2025年綜合類-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)歷年真題摘選帶答案(5卷100道合輯-單選題)2025年綜合類-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)歷年真題摘選帶答案(篇1)【題干1】細(xì)胞傳代時(shí)，若原代細(xì)胞已形成單層匯合，應(yīng)選擇哪種方法繼續(xù)培養(yǎng)？【選項(xiàng)】A.直接傳代B.增加血清濃度C.繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞松散D.更換無血清培養(yǎng)基【參考答案】A【詳細(xì)解析】細(xì)胞匯合后需通過傳代維持活性，直接傳代可避免過度增殖導(dǎo)致的細(xì)胞老化。血清濃度調(diào)整適用于不同培養(yǎng)階段需求，但匯合后傳代是標(biāo)準(zhǔn)操作。細(xì)胞松散需消化處理，而更換無血清培養(yǎng)基可能影響細(xì)胞生長(zhǎng)?！绢}干2】培養(yǎng)基中添加的抗生素應(yīng)每48小時(shí)補(bǔ)充一次，主要基于哪種考慮？【選項(xiàng)】A.抗生素半衰期B.細(xì)胞代謝產(chǎn)物分解C.避免細(xì)胞應(yīng)激D.優(yōu)化藥物濃度梯度【參考答案】A【詳細(xì)解析】抗生素半衰期約24小時(shí)，48小時(shí)后濃度顯著下降，需補(bǔ)充以維持抑菌效果。細(xì)胞代謝產(chǎn)物分解主要影響pH值，應(yīng)激反應(yīng)與培養(yǎng)時(shí)間相關(guān)，濃度梯度與長(zhǎng)期培養(yǎng)需求無關(guān)。【題干3】支原體污染的細(xì)胞常表現(xiàn)為哪種形態(tài)變化？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞碎片化B.細(xì)胞核固縮C.細(xì)胞膜出芽D.細(xì)胞器空泡化【參考答案】C【詳細(xì)解析】支原體通過細(xì)胞膜出芽方式增殖，導(dǎo)致細(xì)胞膜表面出現(xiàn)芽狀突起。細(xì)胞碎片化多見于機(jī)械損傷，核固縮是凋亡特征，空泡化常見于營(yíng)養(yǎng)缺乏或老化。【題干4】熒光標(biāo)記的細(xì)胞爬片檢測(cè)中，最佳固定劑為哪種？【選項(xiàng)】A.甲醇B.丙酮C.甲醛D.戊二醛【參考答案】C【詳細(xì)解析】甲醛可穩(wěn)定DNA和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，同時(shí)保留熒光標(biāo)記物活性。甲醇和丙酮易使細(xì)胞脫水皺縮，戊二醛可能破壞膜脂質(zhì)結(jié)構(gòu)?！绢}干5】以下哪種情況會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞傳代失敗？【選項(xiàng)】A.胰酶濃度過高B.細(xì)胞密度低于1×10^5cells/cm2C.培養(yǎng)基未提前滅菌D.細(xì)胞接觸抑制解除【參考答案】B【詳細(xì)解析】傳代需細(xì)胞密度適中（通常1×10^5-5×10^5cells/cm2），過低會(huì)導(dǎo)致傳代后增殖困難。胰酶濃度過高會(huì)損傷細(xì)胞膜，滅菌問題影響培養(yǎng)環(huán)境，接觸抑制解除是傳代后自然現(xiàn)象。【題干6】在細(xì)胞凍存過程中，添加DMSO的最終濃度應(yīng)為多少？【選項(xiàng)】A.1%B.5%C.10%D.20%【參考答案】C【詳細(xì)解析】10%DMSO是標(biāo)準(zhǔn)凍存濃度，可降低冰晶形成對(duì)細(xì)胞膜的損傷。1%濃度不足以有效保護(hù)細(xì)胞，5%可能引發(fā)毒性，20%會(huì)抑制復(fù)蘇后的細(xì)胞活性。【題干7】哪種檢測(cè)方法可區(qū)分活細(xì)胞與死細(xì)胞？【選項(xiàng)】A.臺(tái)盼藍(lán)染色B.結(jié)晶紫染色C.碘液染色D.annexinV-FITC染色【參考答案】A【詳細(xì)解析】臺(tái)盼藍(lán)可逆性染色法：活細(xì)胞膜完整不染色，死細(xì)胞膜通透性增加被染色。結(jié)晶紫為常規(guī)染色劑，碘液用于真菌染色，annexinV-FITC結(jié)合磷脂酰絲氨酸外翻特異性檢測(cè)凋亡早期細(xì)胞?！绢}干8】細(xì)胞周期同步化常用哪種技術(shù)？【選項(xiàng)】A.鏈霉素A.赤霉素B.磺胺嘧啶C.磷酸二酯酶抑制劑【參考答案】A【詳細(xì)解析】鏈霉素可抑制蛋白質(zhì)合成，使細(xì)胞停滯于G1期；赤霉素促進(jìn)細(xì)胞分裂；磺胺嘧啶抑制葉酸代謝；磷酸二酯酶抑制劑（如cAMP類似物）可阻斷G1/S期轉(zhuǎn)換。【題干9】下列哪種培養(yǎng)基適用于原代培養(yǎng)？【選項(xiàng)】A.RPMI-1640B.DMEM/F12C.L-15D.酵母提取物培養(yǎng)基【參考答案】C【詳細(xì)解析】L-15為無血清培養(yǎng)基，pH穩(wěn)定（6.8-7.2），適合原代細(xì)胞培養(yǎng)。RPMI-1640含谷氨酰胺，需定期更換；DMEM/F12含胎牛血清，適合傳代細(xì)胞；酵母提取物培養(yǎng)基多用于微生物培養(yǎng)?！绢}干10】細(xì)胞傳代時(shí)，最佳細(xì)胞濃度為多少？【選項(xiàng)】A.1×10^3cells/cm2B.1×10^4cells/cm2C.1×10^5cells/cm2D.1×10^6cells/cm2【參考答案】C【詳細(xì)解析】傳代細(xì)胞濃度需達(dá)到1×10^5-5×10^5cells/cm2，此時(shí)細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，傳代后增殖效率最高。濃度過低（如選項(xiàng)A）增殖緩慢，過高（如選項(xiàng)D）易形成單層匯合提前終止培養(yǎng)?！绢}干11】支原體污染的實(shí)驗(yàn)室處理流程中，哪一步驟最關(guān)鍵？【選項(xiàng)】A.空氣消毒B.高壓滅菌所有耗材C.細(xì)胞滅活后丟棄D.環(huán)境紫外線照射【參考答案】B【詳細(xì)解析】支原體耐高溫，常規(guī)滅菌（如121℃高壓滅菌30分鐘）無法徹底滅活，需對(duì)污染環(huán)境及所有耗材進(jìn)行高壓滅菌（≥134℃）或化學(xué)滅菌（如10%次氯酸鈉浸泡）。細(xì)胞滅活無法徹底清除污染，紫外線照射效果有限?！绢}干12】細(xì)胞凍存復(fù)蘇后，24小時(shí)內(nèi)應(yīng)觀察什么指標(biāo)？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞形態(tài)B.轉(zhuǎn)錄活性C.蛋白表達(dá)量D.細(xì)胞周期分布【參考答案】A【詳細(xì)解析】復(fù)蘇后24小時(shí)需通過顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)（如細(xì)胞碎片、空泡化等），確認(rèn)凍存成功。