獸醫(yī)微生物學(xué)重點知識復(fù)習(xí)題集第一章緒論一、名詞解釋1.獸醫(yī)微生物學(xué)答案：研究微生物與動物健康、疾病關(guān)系的學(xué)科，涵蓋微生物的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理代謝、致病機(jī)制、實驗室診斷、免疫防治及與獸醫(yī)公共衛(wèi)生的關(guān)聯(lián)等內(nèi)容，是veterinarymedicine的基礎(chǔ)學(xué)科。2.病原微生物答案：能引起動物或人類疾病的微生物，包括細(xì)菌、病毒、真菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體等，其致病能力取決于毒力、數(shù)量及宿主免疫力。3.條件致病菌答案：正常情況下寄生于動物體內(nèi)不致病，但在宿主免疫力下降、菌群失調(diào)或定植部位改變時可引起疾病的微生物（如腸道內(nèi)的大腸桿菌進(jìn)入腹腔可引發(fā)腹膜炎）。二、選擇題（單選）1.下列科學(xué)家首次提出“病原菌學(xué)說”的是（）A.巴斯德（LouisPasteur）B.科赫（RobertKoch）C.列文虎克（AntonievanLeeuwenhoek）D.弗萊明（AlexanderFleming）答案：B（科赫通過炭疽桿菌實驗確立了“科赫法則”，奠定了病原菌學(xué)說的基礎(chǔ)）。2.獸醫(yī)微生物學(xué)的核心任務(wù)是（）A.研究微生物的分類B.探索微生物的代謝途徑C.揭示微生物與動物疾病的關(guān)系D.開發(fā)微生物制劑答案：C（獸醫(yī)微生物學(xué)的核心是闡明微生物如何導(dǎo)致動物疾病，為診斷、防治提供依據(jù)）。三、簡答題1.簡述獸醫(yī)微生物學(xué)的研究意義。答案：（1）闡明動物疾病的病原學(xué)機(jī)制，為診斷提供依據(jù)；（2）開發(fā)疫苗、抗菌藥物等防治手段，保障動物健康；（3）研究微生物與動物微生態(tài)的關(guān)系，維持動物內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定；（4）涉及獸醫(yī)公共衛(wèi)生，預(yù)防zoonotic疾?。ㄈ缜萘鞲?、布魯氏菌病）的傳播。四、論述題1.試述獸醫(yī)微生物學(xué)的發(fā)展歷程對veterinarymedicine的推動作用。答案：（1）萌芽期（17-19世紀(jì)）：列文虎克發(fā)明顯微鏡，首次觀察到微生物；巴斯德提出“胚種學(xué)說”，否定自然發(fā)生論，發(fā)明巴氏消毒法；科赫確立“科赫法則”，開創(chuàng)病原微生物分離鑒定技術(shù)，為傳染病的病原學(xué)診斷奠定基礎(chǔ)。（2）成熟期（20世紀(jì)）：青霉素的發(fā)現(xiàn)（弗萊明）開啟抗生素時代，有效控制細(xì)菌感染；疫苗的開發(fā)（如牛痘、豬瘟疫苗）使許多烈性傳染病得到預(yù)防；分子生物學(xué)技術(shù)（如PCR、基因測序）的應(yīng)用，提高了病原檢測的靈敏度和特異性，推動了病原微生物的遺傳與變異研究。（3）現(xiàn)代期（21世紀(jì)）：組學(xué)技術(shù)（基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)）的發(fā)展，深入解析微生物與宿主的相互作用；合成生物學(xué)、基因編輯技術(shù)的應(yīng)用，為疫苗和藥物的開發(fā)提供了新手段；微生物組研究的興起，揭示了腸道微生物與動物健康的密切關(guān)系，為微生態(tài)制劑的開發(fā)提供了理論依據(jù)?？偨Y(jié)：獸醫(yī)微生物學(xué)的每一次突破，都推動了veterinarymedicine從經(jīng)驗醫(yī)學(xué)向?qū)嵶C醫(yī)學(xué)的轉(zhuǎn)變，為動物疾病的防治提供了更精準(zhǔn)、有效的手段。第二章微生物的形態(tài)與結(jié)構(gòu)一、名詞解釋1.肽聚糖（Peptidoglycan）答案：細(xì)菌細(xì)胞壁的主要成分，由聚糖骨架（N-乙酰葡糖胺與N-乙酰胞壁酸交替連接）和肽側(cè)鏈（由氨基酸組成）通過肽橋連接而成，維持細(xì)菌細(xì)胞的形態(tài)和滲透壓穩(wěn)定性。革蘭氏陽性菌的肽聚糖層厚（20-80nm），革蘭氏陰性菌的肽聚糖層薄（1-3nm）。2.病毒粒子（Virion）答案：成熟的、具有感染性的病毒顆粒，由核心（核酸，DNA或RNA）和衣殼（蛋白質(zhì)）組成，部分病毒還有包膜（脂質(zhì)和蛋白質(zhì)，來自宿主細(xì)胞膜）。衣殼具有保護(hù)核酸和介導(dǎo)病毒吸附的作用，包膜上的糖蛋白是病毒的抗原成分。3.菌絲體（Mycelium）答案：真菌的營養(yǎng)體結(jié)構(gòu)，由許多菌絲（管狀、分支的絲狀體）交織而成。菌絲分為營養(yǎng)菌絲（吸收營養(yǎng)）、氣生菌絲（向空氣中生長）和生殖菌絲（產(chǎn)生孢子）。