2025年醫(yī)衛(wèi)類病理學(xué)技術(shù)(中級)基礎(chǔ)知識-專業(yè)實踐能力參考題庫含答案解析一、單選題（共35題）1.在病理組織處理過程中，關(guān)于脫水透明步驟的操作要點，下列說法正確的是A.脫水劑濃度應(yīng)從低到高逐級更換，透明劑通常使用二甲苯B.可直接將組織從95%酒精跳轉(zhuǎn)至100%酒精進行充分脫水C.脫水透明后的組織應(yīng)保留在透明劑中進行長期保存D.丙酮的脫水效果優(yōu)于乙醇但毒性更小【選項】A.脫水劑濃度應(yīng)從低到高逐級更換，透明劑通常使用二甲苯B.可直接將組織從95%酒精跳轉(zhuǎn)至100%酒精進行充分脫水C.脫水透明后的組織應(yīng)保留在透明劑中進行長期保存D.丙酮的脫水效果優(yōu)于乙醇但毒性更小【參考答案】A【解析】1.A正確：脫水需梯度酒精逐級提高濃度（如70%-80%-95%-100%），二甲苯是最常用透明劑。2.B錯誤：跳過脫水梯度會導(dǎo)致組織收縮變形，95%酒精需經(jīng)兩次100%酒精徹底脫水。3.C錯誤：透明劑長期浸泡會使組織變脆，透明后需及時浸蠟包埋。4.D錯誤：丙酮脫水速度快但毒性強于乙醇，常用于急檢標(biāo)本而非常規(guī)處理。2.進行HE染色時，若細(xì)胞核染色過淺而胞質(zhì)著色正常，最可能的原因是A.蘇木精染液氧化不足B.分化液作用時間過長C.伊紅染液pH值過高D.封片時中性樹膠過量【選項】A.蘇木精染液氧化不足B.分化液作用時間過長C.伊紅染液pH值過高D.封片時中性樹膠過量【參考答案】B【解析】1.B正確：分化液（如1%鹽酸酒精）過度作用會脫去細(xì)胞核內(nèi)結(jié)合的蘇木精染料。2.A錯誤：氧化不足導(dǎo)致蘇木精染色力弱，現(xiàn)象應(yīng)為核質(zhì)均淺染。3.C錯誤：伊紅pH過高會影響胞質(zhì)著色強度，與核染色無關(guān)。4.D錯誤：封片膠過量僅影響鏡檢清晰度，不影響染色本身。3.免疫組化染色中，"抗原修復(fù)"的主要目的是A.增強組織透光性B.中和內(nèi)源性過氧化物酶C.暴露被甲醛交聯(lián)遮蔽的抗原表位D.降低背景非特異性染色【選項】A.增強組織透光性B.中和內(nèi)源性過氧化物酶C.暴露被甲醛交聯(lián)遮蔽的抗原表位D.降低背景非特異性染色【參考答案】C【解析】1.C正確：甲醛固定導(dǎo)致蛋白交聯(lián)，熱誘導(dǎo)抗原修復(fù)（HIER）可解離交聯(lián)恢復(fù)抗原性。2.A錯誤：透光性改善需透明步驟完成。3.B錯誤：內(nèi)源性酶阻斷需用過氧化氫甲醇液處理。4.D錯誤：降低背景主要靠血清封閉和非特異性結(jié)合阻斷劑。4.特殊染色中，PAS反應(yīng)（過碘酸雪夫染色）主要用于顯示A.神經(jīng)髓鞘B.真菌及基膜糖原C.彈力纖維D.網(wǎng)狀纖維【選項】A.神經(jīng)髓鞘B.真菌及基膜糖原C.彈力纖維D.網(wǎng)狀纖維【參考答案】B【解析】1.B正確：PAS通過顯示多糖的1,2-乙二醇基團，特異染真菌壁、糖原及基膜粘多糖。2.A錯誤：神經(jīng)髓鞘用盧戈耳碘液或固藍(lán)染色。3.C錯誤：彈力纖維需維多利亞藍(lán)或地衣紅染色。