轉(zhuǎn)錄活性檢測(cè)需72小時(shí)以上，蛋白表達(dá)量需更長(zhǎng)時(shí)間，細(xì)胞周期分析需同步化處理?！绢}干13】以下哪種情況會(huì)引發(fā)細(xì)胞培養(yǎng)瓶底殘留物堆積？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞密度過高B.轉(zhuǎn)化效率低下C.培養(yǎng)基更新不及時(shí)D.堿性磷酸酶活性檢測(cè)【參考答案】C【詳細(xì)解析】培養(yǎng)基更新不及時(shí)會(huì)導(dǎo)致代謝廢物（如乳酸、尿酸）及細(xì)胞碎片堆積，形成生物膜影響氧氣交換。細(xì)胞密度過高（選項(xiàng)A）易導(dǎo)致單層匯合，轉(zhuǎn)化效率（選項(xiàng)B）與殘留物無關(guān)，堿性磷酸酶檢測(cè)（選項(xiàng)D）需特殊底物?！绢}干14】熒光標(biāo)記細(xì)胞時(shí)，哪種染料需避光保存？【選項(xiàng)】A.DAPIB.CalceinC.PropidiumiodideD.Hoechst33342【參考答案】B【詳細(xì)解析】Calcein（綠色熒光）為光敏性染料，需避光保存；DAPI（藍(lán)色熒光）和Hoechst33342（藍(lán)色熒光）穩(wěn)定性較高；Propidiumiodide（紅色熒光）需4℃避光保存，但選項(xiàng)中未明確溫度條件?！绢}干15】細(xì)胞傳代時(shí)，胰酶消化終點(diǎn)判斷標(biāo)準(zhǔn)為？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞膜呈透明狀B.細(xì)胞體積縮小50%C.細(xì)胞間隙擴(kuò)大D.細(xì)胞核仁清晰可見【參考答案】A【詳細(xì)解析】胰酶消化終點(diǎn)需顯微鏡下觀察細(xì)胞膜局部透明化，同時(shí)保持細(xì)胞輪廓完整。體積縮?。ㄟx項(xiàng)B）可能因過度消化，間隙擴(kuò)大（選項(xiàng)C）提示消化不足，核仁清晰（選項(xiàng)D）與消化無關(guān)?！绢}干16】以下哪種技術(shù)可檢測(cè)細(xì)胞凋亡小體？【選項(xiàng)】A.TUNEL染色B.堿性磷酸酶活性檢測(cè)C.AnnexinV-FITC染色D.熒光原位雜交【參考答案】A【詳細(xì)解析】TUNEL染色特異性檢測(cè)DNA斷裂末端，凋亡小體可通過電鏡或共聚焦顯微鏡直接觀察。AnnexinV-FITC檢測(cè)磷脂酰絲氨酸外翻（凋亡早期），堿性磷酸酶活性檢測(cè)用于檢測(cè)底物特異性酶活性，熒光原位雜交（FISH）用于核酸探針定位?！绢}干17】細(xì)胞傳代時(shí)，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞漂浮，可能是什么原因？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞密度過低B.胰酶濃度過高C.培養(yǎng)基pH值異常D.細(xì)胞融合過度【參考答案】B【詳細(xì)解析】胰酶濃度過高會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜過度水解，形成漂浮的細(xì)胞團(tuán)塊。密度過低（選項(xiàng)A）通常表現(xiàn)為貼壁困難而非漂浮，pH異常（選項(xiàng)C）多導(dǎo)致細(xì)胞皺縮或脫落，融合過度（選項(xiàng)D）會(huì)形成多核細(xì)胞但未必漂浮?！绢}干18】以下哪種培養(yǎng)基不含L-谷氨酰胺？【選項(xiàng)】A.RPMI-1640B.DMEMC.Ham'sF12D.M199【參考答案】C【詳細(xì)解析】Ham'sF12培養(yǎng)基成分中明確不含L-谷氨酰胺，需單獨(dú)添加。RPMI-1640、DMEM和M199均含谷氨酰胺?！绢}干19】細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)使用哪種緩沖液？【選項(xiàng)】A.PBSB.HEPES緩沖液C.10%FBSD.DMSO【參考答案】D【詳細(xì)解析】DMSO（二甲基亞砜）是標(biāo)準(zhǔn)凍存劑，可滲透細(xì)胞膜降低冰晶形成。PBS（選項(xiàng)A）不含冷凍保護(hù)劑，HEPES（選項(xiàng)B）用于維持pH穩(wěn)定，10%FBS（選項(xiàng)C）可能干擾凍存過程?！绢}干20】細(xì)胞傳代后，若出現(xiàn)大量空泡化細(xì)胞，最可能的原因是？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞老化B.胰酶濃度過高C.培養(yǎng)基污染D.細(xì)胞周期紊亂【參考答案】B【詳細(xì)解析】胰酶濃度過高會(huì)破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞器，導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)大量空泡。細(xì)胞老化（選項(xiàng)A）通常表現(xiàn)為核固縮和胞質(zhì)皺縮，污染（選項(xiàng)C）多引起形態(tài)不規(guī)則或死亡，周期紊亂（選項(xiàng)D）需通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)。2025年綜合類-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)歷年真題摘選帶答案(篇2)【題干1】細(xì)胞培養(yǎng)基中添加血清的主要作用是？【選項(xiàng)】A.提供能量B.補(bǔ)充氨基酸C.調(diào)節(jié)滲透壓D.促進(jìn)細(xì)胞增殖【參考答案】D【詳細(xì)解析】血清主要提供生長(zhǎng)因子、激素和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，直接促進(jìn)細(xì)胞增殖（D）。選項(xiàng)A能量由葡萄糖和谷氨酰胺提供，B氨基酸由培養(yǎng)基中的蛋白水解物補(bǔ)充，C滲透壓由緩沖鹽調(diào)節(jié)?！绢}干2】細(xì)胞傳代時(shí)，若發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞大量懸浮死亡，最可能的原因?yàn)?？【選項(xiàng)】A.傳代時(shí)間過短B.抗生素濃度過高C.胰酶消化時(shí)間不足D.培養(yǎng)基未更換【參考答案】B【詳細(xì)解析】抗生素濃度過高會(huì)破壞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)（B）。選項(xiàng)A時(shí)間過短導(dǎo)致細(xì)胞未完全脫離，懸浮死亡更可能是消化過度（C）。D未更換培養(yǎng)基會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)耗盡，但不會(huì)直接致懸浮死亡?！