真菌的菌絲體是其鑒定的重要依據(jù)（如皮膚癬菌的菌絲形態(tài)）。二、選擇題（單選）1.下列細(xì)菌結(jié)構(gòu)中，與耐藥性傳遞有關(guān)的是（）A.莢膜B.質(zhì)粒C.芽孢D.鞭毛答案：B（質(zhì)粒是細(xì)菌染色體外的環(huán)狀DNA分子，攜帶耐藥基因（如β-內(nèi)酰胺酶基因），可通過轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)或接合傳遞給其他細(xì)菌，導(dǎo)致耐藥性擴(kuò)散）。2.病毒的遺傳物質(zhì)是（）A.DNAB.RNAC.DNA或RNAD.蛋白質(zhì)答案：C（病毒的核心是核酸，分為DNA病毒（如豬瘟病毒）和RNA病毒（如禽流感病毒），部分病毒（如逆轉(zhuǎn)錄病毒）的RNA可逆轉(zhuǎn)錄為DNA整合到宿主基因組中）。三、簡答題1.簡述革蘭氏染色的原理及步驟。答案：（1）原理：基于細(xì)菌細(xì)胞壁肽聚糖層的厚度和結(jié)構(gòu)差異。革蘭氏陽性菌肽聚糖層厚，交聯(lián)度高，不含脂質(zhì)，乙醇脫色時肽聚糖層收縮，阻止結(jié)晶紫-碘復(fù)合物透出，保持紫色；革蘭氏陰性菌肽聚糖層薄，交聯(lián)度低，含大量脂質(zhì)（外膜），乙醇脫色時脂質(zhì)溶解，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物透出，復(fù)染時被沙黃染成紅色。（2）步驟：涂片固定→結(jié)晶紫染色（1min）→碘液媒染（1min）→乙醇脫色（30s）→沙黃復(fù)染（1min）→鏡檢（革蘭氏陽性菌紫色，革蘭氏陰性菌紅色）。2.簡述病毒的結(jié)構(gòu)特點及分類依據(jù)。答案：（1）結(jié)構(gòu)特點：①無細(xì)胞結(jié)構(gòu)，由核酸和蛋白質(zhì)組成；②只能在活細(xì)胞內(nèi)寄生（依賴宿主細(xì)胞的代謝系統(tǒng)進(jìn)行復(fù)制）；③具有感染性（成熟的病毒粒子能感染宿主細(xì)胞）。（2）分類依據(jù)：①核酸類型（DNA或RNA）；②核酸結(jié)構(gòu)（單鏈或雙鏈、線性或環(huán)狀）；③衣殼對稱類型（二十面體對稱、螺旋對稱、復(fù)合對稱）；④有無包膜；⑤宿主范圍（動物病毒、植物病毒、細(xì)菌病毒）。四、論述題1.試述細(xì)菌特殊結(jié)構(gòu)（莢膜、芽孢、鞭毛、菌毛）的功能及在獸醫(yī)臨床中的意義。答案：（1）莢膜：①功能：保護(hù)細(xì)菌免受宿主吞噬細(xì)胞的吞噬（如肺炎鏈球菌的莢膜）、抵抗干燥和有害物質(zhì)的損傷；②臨床意義：莢膜是細(xì)菌的重要抗原（如大腸桿菌的K抗原），可用于血清型鑒定；莢膜陽性菌（如炭疽桿菌）的致病性更強(qiáng)，診斷時可通過莢膜染色（如墨汁染色）檢測。（2）芽孢：①功能：是細(xì)菌的休眠體，對熱、干燥、輻射、化學(xué)消毒劑等具有極強(qiáng)的抵抗力（如破傷風(fēng)梭菌的芽孢可在環(huán)境中存活數(shù)年）；②臨床意義：芽孢是消毒滅菌的指標(biāo)（如高壓蒸汽滅菌需殺死芽孢），診斷時需注意芽孢的形態(tài)（如破傷風(fēng)梭菌的圓形芽孢位于菌體一端，呈“鼓槌狀”）。（3）鞭毛：①功能：是細(xì)菌的運動器官（如大腸桿菌的鞭毛使細(xì)菌能運動）；②臨床意義：鞭毛是細(xì)菌的抗原（H抗原），可用于血清型鑒定（如沙門氏菌的H抗原分型），運動能力有助于細(xì)菌定植（如霍亂弧菌的鞭毛使其能穿過腸黏膜表面的黏液層）。（4）菌毛：①功能：普通菌毛（短、多）介導(dǎo)細(xì)菌吸附于宿主細(xì)胞表面（如大腸桿菌的菌毛吸附于腸黏膜細(xì)胞）；性菌毛（長、少）介導(dǎo)質(zhì)粒的傳遞（如耐藥質(zhì)粒的接合傳遞）；②臨床意義：菌毛是細(xì)菌的致病因子（如淋病奈瑟菌的菌毛吸附于尿道黏膜），診斷時可通過菌毛染色檢測。第三章微生物的生理與代謝一、名詞解釋1.培養(yǎng)基（Medium）答案：人工配制的、適合微生物生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、生長因子和水。根據(jù)用途可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基（如肉湯培養(yǎng)基）、選擇培養(yǎng)基（如SS培養(yǎng)基，選擇沙門氏菌）、鑒別培養(yǎng)基（如伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基，鑒別大腸桿菌）。2.菌落（Colony）答案：單個微生物細(xì)胞在固體培養(yǎng)基上生長繁殖形成的肉眼可見的子細(xì)胞群體。菌落的形態(tài)（大小、形狀、顏色、邊緣、表面）是細(xì)菌鑒定的重要依據(jù)（如金黃色葡萄球菌的菌落呈金黃色、圓形、凸起、表面光滑）。3.發(fā)酵（Fermentation）答案：微生物在無氧條件下，將葡萄糖等碳水化合物分解為乳酸、乙醇、二氧化碳等代謝產(chǎn)物的過程。