4.D錯誤：網(wǎng)狀纖維常用Gomori銀染法。5.顯微鏡物鏡上標(biāo)識"40/0.65160/0.17"中，0.65的含義是A.物鏡放大倍數(shù)B.數(shù)值孔徑（NA值）C.鏡筒長度D.蓋玻片厚度要求【選項】A.物鏡放大倍數(shù)B.數(shù)值孔徑（NA值）C.鏡筒長度D.蓋玻片厚度要求【參考答案】B【解析】1.B正確：標(biāo)注格式為"放大倍數(shù)/數(shù)值孔徑鏡筒長度/蓋玻片厚度"，0.65代表NA值決定分辨率。2.A錯誤：40代表放大倍數(shù)。3.C錯誤：160表示鏡筒長度160mm。4.D錯誤：0.17指蓋玻片標(biāo)準(zhǔn)厚度0.17mm。6.制備冷凍切片時，為減少冰晶形成對組織的損傷，正確的操作是A.將新鮮組織直接放入-20℃冷凍B.使用OCT包埋劑急速冷凍C.冷凍前用生理鹽水充分沖洗組織D.在室溫下緩慢冷凍組織塊【選項】A.將新鮮組織直接放入-20℃冷凍B.使用OCT包埋劑急速冷凍C.冷凍前用生理鹽水充分沖洗組織D.在室溫下緩慢冷凍組織塊【參考答案】B【解析】1.B正確：OCT包埋劑配合液氮或冷阱急速冷凍可減少冰晶產(chǎn)生。2.A錯誤：直接冷凍因水分緩慢結(jié)晶會破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。3.C錯誤：生理鹽水殘留會增大冰晶體積。4.D錯誤：緩慢冷凍將加劇冰晶形成。7.腎穿刺活檢標(biāo)本電鏡觀察時，最佳的固定液選擇是A.10%中性福爾馬林B.4%多聚甲醛-戊二醛混合固定液C.Bouin固定液D.95%乙醇【選項】A.10%中性福爾馬林B.4%多聚甲醛-戊二醛混合固定液C.Bouin固定液D.95%乙醇【參考答案】B【解析】1.B正確：戊二醛可交聯(lián)蛋白保存超微結(jié)構(gòu)，多聚甲醛輔助滲透，是電鏡標(biāo)準(zhǔn)固定劑。2.A錯誤：福爾馬林易致細(xì)胞器收縮失真。3.C錯誤：含苦味酸的Bouin液會使組織硬化不適于超薄切片。4.D錯誤：乙醇導(dǎo)致蛋白質(zhì)沉淀，破壞膜結(jié)構(gòu)。8.用于顯示黑色素的最佳特殊染色方法是A.剛果紅法B.Masson-Fontana銀染法C.普魯士藍(lán)反應(yīng)D.阿爾新藍(lán)染色【選項】A.剛果紅法B.Masson-Fontana銀染法C.普魯士藍(lán)反應(yīng)D.阿爾新藍(lán)染色【參考答案】B【解析】1.B正確：Fontana法通過銀氨溶液還原使黑色素顯黑色。2.A錯誤：剛果紅染淀粉樣物質(zhì)呈橘紅色。3.C錯誤：普魯士藍(lán)反應(yīng)用于顯示含鐵血黃素。4.D錯誤：阿爾新藍(lán)染酸性粘多糖呈藍(lán)色。9.在HE染色封片過程中，若發(fā)現(xiàn)切片上出現(xiàn)白色結(jié)晶沉淀，最常見的原因是A.脫水不徹底B.透明劑二甲苯不純C.中性樹膠濃度過高D.使用乙醇作為封片介質(zhì)【選項】A.脫水不徹底B.透明劑二甲苯不純C.中性樹膠濃度過高D.使用乙醇作為封片介質(zhì)【參考答案】A【解析】1.A正確：脫水不全導(dǎo)致水分殘留，透明、浸蠟不完全，樹膠封片時水分蒸發(fā)析出結(jié)晶。