考答案】B【詳細解析】二甲基亞砜（DMSO）作為滲透壓調(diào)節(jié)劑，能降低細胞內(nèi)外冰晶形成速度，減少凍融損傷。選項B正確。選項A錯誤，DMSO不直接提高增殖效率；選項C錯誤，代謝活性受凍存影響；選項D錯誤，凍存過程抑制細胞分化。【題干5】以下哪種細胞系常用于檢測病毒對細胞的致病性？【選項】A.Hela；B.Vero；C.HEK293；D.3D10【參考答案】B【詳細解析】Vero細胞（非洲綠猴腎細胞系）是國際公認的病毒宿主細胞，廣泛用于體外病毒增殖和致病性研究。選項B正確。選項A（Hela）主要用于腫瘤相關(guān)研究；選項C（HEK293）常用于轉(zhuǎn)染和蛋白質(zhì)表達；選項D（3D10）為小鼠成纖維細胞系?！绢}干6】細胞培養(yǎng)瓶底部細胞聚集成團時，最可能的原因是什么？【選項】A.培養(yǎng)基pH值異常；B.細胞融合過度；C.氧氣供應不足；D.抗生素濃度過高【參考答案】B【詳細解析】細胞融合過度導致聚集成團，常見于某些特定細胞系（如雜交瘤細胞）或不當?shù)膫鞔僮?。選項B正確。選項A（pH異常）會導致細胞形態(tài)改變但未必聚集；選項C（缺氧）多表現(xiàn)為懸浮細胞增多；選項D（抗生素過高）會抑制增殖而非聚集?！绢}干7】在倒置顯微鏡下觀察細胞時，以下哪種現(xiàn)象提示細胞處于G1期？【選項】A.核膜清晰，染色體呈細絲狀；B.細胞質(zhì)濃縮，核仁明顯；C.細胞體積增大，核質(zhì)比降低；D.細胞核固縮，邊緣清晰【參考答案】A【詳細解析】G1期細胞核膜完整，染色體以染色質(zhì)形式分散在核內(nèi)。選項A正確。選項B（G2/M期特征）表現(xiàn)為核膜解體；選項C（S期特征）為核體積增大；選項D（凋亡特征）核固縮且邊界清晰?！绢}干8】細胞培養(yǎng)中，若發(fā)現(xiàn)貼壁細胞懸浮死亡，可能的原因是什么？【選項】A.培養(yǎng)基滲透壓過高；B.抗生素污染；C.溫度不當；D.堿性磷酸酶活性升高【參考答案】C【詳細解析】培養(yǎng)溫度偏離標準（如37℃）會導致細胞代謝紊亂，貼壁細胞無法正常貼壁而懸浮死亡。選項C正確。選項A（高滲）會直接導致細胞脫水；選項B（污染）多表現(xiàn)為大量懸浮菌體；選項D（堿性磷酸酶升高）與溫度無關(guān)。【題干9】以下哪種技術(shù)可用于檢測細胞周期分布？【選項】A.MTT法；B.流式細胞術(shù)；C.CCK-8檢測；D.免疫熒光染色【參考答案】B【詳細解析】流式細胞術(shù)通過檢測細胞內(nèi)熒光標記的核苷酸（如7-AAD或PI），可定量分析G1/S/G2/M期分布。選項B正確。選項A（MTT）用于細胞增殖活性；選項C（CCK-8）同樣用于活力檢測；選項D（免疫熒光）需結(jié)合特定蛋白標記。【題干10】細胞凍存復蘇時，解凍過程中應優(yōu)先使用哪種介質(zhì)？【選項】A.未添加血清的培養(yǎng)基；B.含10%胎牛血清的培養(yǎng)基；C.DMSO；D.生理鹽水【參考答案】A【詳細解析】解凍時需快速稀釋細胞，未添加血清的培養(yǎng)基可避免血清蛋白對細胞的非特異性吸附。選項A正確。選項B（含血清）可能引起細胞聚集；選項C（DMSO）需在凍存管內(nèi)使用；選項D（生理鹽水）僅用于細胞洗滌?！绢}干11】以下哪種操作步驟可能導致細胞培養(yǎng)瓶底部形成殘留血清？【選項】A.細胞傳代時徹底清洗培養(yǎng)瓶；B.倒置培養(yǎng)時培養(yǎng)基未完全覆蓋細胞；C.細胞融合后未及時更換培養(yǎng)基；D.