2025年醫(yī)療器械無菌檢驗培訓考核試題及答案一、單項選擇題（每題2分，共20題，40分）1.醫(yī)療器械無菌檢驗的主要依據(jù)是以下哪項標準？A.GB/T16886.1-2011B.GB/T14233.2-2005C.GB50457-2008D.YY/T0589-2015答案：B解析：GB/T14233.2-2005《醫(yī)用輸液、輸血、注射器具檢驗方法第2部分：生物試驗方法》是醫(yī)療器械無菌檢驗的核心依據(jù)，規(guī)定了無菌檢查的具體操作和判定標準。2.需氧-厭氧培養(yǎng)基（TSB）的培養(yǎng)溫度應為？A.20-25℃B.25-30℃C.30-35℃D.35-40℃答案：C解析：TSB（胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基）用于培養(yǎng)需氧菌和兼性厭氧菌，標準培養(yǎng)溫度為30-35℃；FTM（硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基）用于培養(yǎng)厭氧菌，培養(yǎng)溫度為20-25℃。3.無菌檢查中，陽性對照菌的選擇應符合以下哪項要求？A.選擇金黃色葡萄球菌（需氧菌）和白色念珠菌（真菌）B.選擇生孢梭菌（厭氧菌）和枯草芽孢桿菌（需氧菌）C.選擇大腸埃希菌（需氧菌）和黑曲霉（真菌）D.選擇金黃色葡萄球菌（需氧菌）和生孢梭菌（厭氧菌）答案：D解析：根據(jù)中國藥典和GB標準，無菌檢查陽性對照菌需覆蓋需氧菌（如金黃色葡萄球菌）、厭氧菌（如生孢梭菌）和真菌（如白色念珠菌），但常規(guī)醫(yī)療器械無菌檢驗通常僅需需氧和厭氧菌對照。4.無菌檢查實驗室的環(huán)境潔凈度要求為？A.B級背景下的局部A級B.C級背景下的局部B級C.A級背景下的局部A級D.D級背景下的局部C級答案：A解析：無菌檢查應在B級潔凈背景下的A級單向流區(qū)域內進行，確保操作環(huán)境的微生物污染風險可控。5.采用薄膜過濾法進行無菌檢查時，濾膜的孔徑應為？A.0.22μmB.0.45μmC.0.8μmD.1.0μm答案：A解析：0.22μm孔徑的濾膜可有效截留細菌（通常細菌大小為0.5-5μm），確保微生物被完全截留在濾膜上，避免漏檢。6.供試品為含抑菌成分的醫(yī)療器械（如含銀離子敷料），應優(yōu)先選擇以下哪種無菌檢查方法？A.直接接種法B.薄膜過濾法C.稀釋法D.中和法答案：B解析：薄膜過濾法可通過沖洗去除供試品中的抑菌成分，避免抑菌物質對培養(yǎng)基中微生物生長的抑制，是含抑菌成分供試品的首選方法。7.無菌檢查中，每批培養(yǎng)基使用前需進行的質量控制試驗是？A.無菌性檢查和靈敏度檢查B.滲透壓檢查和pH值檢查C.澄明度檢查和裝量檢查D.熱原檢查和內毒素檢查答案：A解析：培養(yǎng)基使用前需確認無菌（無微生物生長）和靈敏度（能支持目標微生物生長），兩項均合格后方可使用。8.無菌檢查的陽性對照試驗應如何操作？A.在供試品檢驗完成后單獨進行B.與供試品檢驗同步進行C.在供試品檢驗前24小時進行D.在環(huán)境消毒后單獨進行答案：B解析：陽性對照需與供試品同步操作，以驗證檢驗系統(tǒng)（包括培養(yǎng)基、環(huán)境、操作）的有效性，避免因系統(tǒng)誤差導致假陰性。9.