2.B錯誤：劣質(zhì)二甲苯會導(dǎo)致組織渾濁但無結(jié)晶。3.C錯誤：樹膠濃度過高僅致封片不均勻。4.D錯誤：乙醇不能作為封片介質(zhì)會致組織變形。10.關(guān)于巴氏染色的臨床應(yīng)用，下列描述錯誤的是A.可用于宮頸脫落細(xì)胞學(xué)診斷B.可區(qū)分鱗狀上皮角化與非角化細(xì)胞C.細(xì)胞核染色以蘇木精為主D.染色后需用酸性乙醇分化【選項】A.可用于宮頸脫落細(xì)胞學(xué)診斷B.可區(qū)分鱗狀上皮角化與非角化細(xì)胞C.細(xì)胞核染色以蘇木精為主D.染色后需用酸性乙醇分化【參考答案】D【解析】1.D錯誤：巴氏染色使用EA/OG復(fù)合染液染胞質(zhì)，分化步驟在橙黃G染色階段進行。2.A正確：是宮頸癌篩查金標(biāo)準(zhǔn)染色法。3.B正確：通過顏色梯度區(qū)分角化（粉紅）與非角化（綠色）細(xì)胞。4.C正確：核染色采用改良蘇木精如Harris蘇木精。11.關(guān)于組織固定原則的描述，下列哪項是錯誤的？【選項】A.固定液應(yīng)有足夠的滲透性和容量B.固定時間與組織塊大小成正比C.中性緩沖福爾馬林可最大程度保存抗原性D.常溫固定比低溫固定效果更好【參考答案】D【解析】1.組織固定需保證固定液滲透性（A正確）和時間與組織體積匹配（B正確）。2.中性緩沖福爾馬林因pH穩(wěn)定，利于抗原保存（C正確）。3.低溫（如4℃）固定可減少組織自溶，某些特殊染色需低溫處理（D錯誤）。固定效果與溫度需求取決于具體實驗?zāi)康?，無絕對優(yōu)劣。12.PAS染色常用于檢測病理組織中的何種物質(zhì)？【選項】A.膠原纖維B.中性黏液和基膜C.黑色素顆粒D.含鐵血黃素【參考答案】B【解析】1.PAS染色原理為高碘酸氧化糖類形成醛基，與無色品紅結(jié)合顯紅色。2.主要識別中性黏液、糖原、基膜及真菌壁（B正確）。3.膠原纖維用Masson染色（A錯），黑色素需Fontana法（C錯），含鐵血黃素用普魯士藍(lán)（D錯）。13.免疫組化染色中“假陰性”結(jié)果的常見原因不包括：【選項】A.抗原表位被福爾馬林過度交聯(lián)B.一抗?jié)舛冗^高C.組織自發(fā)熒光干擾D.抗原修復(fù)不充分【參考答案】B【解析】1.一抗?jié)舛冗^高可能導(dǎo)致非特異性結(jié)合（假陽性），而非假陰性（B為正確答案）。2.抗原交聯(lián)（A）、修復(fù)不足（D）會阻礙抗體結(jié)合，引起假陰性。3.自發(fā)熒光易誤判為陽性信號（假陽性），但某些情況下也可掩蓋真實信號導(dǎo)致假陰性（C有爭議，但非最佳選項）。14.下列哪種細(xì)胞學(xué)標(biāo)本制備方法適合胸腔積液檢測？【選項】A.印片法B.液基薄層技術(shù)C.刮片法D.冰凍切片法【參考答案】B【解析】1.液基薄層技術(shù)（如TCT）可去除黏液、血液干擾，提高漿膜腔積液細(xì)胞檢出率（B正確）。2.印片法用于實體組織（A錯），刮片法用于黏膜表面（C錯），冰凍切片用于術(shù)中快速診斷（D錯）。15.Bouin固定液的成分中不包含：【選項】A.苦味酸B.甲醛C.冰醋酸D.