發(fā)酵是細(xì)菌的重要代謝方式（如乳酸菌的乳酸發(fā)酵），也是食品加工（如酸奶、釀酒）的基礎(chǔ)。二、選擇題（多選）1.下列屬于細(xì)菌生長繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)的是（）A.碳源B.氮源C.無機(jī)鹽D.生長因子答案：ABCD（碳源提供能量和構(gòu)建細(xì)胞結(jié)構(gòu)的原料，如葡萄糖；氮源提供蛋白質(zhì)和核酸的原料，如氨基酸；無機(jī)鹽（如鈉、鉀、鎂）參與酶的活性調(diào)節(jié)；生長因子（如維生素、氨基酸）是細(xì)菌不能合成的必需物質(zhì)）。2.細(xì)菌生長曲線的對數(shù)期的特點是（）A.生長速率最快B.細(xì)菌形態(tài)典型C.代謝活躍D.易形成芽孢答案：ABC（對數(shù)期是細(xì)菌生長的旺盛期，細(xì)胞數(shù)目呈指數(shù)增長，形態(tài)（如大腸桿菌的桿狀）和生理特性（如酶活性）典型，適合用于藥敏試驗和疫苗生產(chǎn)；芽孢形成于穩(wěn)定期）。三、簡答題1.簡述微生物的營養(yǎng)類型及舉例。答案：微生物的營養(yǎng)類型根據(jù)碳源和能源的不同分為四類：（1）光能自養(yǎng)型：以光為能源，以二氧化碳為碳源（如藍(lán)細(xì)菌、藻類）；（2）光能異養(yǎng)型：以光為能源，以有機(jī)物為碳源（如紅螺菌）；（3）化能自養(yǎng)型：以無機(jī)物氧化釋放的能量為能源，以二氧化碳為碳源（如硝化細(xì)菌，氧化氨為硝酸）；（4）化能異養(yǎng)型：以有機(jī)物氧化釋放的能量為能源，以有機(jī)物為碳源（如大多數(shù)細(xì)菌、真菌、動物病毒）。獸醫(yī)微生物學(xué)中常見的是化能異養(yǎng)型微生物（如大腸桿菌、沙門氏菌）。2.簡述細(xì)菌生長曲線的分期及各期特點。答案：細(xì)菌生長曲線是將細(xì)菌接種到新鮮培養(yǎng)基中，定期測定細(xì)菌數(shù)目繪制的曲線，分為四個時期：（1）遲緩期：細(xì)菌適應(yīng)新環(huán)境，不分裂繁殖，數(shù)目不變或略有減少，代謝活躍（合成酶、ATP等）；（2）對數(shù)期：細(xì)菌快速分裂繁殖，數(shù)目呈指數(shù)增長，形態(tài)典型，代謝活躍，適合用于藥敏試驗、疫苗生產(chǎn)；（3）穩(wěn)定期：細(xì)菌生長速率等于死亡速率，數(shù)目達(dá)到最大值，開始形成芽孢、積累代謝產(chǎn)物（如抗生素、毒素）；（4）衰亡期：細(xì)菌死亡速率大于生長速率，數(shù)目減少，形態(tài)畸形（如桿菌變?yōu)榍蛐危?，代謝停滯。四、論述題1.試述微生物代謝產(chǎn)物的類型及在獸醫(yī)臨床中的應(yīng)用。答案：微生物的代謝產(chǎn)物分為初級代謝產(chǎn)物和次級代謝產(chǎn)物：（1）初級代謝產(chǎn)物：是微生物生長繁殖必需的產(chǎn)物，如氨基酸、核苷酸、維生素、ATP等。應(yīng)用：①氨基酸（如賴氨酸）用于動物飼料添加劑，提高飼料利用率；②維生素（如維生素B12）用于治療動物維生素缺乏癥；③ATP用于改善動物機(jī)體的能量代謝（如心力衰竭的輔助治療）。（2）次級代謝產(chǎn)物：是微生物生長到穩(wěn)定期產(chǎn)生的，與生長繁殖無關(guān)的產(chǎn)物，如抗生素、毒素、色素、激素等。應(yīng)用：①抗生素（如青霉素、鏈霉素）用于治療動物細(xì)菌感染（如大腸桿菌病、沙門氏菌?。?；②毒素（如破傷風(fēng)毒素、肉毒毒素）用于制作疫苗（如破傷風(fēng)類毒素），預(yù)防相應(yīng)疾??；③色素（如金黃色葡萄球菌的金黃色色素）用于細(xì)菌鑒定（如區(qū)分金黃色葡萄球菌與其他葡萄球菌）；④激素（如胰島素）用于治療動物糖尿?。ㄍㄟ^基因工程菌生產(chǎn)）?？偨Y(jié)：微生物代謝產(chǎn)物是獸醫(yī)臨床中重要的藥物和診斷試劑來源，其應(yīng)用極大地提高了動物疾病的防治水平。第四章微生物的致病機(jī)制與抗感染免疫一、名詞解釋1.毒力（Virulence）答案：微生物引起疾病的能力，由侵襲力（微生物突破宿主防御屏障的能力）和毒素（微生物產(chǎn)生的有毒物質(zhì)）組成。毒力的強(qiáng)弱用半數(shù)致死量（LD50）或半數(shù)感染量（ID50）表示（LD50越小，毒力越強(qiáng)）。2.內(nèi)毒素（Endotoxin）答案：革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁外膜中的脂多糖（LPS）成分，當(dāng)細(xì)菌死亡裂解或人工破壞時釋放。內(nèi)毒素的主要成分是脂質(zhì)A（毒性部分），具有致熱、引起休克、彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）等作用（如大腸桿菌內(nèi)毒素引起的敗血癥）。3.