無菌檢查中，供試品的抽樣數(shù)量應符合以下哪項要求？A.每批至少抽取2件B.每批至少抽取5件C.按《中國藥典》規(guī)定的最小抽樣量（如100件抽5件，不足100件抽全部）D.按生產(chǎn)企業(yè)內部標準執(zhí)行答案：C解析：醫(yī)療器械無菌檢查抽樣量需符合《中國藥典》或GB標準要求，通常按批量計算，如批量≤100時抽全部，100-500抽5件，≥500抽10件（具體以產(chǎn)品標準為準）。10.無菌檢查培養(yǎng)時間應為？A.需氧菌培養(yǎng)3天，厭氧菌培養(yǎng)5天B.需氧菌和厭氧菌均培養(yǎng)5天C.需氧菌和厭氧菌均培養(yǎng)14天D.需氧菌培養(yǎng)7天，厭氧菌培養(yǎng)14天答案：C解析：根據(jù)GB/T14233.2-2005，無菌檢查的培養(yǎng)時間應為14天，確保緩慢生長的微生物被檢出。11.無菌檢查中，若供試品為液體（如沖洗液），轉移至培養(yǎng)基的體積應不超過培養(yǎng)基體積的？A.1/2B.1/3C.1/4D.1/5答案：D解析：供試品體積過大可能導致培養(yǎng)基營養(yǎng)被稀釋或抑菌成分濃度過高，因此通常規(guī)定供試品體積不超過培養(yǎng)基體積的1/5（如100mL培養(yǎng)基最多加入20mL供試品）。12.無菌檢查實驗室的壓差應控制為？A.與非潔凈區(qū)壓差≥10Pa，不同潔凈級別間壓差≥5PaB.與非潔凈區(qū)壓差≥5Pa，不同潔凈級別間壓差≥10PaC.與非潔凈區(qū)壓差≥15Pa，不同潔凈級別間壓差≥10PaD.無具體要求，只需保持正壓答案：A解析：無菌檢查實驗室需維持正壓，與非潔凈區(qū)壓差≥10Pa，不同潔凈級別（如B級與C級）間壓差≥5Pa，防止外部污染侵入。13.無菌檢查中，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基渾濁，應首先進行的操作是？A.直接判定為陽性B.涂片鏡檢，觀察是否有微生物C.重新接種至新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)D.記錄為異常，無需處理答案：B解析：培養(yǎng)基渾濁可能是微生物生長，也可能是供試品溶解物或沉淀導致，需通過鏡檢確認是否有微生物存在（如細菌形態(tài)、真菌菌絲）。14.以下哪種情況會導致無菌檢查結果無效？A.陽性對照未生長B.陰性對照未生長C.供試品培養(yǎng)14天后無渾濁D.環(huán)境監(jiān)測結果符合要求答案：A解析：陽性對照未生長說明檢驗系統(tǒng)（如培養(yǎng)基失效、操作錯誤）存在問題，此次檢驗結果無效，需重新試驗。15.無菌檢查中，使用的玻璃器皿應如何處理？A.清洗后直接使用B.清洗后121℃高壓滅菌20分鐘C.清洗后160℃干熱滅菌2小時D.清洗后75%乙醇浸泡消毒答案：C解析：玻璃器皿需通過干熱滅菌（160℃，2小時）徹底殺滅芽孢，避免殘留微生物污染培養(yǎng)基；高壓滅菌（121℃，20分鐘）適用于耐高溫高濕的物品，但可能導致玻璃器皿殘留水分，影響無菌檢查。16.無菌檢查人員進入潔凈區(qū)前，應進行的個人凈化流程不包括？A.換鞋、脫外衣B.手消毒（75%乙醇擦拭）C.佩戴無菌手套、口罩、頭套D.