凍存前未充分混勻凍存液【參考答案】B【詳細解析】倒置培養(yǎng)時培養(yǎng)基未完全覆蓋細胞，會導致血清成分在瓶底濃縮，影響后續(xù)實驗。選項B正確。選項A（徹底清洗）可避免殘留；選項C（及時換液）防止血清消耗；選項D（未混勻）影響凍存效果。【題干12】檢測細胞增殖時，MTT法與CCK-8法的核心區(qū)別是什么？【選項】A.MTT法需使用酶標儀；B.CCK-8法無需細胞裂解；C.MTT法依賴線粒體活性；D.CCK-8法檢測范圍更廣【參考答案】B【詳細解析】CCK-8法通過水溶性四唑鹽還原生成甲瓚，無需裂解細胞即可檢測；MTT法則需裂解細胞后檢測甲瓚。選項B正確。選項A（儀器差異）不成立，兩者均需酶標儀；選項C（線粒體依賴）兩者均需；選項D（范圍）無明確差異?！绢}干13】細胞傳代時，若發(fā)現(xiàn)細胞形態(tài)異常（如多核、怪異核），最可能的原因是什么？【選項】A.培養(yǎng)基未完全更換；B.細胞融合過度；C.抗生素濃度不足；D.傳代時間過長【參考答案】B【詳細解析】細胞融合過度（如雜交瘤細胞）會導致多核或異形核，需通過傳代控制融合率。選項B正確。選項A（未換液）導致營養(yǎng)不足；選項C（抗生素不足）引發(fā)污染；選項D（傳代過久）導致細胞老化?！绢}干14】在細胞培養(yǎng)中，以下哪種操作可能激活細胞凋亡通路？【選項】A.添加5-溴脫氧尿苷（BrdU）；B.空氣暴露導致缺氧；C.使用絲裂霉素C；D.更換新鮮培養(yǎng)基【參考答案】B【詳細解析】缺氧（如低氧培養(yǎng)箱）可激活p53通路，誘導細胞凋亡。選項B正確。選項A（BrdU）用于DNA合成檢測；選項C（絲裂霉素C）抑制DNA復制；選項D（換液）無直接凋亡效應?！绢}干15】檢測細胞分泌蛋白時，以下哪種方法需在細胞培養(yǎng)24小時后進行？【選項】A.細胞轉(zhuǎn)染后立即檢測；B.細胞饑餓處理；C.收集上清液進行ELISA；D.免疫熒光染色【參考答案】C【詳細解析】分泌蛋白需在細胞培養(yǎng)24小時后收集上清液進行檢測，此時蛋白表達已達到穩(wěn)定狀態(tài)。選項C正確。選項A（轉(zhuǎn)染后立即檢測）可能檢測到內(nèi)源性蛋白；選項B（饑餓處理）可能抑制分泌；選項D（免疫熒光）需固定細胞?！绢}干16】細胞凍存管在-80℃保存時，應避免以下哪種操作？【選項】A.凍存管未充分密封；B.凍存前未添加DMSO；C.凍存后未充分搖勻；D.凍存溫度未達-80℃【參考答案】B【詳細解析】凍存管需在凍存前添加適量DMSO（通常10%），以穩(wěn)定細胞膜和DNA。選項B正確。選項A（未密封）會導致冷凝水污染；選項C（未搖勻）影響凍存液分布；選項D（溫度未達）可能影響凍存效果。【題干17】在細胞周期檢測中，G0/G1期細胞的主要特征是什么？【選項】A.細胞體積增大，核仁明顯；B.細胞周期進程受阻；C.細胞質(zhì)內(nèi)游離鈣離子升高；D.細胞核固縮【參考答案】B【詳細解析】G0/G1期細胞暫時退出細胞周期進程，處于靜止狀態(tài)。選項B正確。選項A（S期特征）為核體積增大；選項C（鈣離子升高）與凋亡相關(guān)；選項D（核固縮）為G2/M期或凋亡特征?！绢}干18】檢測細胞增殖時，若使用CCK-8法，需注意以下哪種事項？【選項】A.細胞密度需低于2000個/孔；B.培養(yǎng)基需完全覆蓋細胞；C.檢測前需用胰酶消化；D.需設(shè)置空白對照【參考答案】A【詳細解析】CCK-8法要求細胞密度低于2000個/孔，過高會導致代謝產(chǎn)物疊加影響檢測。選項A正確。