細(xì)胞免疫（Cell-mediatedImmunity）答案：由T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答，主要針對細(xì)胞內(nèi)寄生的微生物（如病毒、結(jié)核桿菌）。T細(xì)胞接受抗原刺激后增殖分化為效應(yīng)T細(xì)胞（細(xì)胞毒性T細(xì)胞、輔助T細(xì)胞），細(xì)胞毒性T細(xì)胞通過釋放穿孔素、顆粒酶殺死感染細(xì)胞，輔助T細(xì)胞通過分泌細(xì)胞因子（如IL-2、IFN-γ）激活其他免疫細(xì)胞（如巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞）。二、選擇題（單選）1.下列毒素中，屬于外毒素的是（）A.大腸桿菌內(nèi)毒素B.破傷風(fēng)毒素C.結(jié)核桿菌毒素D.沙門氏菌毒素答案：B（外毒素是革蘭氏陽性菌（如破傷風(fēng)梭菌、金黃色葡萄球菌）或少數(shù)革蘭氏陰性菌（如霍亂弧菌）分泌的蛋白質(zhì)毒素，毒性強(qiáng)、特異性高（如破傷風(fēng)毒素作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，引起肌肉痙攣）；內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌的脂多糖，毒性弱、廣譜）。2.抗感染免疫中，針對病毒的主要免疫類型是（）A.體液免疫B.細(xì)胞免疫C.吞噬作用D.補(bǔ)體激活答案：B（病毒是細(xì)胞內(nèi)寄生微生物，體液免疫（抗體）主要作用于游離的病毒（如中和病毒），而細(xì)胞免疫（效應(yīng)T細(xì)胞）主要殺死感染病毒的細(xì)胞，清除細(xì)胞內(nèi)的病毒；吞噬作用（如巨噬細(xì)胞吞噬病毒）是innateimmunity的一部分，補(bǔ)體激活（如溶菌作用）主要針對細(xì)菌）。三、簡答題1.簡述細(xì)菌的致病機(jī)制。答案：細(xì)菌的致病機(jī)制主要包括三個方面：（1）侵襲力：細(xì)菌突破宿主防御屏障的能力，包括：①黏附（如大腸桿菌的菌毛黏附于腸黏膜細(xì)胞）；②定植（如沙門氏菌在腸道內(nèi)生長繁殖）；③侵襲（如志賀氏菌侵入腸黏膜細(xì)胞）；④逃避宿主免疫（如肺炎鏈球菌的莢膜逃避吞噬細(xì)胞的吞噬）。（2）毒素：細(xì)菌產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，包括：①外毒素（如破傷風(fēng)毒素、霍亂毒素，毒性強(qiáng)、特異性高）；②內(nèi)毒素（如大腸桿菌內(nèi)毒素，毒性弱、廣譜，引起發(fā)熱、休克等）。（3）其他致病物質(zhì)：如酶類（如金黃色葡萄球菌的血漿凝固酶，使血漿凝固，保護(hù)細(xì)菌免受吞噬；鏈球菌的透明質(zhì)酸酶，分解結(jié)締組織，促進(jìn)細(xì)菌擴(kuò)散）。2.簡述抗感染免疫的類型及特點。答案：抗感染免疫分為innateimmunity（固有免疫）和adaptiveimmunity（適應(yīng)性免疫）：（1）固有免疫：是機(jī)體生來就有的免疫，無特異性，作用快，包括：①屏障結(jié)構(gòu)（如皮膚、黏膜，阻擋微生物侵入）；②吞噬細(xì)胞（如巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞，吞噬微生物）；③體液因子（如補(bǔ)體、溶菌酶，殺死微生物）；④自然殺傷細(xì)胞（NK細(xì)胞，殺死感染病毒的細(xì)胞）。（2）適應(yīng)性免疫：是機(jī)體接觸微生物后產(chǎn)生的免疫，有特異性，作用慢，包括：①體液免疫（由B細(xì)胞介導(dǎo)，產(chǎn)生抗體，作用于游離的微生物（如病毒、細(xì)菌），中和毒素、凝集細(xì)菌、激活補(bǔ)體）；②細(xì)胞免疫（由T細(xì)胞介導(dǎo)，產(chǎn)生效應(yīng)T細(xì)胞，作用于細(xì)胞內(nèi)寄生的微生物（如病毒、結(jié)核桿菌），殺死感染細(xì)胞）。四、論述題1.試述微生物的致病機(jī)制與抗感染免疫的相互關(guān)系。答案：微生物的致病機(jī)制與抗感染免疫是相互作用、相互制約的關(guān)系：（1）微生物的致病機(jī)制：微生物通過侵襲力（黏附、定植、侵襲、逃避免疫）和毒素（外毒素、內(nèi)毒素）引起疾病，其目的是在宿主體內(nèi)生存和繁殖。（2）抗感染免疫的作用：宿主通過固有免疫（屏障、吞噬細(xì)胞、補(bǔ)體）和適應(yīng)性免疫（體液免疫、細(xì)胞免疫）清除微生物，保護(hù)機(jī)體健康。（3）相互關(guān)系：①微生物的致病機(jī)制是為了逃避或破壞宿主的抗感染免疫（如肺炎鏈球菌的莢膜逃避吞噬細(xì)胞的吞噬；金黃色葡萄球菌的血漿凝固酶使血漿凝固，保護(hù)細(xì)菌免受吞噬；病毒的抗原變異（如禽流感病毒的H和N亞型變異）逃避抗體的中和作用）；②宿主的抗感染免疫是為了對抗微生物的致病機(jī)制（如吞噬細(xì)胞通過表面受體識別微生物的病原體相關(guān)分子模式（PAMP），如細(xì)菌的脂多糖、肽聚糖，激活吞噬作用；抗體通過識別微生物的抗原（如病毒的包膜糖蛋白），中和病毒、凝集細(xì)菌、激活補(bǔ)體；效應(yīng)T細(xì)胞通過識別感染細(xì)胞表面的抗原-MHC復(fù)合物，殺死感染細(xì)胞）。