绢}干3】以下哪種試劑用于細(xì)胞凍存前處理？【選項(xiàng)】A.谷氨酰胺B.聚乙二醇C.碳酸氫鈉D.胰酶【參考答案】B【詳細(xì)解析】聚乙二醇（PEG）通過破壞細(xì)胞膜脂質(zhì)結(jié)構(gòu)促進(jìn)細(xì)胞融合（B）。谷氨酰胺（A）為能量前體，碳酸氫鈉（C）調(diào)節(jié)pH，胰酶（D）用于消化貼壁細(xì)胞。【題干4】檢測(cè)細(xì)胞周期的常用方法是？【選項(xiàng)】A.相差顯微鏡觀察B.流式細(xì)胞術(shù)C.染色體核型分析D.免疫熒光標(biāo)記【參考答案】B【詳細(xì)解析】流式細(xì)胞術(shù)通過熒光標(biāo)記DNA含量檢測(cè)細(xì)胞周期（B）。相差顯微鏡（A）觀察形態(tài)，染色體核型（C）用于遺傳分析，免疫熒光（D）檢測(cè)蛋白質(zhì)表達(dá)?！绢}干5】細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)中，為何需在聚乙二醇處理前添加10%胎牛血清？【選項(xiàng)】A.抑制非特異性吸附B.提供融合促進(jìn)因子C.防止細(xì)胞凋亡D.增加細(xì)胞密度【參考答案】B【詳細(xì)解析】胎牛血清中的融合促進(jìn)因子（如鈣離子結(jié)合蛋白）可增強(qiáng)細(xì)胞膜融合效率（B）。選項(xiàng)A血清蛋白可能吸附非目標(biāo)細(xì)胞，C血清中的促凋亡因子需在處理前去除，D密度與融合無直接關(guān)聯(lián)?！绢}干6】下列哪種情況會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)基pH值異常升高？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞大量分泌乳酸B.培養(yǎng)箱二氧化碳濃度不足C.抗生素失效D.葡萄糖濃度過高【參考答案】B【詳細(xì)解析】二氧化碳濃度不足（B）導(dǎo)致培養(yǎng)基堿性升高（pH>7.4）。乳酸分泌（A）會(huì)降低pH，抗生素失效（C）引發(fā)細(xì)菌過度增殖，葡萄糖（D）代謝產(chǎn)生乳酸?！绢}干7】細(xì)胞傳代時(shí)，胰酶消化結(jié)束后需立即加入新鮮培養(yǎng)基，主要為了避免？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞脫膜困難B.胰酶殘留毒性C.細(xì)胞過度增殖D.細(xì)胞黏附增強(qiáng)【參考答案】B【詳細(xì)解析】未及時(shí)更換培養(yǎng)基會(huì)殘留胰酶毒性（B），導(dǎo)致細(xì)胞死亡。選項(xiàng)A胰酶濃度過高才會(huì)導(dǎo)致脫膜困難，C胰酶促進(jìn)增殖需特定濃度，D黏附增強(qiáng)需血清刺激?！绢}干8】以下哪種情況需暫停細(xì)胞傳代？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞密度達(dá)80%B.細(xì)胞形態(tài)異常C.培養(yǎng)基中出現(xiàn)渾濁D.細(xì)胞存活率低于70%【參考答案】C【詳細(xì)解析】培養(yǎng)基渾濁（C）提示細(xì)菌污染，需暫停傳代并滅菌處理。選項(xiàng)A密度達(dá)80%時(shí)需傳代，B形態(tài)異常需排查毒性物質(zhì)，D存活率低于70%需優(yōu)化消化條件。【題干9】細(xì)胞凍存時(shí)，DMSO的添加濃度為？【選項(xiàng)】A.5%B.10%C.20%D.30%【參考答案】C【詳細(xì)解析】20%DMSO（C）可最大程度抑制冰晶形成，保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)。5%（A）效果不足，30%（D）可能破壞細(xì)胞，10%（B）用于短期保存?！绢}干10】檢測(cè)細(xì)胞增殖常用的四甲基偶氮唑藍(lán)法（MTT法）原理是？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞膜通透性改變B.葡萄糖代謝產(chǎn)物顯色C.DNA含量變化D.蛋白質(zhì)合成增加【參考答案】B【詳細(xì)解析】MTT法通過活細(xì)胞代謝還原MTT生成藍(lán)紫色甲瓚（B）。細(xì)胞膜通透性改變（A）見于死亡細(xì)胞，DNA（C）用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)，蛋白質(zhì)（D）用Westernblot分析?！绢}干11】細(xì)胞傳代時(shí)，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞碎片增多，最可能的原因?yàn)?？【選項(xiàng)】A.胰酶濃度過高B.融合實(shí)驗(yàn)污染C.培養(yǎng)基未更換D.二氧化碳濃度不足【參考答案】A【詳細(xì)解析】胰酶濃度過高（A）會(huì)過度剪切細(xì)胞骨架蛋白，導(dǎo)致碎片化。融合污染（B）表現(xiàn)為多核細(xì)胞，培養(yǎng)基未更換（C）導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)耗盡，CO?不足（D）影響pH?！绢}干12】細(xì)胞凍存復(fù)蘇后，若存活率低于50%，應(yīng)優(yōu)先排查？【選項(xiàng)】A.凍存溫度B.融化速率C.DMSO濃度D.細(xì)胞傳代次數(shù)【參考答案】B【詳細(xì)解析】快速融化（B）會(huì)形成冰晶損傷細(xì)胞膜。凍存溫度（A）過低或過高均會(huì)影響存活，DMSO濃度（C）需嚴(yán)格計(jì)算，傳代次數(shù)（D）與凍存無關(guān)。【題干13】以下哪種情況需使用無血清培養(yǎng)基？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞大規(guī)模擴(kuò)增B.細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)C.細(xì)胞周期同步化D.細(xì)胞凋亡檢測(cè)【參考答案】C【詳細(xì)解析】無血清培養(yǎng)基（C）通過化學(xué)成分同步化細(xì)胞周期。血清（A）促進(jìn)擴(kuò)增，融合實(shí)驗(yàn)（B）需血清提供融合因子，凋亡檢測(cè)（D）需血清維持存活。【題干14】檢測(cè)細(xì)胞凋亡常用的AnnexinV/PI雙染法中，AnnexinV標(biāo)記的細(xì)胞特征是？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞膜完整B.細(xì)胞核碎裂C.膜磷脂外翻D.胞質(zhì)濃縮【參考答案】C【詳細(xì)解析】AnnexinV（C）特異性結(jié)合膜磷脂外翻的凋亡細(xì)胞，PI（碘丙啶）染色核膜破損（B）。選項(xiàng)A膜完整為正常細(xì)胞，D胞質(zhì)濃縮為凋亡晚期特征?！绢}干15】細(xì)胞培養(yǎng)過程中，若發(fā)現(xiàn)貼壁率持續(xù)低于50%，需優(yōu)先排查？