選項B（培養(yǎng)基覆蓋）適用于MTT法；選項C（消化）會破壞細胞結(jié)構(gòu)；選項D（空白對照）為必要步驟但非特殊要求?！绢}干19】細胞傳代時，若發(fā)現(xiàn)細胞貼壁率顯著降低，可能的原因是什么？【選項】A.培養(yǎng)基pH值異常；B.細胞融合過度；C.抗生素濃度不足；D.傳代時間過短【參考答案】D【詳細解析】傳代時間過短（如未達到融合度50%-70%）會導致細胞未完全同步化，貼壁率降低。選項D正確。選項A（pH異常）會導致細胞形態(tài)改變；選項B（融合過度）會降低貼壁率；選項C（抗生素不足）引發(fā)污染?！绢}干20】檢測細胞凋亡時，流式細胞術(shù)常用哪種熒光染料？【選項】A.7-AAD；B.PI；C.hoechst33342；D.DAPI【參考答案】A【詳細解析】7-AAD（7-氨基actinomycinD）可特異性結(jié)合凋亡細胞膜通透性增加后的DNA，用于流式細胞術(shù)凋亡檢測。選項A正確。選項B（PI）用于檢測細胞周期時需結(jié)合DNA酶處理；選項C（hoechst33342）用于核DNA染色；選項D（DAPI）需避光操作且毒性較高。2025年綜合類-病理學技術(shù)(主管技師)-細胞培養(yǎng)技術(shù)歷年真題摘選帶答案(篇3)【題干1】細胞傳代操作中，若發(fā)現(xiàn)貼壁細胞生長不良且懸浮細胞增多，最可能的原因是【選項】A.細胞密度過高B.培養(yǎng)基中血清濃度不足C.細胞污染D.堿性磷酸酶活性異常【參考答案】B【詳細解析】血清濃度不足會導致細胞無法有效增殖，血清中的生長因子和激素對貼壁細胞生長至關(guān)重要。密度過高（A）通常導致懸浮細胞減少而非增多，污染（C）多表現(xiàn)為渾濁或菌落，堿性磷酸酶異常（D）與增殖狀態(tài)無直接關(guān)聯(lián)?！绢}干2】配制RPMI-1640培養(yǎng)基時，必須添加的成分是【選項】A.谷氨酰胺B.酚紅C.胰島素D.青霉素【參考答案】A【詳細解析】RPMI-1640為無血清培養(yǎng)基，需添加谷氨酰胺作為細胞代謝的氮源。酚紅（B）用于pH指示，胰島素（C）屬于添加型生長因子，青霉素（D）為抗生素，非培養(yǎng)基必需成分?！绢}干3】細胞污染中最具破壞性的類型是【選項】A.真菌污染B.霉菌污染C.細菌污染D.病毒污染【參考答案】D【詳細解析】病毒污染可長期潛伏于細胞中，通過干擾細胞周期或誘變機制導致實驗數(shù)據(jù)失真，且難以徹底清除。真菌（A/B）污染多表現(xiàn)為菌絲或孢子，細菌（C）污染可通過抗生素抑制。【題干4】細胞周期S期的主要生化標志物是【選項】A.細胞體積增大B.核酸含量倍增C.細胞膜通透性增加D.胞質(zhì)分裂【參考答案】B【詳細解析】S期是DNA合成期，核苷酸含量倍增是S期的核心特征。細胞體積增大（A）可能出現(xiàn)在G1/S期轉(zhuǎn)換階段，膜通透性（C）與凋亡相關(guān)，胞質(zhì)分裂（D）發(fā)生在M期?！绢}干5】傳代細胞首次接種后，最佳觀察細胞融合的時間是【選項】A.24小時B.48小時C.72小時D.96小時【參考答案】C【詳細解析】貼壁細胞傳代后，48小時完成初次增殖，72小時細胞融合度可達80%-90%，此時形態(tài)學觀察最顯著。24小時（A）細胞尚未完成貼壁，96小時（D）可能進入衰退期?！绢}干6】檢測細胞凋亡的金標準方法是【選項】A.堿性磷酸酶染色B.TUNEL法C.臺盼藍染色D.熒光標記【參考答案】B【詳細解析】TUNEL法通過檢測末端轉(zhuǎn)移酶活性標記DNA斷裂，特異性識別凋亡細胞，是目前國際公認的凋亡檢測金標準。