（4）結(jié)果：如果微生物的致病機(jī)制強(qiáng)于宿主的抗感染免疫，則引起疾??；如果宿主的抗感染免疫強(qiáng)于微生物的致病機(jī)制，則清除微生物，不引起疾病或疾病恢復(fù)。舉例：大腸桿菌感染腸道時，通過菌毛黏附于腸黏膜細(xì)胞（侵襲力），產(chǎn)生腸毒素（如耐熱腸毒素ST、不耐熱腸毒素LT），引起腹瀉（致病機(jī)制）；宿主的固有免疫（如腸黏膜的屏障作用、吞噬細(xì)胞吞噬大腸桿菌）和適應(yīng)性免疫（如產(chǎn)生抗腸毒素抗體、效應(yīng)T細(xì)胞殺死感染的腸黏膜細(xì)胞）對抗大腸桿菌的感染，如果宿主免疫力強(qiáng)（如成年動物），則腹瀉輕微或不發(fā)生；如果宿主免疫力弱（如幼齡動物），則腹瀉嚴(yán)重，甚至死亡。第五章微生物學(xué)實驗室診斷一、名詞解釋1.藥敏試驗（AntimicrobialSusceptibilityTest,AST）答案：檢測微生物對antimicrobialagents敏感性的試驗，用于指導(dǎo)臨床合理用藥。常用方法有紙片擴(kuò)散法（Kirby-Bauer法，將含抗菌藥物的紙片貼在接種細(xì)菌的培養(yǎng)基上，觀察抑菌圈大小，判斷敏感性）、肉湯稀釋法（測定最低抑菌濃度（MIC），即抑制細(xì)菌生長的最低藥物濃度）。2.PCR（PolymeraseChainReaction）答案：一種體外擴(kuò)增DNA的技術(shù)，通過變性（94℃，DNA雙鏈解開）、退火（50-60℃，引物與模板DNA結(jié)合）、延伸（72℃，DNA聚合酶合成DNA）三個步驟循環(huán)，將目的DNA片段擴(kuò)增數(shù)百萬倍。PCR具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速的特點，用于微生物的檢測（如禽流感病毒、豬瘟病毒的檢測）。3.ELISA（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay）答案：一種酶聯(lián)免疫吸附試驗，用于檢測抗原或抗體。原理是將抗原或抗體固定在固相載體（如聚苯乙烯板）上，加入待檢樣品（抗體或抗原），再加入酶標(biāo)記的二抗，最后加入底物，通過酶催化底物產(chǎn)生的顏色深淺判斷樣品中抗原或抗體的含量。ELISA具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、可定量的特點，用于微生物的診斷（如犬細(xì)小病毒抗體檢測、禽流感病毒抗原檢測）。二、選擇題（單選）1.下列標(biāo)本中，適合用于檢測敗血癥病原的是（）A.糞便B.血液C.尿液D.痰液答案：B（敗血癥是細(xì)菌進(jìn)入血液并大量繁殖引起的疾病，血液標(biāo)本中含有大量細(xì)菌，適合用于分離鑒定病原（如大腸桿菌、金黃色葡萄球菌）；糞便標(biāo)本適合檢測腸道病原（如沙門氏菌、志賀氏菌）；尿液標(biāo)本適合檢測尿路感染病原（如大腸桿菌）；痰液標(biāo)本適合檢測呼吸道病原（如肺炎鏈球菌、流感病毒））。2.紙片擴(kuò)散法藥敏試驗中，抑菌圈直徑越大，說明細(xì)菌對藥物（）A.越敏感B.越耐藥C.無關(guān)系D.不確定答案：A（紙片擴(kuò)散法中，抗菌藥物通過擴(kuò)散作用抑制細(xì)菌生長，抑菌圈直徑越大，說明藥物對細(xì)菌的抑制作用越強(qiáng)，細(xì)菌對藥物越敏感；反之，抑菌圈直徑越小，說明細(xì)菌對藥物越耐藥）。三、簡答題1.簡述微生物學(xué)實驗室診斷的基本步驟。答案：微生物學(xué)實驗室診斷的基本步驟包括：（1）標(biāo)本采集：根據(jù)疾病類型采集合適的標(biāo)本（如敗血癥采集血液，腹瀉采集糞便，呼吸道感染采集痰液），采集時要注意無菌操作（避免污染）、及時送檢（避免微生物死亡）、標(biāo)本量足夠（滿足檢測需求）。（2）標(biāo)本處理：對標(biāo)本進(jìn)行處理（如糞便標(biāo)本用生理鹽水稀釋，血液標(biāo)本用肉湯增菌），以提高檢測的靈敏度。（3）直接檢測：通過顯微鏡檢查（如革蘭氏染色、瑞氏染色）觀察微生物的形態(tài)（如細(xì)菌的革蘭氏染色結(jié)果、病毒的包涵體），或通過抗原檢測（如ELISA、膠體金試驗）快速檢測微生物的抗原（如犬細(xì)小病毒抗原）。（4）分離培養(yǎng)：將標(biāo)本接種到合適的培養(yǎng)基（如血液標(biāo)本接種到血瓊脂平板，糞便標(biāo)本接種到SS培養(yǎng)基），在適宜的條件（溫度、濕度、氣體）下培養(yǎng)（如細(xì)菌37℃培養(yǎng)18-24h，病毒需接種細(xì)胞培養(yǎng)），觀察菌落形態(tài)（細(xì)菌）或細(xì)胞病變（病毒）。