【選項(xiàng)】A.抗生素失效B.培養(yǎng)基pH異常C.胰酶消化過度D.細(xì)胞密度過高【參考答案】C【詳細(xì)解析】胰酶消化過度（C）導(dǎo)致細(xì)胞無法有效貼壁?？股厥Вˋ）會(huì)引發(fā)細(xì)菌污染，pH異常（B）影響貼壁，密度過高（D）導(dǎo)致?lián)頂D效應(yīng)?！绢}干16】以下哪種方法用于檢測(cè)細(xì)胞分泌功能？【選項(xiàng)】A.CCK-8實(shí)驗(yàn)B.蛋白質(zhì)印跡C.細(xì)胞周期分析D.MTT法【參考答案】A【詳細(xì)解析】CCK-8（A）通過檢測(cè)細(xì)胞分泌的還原型黃嘌呤氧化酶活性評(píng)估增殖，蛋白質(zhì)印跡（B）用于檢測(cè)分泌蛋白，細(xì)胞周期（C）和MTT（D）反映增殖能力?！绢}干17】細(xì)胞凍存時(shí)，若未充分混勻凍存管可能導(dǎo)致？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞活性降低B.凍存失敗C.細(xì)胞污染D.細(xì)胞分化【參考答案】B【詳細(xì)解析】未混勻會(huì)導(dǎo)致DMSO分布不均（B），部分區(qū)域濃度不足無法抑制冰晶?；钚越档停ˋ）由融化速度或溫度引起，污染（C）需滅菌不嚴(yán)，分化（D）與凍存無關(guān)?！绢}干18】檢測(cè)細(xì)胞增殖的BrDU摻入法中，顯色劑為？【選項(xiàng)】A.MTTB.甲基綠C.熒光素D.煌綠【參考答案】C【詳細(xì)解析】BrDU（Bromodeoxyuridine）摻入DNA后，熒光素（C）染色顯熒光。MTT（A）用于還原顯色，甲基綠（B）用于細(xì)胞核染色，煌綠（D）用于細(xì)胞計(jì)數(shù)。【題干19】細(xì)胞傳代時(shí)，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞形態(tài)呈多核空泡狀，最可能的原因?yàn)?？【選項(xiàng)】A.胰酶濃度不足B.融合實(shí)驗(yàn)污染C.培養(yǎng)基未更換D.二氧化碳濃度過高【參考答案】B【詳細(xì)解析】多核空泡狀（B）為細(xì)胞融合異常表現(xiàn)。胰酶不足（A）導(dǎo)致傳代困難，培養(yǎng)基未更換（C）導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)缺乏，CO?過高（D）導(dǎo)致酸中毒?！绢}干20】細(xì)胞凍存復(fù)蘇后，若存活率異常升高，可能原因？【選項(xiàng)】A.凍存溫度過低B.融化速率過快C.DMSO濃度過高D.細(xì)胞密度適中【參考答案】C【詳細(xì)解析】DMSO濃度過高（C）會(huì)抑制冰晶形成，暫時(shí)提高存活率。溫度過低（A）延長(zhǎng)凍存時(shí)間，融化過快（B）損傷細(xì)胞，密度適中（D）與存活率無直接關(guān)聯(lián)。2025年綜合類-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)歷年真題摘選帶答案(篇3)【題干1】在建立原代細(xì)胞系時(shí)，最關(guān)鍵的操作步驟是避免細(xì)胞被纖維連結(jié)蛋白過度包裹而失去貼壁能力。以下哪種處理方法可有效解決這一問題？【選項(xiàng)】A.增加血清濃度至20%B.調(diào)整培養(yǎng)基pH至7.4C.使用0.1%二甲基亞砜處理D.添加0.05%EDTA【參考答案】C【詳細(xì)解析】二甲基亞砜（DMSO）可破壞細(xì)胞間纖維連結(jié)蛋白的交聯(lián)作用，幫助細(xì)胞分離。其他選項(xiàng)：A高血清可能促進(jìn)貼壁；B維持正常pH；DEDTA用于去除鈣鎂離子，但濃度過高會(huì)損傷細(xì)胞膜。【題干2】細(xì)胞傳代時(shí)，若發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞在24小時(shí)內(nèi)大量懸浮死亡，最可能的原因?yàn)?？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞密度過高B.培養(yǎng)基中葡萄糖耗盡C.堿性磷酸酶活性異常D.抗生素失效【參考答案】A【詳細(xì)解析】細(xì)胞密度過高會(huì)導(dǎo)致代謝產(chǎn)物（如乳酸）積累和氧氣供應(yīng)不足，引發(fā)懸浮死亡。B選項(xiàng)需48小時(shí)以上才會(huì)顯著影響；C選項(xiàng)與細(xì)胞死亡無直接關(guān)聯(lián)；D選項(xiàng)失效通常導(dǎo)致細(xì)菌污染而非細(xì)胞自溶。【題干3】?jī)龃婕?xì)胞時(shí)，慢速凍存法的關(guān)鍵步驟是？【選項(xiàng)】A.直接投入液氮B.-80℃預(yù)冷30分鐘C.分裝后速凍至-20℃D.使用DMSO梯度降溫【參考答案】D【詳細(xì)解析】慢速凍存需將細(xì)胞懸液與10%DMSO混合后分裝，在-80℃梯度降溫（4℃→-80℃每分鐘降5℃）以減少冰晶損傷。其他選項(xiàng)：A導(dǎo)致細(xì)胞快速脫水死亡；B無降溫梯度；C未達(dá)有效凍存溫度?！绢}干4】以下哪種操作會(huì)顯著降低細(xì)胞傳代效率？【選項(xiàng)】A.使用胰酶消化后立即用血清終止反應(yīng)B.消化時(shí)間延長(zhǎng)至5分鐘C.消化后用無酚紅培養(yǎng)基漂洗D.終止消化后立即接種至新培養(yǎng)基【參考答案】B【詳細(xì)解析】胰酶消化時(shí)間超過5分鐘會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化損傷，存活率下降40%以上。A選項(xiàng)血清終止可減少纖維連結(jié)蛋白殘留；C選項(xiàng)去除酚紅更利于觀察增殖；D選項(xiàng)及時(shí)提供新鮮培養(yǎng)基維持細(xì)胞活性?！绢}干5】支原體污染的細(xì)胞傳代后，最早出現(xiàn)的病理學(xué)特征是？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞體積顯著增大B.細(xì)胞核固縮C.胞質(zhì)空泡化D.細(xì)胞膜孔洞形成【參考答案】D【詳細(xì)解析】支原體通過形成膜孔洞破壞細(xì)胞膜完整性，鏡檢可見胞膜不規(guī)則突起和微孔。其他選項(xiàng)：A為病毒感染特征；B是凋亡表現(xiàn)；C常見于培養(yǎng)基污染。需通過PCR或免疫熒光確認(rèn)。【題干6】建立永生化細(xì)胞系時(shí)，常用的轉(zhuǎn)化試劑是？【選項(xiàng)】A.酵母提取物B.轉(zhuǎn)化酶C.胰島素D.胰酶+EDTA【參考答案】B【詳細(xì)解析】轉(zhuǎn)化酶（如L-阿拉伯糖苷酶）可幫助外源基因整合至宿主基因組。其他選項(xiàng)：A提供營(yíng)養(yǎng)因子；C調(diào)節(jié)血糖；D用于原代細(xì)胞分離?！绢}干7】細(xì)胞融合后，需加入的特定成分是？【選項(xiàng)】A.胰島素B.胰酶C.聚乙二醇D.