堿性磷酸酶（A）用于檢測磷酸化底物，臺盼藍（C）染色區(qū)分死活細胞，熒光標記（D）需結(jié)合特定探針。【題干7】細胞傳代時，若原代培養(yǎng)瓶底部殘留較多舊培養(yǎng)基，可能導致【選項】A.細胞增殖加速B.細胞形態(tài)異常C.細胞污染風險增加D.細胞活性提高【參考答案】B【詳細解析】殘留舊培養(yǎng)基中的代謝產(chǎn)物（如乳酸、氨）易導致pH失衡，影響細胞正常代謝。同時可能激活應激反應，使細胞呈現(xiàn)多形性或空泡化。增殖加速（A/D）需要新鮮培養(yǎng)基支持，污染（C）與殘留物無關(guān)。【題干8】下列哪種成分不能作為細胞培養(yǎng)基的碳源【選項】A.葡萄糖B.乳糖C.蔗糖D.丙酮酸【參考答案】D【詳細解析】丙酮酸是三羧酸循環(huán)的中間產(chǎn)物，不能直接作為碳源。葡萄糖（A）和乳糖（B）是常見碳源，蔗糖（C）需經(jīng)分解代謝后利用。需注意乳糖僅用于某些特定細胞系（如L929）。【題干9】細胞傳代時，若發(fā)現(xiàn)細胞呈多核或巨大細胞，最可能的原因是【選項】A.細胞密度不足B.培養(yǎng)溫度異常C.細胞周期紊亂D.培養(yǎng)基滲透壓變化【參考答案】C【詳細解析】多核或巨大細胞是細胞周期調(diào)控失常的表現(xiàn)，常見于血清濃度過高或接觸抑制失效導致S/G2期阻滯。密度不足（A）通常表現(xiàn)為貼壁不良，溫度異常（B）主要影響酶活性，滲透壓變化（D）多導致細胞皺縮或破裂?！绢}干10】下列哪種抗生素對支原體污染無效【選項】A.紅霉素B.鏈霉素C.球孢菌素D.青霉素【參考答案】D【詳細解析】青霉素針對細菌細胞壁合成，對無細胞壁的支原體（屬細菌界但無細胞壁）完全無效。紅霉素（A）和鏈霉素（B）對支原體有效，球孢菌素（C）用于真菌污染?！绢}干11】細胞傳代后首次融合達90%時，最佳傳代比例為【選項】A.1:3B.1:5C.1:7D.1:10【參考答案】C【詳細解析】傳代比例需考慮細胞增殖周期。融合度90%時，剩余未融合細胞仍需1-2天完成增殖，1:7比例（C）可保證后續(xù)培養(yǎng)周期穩(wěn)定。1:3（A）過快易導致營養(yǎng)不足，1:5（B）和1:10（D）均可能影響傳代效率?！绢}干12】檢測細胞增殖常用的四色染料是【選項】A.臺盼藍-結(jié)晶紫B.7-AAD-PIC.熒光黃-羅丹明D.美藍-亞甲藍【參考答案】B【詳細解析】7-AAD（7-氨基actinomycinD）結(jié)合DNA抑制核酸酶，PI（碘化丙啶）結(jié)合游離DNA，兩者聯(lián)合可同時檢測活細胞（7-AAD陰性）和死細胞（PI陽性）。臺盼藍（A）僅標記死細胞，其他組合（C/D）非標準檢測方案?！绢}干13】細胞培養(yǎng)中，血清濃度突然升高可能導致【選項】A.細胞凋亡B.細胞周期阻滯C.細胞融合加速D.細胞活性提高【參考答案】B【詳細解析】高濃度血清可能通過激活某些促凋亡信號通路（如p53）或干擾細胞周期調(diào)控蛋白（如CDK）導致阻滯。細胞融合加速（C）需要細胞間接觸抑制解除，活性提高（D）需穩(wěn)定培養(yǎng)條件，與血清濃度突變無直接關(guān)聯(lián)?！绢}干14】下列哪種方法不能用于細胞增殖計數(shù)【選項】A.臺盼藍染色法B.CCK-8法C.MTT法D.流式細胞術(shù)【參考答案】B【詳細解析】CCK-8法基于水溶性四氮唑鹽還原反應，需在96孔板中進行，無法直接獲得細胞總數(shù)。臺盼藍染色（A）和MTT法（C）適用于單層細胞定量，流式細胞術(shù)（D）需細胞懸液且對儀器要求高?！