升汞【參考答案】D【解析】1.Bouin液經(jīng)典配方為苦味酸+甲醛+冰醋酸（A/B/C均包含），用于保存細(xì)胞核細(xì)節(jié)。2.升汞是Zenker固定液成分（D錯誤）。16.腎穿刺活檢標(biāo)本進行電鏡觀察時，首選固定液是：【選項】A.10%中性福爾馬林B.2.5%戊二醛C.4%多聚甲醛D.95%乙醇【參考答案】B【解析】1.戊二醛能更好保存細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)（B正確）。2.福爾馬林（A/C）適用于光鏡，乙醇（D）常用于細(xì)胞學(xué)固定。17.下列特殊染色組合與用途匹配錯誤的是：【選項】A.剛果紅——淀粉樣物質(zhì)B.維多利亞藍(lán)——彈力纖維C.蘇丹III——脂肪D.六胺銀——網(wǎng)狀纖維【參考答案】D【解析】1.六胺銀染色用于真菌和基膜（D錯誤），網(wǎng)狀纖維常用Gomori銀染。2.其他選項均正確：剛果紅顯淀粉樣物橙紅（A對），維多利亞藍(lán)染彈力纖維藍(lán)綠（B對），蘇丹III染脂肪紅色（C對）。18.PCR實驗室防污染措施中，最關(guān)鍵的是：【選項】A.穿戴一次性手套B.分區(qū)域操作C.使用UNG酶D.定期紫外線消毒【參考答案】B【解析】1.分區(qū)操作（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)）是防止氣溶膠污染的核心（B正確）。2.其他選項為輔助措施：手套防交叉（A），UNG酶降解殘留DNA（C），紫外線破壞核酸（D）。19.診斷甲狀腺乳頭狀癌最具特異性的細(xì)胞學(xué)特征是：【選項】A.核溝B.核內(nèi)假包涵體C.毛玻璃樣核D.砂粒體【參考答案】C【解析】1.毛玻璃樣核（核淡染、染色質(zhì)邊集）是乳頭狀癌最特異性標(biāo)志（C正確）。2.核溝（A）和核內(nèi)假包涵體（B）也常見，但特異性較低；砂粒體（D）多見于漿液性卵巢癌。20.原位雜交技術(shù)檢測EBER時，探針標(biāo)記物通常為：【選項】A.地高辛B.生物素C.FITCD.辣根過氧化物酶【參考答案】A【解析】1.EBER檢測使用地高辛標(biāo)記探針（A正確），通過抗地高辛抗體顯色。2.生物素（B）易受內(nèi)源性生物素干擾，F(xiàn)ITC（C）用于熒光標(biāo)記，HRP（D）是顯色酶。21.在病理組織處理過程中，下列關(guān)于固定液選擇的描述，最準(zhǔn)確的是？【選項】A.常規(guī)組織固定首選95%乙醇溶液B.中性緩沖福爾馬林因pH穩(wěn)定，可減少抗原損失，廣泛用于免疫組化標(biāo)本C.Bouin液適用于需保留糖原含量的組織固定D.Zenker液對細(xì)胞核染色效果差，常用于肌肉組織固定【參考答案】B【解析】1.A錯誤：95%乙醇主要用于細(xì)胞涂片快速固定，常規(guī)組織固定首選為10%中性緩沖福爾馬林。2.B正確：中性緩沖福爾馬林能維持pH在7.0左右，減少組織酸化和抗原破壞，是免疫組化的標(biāo)準(zhǔn)固定液。3.C錯誤：Bouin液含苦味酸，易溶解糖原，而糖原保存應(yīng)使用乙醇類固定液（如Carnoy液）。