胰高血糖素【參考答案】C【詳細(xì)解析】聚乙二醇（PEG）通過脫水-復(fù)水機(jī)制促進(jìn)細(xì)胞膜融合，通常在融合后30分鐘內(nèi)加入。其他選項(xiàng)：A用于調(diào)節(jié)代謝；B用于消化細(xì)胞；D用于拮抗胰島素?！绢}干8】細(xì)胞周期同步化實(shí)驗(yàn)中，用于阻斷G1/S期轉(zhuǎn)換的關(guān)鍵藥物是？【選項(xiàng)】A.秋水仙堿B.磷酸二酯酶抑制劑C.紫杉醇D.阿糖胞苷【參考答案】A【詳細(xì)解析】秋水仙堿抑制微管聚合，使細(xì)胞停滯在G2/M期。B選項(xiàng)抑制cAMP信號(hào)通路；C選項(xiàng)穩(wěn)定微管；D選項(xiàng)抑制DNA合成。需結(jié)合熒光標(biāo)記檢測(cè)細(xì)胞周期分布。【題干9】下列哪種培養(yǎng)基成分能顯著抑制成纖維細(xì)胞增殖？【選項(xiàng)】A.青霉素B.葡萄糖C.胰島素D.胰酶【參考答案】D【詳細(xì)解析】胰酶（如膠原酶）用于消化細(xì)胞外基質(zhì)，過量會(huì)損傷細(xì)胞表面受體。其他選項(xiàng)：A預(yù)防細(xì)菌污染；B調(diào)節(jié)能量代謝；C促進(jìn)細(xì)胞增殖?！绢}干10】細(xì)胞傳代時(shí)，判斷貼壁率是否合格的標(biāo)準(zhǔn)是？【選項(xiàng)】A.超過90%細(xì)胞貼壁B.細(xì)胞形態(tài)保持完整C.培養(yǎng)基無渾濁D.細(xì)胞密度達(dá)到1×10^5/mL【參考答案】A【詳細(xì)解析】貼壁率<90%說明傳代過度或消化不足。其他選項(xiàng)：B需通過相差顯微鏡觀察；C需在48小時(shí)后檢測(cè)；D是細(xì)胞增殖的定量指標(biāo)?！绢}干11】?jī)龃婕?xì)胞復(fù)蘇后，出現(xiàn)大量細(xì)胞碎片的原因是？【選項(xiàng)】A.凍存溫度不足B.梯度降溫不充分C.終止液未及時(shí)更換D.培養(yǎng)基未更換【參考答案】B【詳細(xì)解析】未完成-80℃梯度降溫（<15℃/分鐘）會(huì)導(dǎo)致冰晶過大，復(fù)蘇時(shí)細(xì)胞膜脂質(zhì)崩解。其他選項(xiàng)：A導(dǎo)致細(xì)胞快速脫水；C需使用含EDTA的終止液；D需更換至完全培養(yǎng)基?！绢}干12】細(xì)胞傳代時(shí)，下列哪種操作會(huì)降低病毒污染風(fēng)險(xiǎn)？【選項(xiàng)】A.使用新鮮胰酶消化B.消化后立即離心C.消化時(shí)間縮短至2分鐘D.終止液含5%胎牛血清【參考答案】D【詳細(xì)解析】5%胎牛血清可中和胰酶活性，同時(shí)封閉病毒吸附位點(diǎn)。其他選項(xiàng)：A增加污染機(jī)會(huì)；B未去除消化液；C易導(dǎo)致細(xì)胞未完全分離?！绢}干13】細(xì)胞融合后，最關(guān)鍵的后續(xù)處理是？【選項(xiàng)】A.立即更換完全培養(yǎng)基B.繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)C.加入抗代謝藥物D.調(diào)整CO2濃度至5%【參考答案】B【詳細(xì)解析】融合細(xì)胞需在無選擇壓力下完成基因整合，48小時(shí)后檢測(cè)融合率。其他選項(xiàng)：A過早更換培養(yǎng)基會(huì)丟失未融合細(xì)胞；C抑制DNA復(fù)制；D正常培養(yǎng)需5%CO2?！绢}干14】細(xì)胞傳代時(shí)，若發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞在48小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)大量凋亡，最可能的原因?yàn)?？【選項(xiàng)】A.培養(yǎng)基中谷氨酰胺耗盡B.細(xì)胞密度過高C.胰酶消化時(shí)間不足D.抗生素失效【參考答案】A【詳細(xì)解析】谷氨酰胺分解產(chǎn)生氨，pH升高至7.8以上會(huì)激活caspase通路導(dǎo)致凋亡。其他選項(xiàng)：B引發(fā)懸浮死亡；C導(dǎo)致細(xì)胞未完全分離；D引發(fā)細(xì)菌污染?！绢}干15】建立單細(xì)胞克隆時(shí)，常用的篩選標(biāo)記是？【選項(xiàng)】A.綠色熒光蛋白B.藍(lán)色熒光蛋白C.紅色熒光蛋白D.黃色熒光蛋白【參考答案】A【詳細(xì)解析】綠色熒光蛋白（GFP）可通過熒光顯微鏡直接識(shí)別單克隆。其他選項(xiàng)：B用于報(bào)告基因檢測(cè)；C用于細(xì)胞分選；D尚未廣泛應(yīng)用?！绢}干16】細(xì)胞凍存時(shí)，若未添加DMSO，復(fù)蘇后存活率通常？【選項(xiàng)】A.達(dá)90%以上B.50%-70%C.20%-30%D.低于10%【參考答案】C【詳細(xì)解析】DMSO（10%）可滲透細(xì)胞膜減少冰晶形成，未添加時(shí)冰晶損傷導(dǎo)致20%-30%存活率。其他選項(xiàng)：A需添加DMSO；B為部分污染存活率；D為完全壞死?！绢}干17】細(xì)胞周期分析中，用于檢測(cè)S期細(xì)胞的熒光染料是？【選項(xiàng)】A.碘化丙啶B.熒光黃素C.紫杉醇D.磷酸二酯酶抑制劑【參考答案】A【詳細(xì)解析】碘化丙啶（PI）可嵌入DNA雙螺旋，結(jié)合流式細(xì)胞儀檢測(cè)S/G2期。其他選項(xiàng)：B用于熒光標(biāo)記；C為微管抑制劑；D為信號(hào)通路抑制劑?！绢}干18】細(xì)胞傳代時(shí)，判斷消化完全的標(biāo)準(zhǔn)是？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞呈透明狀懸浮B.消化液pH降至4.5C.細(xì)胞膜出現(xiàn)孔洞D.終止液顏色變?yōu)辄S色【參考答案】A【詳細(xì)解析】完全消化的細(xì)胞膜通透性改變呈透明狀。其他選項(xiàng)：B胰酶最佳活性pH為7.4-8.0；C為支原體污染特征；D為酚紅指示劑，與消化無關(guān)?！绢}干19】細(xì)胞融合后，需檢測(cè)的分子標(biāo)志是？【選項(xiàng)】A.蛋白質(zhì)表達(dá)譜B.DNA甲基化水平C.膜電位變化D.細(xì)胞周期蛋白表達(dá)【參考答案】D【詳細(xì)解析】細(xì)胞周期蛋白（如CyclinD1）表達(dá)量變化可反映基因整合狀態(tài)。其他選項(xiàng)：A需質(zhì)譜分析；B與表觀遺傳相關(guān)；C需膜電位測(cè)定儀檢測(cè)?！绢}干20】細(xì)胞傳代時(shí)，若發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞在24小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)大量出芽現(xiàn)象，最可能的原因?yàn)椋俊具x項(xiàng)】A.細(xì)胞密度過低B.培養(yǎng)基中葡萄糖不足C.細(xì)胞老化D.