绢}干15】細胞凋亡時線粒體膜通透性增加會釋放【選項】A.胞質(zhì)因子B.細胞色素CC.脂溶性色素D.堿性磷酸酶【參考答案】B【詳細解析】線粒體膜通透性增加導致細胞色素C（Cytc）釋放到胞質(zhì)，與凋亡誘導因子形成復合體激活caspase。胞質(zhì)因子（A）多參與信號傳導，脂溶性色素（C）用于染色觀察，堿性磷酸酶（D）與凋亡無直接關(guān)聯(lián)?！绢}干16】下列哪種培養(yǎng)基需定期補充葡萄糖【選項】A.DMEM/F-12B.RPMI-1640C.Ham'sF-12D.MCDB-143【參考答案】C【詳細解析】Ham'sF-12培養(yǎng)基以蔗糖為碳源，需定期補充葡萄糖維持代謝平衡。DMEM/F-12（A）和RPMI-1640（B）含葡萄糖作為主要碳源，MCDB-143（D）為低糖配方但無需額外補充?！绢}干17】細胞傳代時若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液pH持續(xù)升高，最可能的原因是【選項】A.細胞密度過高B.培養(yǎng)基中乳酸脫氫酶活性過強C.堿性磷酸酶活性異常D.細胞外基質(zhì)降解【參考答案】B【詳細解析】乳酸脫氫酶（LDH）將葡萄糖轉(zhuǎn)化為乳酸，pH升高（<7.2）是典型表現(xiàn)。細胞密度過高（A）會導致pH下降（乳酸積累），堿性磷酸酶（C）與pH無直接關(guān)聯(lián)，基質(zhì)降解（D）多引起pH波動?！绢}干18】檢測細胞凋亡的形態(tài)學特征是【選項】A.細胞膜內(nèi)陷B.核固縮C.碎片形成D.細胞體積縮小【參考答案】C【詳細解析】凋亡細胞核DNA降解形成凋亡小體（碎片），隨后被吞噬。細胞膜內(nèi)陷（A）是壞死特征，核固縮（B）常見于凋亡早期，體積縮小（D）是壞死晚期表現(xiàn)?！绢}干19】細胞周期檢測中，Hoechst33342染色主要用于【選項】A.檢測活細胞B.檢測死細胞C.染色細胞核DNAD.染色細胞質(zhì)成分【參考答案】C【詳細解析】Hoechst33342為核酸染料，可特異性結(jié)合細胞核DNA，通過熒光強度反映細胞周期階段。活細胞檢測（A）需結(jié)合PI，死細胞（B）需臺盼藍染色，細胞質(zhì)染色（D）需羅丹明等染料。【題干20】細胞培養(yǎng)中，若發(fā)現(xiàn)貼壁細胞大量懸浮，最可能的原因是【選項】A.培養(yǎng)基滲透壓過低B.細胞周期紊亂C.營養(yǎng)物質(zhì)缺乏D.抗生素過量【參考答案】A【詳細解析】滲透壓過低（如低鈉濃度）會導致細胞脫水并從貼壁面脫落。細胞周期紊亂（B）多引起多核或巨大細胞，營養(yǎng)缺乏（C）通常導致生長遲緩而非懸浮，抗生素過量（D）可能抑制貼壁相關(guān)蛋白表達。2025年綜合類-病理學技術(shù)(主管技師)-細胞培養(yǎng)技術(shù)歷年真題摘選帶答案(篇4)【題干1】原代細胞培養(yǎng)時，貼壁時間通常需要多長時間？【選項】A.24小時B.48小時C.72小時D.96小時【參考答案】C【詳細解析】原代細胞貼壁時間一般為48-72小時，貼壁后形成單層細胞即可進行傳代。過早（如24小時）可能未完成貼壁，過晚（如96小時）可能導致部分細胞死亡或污染風險增加?！绢}干2】細胞傳代時，最佳傳代倍數(shù)為多少倍？【選項】A.2-3倍B.3-5倍C.5-8倍D.8-10倍【參考答案】C【詳細解析】傳代最佳倍數(shù)為5-8倍，此時細胞處于對數(shù)生長期末期，增殖活躍但尚未過度擁擠。