（5）鑒定：對分離到的微生物進(jìn)行鑒定，包括：①形態(tài)學(xué)鑒定（如細(xì)菌的革蘭氏染色、芽孢形態(tài)）；②生化鑒定（如大腸桿菌的乳糖發(fā)酵試驗、沙門氏菌的硫化氫試驗）；③血清學(xué)鑒定（如用特異性抗體檢測微生物的抗原，如沙門氏菌的血清型鑒定）；④分子生物學(xué)鑒定（如PCR檢測微生物的特異性基因，如禽流感病毒的H5基因）。（6）藥敏試驗：對分離到的細(xì)菌進(jìn)行藥敏試驗（如紙片擴(kuò)散法、肉湯稀釋法），指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物。2.簡述PCR的原理及在獸醫(yī)微生物學(xué)中的應(yīng)用。答案：（1）原理：PCR是一種體外擴(kuò)增DNA的技術(shù)，基于DNA的半保留復(fù)制原理。反應(yīng)體系包括模板DNA（待擴(kuò)增的DNA）、引物（與模板DNA兩端互補(bǔ)的短鏈DNA）、DNA聚合酶（如Taq酶，耐高溫）、dNTP（脫氧核苷酸，DNA合成的原料）、緩沖液（維持反應(yīng)體系的pH）。反應(yīng)過程分為三個步驟：①變性（94℃，模板DNA雙鏈解開為單鏈）；②退火（50-60℃，引物與模板DNA的單鏈互補(bǔ)結(jié)合）；③延伸（72℃，DNA聚合酶以引物為起點，沿模板DNA合成互補(bǔ)的DNA鏈）。這三個步驟循環(huán)25-35次，模板DNA可擴(kuò)增數(shù)百萬倍。（2）應(yīng)用：①微生物的檢測（如禽流感病毒、豬瘟病毒、大腸桿菌的檢測），具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、快速的特點；②微生物的鑒定（如通過擴(kuò)增16SrRNA基因鑒定細(xì)菌的種屬）；③微生物的遺傳變異研究（如檢測病毒的基因突變（如流感病毒的H5N1亞型變異））；④疫苗研發(fā)（如擴(kuò)增病毒的抗原基因，用于制作基因工程疫苗）。四、論述題1.試述微生物學(xué)實驗室診斷中，標(biāo)本采集與處理的重要性及注意事項。答案：（1）重要性：標(biāo)本采集與處理是微生物學(xué)實驗室診斷的第一步，直接影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。如果標(biāo)本采集不當(dāng)（如污染、標(biāo)本量不足）或處理不及時（如微生物死亡、降解），會導(dǎo)致假陰性（未檢測到病原）或假陽性（檢測到污染的微生物）結(jié)果，影響臨床診斷和治療。（2）注意事項：①標(biāo)本采集的原則：a.無菌操作：采集標(biāo)本時要避免外界微生物的污染（如用無菌注射器采集血液，用無菌棉簽采集痰液）；b.針對性：根據(jù)疾病類型采集合適的標(biāo)本（如敗血癥采集血液，腹瀉采集糞便，腦炎采集腦脊液）；c.及時性：采集標(biāo)本后要及時送檢（如血液標(biāo)本要在采集后1h內(nèi)送檢，糞便標(biāo)本要在采集后2h內(nèi)送檢），避免微生物死亡（如腦膜炎奈瑟菌對溫度敏感，需保溫送檢）；d.足夠量：標(biāo)本量要足夠（如血液標(biāo)本需采集5-10ml，糞便標(biāo)本需采集1-2g），滿足檢測需求（如分離培養(yǎng)需要足夠的微生物量）。②標(biāo)本處理的原則：a.增菌培養(yǎng)：對于含菌量少的標(biāo)本（如血液、腦脊液），需要先進(jìn)行增菌培養(yǎng)（如血液標(biāo)本接種到肉湯培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)18-24h，使微生物數(shù)量增加），提高檢測的靈敏度；b.稀釋處理：對于含菌量多的標(biāo)本（如糞便標(biāo)本），需要用生理鹽水稀釋（如1:10稀釋），避免微生物過度生長影響分離培養(yǎng)（如糞便標(biāo)本稀釋后接種到SS培養(yǎng)基，可分離出沙門氏菌）；c.去污染：對于含雜菌多的標(biāo)本（如痰液標(biāo)本），需要用胰酶或鹽酸處理，去除雜菌（如痰液標(biāo)本用胰酶消化，使痰液液化，去除口腔中的雜菌）；d.保存：如果標(biāo)本不能及時送檢，需要保存（如糞便標(biāo)本可冷藏（4℃）保存，血液標(biāo)本可冷凍（-20℃）保存），但要注意保存時間（如糞便標(biāo)本冷藏保存不超過24h，血液標(biāo)本冷凍保存不超過1周）。（3）舉例：如果采集敗血癥患者的血液標(biāo)本時，沒有用無菌注射器，導(dǎo)致標(biāo)本被外界的大腸桿菌污染，實驗室檢測時會分離到大腸桿菌，誤認(rèn)為是敗血癥的病原，導(dǎo)致臨床誤用抗生素（如用針對大腸桿菌的抗生素治療，而實際病原是金黃色葡萄球菌）；如果采集糞便標(biāo)本后，沒有及時送檢，導(dǎo)致標(biāo)本中的沙門氏菌死亡，實驗室檢測時會未分離到沙門氏菌，導(dǎo)致假陰性結(jié)果，影響臨床診斷（如漏診沙門氏菌?。？