病毒感染【參考答案】C【詳細(xì)解析】細(xì)胞老化（>80代）會(huì)導(dǎo)致膜表面微絲結(jié)構(gòu)異常，形成出芽狀突起。其他選項(xiàng)：A引發(fā)懸浮死亡；B影響能量代謝；D需通過PCR檢測(cè)病毒序列。2025年綜合類-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)歷年真題摘選帶答案(篇4)【題干1】細(xì)胞傳代時(shí)，判斷最佳傳代時(shí)間的依據(jù)是細(xì)胞密度達(dá)到多少時(shí)進(jìn)行消化？【選項(xiàng)】A.30%B.50%C.80-90%D.100%【參考答案】C【詳細(xì)解析】細(xì)胞傳代需在細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)進(jìn)行，此時(shí)細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末，傳代效率最高。密度過高（如90%以上）會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)耗盡，細(xì)胞進(jìn)入衰老階段；密度過低（如50%以下）則傳代所需時(shí)間延長(zhǎng)，影響實(shí)驗(yàn)節(jié)奏。【題干2】培養(yǎng)基中添加血清的主要作用是？【選項(xiàng)】A.提供能量B.促進(jìn)細(xì)胞增殖C.調(diào)節(jié)pHD.防止污染【參考答案】A【詳細(xì)解析】血清（如10%胎牛血清）的主要功能是提供細(xì)胞增殖所需的生長(zhǎng)因子、激素和氨基酸等營(yíng)養(yǎng)，同時(shí)緩沖培養(yǎng)基pH。選項(xiàng)B錯(cuò)誤，因血清本身可能抑制某些細(xì)胞增殖；選項(xiàng)C需通過緩沖系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)；選項(xiàng)D需依賴無菌操作?！绢}干3】下列哪種情況屬于細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞形態(tài)異常且培養(yǎng)基渾濁B.細(xì)胞死亡形成團(tuán)塊C.細(xì)胞融合成多核giantcellD.培養(yǎng)基表面出現(xiàn)綠色絮狀物【參考答案】A【詳細(xì)解析】支原體污染表現(xiàn)為細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則（如拉絲狀、多核）、培養(yǎng)基渾濁但無可見菌落。選項(xiàng)B為真菌污染特征；選項(xiàng)C是病毒感染表現(xiàn)；選項(xiàng)D為細(xì)菌污染特征?！绢}干4】細(xì)胞凍存液應(yīng)包含哪種成分以防止冰晶形成？【選項(xiàng)】A.葡萄糖B.脂肪酸C.DMSOD.胰島素【參考答案】C【詳細(xì)解析】DMSO（二甲基亞砜）作為抗凍劑能滲透細(xì)胞膜，降低冰點(diǎn)并抑制細(xì)胞凋亡。其他選項(xiàng)：A提供能量但無抗凍作用；B可能干擾細(xì)胞代謝；D調(diào)節(jié)糖代謝但非抗凍成分?！绢}干5】下列哪種方法能有效終止胰蛋白酶消化？【選項(xiàng)】A.加入37℃完全培養(yǎng)基B.加入EDTAC.加入胎牛血清D.加入雙抗溶液【參考答案】A【詳細(xì)解析】胰蛋白酶消化終止需用37℃完全培養(yǎng)基（含甘露醇或EDTA）中和酶活性。選項(xiàng)B僅抑制胰蛋白酶活性但無法終止消化；選項(xiàng)C可能激活胰蛋白酶；選項(xiàng)D用于抑制細(xì)菌?！绢}干6】細(xì)胞傳代時(shí)，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞碎片增多，最可能的原因?yàn)?？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞密度過高B.消化時(shí)間不足C.培養(yǎng)基成分異常D.病毒感染【參考答案】B【詳細(xì)解析】消化時(shí)間不足會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞未完全脫離但部分死亡，形成碎片。選項(xiàng)A（密度過高）會(huì)延長(zhǎng)消化時(shí)間；選項(xiàng)C需檢測(cè)培養(yǎng)基成分；選項(xiàng)D需排查病毒感染證據(jù)?！绢}干7】原代細(xì)胞培養(yǎng)中，首次傳代通常在接種后多少天進(jìn)行？【選項(xiàng)】A.3-5天B.7-10天C.14-21天D.30天以上【參考答案】A【詳細(xì)解析】原代細(xì)胞因貼壁快，通常在接種后3-5天形成單層，若超過7天可能因營(yíng)養(yǎng)耗盡導(dǎo)致細(xì)胞死亡。選項(xiàng)B適用于某些貼壁較弱的細(xì)胞；選項(xiàng)C-D時(shí)間過長(zhǎng)?！绢}干8】細(xì)胞周期檢測(cè)中，5-溴脫氧尿苷（Brdu）的摻入階段是？【選項(xiàng)】A.G1期B.S期C.G2期D.M期【參考答案】B【詳細(xì)解析】Brdu作為胸苷類似物，在S期被整合到DNA中。其他選項(xiàng)：G1期無DNA合成；G2期DNA復(fù)制已完成；M期細(xì)胞分裂?！绢}干9】下列哪種抗生素對(duì)革蘭氏陽性菌污染無效？【選項(xiàng)】A.青霉素B.紅霉素C.羧芐西林D.兩性霉素B【參考答案】D【詳細(xì)解析】?jī)尚悦顾谺針對(duì)真菌污染（如念珠菌），對(duì)細(xì)菌無效。其他選項(xiàng)：青霉素、羧芐西林針對(duì)革蘭氏陽性/陰性菌；紅霉素對(duì)革蘭氏陽性菌（如鏈球菌）有效。【題干10】細(xì)胞凍存后復(fù)蘇時(shí)，應(yīng)首先進(jìn)行哪種操作？【選項(xiàng)】A.轉(zhuǎn)入37℃培養(yǎng)箱B.加入完全培養(yǎng)基C.離心去除DMSOD.更換新鮮培養(yǎng)基【參考答案】C【詳細(xì)解析】復(fù)蘇前需離心去除殘留DMSO（高濃度DMSO會(huì)毒害細(xì)胞），再逐步加入完全培養(yǎng)基。選項(xiàng)A直接37℃可能加速細(xì)胞損傷；選項(xiàng)D過早更換培養(yǎng)基會(huì)稀釋復(fù)蘇液?！绢}干11】下列哪種情況屬于細(xì)胞融合失??？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞形態(tài)融合但無功能變化B.細(xì)胞死亡C.融合細(xì)胞失去貼壁能力D.細(xì)胞周期延長(zhǎng)【參考答案】B【詳細(xì)解析】融合失敗表現(xiàn)為細(xì)胞死亡（如凋亡或壞死），而選項(xiàng)A（形態(tài)融合）、C（貼壁異常）、D（周期延遲）均可能與融合相關(guān)。需結(jié)合熒光標(biāo)記驗(yàn)證融合效率?！绢}干12】檢測(cè)細(xì)胞增殖的MTT法原理是？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞增殖增加線粒體活性B.