佩戴普通工作服答案：D解析：無菌檢查人員需穿戴無菌工作服（覆蓋全部毛發(fā)和皮膚）、口罩、手套，并進行手消毒，普通工作服無法滿足潔凈區(qū)要求。17.薄膜過濾法中，沖洗液的選擇應優(yōu)先考慮？A.生理鹽水B.含0.1%蛋白胨的生理鹽水C.純化水D.注射用水答案：B解析：含0.1%蛋白胨的生理鹽水可中和部分抑菌成分（如表面活性劑），并為微生物提供保護，提高回收率。18.無菌檢查記錄應至少保存？A.1年B.3年C.5年D.至產(chǎn)品有效期后1年答案：D解析：根據(jù)醫(yī)療器械法規(guī)要求，無菌檢查記錄需保存至產(chǎn)品有效期后1年，以便追溯。19.以下哪種微生物不屬于無菌檢查需檢測的范圍？A.細菌B.真菌C.支原體D.病毒答案：D解析：醫(yī)療器械無菌檢查主要針對細菌和真菌，病毒需通過特定方法（如細胞培養(yǎng)）檢測，通常不在常規(guī)無菌檢查范圍內。20.無菌檢查中，若供試品為植入性器械（如骨釘），應如何處理？A.直接放入培養(yǎng)基中培養(yǎng)B.用無菌剪刀剪碎后放入培養(yǎng)基C.表面消毒（如75%乙醇擦拭）后放入培養(yǎng)基D.無需處理，直接接種答案：C解析：植入性器械表面可能攜帶環(huán)境微生物，需用75%乙醇擦拭消毒（作用時間≥30秒），避免外源性污染影響結果。二、判斷題（每題1分，共10題，10分）1.無菌檢查實驗室可以與陽性菌實驗室共用同一套空調系統(tǒng)。（）答案：×解析：陽性菌實驗室（如微生物限度室）需與無菌檢查實驗室嚴格分隔，避免陽性菌污染無菌檢查環(huán)境，空調系統(tǒng)需獨立。2.培養(yǎng)基靈敏度檢查只需在新購培養(yǎng)基時進行，無需定期復檢。（）答案：×解析：培養(yǎng)基靈敏度檢查需每批（或每月，以先到者為準）進行，確保培養(yǎng)基在有效期內的性能穩(wěn)定。3.無菌檢查中，陽性對照菌的傳代次數(shù)不得超過5代。（）答案：√解析：標準菌株傳代次數(shù)超過5代可能導致生物學特性改變（如生長能力下降），影響陽性對照的有效性。4.供試品為液體時，若體積小于1mL，可直接接種至培養(yǎng)基，無需稀釋。（）答案：√解析：體積過小的供試品（如0.5mL）直接接種即可，稀釋可能導致微生物被過度分散，降低檢出率。5.無菌檢查中，若環(huán)境沉降菌檢測結果為1CFU/φ90mm·4小時，判定為合格。（）答案：×解析：A級潔凈區(qū)沉降菌標準為≤1CFU/φ90mm·4小時（動態(tài)），B級為≤5CFU/φ90mm·4小時（動態(tài)），需根據(jù)實際潔凈級別判定。若在A級區(qū)域檢測到1CFU，需評估是否為偶然污染。6.薄膜過濾法中，沖洗次數(shù)越多越好，可徹底去除抑菌成分。（）答案：×解析：沖洗次數(shù)需根據(jù)供試品特性確定（通常3次，每次100mL），過度沖洗可能導致微生物被沖走，降低回收率。7.無菌檢查人員每年需進行健康檢查，手部皮膚有破損者不得參與操作。（）答案：√解析：皮膚破損可能導致微生物污染供試品或培養(yǎng)基，需禁止上崗。8.無菌檢查結果為“無菌”，意味著供試品絕對不含任何微生物。（）答案：×解析：無菌檢查為抽樣檢驗，存在統(tǒng)計學概率，結果“無菌”僅表示在當前檢驗條件下未檢出微生物，不代表絕對無菌。9.