偨Y(jié)：標(biāo)本采集與處理是微生物學(xué)實驗室診斷的關(guān)鍵步驟，必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作、針對性、及時性、足夠量的原則，以及增菌、稀釋、去污染、保存的處理原則，才能保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，為臨床診斷和治療提供可靠的依據(jù)。第六章常見病原微生物一、名詞解釋1.大腸桿菌（Escherichiacoli）答案：革蘭氏陰性桿菌，屬于腸桿菌科，是腸道正常菌群的成員（共生菌），但某些血清型（如O157:H7）具有致病性，可引起動物腹瀉（如仔豬黃痢、犢牛腹瀉）、敗血癥（如新生動物敗血癥）、尿路感染（如犬尿路感染）。2.禽流感病毒（AvianInfluenzaVirus,AIV）答案：屬于正黏病毒科，流感病毒屬，單鏈RNA病毒，包膜上有兩種糖蛋白：血凝素（H）和神經(jīng)氨酸酶（N）。根據(jù)H和N的亞型，可分為高致病性（如H5N1、H7N9）和低致病性（如H9N2）。高致病性禽流感病毒可引起雞、鴨等禽類的急性死亡（死亡率可達(dá)100%），并可通過接觸感染人類（如H5N1亞型引起人類肺炎、死亡）。3.犬細(xì)小病毒（CanineParvovirus,CPV）答案：屬于細(xì)小病毒科，細(xì)小病毒屬，單鏈DNA病毒，無包膜。主要感染犬（尤其是幼犬），引起兩種臨床類型：①腸炎型（以腹瀉、便血、嘔吐為特征）；②心肌炎型（以呼吸困難、心力衰竭為特征）。犬細(xì)小病毒的傳染性強(qiáng)，死亡率高（腸炎型死亡率可達(dá)30-50%，心肌炎型死亡率可達(dá)80%以上）。二、選擇題（單選）1.下列細(xì)菌中，屬于革蘭氏陽性球菌的是（）A.大腸桿菌B.沙門氏菌C.金黃色葡萄球菌D.志賀氏菌答案：C（金黃色葡萄球菌是革蘭氏陽性球菌，排列成葡萄串狀，是引起動物化膿性感染（如傷口感染、乳腺炎）的常見病原；大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌都是革蘭氏陰性桿菌）。2.禽流感病毒的遺傳物質(zhì)是（）A.DNAB.RNAC.蛋白質(zhì)D.脂質(zhì)答案：B（禽流感病毒屬于正黏病毒科，流感病毒屬，其遺傳物質(zhì)是單鏈RNA，易發(fā)生基因突變（如H和N亞型的變異），導(dǎo)致新的亞型出現(xiàn)（如H5N1、H7N9），增加了防控的難度）。三、簡答題1.簡述大腸桿菌病的臨床類型及致病機(jī)制。答案：（1）臨床類型：大腸桿菌病是動物常見的細(xì)菌性疾病，根據(jù)感染部位和動物年齡，可分為以下類型：①新生動物敗血癥（如仔豬、犢牛、幼犬的敗血癥）：由大腸桿菌通過臍帶、呼吸道或消化道侵入血液引起，表現(xiàn)為發(fā)熱、精神沉郁、呼吸困難、死亡；②腹瀉（如仔豬黃痢、犢牛腹瀉、犬腹瀉）：由大腸桿菌產(chǎn)生的腸毒素（如ST、LT）引起，表現(xiàn)為水樣腹瀉、脫水、電解質(zhì)紊亂；③尿路感染（如犬、貓的尿路感染）：由大腸桿菌通過尿道侵入膀胱或腎臟引起，表現(xiàn)為尿頻、尿急、尿痛、尿液渾濁；④乳腺炎（如奶牛的乳腺炎）：由大腸桿菌通過乳頭侵入乳腺引起，表現(xiàn)為乳房紅腫、發(fā)熱、乳汁變稠。（2）致病機(jī)制：大腸桿菌的致病機(jī)制主要包括：①黏附：通過菌毛（如K88、K99菌毛）黏附于腸黏膜或尿路上皮細(xì)胞，避免被腸蠕動或尿液沖洗掉；②產(chǎn)生毒素：產(chǎn)生腸毒素（ST、LT），刺激腸黏膜細(xì)胞分泌大量液體和電解質(zhì)，引起腹瀉；產(chǎn)生內(nèi)毒素（LPS），引起發(fā)熱、休克、DIC；③侵襲：某些血清型（如O157:H7）可侵入腸黏膜細(xì)胞，引起炎癥和潰瘍；④逃避免疫：通過莢膜（如K抗原）逃避吞噬細(xì)胞的吞噬，通過產(chǎn)生超氧化物歧化酶（SOD）中和吞噬細(xì)胞產(chǎn)生的reactiveoxygenspecies（ROS）。2.簡述犬細(xì)小病毒病的診斷與防治措施。答案：（1）診斷：犬細(xì)小病毒病的診斷主要依靠臨床癥狀、實驗室檢測：①臨床癥狀：腸炎型表現(xiàn)為腹瀉（先水樣，后帶血）、嘔吐、精神沉郁、脫水；心肌炎型表現(xiàn)為呼吸困難、咳嗽、心力衰竭、突然死亡（多見于幼犬）；②實驗室檢測：a.抗原檢測：用膠體金試紙條檢測糞便中的犬細(xì)小病毒抗原（快速、簡便）；b.抗體檢測：用ELISA檢測血清中的犬細(xì)小病毒抗體（用于判斷疫苗免疫效果）；c.病毒分離：將糞便標(biāo)本接種到犬腎細(xì)胞（MDCK細(xì)胞），觀察細(xì)胞病變（如細(xì)胞圓縮、脫落）；d.PCR檢測：擴(kuò)增犬細(xì)小病毒的VP2基因（特異性強(qiáng)、靈敏度高）。（2）防治措施：①預(yù)防：a.疫苗接種：是預(yù)防犬細(xì)小病毒病的關(guān)鍵，幼犬在6-8周齡時接種第一針疫苗（如犬細(xì)小病毒滅活疫苗或弱毒疫苗），每隔2-3周接種一次，共接種3次，成年犬每年加強(qiáng)免疫一次；b.衛(wèi)生消毒：用含氯消毒劑（如漂白粉）或氧化劑（如過氧乙酸）消毒犬舍、用具，避免病毒傳播；c.隔離：避免幼犬接觸病犬或帶毒犬（如避免去寵物醫(yī)院、公園等地方）。②治療：a.