4.D錯誤：Zenker液含汞鹽，可增強細(xì)胞核著色，常用于造血組織固定，但對肌肉組織無特殊優(yōu)勢。22.免疫組化染色中出現(xiàn)假陰性結(jié)果，最可能的原因是下列哪項操作失誤？【選項】A.一抗孵育時間過長B.抗原熱修復(fù)時使用pH9.0的EDTA緩沖液C.未進行內(nèi)源性過氧化物酶阻斷D.二抗?jié)舛冗^高【參考答案】B【解析】1.A錯誤：一抗孵育時間過長可能導(dǎo)致非特異性著色，與假陰性無關(guān)。2.B正確：抗原修復(fù)緩沖液pH值需與目標(biāo)抗原特性匹配，堿性條件（如pH9.0）可能破壞某些抗原表位，導(dǎo)致假陰性。3.C錯誤：未阻斷內(nèi)源性過氧化物酶會引起背景著色，但不會掩蓋陽性信號。4.D錯誤：二抗?jié)舛冗^高易造成背景染色，而非假陰性。23.下列哪種特殊染色技術(shù)最適用于結(jié)核桿菌的檢測？【選項】A.PAS染色B.抗酸染色（Ziehl-Neelsen法）C.革蘭氏染色D.剛果紅染色【參考答案】B【解析】1.A錯誤：PAS染色用于顯示糖原、真菌等，不適用于抗酸桿菌。2.B正確：抗酸染色中結(jié)核桿菌因含分枝菌酸可抵抗酸性脫色，呈現(xiàn)紅色。3.C錯誤：革蘭氏染色用于細(xì)菌分類（G+/G-），結(jié)核桿菌為弱革蘭氏陽性且需特殊染色確認(rèn)。4.D錯誤：剛果紅染色用于淀粉樣物質(zhì)檢測。24.組織脫水不徹底對石蠟包埋的影響主要表現(xiàn)為？【選項】A.切片時組織塊易碎裂B.染色后細(xì)胞核不著色C.石蠟無法滲透組織，導(dǎo)致切片皺縮D.切片染色后出現(xiàn)白色云霧狀沉淀【參考答案】C【解析】1.A錯誤：組織碎裂主要與脫水過度或透明劑殘留相關(guān)。2.B錯誤：細(xì)胞核著色異常多由固定不當(dāng)或染色步驟錯誤引起。3.C正確：脫水不徹底使組織含水，阻礙石蠟滲透，導(dǎo)致包埋后切片難以完整展開。4.D錯誤：白色沉淀通常與封片劑混濁或染色后沖洗不徹底有關(guān)。25.HE染色中，蘇木精的主要作用是？【選項】A.與細(xì)胞質(zhì)蛋白結(jié)合呈粉紅色B.與細(xì)胞核內(nèi)DNA結(jié)合顯藍(lán)色C.分化時去除胞質(zhì)多余染料D.增強膠原纖維的著色強度【參考答案】B【解析】1.A錯誤：伊紅負(fù)責(zé)染細(xì)胞質(zhì)呈粉紅色。2.B正確：蘇木精為堿性染料，與DNA磷酸基團結(jié)合，核染色質(zhì)呈藍(lán)色。3.C錯誤：分化步驟使用酸性酒精，目的是選擇性脫去核外蘇木精。4.D錯誤：膠原纖維著色由伊紅完成，與蘇木精無關(guān)。26.冷凍切片技術(shù)中，為獲得最佳切片質(zhì)量，組織冷凍溫度通常設(shè)置為？【選項】A.-4℃至-10℃B.-15℃至-20℃C.-25℃至-30℃D.-40℃以下【參考答案】B【解析】1.A錯誤：-4℃至-10℃溫度過高，組織硬度不足，難以成片。2.B正確：-15℃至-20℃可使多數(shù)組織適度硬化，減少冰晶形成并保證切片完整性。3.C錯誤：-25℃以下組織過脆，易產(chǎn)生裂隙。4.D錯誤：超低溫（如-40℃）僅用于特殊組織保存，切片時需回溫。27.用于長期保存病理切片的封片劑首選？