若供試品與培養(yǎng)基發(fā)生反應（如凝固），可更換培養(yǎng)基種類（如改用固體培養(yǎng)基）。（）答案：√解析：若液體培養(yǎng)基與供試品反應，可改用固體培養(yǎng)基（如TSA、SDA），將供試品貼附于培養(yǎng)基表面培養(yǎng)。10.無菌檢查報告中只需記錄“無菌”或“有菌”，無需描述具體操作過程。（）答案：×解析：報告需包含供試品信息、檢驗方法、環(huán)境條件、培養(yǎng)基信息、陽性/陰性對照結果、培養(yǎng)時間等詳細記錄，確?？勺匪菪浴Ｈ?、簡答題（每題8分，共5題，40分）1.簡述無菌檢驗前的準備工作包括哪些關鍵步驟？答案：（1）環(huán)境確認：檢查潔凈區(qū)壓差（與非潔凈區(qū)≥10Pa，不同級別間≥5Pa）、溫濕度（溫度20-24℃，濕度45-60%）、沉降菌/浮游菌（A級動態(tài)≤1CFU/φ90mm·4小時，B級動態(tài)≤5CFU/φ90mm·4小時）是否符合要求；（2）設備檢查：確認生物安全柜（或超凈工作臺）風速（0.36-0.54m/s）、紫外燈照射時間（≥30分鐘）、培養(yǎng)箱溫度（TSB30-35℃，F(xiàn)TM20-25℃）及波動范圍（±1℃）、高壓滅菌器滅菌記錄（121℃，20分鐘，壓力103kPa）；（3）培養(yǎng)基質量控制：檢查培養(yǎng)基名稱、批號、有效期，進行無菌性檢查（30-35℃培養(yǎng)48小時，20-25℃培養(yǎng)72小時，應無渾濁）和靈敏度檢查（接種≤100CFU的陽性菌，培養(yǎng)3天應生長）；（4）供試品處理：核對供試品名稱、批號、數(shù)量（符合抽樣標準），表面消毒（75%乙醇擦拭，作用30秒），去除外包裝后轉移至潔凈區(qū)；（5）人員準備：穿戴無菌工作服、口罩、手套，手消毒（75%乙醇擦拭），確認培訓記錄和健康狀態(tài)（無皮膚破損）。2.簡述薄膜過濾法的操作步驟及注意事項。答案：操作步驟：（1）組裝濾器：將0.22μm濾膜放入濾器，確認密封良好；（2）轉移供試品：將供試品（液體或剪碎的固體）加入濾器，啟動抽濾；（3）沖洗：用沖洗液（如0.1%蛋白胨生理鹽水）沖洗濾膜3次，每次100mL，去除抑菌成分；（4）分膜：若需同時做需氧和厭氧培養(yǎng)，將濾膜剪成兩半，分別放入TSB和FTM培養(yǎng)基；（5）培養(yǎng)：TSB培養(yǎng)基30-35℃培養(yǎng)14天，F(xiàn)TM培養(yǎng)基20-25℃培養(yǎng)14天；（6）觀察：每天觀察培養(yǎng)基是否渾濁，渾濁時涂片鏡檢確認是否有微生物。注意事項：（1）濾器和濾膜需預先滅菌（121℃高壓滅菌20分鐘）；（2）抽濾過程中避免濾膜破損（如壓力過大），若破損需更換濾膜重新操作；（3）沖洗液體積和次數(shù)需根據(jù)供試品特性調整（如含強抑菌成分時增加沖洗次數(shù)）；（4）分膜時需無菌操作，避免交叉污染；（5）培養(yǎng)期間避免移動培養(yǎng)基，防止微生物擴散。3.無菌檢查中陽性對照的目的是什么？應如何進行操作？答案：目的：驗證檢驗系統(tǒng)（包括培養(yǎng)基、環(huán)境、操作）的有效性，確保若供試品存在微生物，系統(tǒng)能夠檢出，避免假陰性結果。