品種真實性和品種純度鑒定

項目8學習任務1.熟練操作苯酸染色法、種子形態(tài)鑒定、品種純度的電泳鑒定；2.會制訂真實性和品種純度鑒定方案；3.能準確填寫真實性和品種純度鑒定原始記載表；4.能準確計算真實性和品種純度。按照《農(nóng)作物種子檢驗規(guī)程》規(guī)范進行不同作物品種真實性和品種純度鑒定操作，完成種子品種真實性和品種純度原始記錄表及結果報告。1.掌握種子純度檢驗相關概念；2.理解種子純度檢測的目的、意義、電泳鑒定種子純度的原理；3.熟知品種真實性和純度鑒定的方法。能力目標學習目標

任務描述學習任務01

品種真實性和純度鑒定基礎知識02品種真實性和純度鑒定03品種真實性和純度鑒定考核評價本項目學習內(nèi)容品種真實性和純度鑒定基礎知識PART.01項目8品種真實性和品種純度鑒定01品種真實性和純度鑒定基礎知識1.品種純度相關定義

品種純度檢驗包括兩方面內(nèi)容，即品種真實性和品種純度。

在品種純度檢驗之前，應先進行種子真實性鑒定，如果品種真實性有問題，品種純度檢驗就毫無意義了。品種真實性：指—批種子所屬品種、種或?qū)倥c文件描述是否相符。011.品種純度相關定義品種純度：指品種個體與個體之間在特征特性方面典型一致的程度，用本品種的種子數(shù)(或株、穗數(shù))占供檢驗本作物種子數(shù)(株、穗數(shù))的百分率表示。異型株：指一個或多個性狀(特征、特性)與原品種的性狀明顯不同的植株。純度檢驗主要鑒別與本品種不同的異型株。品種真實性和純度鑒定基礎知識012.品種純度品種純度檢驗對象：種子、幼苗、植株。品種純度檢驗：田間檢驗、室內(nèi)檢驗、田間種植鑒定。三種檢驗之間的關系：以田間檢驗為主，田間檢驗與室內(nèi)檢驗

相結合，輔之田間種植鑒定。品種真實性和純度鑒定基礎知識01是保證品種優(yōu)良遺傳特性得以充分發(fā)揮的前提。

研究表明，玉米種子純度每降低1％，造成的減產(chǎn)幅度就會接近1％。在雜交稻種子生產(chǎn)中，親本純度每降低1％，制種田純度就會下降?6～7％，糧食生產(chǎn)就會減產(chǎn)10％左右。是正確評定種子等級、貫徹優(yōu)種優(yōu)價政策的主要依據(jù)；玉米大田生產(chǎn)一般每穴播2粒，優(yōu)質(zhì)種子可單粒播種，如先玉335、鄭單958等。3.品種純度鑒定的意義品種真實性和純度鑒定基礎知識01是防止品種混雜退化，提高種子質(zhì)量的必要手段。品種混雜、品種純度降低，會明顯降低作物產(chǎn)量和品質(zhì)。品種純度不高的種子播入田間后會導致作物生長發(fā)育不一致、植株高矮不齊、成熟遲早不同。種子純度降低越多，影響產(chǎn)量的幅度也越大。

因此，品種真實性和品種純度檢驗在種子生產(chǎn)、加工、貯藏及經(jīng)營貿(mào)易中具有重要意義和應用價值。

3.品種純度鑒定的意義品種真實性和純度鑒定基礎知識014.種子形態(tài)鑒定隨機從送驗樣品中數(shù)取400粒種子，鑒定時需設重復，每個重復不超過100粒種子。根據(jù)種子的形態(tài)特征，必要時可借助放大鏡、解剖鏡等逐粒進行觀察，區(qū)別本品種、異品種，計數(shù)，計算品種純度。鑒定時必須備有標準樣品和鑒定圖片或有關資料（說明或標簽）。主要根據(jù)種子形態(tài)大小、顏色、芒、種臍、茸毛等明顯或細微差異。品種真實性和純度鑒定基礎知識014.種子形態(tài)鑒定小麥種子

小麥種子的真?zhèn)慰梢愿鶕?jù)粒色（白、紅）、粒形（短柱、卵圓、橢圓、線形）、質(zhì)地（角質(zhì)、粉質(zhì)）、種背性狀（光滑與否、寬窄）、腹溝形狀（寬窄、深淺）、茸毛（長短、多少）、胚（大小、黑胚）、籽粒大小等加以鑒別。品種真實性和純度鑒定基礎知識01紅白皮小麥對比紫皮小麥黑皮小麥品種真實性和純度鑒定基礎知識4.種子形態(tài)鑒定01品種真實性和純度鑒定基礎知識小麥種子014.種子形態(tài)鑒定玉米種子