若傳代過早（如2-3倍）可能影響增殖效率，過晚（如8-10倍）易導致細胞衰老或死亡?！绢}干3】在倒置顯微鏡下觀察細胞時，若發(fā)現(xiàn)大量圓形顆粒狀物質(zhì)，最可能的污染類型是什么？【選項】A.細菌污染B.真菌污染C.霉菌污染D.霉草污染【參考答案】B【詳細解析】真菌污染在倒置顯微鏡下表現(xiàn)為圓形、顆粒狀或放射狀結(jié)構(gòu)，常呈白色或奶油色。細菌污染多呈絲狀或云霧狀，霉菌污染則可能伴隨黑色或綠色孢子。【題干4】凍存細胞時，常用的保護劑成分是什么？【選項】A.葡萄糖B.胰島素C.DMSOD.胰島素+DMSO【參考答案】C【詳細解析】DMSO（二甲基亞砜）是細胞凍存的核心保護劑，可降低冰晶形成對細胞的損傷。胰島素主要用于促進貼壁，單獨凍存時無需添加?！绢}干5】細胞融合后，判斷融合成功的最可靠指標是？【選項】A.細胞體積增大B.細胞形態(tài)不規(guī)則C.細胞膜間隙增大D.細胞增殖速度加快【參考答案】C【詳細解析】融合細胞間會形成膜間隙（Tjunction），在相差顯微鏡下可見雙核或multinucleated細胞。其他選項如體積增大（A）是衰老標志，形態(tài)不規(guī)則（B）可能為凋亡，增殖速度（D）與融合無直接關(guān)聯(lián)。【題干6】以下哪種情況屬于細胞培養(yǎng)中的“接觸抑制”？【選項】A.細胞傳代后增殖停滯B.細胞融合后死亡C.培養(yǎng)基營養(yǎng)耗盡D.細胞形態(tài)異?！緟⒖即鸢浮緼【詳細解析】接觸抑制指貼壁細胞在單層生長時因相互接觸而停止增殖，是細胞正常調(diào)控機制。營養(yǎng)耗盡（C）屬于環(huán)境因素，形態(tài)異常（D）可能是污染或應激反應。【題干7】檢測細胞增殖常用的四色染料組合不包括？【選項】A.7-AADB.PIC.hoechst33342D.胰島素【參考答案】D【詳細解析】四色染料通常為7-AAD（凋亡）、PI（死細胞）、hoechst33342（核）和BrdU（增殖）。胰島素（D）是促生長因子，非染色劑?！绢}干8】下列哪種培養(yǎng)基成分在凍存細胞時必須去除？【選項】A.谷氨酰胺B.胰島素C.葡萄糖D.胰酶【參考答案】A【詳細解析】凍存時需去除谷氨酰胺（需在融存后添加），因其代謝產(chǎn)物NH4+在低溫下易導致細胞損傷。胰島素（B）和葡萄糖（C）可保留，胰酶（D）僅在解凍后用于細胞復蘇?！绢}干9】細胞傳代時，若發(fā)現(xiàn)大量空泡狀細胞，最可能的原因是？【選項】A.污染B.營養(yǎng)不足C.氧化應激D.藥物毒性【參考答案】C【詳細解析】空泡狀細胞（vacuoles）是氧化應激的典型表現(xiàn)，常見于高氧環(huán)境或培養(yǎng)基中抗氧化劑不足。藥物毒性（D）多表現(xiàn)為細胞碎片化，營養(yǎng)不足（B）導致細胞皺縮?！绢}干10】判斷細胞傳代成功的核心依據(jù)是？【選項】A.細胞形態(tài)正常B.增殖曲線呈對數(shù)增長C.細胞核仁清晰D.細胞計數(shù)符合要求【參考答案】B【詳細解析】傳代成功的關(guān)鍵是細胞進入對數(shù)生長期（3-7天），此時增殖曲線斜率最大。其他選項如核仁清晰（C）是細胞健康指標，計數(shù)符合要求（D）是操作結(jié)果?！绢}干11】在細胞培養(yǎng)中，哪種抗生素需在倒置培養(yǎng)后添加？【選項】A.青霉素B.美洛西林C.兩性霉素BD.環(huán)丙沙星【參考答案】C【詳細解析】兩性霉素B（C）需在倒置培養(yǎng)后加入，因其對光敏感且易被培養(yǎng)基中的脂類破壞。