支持治療：補(bǔ)充水分和電解質(zhì)（如靜脈注射生理鹽水、葡萄糖），糾正脫水和電解質(zhì)紊亂；b.止吐止瀉：用止吐藥（如胃復(fù)安）、止瀉藥（如蒙脫石散）緩解癥狀；c.抗病毒治療：用干擾素（如犬干擾素α）、利巴韋林（但效果有限）；d.控制繼發(fā)感染：用抗生素（如頭孢菌素）治療繼發(fā)的細(xì)菌感染。四、論述題1.試述禽流感病毒的流行特點及防控策略。答案：（1）流行特點：禽流感是由禽流感病毒引起的禽類傳染病，其流行特點包括：①宿主范圍廣：禽流感病毒可感染雞、鴨、鵝、火雞等禽類，也可感染豬、馬、人類等哺乳動物；②傳染性強(qiáng)：禽流感病毒可通過空氣傳播（如呼吸道飛沫）、接觸傳播（如接觸病禽的糞便、分泌物）、食物傳播（如食用未煮熟的病禽肉）；③變異快：禽流感病毒的RNA聚合酶無校正功能，易發(fā)生基因突變（如H和N亞型的變異），導(dǎo)致新的亞型出現(xiàn)（如H5N1、H7N9），增加了防控的難度；④致病性差異大：根據(jù)H和N的亞型，禽流感病毒可分為高致病性（如H5N1、H7N9）和低致病性（如H9N2），高致病性禽流感病毒可引起禽類的急性死亡（死亡率可達(dá)100%），低致病性禽流感病毒可引起禽類的輕度呼吸道癥狀或產(chǎn)蛋下降；⑤季節(jié)性：禽流感病毒在寒冷季節(jié)（如冬季、春季）易流行，因為低溫有利于病毒的存活。（2）防控策略：禽流感的防控策略主要包括以下幾個方面：①監(jiān)測：建立禽流感監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)，定期對禽類（如雞、鴨、鵝）進(jìn)行血清學(xué)檢測（如ELISA檢測抗體）和病原學(xué)檢測（如PCR檢測病毒），及時發(fā)現(xiàn)疫情；②檢疫：對進(jìn)口的禽類及其產(chǎn)品進(jìn)行檢疫，禁止從禽流感疫區(qū)進(jìn)口禽類及其產(chǎn)品；③消毒：對禽舍、用具、運輸工具進(jìn)行定期消毒（如用含氯消毒劑、過氧乙酸），殺死環(huán)境中的禽流感病毒；④疫苗接種：接種禽流感疫苗是預(yù)防禽流感的有效措施，目前常用的疫苗有滅活疫苗（如H5N1滅活疫苗）、弱毒疫苗（如H9N2弱毒疫苗）、基因工程疫苗（如重組禽流感病毒疫苗）；⑤撲殺：一旦發(fā)生高致病性禽流感疫情，要立即撲殺病禽和疑似病禽，銷毀其尸體和污染物，防止疫情擴(kuò)散；⑥個人防護(hù)：接觸禽類的人員（如養(yǎng)殖戶、獸醫(yī)）要穿防護(hù)服、戴口罩、手套，避免直接接觸病禽的糞便、分泌物，接觸后要及時洗手；食用禽類產(chǎn)品時要徹底煮熟（中心溫度達(dá)到70℃以上），殺死其中的禽流感病毒；⑦國際合作：禽流感是一種全球性疾病，需要國際社會的合作（如世界衛(wèi)生組織（WHO）、聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織（FAO）），共享監(jiān)測數(shù)據(jù)和防控經(jīng)驗，共同防控禽流感。舉例：2003年，H5N1亞型高致病性禽流感在亞洲爆發(fā)，導(dǎo)致數(shù)百萬只雞死亡，數(shù)千人感染，數(shù)百人死亡。通過采取監(jiān)測、檢疫、消毒、疫苗接種、撲殺等防控措施，疫情得到了有效控制。2013年，H7N9亞型高致病性禽流感在中國爆發(fā)，導(dǎo)致數(shù)百人感染，數(shù)十人死亡。通過加強(qiáng)監(jiān)測、關(guān)閉活禽市場、接種疫苗等措施，疫情得到了控制?？偨Y(jié)：禽流感的防控需要采取綜合措施，包括監(jiān)測、檢疫、消毒、疫苗接種、撲殺、個人防護(hù)等，同時需要國際社會的合作，才能有效預(yù)防和控制禽流感的流行。第七章微生物與獸醫(yī)公共衛(wèi)生一、名詞解釋1.Zoonosis（人獸共患?。┐鸢福河赏环N病原體引起的、可在動物和人類之間自然傳播的疾病，如禽流感（病毒）、布魯氏菌?。?xì)菌）、狂犬?。ú《荆?、弓形蟲病（原蟲）。Zoonosis是獸醫(yī)公共衛(wèi)生的重要內(nèi)容，其防控需要動物醫(yī)學(xué)與人類醫(yī)學(xué)的合作。2.消毒（Disinfection）答案：殺死或清除環(huán)境中的病原微生物（不包括芽孢）的過程，用于預(yù)防傳染病的傳播。常用的消毒方法有物理消毒（如煮沸、紫外線照射）、化學(xué)消毒（如含氯消毒劑、過氧乙酸）、生物消毒（如發(fā)酵）。3.巴氏消毒法（Pasteurization）答案：一種低溫消毒法，用于殺死牛奶、啤酒等食品中的病原微生物（如結(jié)核桿菌、沙門氏菌），同時保持食品的營養(yǎng)和風(fēng)味。常用的巴氏消毒法有兩種：①低溫長時間消毒（63-65℃，30min）；②高溫短時間消毒（72-75℃，15-20s）。二、選擇題（單選）1.下列疾病中，屬于zoonosis的是（）A.豬瘟B.犬細(xì)小病毒病C.布魯氏菌病D.雞新城疫答案：C（布魯氏菌病是由布魯氏菌引起的人獸共患病，可感染牛、羊、豬等動物，人類通過接觸病畜的分泌物、乳汁或食用未煮熟的病畜肉感染，表現(xiàn)為發(fā)熱、關(guān)節(jié)疼痛、肝脾腫大