玉米種子根據(jù)粒形（圓粒、長粒、扁粒）、類型（馬齒型、半馬齒型、硬粒型、半硬粒型）、粒色深淺（白、淺黃、橙黃、淺紅、紫色）、種子大小、果柄顏色（紅、白、淺紅、紫紅）、頂部凹陷和飽滿狀況，胚的大小和形狀，籽粒表面圓滑程度、棱角有無、顏色和花絲遺跡等區(qū)別不同品種。品種真實性和純度鑒定基礎知識01玉米種子品種真實性和純度鑒定基礎知識014.種子形態(tài)鑒定大豆種子

大豆種子根據(jù)種子大小、粒形（球形、扁球形、扁橢球形等）顏色深淺（黃、青、紅、褐、黑）、光澤、臍色（黃、青、紅、淺褐、褐、深褐、黑）、臍形狀（園、橢圓、倒卵圓、腎臟形等）區(qū)別不同品種。品種真實性和純度鑒定基礎知識01大豆種子品種真實性和純度鑒定基礎知識014.種子形態(tài)鑒定大麥種子

可以根據(jù)籽粒形狀（長寬比）、外稃基部皺褶、籽粒顏色、腹溝基刺、腹溝展開程度（寬、中、緊）、外稃側(cè)背脈紋齒狀物及脈色、外稃基部稃殼皺褶凹陷、小穗軸茸毛多少、鱗被（漿片）開頭及茸毛稀密等加以鑒別。品種真實性和純度鑒定基礎知識014.種子形態(tài)鑒定水稻種子

水稻種子根據(jù)谷粒形狀、長寬比、大小、稃殼和稃尖色、稃毛長短、稀密、柱頭夾持率加以鑒別。品種真實性和純度鑒定基礎知識014.種子形態(tài)鑒定棉花種子

棉花種子的真?zhèn)沃饕歉鶕?jù)棉籽的纖維長度、纖維整齊度和雜籽百分率來判斷。品種真實性和純度鑒定基礎知識015.幼苗形態(tài)鑒定隨機從送驗樣品中數(shù)取400粒種子，鑒定時須設重復，每重復為100粒種子。幼苗鑒定可以通過兩個主要途徑：①提供給植株以加速發(fā)育的條件，當幼苗達到適宜評價的發(fā)育階段時，對全部或部分幼苗進行鑒定；②讓植株生長在特殊的逆境條件下，測定不同品種對逆境的不同反應來鑒別不同品種。品種真實性和純度鑒定基礎知識015.幼苗形態(tài)鑒定禾谷類

禾谷類作物的芽鞘、中胚軸有紫色與綠色兩大類，是受遺傳基因控制的。

（1）播種方法種子播在砂中，玉米、高粱種子間隔1.0cm×4.5cm，燕麥、小麥種子間隔2.0cm×4.0cm，播種深度1.0cm；

（2）培養(yǎng)條件25℃恒溫，24h光照，玉米、高梁每天加水，小麥、燕麥每隔4d施加缺磷的Hoagland1號培養(yǎng)液；

（3）幼苗鑒定

高粱、玉米14d，小麥7d，燕麥10～14d，鑒定芽鞘的顏色。品種真實性和純度鑒定基礎知識015.幼苗形態(tài)鑒定禾谷類——玉米、高粱

可在出苗后第14天鑒定幼苗苗端顏色。苗端顏色可能有4種類型：深紫色(在莖和葉的近軸和遠軸表面全深紫色）中等紫色(紫包莖，近軸葉表面幾乎深紫色，但遠軸葉表面為黃棕色)淺紫色(幼苗在莖和葉邊緣有局部紫色，主要為綠色)綠色(幼苗完全綠色)。品種真實性和純度鑒定基礎知識01品種真實性和純度鑒定基礎知識01品種真實性和純度鑒定基礎知識015.幼苗形態(tài)鑒定禾谷類——大麥播種10天至2周可以鑒定胚軸或葉鞘。播種3-4周可以鑒定品種間的胚軸長度和株高差異。播種4-6周，大麥品種可以記錄抽穗（春大麥）或不抽穗（冬大麥）。春性品種還可以評定穗上的芒顏色（紅或綠）和其它性狀。這些觀察可作為品種分類，也可作為鑒定異型株。品種真實性和純度鑒定基礎知識015.幼苗形態(tài)鑒定禾谷類——小麥小麥幼苗的芽鞘和莖色的鑒定，可在播后大約第7天進行。其顏色可分為紫色和綠色。抽穗情況的記載可在出苗后30天左右進行。抽穗情況可分為正在抽穗(春小麥)、未抽穗(冬小麥)。