操作要求：（1）菌種選擇：需氧菌（如金黃色葡萄球菌ATCC6538）、厭氧菌（如生孢梭菌ATCC19404），接種量≤100CFU；（2）同步操作：與供試品檢驗同時進行，使用相同的培養(yǎng)基、環(huán)境和操作流程；（3）接種方法：液體培養(yǎng)基直接接種菌液，固體培養(yǎng)基（如濾膜法）將菌液滴加在濾膜上；（4）培養(yǎng)條件：與供試品一致（TSB30-35℃，F(xiàn)TM20-25℃，14天）；（5）結果判定：陽性對照應在3天內出現(xiàn)渾濁（或鏡檢有微生物），若未生長，說明系統(tǒng)失效，需重新檢驗。4.簡述無菌檢查結果判定的標準及異常結果的處理流程。答案：判定標準：（1）陽性對照生長，陰性對照未生長，供試品培養(yǎng)14天后無渾濁（鏡檢無微生物），判定為“無菌”；（2）供試品培養(yǎng)期間出現(xiàn)渾濁，鏡檢有微生物（或陽性菌鑒定與污染菌一致），判定為“有菌”；（3）陽性對照未生長，或陰性對照生長，判定為檢驗無效，需重新試驗。異常結果處理流程：（1）初步確認：重復檢驗（使用同批供試品的剩余樣品），若第二次結果仍為陽性，判定為有菌；（2）陽性菌鑒定：通過革蘭染色、生化試驗（如API試劑條）或分子生物學方法（如16SrRNA測序）確定污染菌種類；（3）環(huán)境回顧：檢查檢驗期間的環(huán)境監(jiān)測記錄（沉降菌、浮游菌、表面微生物），確認是否存在污染；（4）操作追溯：查看人員操作記錄（如消毒時間、濾膜更換、培養(yǎng)基配制），分析是否有違規(guī)操作；（5）根本原因分析：確定污染來源（如供試品生產(chǎn)污染、檢驗環(huán)境泄露、人員操作不當）；（6）糾正措施：對生產(chǎn)環(huán)節(jié)（如加強滅菌）、檢驗環(huán)節(jié)（如環(huán)境消毒、人員培訓）采取改進措施，并記錄。5.簡述醫(yī)療器械無菌檢驗中常見的誤差來源及預防措施。答案：常見誤差來源及預防措施：（1）環(huán)境污染：潔凈區(qū)壓差不足、人員走動頻繁導致顆粒進入。預防：定期檢測壓差，限制人員流動，操作時避免劇烈動作；（2）培養(yǎng)基失效：培養(yǎng)基過期、配制錯誤（如pH值偏差）、滅菌不徹底。預防：使用前檢查有效期，按說明書配制（pH值偏差≤0.2），滅菌后做無菌性檢查；（3）操作污染：手消毒不徹底、濾膜破損、培養(yǎng)基轉移時暴露。預防：嚴格執(zhí)行手消毒（75%乙醇擦拭≥30秒），使用前檢查濾膜完整性，培養(yǎng)基轉移時在生物安全柜內操作；（4）抑菌成分干擾：供試品含抗生素、消毒劑等抑制微生物生長。預防：采用薄膜過濾法沖洗去除抑菌成分，或使用中和培養(yǎng)基（如含中和劑的TSB）；（5）抽樣誤差：抽樣數(shù)量不足或代表性差（如僅抽取包裝完好的樣品）。預防：按標準抽樣（如批量≤100抽全部），隨機抽取不同位置的樣品；（6）培養(yǎng)條件偏差：培養(yǎng)箱溫度波動大（如超過±1℃）、培養(yǎng)時間不足（如僅培養(yǎng)7天）。預防：定期校準培養(yǎng)箱（溫度偏差≤±0.5℃），嚴格執(zhí)行14天培養(yǎng)周期。四、案例分析題（10分）某企業(yè)對一批外科手術手套進行無菌檢驗，使用薄膜過濾法，按標準操作后，培養(yǎng)第5天發(fā)現(xiàn)需氧培養(yǎng)基（TSB）出現(xiàn)渾濁。請分析可能原因及處理措施。答案：可能原因：