青霉素（A）和環(huán)丙沙星（D）可在培養(yǎng)基配制時加入，美洛西林（B）為廣譜青霉素?！绢}干12】細胞凍存時，解凍后應立即進行？【選項】A.轉(zhuǎn)入37℃培養(yǎng)ACOB.更換新鮮培養(yǎng)基C.調(diào)整細胞濃度D.檢測細胞活性【參考答案】A【詳細解析】解凍后需立即將細胞轉(zhuǎn)移至37℃培養(yǎng)箱恢復代謝，否則低溫會抑制細胞活性。調(diào)整濃度（C）和檢測活性（D）應在復蘇后24小時進行?！绢}干13】以下哪種情況會導致細胞培養(yǎng)污染？【選項】A.培養(yǎng)瓶內(nèi)壁有纖維狀物B.細胞生長緩慢C.培養(yǎng)基顏色變黃D.細胞形態(tài)均勻【參考答案】A【詳細解析】纖維狀物（A）是真菌污染特征，細菌污染多表現(xiàn)為渾濁，霉菌污染可能伴隨黑色孢子。細胞生長緩慢（B）和顏色變黃（C）可能是營養(yǎng)不足或氧化反應?！绢}干14】細胞融合實驗中，常用的融合劑是？【選項】A.胰酶B.聚乙二醇（PEG）C.胰島素D.葡萄糖【參考答案】B【詳細解析】PEG（聚乙二醇）是經(jīng)典融合劑，通過改變細胞膜通透性促進融合。胰酶（A）用于消化細胞層，胰島素（C）和葡萄糖（D）與融合無直接作用?！绢}干15】在細胞計數(shù)中，若細胞團塊無法分散，應優(yōu)先采?。俊具x項】A.更換消化酶濃度B.延長消化時間C.添加EDTAD.轉(zhuǎn)移至新鮮培養(yǎng)基【參考答案】B【詳細解析】延長消化時間（B）是解決細胞團塊的最佳方法，EDTA（C）會抑制胰酶活性，轉(zhuǎn)移培養(yǎng)基（D）無法解決分散問題?！绢}干16】凍存細胞時，建議的保存溫度是？【選項】A.-20℃B.-80℃C.4℃D.37℃【參考答案】B【詳細解析】-80℃是標準凍存溫度，可長期保存（1-5年）。-20℃易導致冰晶形成損傷細胞，4℃（C）為常溫保存，37℃（D）會加速細胞死亡?！绢}干17】判斷細胞凋亡的特異性染料是？【選項】A.PIB.TUNELC.7-AADD.hoechst33342【參考答案】B【詳細解析】TUNEL（末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶缺口末端標記）是檢測凋亡的金標準，7-AAD（C）和PI（A）用于檢測壞死，hoechst33342（D）顯示細胞核?！绢}干18】在培養(yǎng)基中添加血清的主要作用是？【選項】A.提供能量B.促進貼壁C.補充氨基酸D.激活生長因子【參考答案】D【詳細解析】血清（如10%FBS）含多種生長因子（如EGF、bFGF）、激素和酶，能激活細胞增殖信號通路。能量（A）由葡萄糖提供，貼壁（B）依賴基底膜成分?！绢}干19】細胞傳代后，若出現(xiàn)大量碎片狀細胞，最可能的原因是？【選項】A.污染B.氧化應激C.營養(yǎng)缺乏D.藥物毒性【參考答案】D【詳細解析】碎片狀細胞（碎片細胞）是藥物毒性的典型表現(xiàn)，如抗生素過量。氧化應激（B）多導致空泡，營養(yǎng)缺乏（C）導致皺縮?！绢}干20】在細胞培養(yǎng)中，檢測細胞增殖的常用方法不包括？【選項】A.CCK-8法B.MTT法C.轉(zhuǎn)錄熒光標記法D.細胞計數(shù)法【參考答案】C【詳細解析】轉(zhuǎn)錄熒光標記法（C）用于檢測基因表達，增殖檢測常用CCK-8（A）、MTT（B）和細胞計數(shù)（D）。2025年綜合類-病理學技術(shù)(主管技師)-細胞培養(yǎng)技術(shù)歷年真題摘選帶答案(篇5)【題干1】細胞傳代過程中，若發(fā)現(xiàn)貼壁細胞生長遲緩且形態(tài)異常，最可能的原因是？