該法可用于區(qū)分品種，及檢出異型株。品種真實性和純度鑒定基礎知識015.幼苗形態(tài)鑒定禾谷類——燕麥播后第10～14天：對燕麥幼苗的芽鞘和葉鞘顏色(紅色或綠色)和葉鞘茸毛進行鑒定。播后30天：對幼苗茸毛有無，光滑或混合進行分類。燕麥植株也可進行抽穗(春燕麥品種)或不抽穗(冬燕麥品種)檢查。

該檢查可用于區(qū)分栽培品種，并附帶檢出異型株。品種真實性和純度鑒定基礎知識015.幼苗形態(tài)鑒定大豆播種方法：種子播于砂中，種子間隔2.5cm×2.5cm，播種深度2.5cm；培養(yǎng)條件：25℃恒溫，24h光照，每隔4d施加Hoagland1號培養(yǎng)液；幼苗鑒定：根據(jù)幼苗下胚軸顏色（生長10～14d）、茸毛顏色（21d）、茸毛在胚軸上著生的角度（21d）、

小葉形狀（21d）等進行鑒定。品種真實性和純度鑒定基礎知識01大豆大豆幼苗花青素鑒定，可在播后第10～14天進行?？赡苡^察到4種苗色：綠色（僅有綠色素）赤褐色（下胚軸下部有赤褐色素）淡紫色（下胚軸紫色，上胚軸綠色）深紫色（上胚軸和下胚軸均為紫色）5.幼苗形態(tài)鑒定品種真實性和純度鑒定基礎知識01大豆在播后第21天，待3片小葉完全展開時，可能觀察到3種小葉茸毛角度：直角、緊貼、中等；可能觀察到2種小葉茸毛顏色：黃褐色、灰色；可能觀察到2種小葉形狀：卵形(長／寬＜1.6）、尖形(長／寬＞2)。該法適用于區(qū)分品種和檢出異型株。5.幼苗形態(tài)鑒定品種真實性和純度鑒定基礎知識01十字花科播種方法：將種子播在水分適宜的砂中，種子間隔1.0cm；培養(yǎng)條件：20~25℃培養(yǎng)，出苗后置于有充足陽光的室內(nèi)培養(yǎng)；幼苗鑒定：發(fā)芽7d后鑒定子葉性狀發(fā)芽10~12d鑒定真葉未展開時的性狀15～20d鑒定真葉性狀5.幼苗形態(tài)鑒定品種真實性和純度鑒定基礎知識01十字花科

根據(jù)子葉與第一片真葉形態(tài)鑒定十字花科的種與變種。第一真葉期根據(jù)第一真葉的形狀、大小、顏色、光澤、絨毛、葉脈寬窄及顏色、葉緣特性鑒別。5.幼苗形態(tài)鑒定品種真實性和純度鑒定基礎知識01十字花科甘藍各變種第一真葉的性狀結球甘藍花椰菜抱子甘藍羽衣甘藍球莖甘藍品種真實性和純度鑒定基礎知識01甜菜

有些栽培品種可根據(jù)幼苗顏色（白色、黃色、暗紅色或紅色）來區(qū)別。

將種球播在培養(yǎng)皿濕砂上，置于溫室的柔和日光下，經(jīng)7d后，檢查幼苗下胚軸的顏色。根據(jù)白色與暗紅色幼苗的比例，可在一定程度上表明糖用甜菜及白色飼料甜菜栽培品種的真實性。5.幼苗形態(tài)鑒定品種真實性和純度鑒定基礎知識01洋蔥出苗后幾天，在砂上長出的部分可評定為紅葉或綠葉。播種后四周，檢查是否形成球莖，記錄從播種至球莖形成的時間。在球莖形成時記錄株高和球莖(而蔥不形成球莖)。播種后12周，在容器中生長的植株至少17cm，檢查球莖的形狀和顏色、葉姿和葉蠟。