細(xì)胞增殖減少線粒體酶活性C.細(xì)胞死亡釋放結(jié)晶紫D.細(xì)胞增殖抑制DNA合成【參考答案】A【詳細(xì)解析】活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶將MTT還原為甲瓚結(jié)晶，增殖細(xì)胞越多，結(jié)晶越明顯。選項(xiàng)B錯(cuò)誤（抑制活性）；選項(xiàng)C為死細(xì)胞染色特征；選項(xiàng)D與MTT無關(guān)?！绢}干13】細(xì)胞傳代時(shí)，若培養(yǎng)基未提前滅菌，最可能引發(fā)的問題？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞污染B.細(xì)胞密度下降C.細(xì)胞形態(tài)異常D.培養(yǎng)基pH升高【參考答案】A【詳細(xì)解析】未滅菌培養(yǎng)基含微生物，導(dǎo)致細(xì)菌或真菌污染。選項(xiàng)B因污染導(dǎo)致細(xì)胞死亡；選項(xiàng)C需排查其他污染源；選項(xiàng)D由微生物代謝引起?！绢}干14】細(xì)胞周期各期特征中，S期的主要標(biāo)志是？【選項(xiàng)】A.DNA含量加倍B.細(xì)胞體積增大C.蛋白質(zhì)合成增加D.細(xì)胞核膜解體【參考答案】A【詳細(xì)解析】S期（合成期）DNA復(fù)制完成，細(xì)胞DNA含量加倍。選項(xiàng)B（體積增大）發(fā)生在G1期；選項(xiàng)C（蛋白質(zhì)合成）主要在G1期；選項(xiàng)D（核膜解體）發(fā)生在M期。【題干15】下列哪種方法用于檢測(cè)細(xì)胞凋亡？【選項(xiàng)】A.MTT法B.TUNEL法C.CCK-8法D.細(xì)胞計(jì)數(shù)法【參考答案】B【詳細(xì)解析】TUNEL法通過檢測(cè)3'端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶活性，標(biāo)記凋亡細(xì)胞DNA斷裂。選項(xiàng)A（增殖）、C（增殖）、D（基礎(chǔ)計(jì)數(shù)）均不適用?！绢}干16】細(xì)胞凍存時(shí)，凍存管應(yīng)預(yù)先加入哪種溶液？【選項(xiàng)】A.無血清培養(yǎng)基B.含10%DMSO的完全培養(yǎng)基C.抗凍劑D.生理鹽水【參考答案】B【詳細(xì)解析】?jī)龃婀苄桀A(yù)冷含10%DMSO的完全培養(yǎng)基，DMSO作為抗凍劑并維持滲透壓。選項(xiàng)A無抗凍作用；選項(xiàng)C抗凍劑未說明濃度；選項(xiàng)D滲透壓不足?！绢}干17】細(xì)胞傳代時(shí)，若消化不完全導(dǎo)致殘留細(xì)胞團(tuán)塊，最可能引發(fā)的問題？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞污染B.細(xì)胞增殖停滯C.融合細(xì)胞形成D.細(xì)胞凋亡【參考答案】B【詳細(xì)解析】殘留細(xì)胞團(tuán)塊會(huì)形成“克隆球”，抑制周圍細(xì)胞生長(zhǎng)，導(dǎo)致整體增殖停滯。選項(xiàng)A需排查污染；選項(xiàng)C與消化不完全無關(guān)；選項(xiàng)D需檢測(cè)凋亡標(biāo)志?！绢}干18】檢測(cè)細(xì)胞遷移能力的Transwell實(shí)驗(yàn)中，下室應(yīng)加入哪種溶液？【選項(xiàng)】A.完全培養(yǎng)基B.無血清培養(yǎng)基C.氧化損傷溶液D.胰酶消化液【參考答案】A【詳細(xì)解析】下室加入完全培養(yǎng)基模擬細(xì)胞遷移后的微環(huán)境，促進(jìn)細(xì)胞向基質(zhì)遷移。選項(xiàng)B（無血清）可能抑制遷移；選項(xiàng)C（損傷溶液）用于測(cè)試毒性；選項(xiàng)D（消化液）用于分離。【題干19】細(xì)胞周期檢測(cè)中，流式細(xì)胞術(shù)獲取的DNA含量曲線中，G2期特征是？【選項(xiàng)】A.DNA含量50%B.DNA含量150%C.DNA含量200%D.DNA含量400%【參考答案】B【詳細(xì)解析】G2期DNA復(fù)制已完成，理論DNA含量為G1期的2倍（若G1為50%，G2應(yīng)為100%）。選項(xiàng)B（150%）可能因?qū)嶒?yàn)誤差；選項(xiàng)C（200%）為M期；選項(xiàng)D（400%）為雙倍體細(xì)胞?！绢}干20】細(xì)胞凍存后復(fù)蘇時(shí)，若發(fā)現(xiàn)大量空泡細(xì)胞，最可能的原因?yàn)?？【選項(xiàng)】A.DMSO濃度過高B.凍存溫度過低C.凍存時(shí)間過長(zhǎng)D.離心轉(zhuǎn)速不足【參考答案】A【詳細(xì)解析】DMSO濃度過高（>10%）會(huì)破壞細(xì)胞膜形成空泡。選項(xiàng)B（溫度過低）會(huì)延長(zhǎng)凍存時(shí)間；選項(xiàng)C（時(shí)間過長(zhǎng)）可能增加細(xì)胞損傷；選項(xiàng)D（離心不足）導(dǎo)致細(xì)胞碎片殘留。2025年綜合類-病理學(xué)技術(shù)(主管技師)-細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)歷年真題摘選帶答案(篇5)【題干1】細(xì)胞傳代過程中，若發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)不良且形態(tài)異常，最可能的原因是？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞密度過高B.營(yíng)養(yǎng)液未及時(shí)更換C.抗生素濃度超標(biāo)D.培養(yǎng)溫度異?！緟⒖即鸢浮緿【詳細(xì)解析】培養(yǎng)溫度異常是貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)不良的常見原因。正常細(xì)胞培養(yǎng)溫度為37℃（5%CO?），若溫度低于35℃或高于39℃，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞代謝減緩或DNA損傷，表現(xiàn)為生長(zhǎng)遲緩或形態(tài)異常。選項(xiàng)A（密度過高）會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)，但通常表現(xiàn)為懸浮細(xì)胞增多而非貼壁細(xì)胞異常；選項(xiàng)B（營(yíng)養(yǎng)液未更換）會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)耗竭，但不會(huì)直接引起形態(tài)異常；選項(xiàng)C（抗生素超標(biāo)）可能抑制細(xì)胞增殖，但抗生素濃度過高通常會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞溶解而非形態(tài)特異性改變。【題干2】下列哪種血清成分對(duì)體外細(xì)胞增殖具有顯著促進(jìn)作用？