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T/ T/NAIA0318-DeterminationofLyciumbarbarumpolysaccharidesinLyciumbarbarumpulpandclearjuice-IonChromatography2024-10-02發(fā) 2024-10-20實(shí)寧夏化學(xué)分析測(cè)試協(xié) 發(fā) GB/T1.1—20201部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》本文件起草單位：寧夏回族自治區(qū)藥品檢驗(yàn)研究院（T/NAIA0318-T/NAIA0318-李糖、木糖、甘露糖、半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸或單糖組成為以上各個(gè)單糖的任意組合的多糖的測(cè)定。其他液態(tài)枸杞產(chǎn)品中枸杞多糖的測(cè)定也可以參考本方法。GB/T6682Lyciumbarbarum除非另有說明，在分析中僅使用確認(rèn)為分析純的試劑，水為GB/T6682氫氧化鈉（100mmol/L）和乙酸鈉（150mmol/L）8.00g氫氧化鈉（5.1.1）24.60g無水乙酸鈉（5.1.2）300mL500mL燒杯中，待完全溶解且溫度降到室溫2000mL80%乙醇溶液（80+20，V/V）：800mL無水乙醇（5.1.4），200mL60%乙醇溶液（60+40，V/V）：600mL無水乙醇（5.1.4），400mL各單糖標(biāo)準(zhǔn)品見附錄A表A.1半乳糖醛酸，D-16mg、38mg、26mg、10mg、26mg、4mg、100mg4mg，分20mL容量瓶中用水溶解并定容至刻度，混勻，4℃3個(gè)月。至刻度，混勻，4℃1個(gè)月。mL、0.6mL、0.7mL10mL容量瓶，用去離子水定容至刻度，混勻，配制成不同質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)系5個(gè)濃度點(diǎn)，臨用新制。反相凈化小柱：RP前處理小柱，C18水系膜，0.22μm離子色譜儀，配脈沖安培檢測(cè)器（Au為工作電極，Pd為參比電極）分析天平（0.000001g0.00001g0.01g）取試樣5.0g（精確至0.01g），置入250mL平底燒瓶中，加入150mL乙醇溶液（5.2.3），加熱回流1小時(shí)，趁熱用布氏漏斗抽真空濾過，棄去濾液，濾渣與濾器用約50mL45℃~75℃熱乙醇溶液（5.2.3）分5次過濾洗滌并棄去洗滌液；濾渣連同濾紙置燒瓶中，加150mL乙醇溶液（5.2.4），加熱回流提取1小時(shí)，趁熱用布氏漏斗抽真空濾過，棄去濾液，濾渣與濾器用約50mL45℃~75℃熱乙醇溶液（5.2.4）分5次過濾洗滌并棄去洗滌液；用150mL乙醇溶液（5.2.4）重復(fù)提取1次后，濾渣連同濾紙置燒瓶中，將燒瓶置水浴鍋（水浴溫度80℃）上揮去殘留的乙醇；加150mL水，加熱回流2小時(shí)，趁熱過濾，用約50mL70℃~100℃熱水過濾洗滌濾器，合并濾液與洗滌液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮（加熱水浴溫度70℃，真空度＞0.09MPa）至約10mL，待冷卻后轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中，并用水少量多次清洗旋蒸瓶，并將清洗液5mL容量瓶中，定容，混勻，得試樣溶液。色譜柱：基于聚苯乙烯-二乙烯基苯聚合物填料的陰離子交換色譜柱（4.0mm×250mm，5μm），進(jìn)樣量：20流速：0.6流動(dòng)相：以氫氧化鈉和乙酸鈉溶液梯度洗脫（A：水；B：100mmol/L150乙酸鈉混合溶液檢測(cè)器：脈沖安培檢測(cè)器，Au工作電極，Pd2表 梯度洗脫程序表 檢測(cè)器電位波形程0.30-0.35--濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（5.4.3）過0.22μm水系濾膜（5.5.2）后，加載至反相凈化小柱（5.5.1），棄去前2mL~3mL流出液，收集續(xù)濾液，按照（8.1）設(shè)定的色譜條件，待儀器穩(wěn)定后，依次測(cè)定不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液色譜圖見附錄B中的圖B.1（7.30.22μ（5.5.2（5.5.12mL~3m流出液，收集續(xù)濾液，按照（8.1）設(shè)定的色譜條件，待儀器穩(wěn)定后，依次測(cè)定試樣的色譜峰面積。試樣中各單??=??×??×??1×

× mi—試樣中各單糖的質(zhì)量，單位為毫克ρ—由標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算所得試樣中各單糖組分的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升 —V1—消解后總體積，單位為毫升V2—用于消解的枸杞多糖提取液的體積，單位為毫升（mL）；V3—枸杞多糖提取液濃縮后定容的總體積，單位為毫升（mL）；10-3—單位換算。??=

（?? ×

)

—試樣中多糖的質(zhì)量，單位為毫克mi—試樣中各單糖的質(zhì)量，單位為毫克Mi—試樣中各單糖的摩爾質(zhì)量，單位為克每摩爾MH?O)—水的摩爾質(zhì)量，單位為克每摩爾（g/mol）??×??

—枸杞多糖含量，單位為毫克每千克m—試樣中多糖的質(zhì)量，單位為毫克ms—試樣的質(zhì)量，單位為千克（g）在重復(fù)性條件下，獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%在再現(xiàn)性條件下，獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于15%本方法中各單糖檢出限在3.60mg/kg~28.58mg/kg之間，定量限在10.80mg/kg~95.26mg/kg之間，附錄表A.159-23-10323-20-