該法可用于栽培品種分類和鑒定異型株。5.幼苗形態(tài)鑒定品種真實性和純度鑒定基礎知識01萵苣（1）播種方法：萵苣種子播在砂中，種子間隔1.0cm×4.0cm，播種深度1cm。（2）培養(yǎng)條件：25℃恒溫，每隔4d施加Hoagland1號培養(yǎng)液。5.幼苗形態(tài)鑒定品種真實性和純度鑒定基礎知識01萵苣（3）幼苗鑒定：

3周后（長有3～4片葉）根據(jù)下胚軸顏色(粉紅色或綠色)、

葉色(紅、粉紅、淺綠或深綠)、葉緣(深裂、全緣或淺裂)、葉片卷曲程度(似管形或展開)、子葉(寬或窄)等形狀進行鑒別。該法可用于栽培品種分類和鑒定異型株。5.幼苗形態(tài)鑒定品種真實性和純度鑒定基礎知識01品種純度檢測品種純度是種子質(zhì)量標準中四大指標之一。品種真實性和品種純度檢驗在種子生產(chǎn)、加工、貯藏及經(jīng)營貿(mào)易中具有重要意義和應用價值。樣品純度的計算：品種真實性和純度鑒定基礎知識01種子純度快速測定在品種純度的測定中通常把物理法鑒定、化學法鑒定等在短時間內(nèi)測定品種純度的方法歸為快速測定方法。物理鑒定

（熒光分析法測定種子或幼苗的方法）

不同作物或不同品種，其種皮結構和化學組成不同，因此在紫外光照射下發(fā)出的熒光顏色也不同。

如十字花科不同種發(fā)出熒光不同：白菜為綠色，蘿卜為淺藍綠色，白芥為鮮紅色，黑芥為深藍色，田芥為淺藍色。品種真實性和純度鑒定基礎知識01種子純度快速測定化學鑒定

鑒定品種的化學特性主要是根據(jù)不同品種的種子化學成分的差異，用化學藥劑處理后所產(chǎn)生的顏色的差異區(qū)分不同品種。

常用的化學測定法有：麥類、水稻、牧草的苯酚染色法、大豆種子的愈創(chuàng)木酚染色法等。品種真實性和純度鑒定基礎知識01種子純度快速測定方法

苯酚染色法愈創(chuàng)木酚染色法

熒光分析法品種真實性和純度鑒定基礎知識011.苯酚染色法的原理小麥種皮內(nèi)，水稻皮殼內(nèi)含有的多酚氧化酶和金屬元素，多酚氧化酶在金屬元素催化作用下，將苯酚氧化成黑褐色的對苯醌。不同品種多酚氧化酶和金屬元素含量有差異，在同一苯酚染色條件表現(xiàn)不同顏色，由此鑒定品種純度。該法主要適用于小麥、水稻種子。品種真實性和純度鑒定基礎知識012.主要儀器設備冰箱培養(yǎng)皿分析

天平其它

……鑷子濾紙品種真實性和純度鑒定基礎知識01苯酚染色法測定程序方案數(shù)取試樣種子預濕苯酚染色觀察鑒定結果計算結果報告品種真實性和純度鑒定基礎知識013.苯酚染色法（小麥）步驟數(shù)取試樣數(shù)取凈種子400粒，每重復100粒；種子預濕將種子浸入清水中經(jīng)18～24h，用濾紙吸干表面水分；苯酚染色置于墊有已經(jīng)過1%苯酚溶液溫潤濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi)（腹溝朝下），蓋上培養(yǎng)皿蓋。室溫放置4h，即可鑒定種子染色深淺。品種真實性和純度鑒定基礎知識013.苯酚染色法（小麥）觀察鑒定小麥觀察穎果染色情況，一般染色后顏色可分為不染色、淡褐色、褐色、深褐色、黑色五種。將與基本顏色不同的種子取出作為異品種。品種真實性和純度鑒定基礎知識013.苯酚染色法（小麥）五種顏色反應不染色品種真實性和純度鑒定基礎知識013.苯酚染色法（水稻）數(shù)取試樣數(shù)取凈種子400粒，每重復100粒；種子預濕將種子浸入清水中經(jīng)6h，倒去清水；苯酚染色注入1%(m/V)苯酚溶液，蓋上培養(yǎng)皿蓋，室溫放置12h，取出用清水洗滌，放在濕潤的濾紙上24h。品種真實性和純度鑒定基礎知識013.苯酚染色法（水稻）觀察鑒定觀察谷?；蛎琢Ｈ旧潭取９攘Ｈ旧譃椴蝗旧?、淡茶褐色、茶褐色、黑褐色和黑色五級。品種真實性和純度鑒定基礎知識試驗中應注意的問題有哪些？1.某些小麥品種利用標準法染色后，顏色相同無法區(qū)別?？刹捎眉铀倩蜓泳弰┨幚砗笤偃旧b定。對染色很深的種子，用0.3%碳酸鈉溶液浸種18小時（室溫）；對染色很淺的種子利用0.01%硫酸銅溶液浸種18小時，然后置培養(yǎng)皿內(nèi)染色。2.在應用此法測定麥類品種純度時，最好用固定程序測定現(xiàn)有品種的染色情況，供測定時參考。01特別關注品種真實性和純度鑒定基礎知識011.愈創(chuàng)木酚染色法原理