【選項(xiàng)】A.胰島素B.轉(zhuǎn)鐵蛋白C.表皮生長(zhǎng)因子D.磷酸鹽緩沖液【參考答案】C【詳細(xì)解析】表皮生長(zhǎng)因子（EGF）屬于細(xì)胞因子，可直接與細(xì)胞表面受體結(jié)合，激活下游信號(hào)通路（如MAPK通路），促進(jìn)細(xì)胞增殖和遷移。選項(xiàng)A（胰島素）主要調(diào)節(jié)糖代謝，對(duì)增殖的直接作用較弱；選項(xiàng)B（轉(zhuǎn)鐵蛋白）負(fù)責(zé)鐵離子運(yùn)輸，與增殖無直接關(guān)聯(lián)；選項(xiàng)D（磷酸鹽緩沖液）是基礎(chǔ)培養(yǎng)基成分，無促增殖活性?！绢}干3】細(xì)胞培養(yǎng)中，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基出現(xiàn)渾濁且鏡檢可見菌絲狀結(jié)構(gòu)，最可能是什么類型的污染？【選項(xiàng)】A.霉菌污染B.細(xì)菌污染C.病毒污染D.霉菌和細(xì)菌混合污染【參考答案】A【詳細(xì)解析】霉菌污染的典型特征是培養(yǎng)基渾濁伴菌絲狀結(jié)構(gòu)（如青霉屬的棉絮狀菌落），而細(xì)菌污染通常表現(xiàn)為均勻渾濁或絮狀沉淀。病毒污染不會(huì)直接改變培養(yǎng)基物理狀態(tài)，需通過PCR或電鏡檢測(cè)。選項(xiàng)D（混合污染）需同時(shí)存在兩種污染特征，題目描述僅符合霉菌污染特征?！绢}干4】細(xì)胞傳代時(shí)，常用哪種方法快速去除殘留血清？【選項(xiàng)】A.10%甲醇-乙醚混合液B.胰酶消化C.膠原酶消化D.磷酸鹽緩沖液沖洗【參考答案】A【詳細(xì)解析】10%甲醇-乙醚混合液能快速分解血清蛋白（如白蛋白），同時(shí)溶解殘留血清，而磷酸鹽緩沖液（PBS）僅能去除部分小分子物質(zhì)。選項(xiàng)B（胰酶消化）用于細(xì)胞分離而非血清去除；選項(xiàng)C（膠原酶消化）用于原代細(xì)胞分離；選項(xiàng)D（PBS沖洗）無法有效去除大分子血清蛋白?！绢}干5】下列哪種操作會(huì)顯著增加細(xì)胞凋亡率？【選項(xiàng)】A.更換新鮮培養(yǎng)基B.調(diào)控血清濃度至5%C.短暫離心（1000rpm,5min）D.添加5-溴脫氧尿苷【參考答案】D【詳細(xì)解析】5-溴脫氧尿苷（BrdU）是一種嘧啶類似物，可摻入細(xì)胞DNA并抑制DNA復(fù)制，導(dǎo)致細(xì)胞周期阻滯（G1/S期），長(zhǎng)期暴露會(huì)誘導(dǎo)凋亡。選項(xiàng)A（換液）和選項(xiàng)B（低血清）會(huì)激活凋亡通路（如p53通路），但短期作用較弱；選項(xiàng)C（離心）可能造成機(jī)械損傷，但凋亡率提升幅度有限?！绢}干6】細(xì)胞培養(yǎng)中，用于檢測(cè)病毒污染的常用方法是？【選項(xiàng)】A.熒光標(biāo)記抗體染色B.MTT法C.病毒顆粒電鏡觀察D.胞外基質(zhì)層染色【參考答案】C【詳細(xì)解析】病毒顆粒電鏡觀察可直接識(shí)別病毒形態(tài)特征（如噬菌體的蝌蚪狀、皰疹病毒的二十面體），是病毒污染的確診方法。熒光標(biāo)記抗體染色（選項(xiàng)A）用于檢測(cè)已知病毒蛋白；MTT法（選項(xiàng)B）評(píng)估細(xì)胞活力；胞外基質(zhì)層染色（選項(xiàng)D）用于檢測(cè)細(xì)胞外基質(zhì)異常。【題干7】下列哪種因素最可能導(dǎo)致原代細(xì)胞培養(yǎng)成功？【選項(xiàng)】A.使用低糖培養(yǎng)基B.提供充足血清（20%）C.控制接種密度為1×10?cells/cm2D.培養(yǎng)箱濕度保持95%【參考答案】C【詳細(xì)解析】原代細(xì)胞接種密度過高（>5×10?cells/cm2）會(huì)導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)競(jìng)爭(zhēng)和死亡，最佳密度為1×10?cells/cm2（如成纖維細(xì)胞）。選項(xiàng)A（低糖培養(yǎng)基）適用于某些特定細(xì)胞（如神經(jīng)元），但原代細(xì)胞通常需高糖培養(yǎng)基；選項(xiàng)B（20%血清）可能抑制原代細(xì)胞增殖；選項(xiàng)D（高濕度）雖利于培養(yǎng)基體積穩(wěn)定，但非決定性因素?！绢}干8】細(xì)胞傳代時(shí)，胰酶消化后需立即加入的成分是？【選項(xiàng)】A.胰島素B.胰酶抑制劑C.轉(zhuǎn)鐵蛋白D.乙二胺四乙酸（EDTA）【參考答案】B【詳細(xì)解析】胰酶（如0.25%胰蛋白酶）會(huì)消化細(xì)胞間質(zhì)連接蛋白（如鈣黏蛋白），但過度消化需加入胰酶抑制劑（如EDTA）終止反應(yīng)，防止細(xì)胞碎片化。選項(xiàng)A（胰島素）用于調(diào)節(jié)代謝；選項(xiàng)C（轉(zhuǎn)鐵蛋白）無終止消化作用；選項(xiàng)D（EDTA）用于螯合鈣離子，需在消化前加入以輔助胰酶作用?！绢}干9】下列哪種情況最易導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)瓶底部形成單層細(xì)胞？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞周期S期阻滯B.細(xì)胞黏附分子異常C.培養(yǎng)基pH持續(xù)偏低D.堿性磷酸酶活性升高【參考答案】B【詳細(xì)解析】細(xì)胞黏附分子（如整合素、鈣黏蛋白）異常會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞無法正常貼壁（如E-鈣黏蛋白缺陷的腫瘤細(xì)胞），表現(xiàn)為懸浮生長(zhǎng)或底部單層聚集。選項(xiàng)A（S期阻滯）會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞體積增大但無定位異常；選項(xiàng)C（pH偏低）會(huì)抑制酶活性，導(dǎo)致代謝障礙；選項(xiàng)D（堿性磷酸酶升高）與細(xì)胞分化相關(guān)。【題干10】細(xì)胞凍存時(shí)，加入DMSO的主要作用是？【選項(xiàng)】A.抑制酶活性B.穩(wěn)定細(xì)胞膜C.防止冰晶形成D.促進(jìn)細(xì)胞復(fù)蘇【參考答案】C【詳細(xì)解析】DMSO（二甲基亞砜）作為滲透保護(hù)劑，可降低冰點(diǎn)并抑制冰晶形成，避免細(xì)胞膜損傷。選項(xiàng)A（抑制酶活性）需低溫處理；選項(xiàng)B（穩(wěn)定膜結(jié)構(gòu)）依賴其他成分（如甘油）；選項(xiàng)D（促進(jìn)復(fù)蘇）需在解凍后添加?！绢}干11】細(xì)胞傳代時(shí)，若發(fā)現(xiàn)細(xì)胞碎片增多且培養(yǎng)基渾濁，最可能的原因是？【選項(xiàng)】A.胰酶濃度過高B.培養(yǎng)基未過濾C.細(xì)胞密度過低D.血清濃度不足【參考答案】A【詳細(xì)解析】胰酶濃度過高