【選項】A.培養(yǎng)基中血清濃度不足B.細胞傳代時間過長C.細胞融合導致增殖能力下降D.細胞污染【參考答案】C【詳細解析】細胞融合會導致細胞增殖能力下降，表現(xiàn)為生長遲緩和形態(tài)異常。血清濃度不足主要影響細胞代謝而非增殖，傳代時間過長會導致細胞老化而非融合，污染通常伴隨明顯異常形態(tài)或死亡?！绢}干2】配制RPMI-1640培養(yǎng)基時，必須添加的成分是？【選項】A.青霉素50U/mLB.葡萄糖10g/LC.胰島素10μg/mLD.胰酶消化液【參考答案】B【詳細解析】RPMI-1640培養(yǎng)基需添加葡萄糖（10g/L）作為能量來源，其他選項為可選添加劑。青霉素為抗生素（可選），胰島素用于特定細胞（如3D細胞球），胰酶消化液用于傳代而非配制培養(yǎng)基?！绢}干3】細胞培養(yǎng)箱二氧化碳濃度過高會導致？【選項】A.細胞代謝增強B.細胞增殖受抑制C.細胞形態(tài)扁平化D.細胞凋亡增加【參考答案】B【詳細解析】CO?濃度過高（＞5%）會降低pH值，抑制細胞增殖。代謝增強需依賴氧氣充足，形態(tài)扁平化與缺氧相關(guān)，凋亡與氧化應激相關(guān)?！绢}干4】處理細胞污染時，首選的消毒劑是？【選項】A.碘伏75%B.酒精70%C.龍膽紫D.次氯酸鈉【參考答案】D【詳細解析】次氯酸鈉（含氯消毒劑）可徹底殺滅細菌、真菌及支原體，碘伏和酒精僅對表面消毒有效，龍膽紫為堿性染料，不可用于污染處理?！绢}干5】細胞凍存復蘇后，若出現(xiàn)大量細胞碎片，可能的原因為？【選項】A.凍存液未添加DMSOB.凍存溫度過低C.細胞解凍速度過快D.凍存時間不足【參考答案】C【詳細解析】快速解凍會導致冰晶直接損傷細胞膜，形成碎片。DMSO濃度不足（A）會降低細胞存活率但無碎片，低溫（B）延長凍存時間（D）影響存活但無碎片。【題干6】檢測細胞增殖常用的四唑鹽法（MTT法）原理是？【選項】A.細胞線粒體酶還原MTT生成甲瓚B(tài).細胞膜通透性改變C.細胞周期檢測D.細胞凋亡檢測【參考答案】A【詳細解析】MTT法依賴活細胞線粒體酶將MTT還原為甲瓚結(jié)晶，通過溶解結(jié)晶測吸光度。細胞膜通透性改變（B）是凋亡的標志，C選項為流式細胞術(shù)檢測?！绢}干7】細胞傳代時，判斷細胞最佳傳代時間的指標是？【選項】A.細胞體積增大B.細胞密度達90%C.細胞形態(tài)出現(xiàn)多極性D.細胞doublingtime縮短【參考答案】B【詳細解析】傳代時機通常選擇細胞密度達培養(yǎng)瓶90%時，此時細胞處于對數(shù)生長期末，繼續(xù)培養(yǎng)易進入平臺期。形態(tài)多極性（C）提示老化，doublingtime（D）是細胞固有特性?！绢}干8】培養(yǎng)基中添加10%胎牛血清（FBS）的主要作用是？【選項】A.提供能量和維生素B.誘導細胞分化C.維持pH穩(wěn)定D.提供生長因子【參考答案】A【詳細解析】FBS含細胞必需的氨基酸、葡萄糖、維生素及生長因子，主要作用是維持細胞代謝。pH穩(wěn)定（C）依賴緩沖系統(tǒng)，分化（B）需特定因子?！绢}干9】細胞融合常用的聚乙二醇（PEG）濃度范圍是？【選項】A.0.5%-1.5%B.2%-5%C.10%-20%D.50%-100%【參考答案】A【詳細解析】PEG濃度過高（＞1.5%）會破壞細胞膜，導致細胞死亡。2%-5%（B）用于植物細胞融合，10%-20%（C）用于動物細胞雜交瘤?！绢}干10】細胞計數(shù)時，若使用臺盼藍染色，死亡細胞呈？