大豆種皮內(nèi)的過氧化物酶，可催化過氧化氫分解產(chǎn)生游離氧基，游離氧基可使無色的愈創(chuàng)木酚氧化產(chǎn)生紅褐色的鄰甲氧基對苯醌，由于不同品種過氧化物酶活性不同，溶液顏色也有深淺之分，據(jù)此區(qū)分不同品種。品種真實性和純度鑒定基礎知識012.主要儀器設備品種真實性和純度鑒定基礎知識013.愈創(chuàng)木酚染色法（大豆）步驟（1）數(shù)取試樣數(shù)取凈種子400粒，每重復100粒；品種真實性和純度鑒定基礎知識013.愈創(chuàng)木酚染色法（大豆）步驟（2）樣品預處理將大豆種皮逐粒剝下，分別放入指形管內(nèi)，然后注入1mL蒸餾水，在30℃下浸泡1h。品種真實性和純度鑒定基礎知識013.愈創(chuàng)木酚染色法（大豆）步驟（3）愈創(chuàng)木酚染色在每支試管中加入10滴5%愈創(chuàng)木酚溶液，10min后，每支試管加入1滴0.1%過氧化氫溶液。品種真實性和純度鑒定基礎知識013.愈創(chuàng)木酚染色法（大豆）步驟4.觀察鑒定1min后根據(jù)溶液呈現(xiàn)的顏色差異區(qū)分本品種和異品種。品種真實性和純度鑒定基礎知識品種純度鑒定原始記載表的填寫品種真實性和純度鑒定基礎知識01品種真實性和品種純度鑒定PART.02項目8品種真實性和品種純度鑒定02品種真實性和品種純度鑒定作為電泳支持物的聚丙烯酰胺凝膠是丙烯酰胺和交聯(lián)劑（N，N-亞甲基雙丙烯酰胺）在催化劑作用下聚合而成的高分子膠狀聚合物。聚丙稀酰胺凝膠電泳（簡稱PAGE）因其凝膠透明度高、彈性好、機械強度高、化學穩(wěn)定性好、對PH、溫度變化穩(wěn)定；沒有吸附和電滲現(xiàn)象，并通過改變丙烯酰胺和交聯(lián)劑的濃度有效控制凝膠孔徑的大小，在品種純度電泳分析中廣泛應用。聚丙烯酰胺凝膠電泳的原理021.電泳檢測的主要儀器電泳儀電泳槽分析

天平其它

……膠片觀察燈離心機品種真實性和品種純度鑒定02離心機電泳儀垂直電泳槽1.電泳檢測的主要儀器品種真實性和品種純度鑒定02電子天平磁力攪拌器微量進樣器1.電泳檢測的主要儀器品種真實性和品種純度鑒定02膠片觀察燈單粒樣品粉碎器1.電泳檢測的主要儀器品種真實性和品種純度鑒定02玻璃支架脫色搖床1.電泳檢測的主要儀器品種真實性和品種純度鑒定022.主要試劑品種真實性和品種純度鑒定023.溶液配制品種真實性和品種純度鑒定02在導師指導帶領下，首先在品種純度測定開始前做好一切準備工作，儀器使用前要對儀器狀態(tài)進行查看，并做好記錄；對檢驗室溫度、濕度、電源、供水和排水進行有效的控制，并做好記錄；其次，規(guī)范進行不同作物品種聚丙烯酰胺凝膠電泳操作，完成品種純度鑒定結果及原始記載表的填寫。任務描述品種真實性和品種純度鑒定02品種純度電泳檢測程序方案樣品制備制備凝膠點樣電泳染色圖譜鑒定結果報告品種真實性和品種純