【選項】A.甘油明膠B.中性樹脂C.DPX封固劑D.水性封片劑【參考答案】B【解析】1.A錯誤：甘油明膠適用于短期封片，易干涸變質(zhì)。2.B正確：中性樹脂折射率與玻璃相近，不易褪色且能長期防潮。3.C錯誤：DPX含二甲苯，長期使用易使切片發(fā)黃。4.D錯誤：水性封片劑保存時間短，僅用于特殊染色。28.免疫熒光雙標(biāo)實驗中，若兩種一抗均來源于兔，可能導(dǎo)致？【選項】A.熒光信號強度不均B.兩種抗原定位重合C.交叉反應(yīng)造成假陽性D.背景自發(fā)熒光增強【參考答案】C【解析】1.A錯誤：信號強度不均與抗體效價或熒光素種類相關(guān)。2.B錯誤：定位重合反映抗原共定位，屬真實結(jié)果。3.C正確：同種屬一抗會與同一二抗結(jié)合，導(dǎo)致非特異性交叉反應(yīng)。4.D錯誤：自發(fā)熒光與組織內(nèi)源性物質(zhì)（如脂褐素）相關(guān)。29.乳腺組織活檢標(biāo)本的包埋方向錯誤可導(dǎo)致？【選項】A.切片厚度不均B.無法判斷導(dǎo)管原位癌的侵犯深度C.蘇木精染色偏紫D.免疫組化脫片率增高【參考答案】B【解析】1.A錯誤：切片厚度由切片機設(shè)定，與包埋方向無關(guān)。2.B正確：包埋方向錯誤（如未垂直管腔）會破壞組織層次結(jié)構(gòu)，影響腫瘤侵犯深度評估。3.C錯誤：染色異常由試劑pH或染色時間不當(dāng)引起。4.D錯誤：脫片主要與載玻片處理或抗原修復(fù)操作相關(guān)。30.下列哪種染色組合最適合顯示胃黏膜腸化生中的酸性黏液？【選項】A.AB-PAS染色（阿爾辛藍(lán)-過碘酸雪夫）B.黏液卡紅染色C.維多利亞藍(lán)染色D.六胺銀染色【參考答案】A【解析】1.A正確：AB染酸性黏液（藍(lán)色），PAS染中性黏液（紅色），腸化生以酸性黏液為主。2.B錯誤：黏液卡紅僅染上皮源性酸性黏液，無法區(qū)分亞型。3.C錯誤：維多利亞藍(lán)用于顯示彈性纖維或乙型肝炎表面抗原。4.D錯誤：六胺銀染色用于真菌、基底膜等成分。31.關(guān)于中性福爾馬林固定液的描述，以下哪項是正確的？【選項】A.由40%甲醛與蒸餾水按1:9比例配制B.pH值通常為4.5-5.5C.加入磷酸二氫鈉可緩沖pH至7.2-7.4D.適用于需保留脂類物質(zhì)的組織固定【參考答案】C【解析】1.中性福爾馬林固定液的配制需40%甲醛與蒸餾水按1:9比例混合后，加入磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉緩沖體系，將pH調(diào)節(jié)至7.2-7.4（C正確）；2.A錯誤：標(biāo)準(zhǔn)配制比例為10%甲醛（即4%甲醛原液），而非直接使用40%甲醛與蒸餾水混合；3.B錯誤：普通福爾馬林pH偏酸性（約3-4），中性福爾馬林因加入緩沖液而呈中性；4.D錯誤：福爾馬林會使脂類溶解，脂類保存需用冰凍切片或特殊固定液如戊二醛。32.診斷淀粉樣變性最特異的染色方法是？【選項】A.PAS染色B.剛果紅染色C.蘇丹Ⅲ染色D.鍍銀染色【參考答案】B【解析】1.剛果紅染色后淀粉樣物質(zhì)呈磚紅色，偏振光下顯示蘋果綠色雙折光，具高度特異性（B正確）；2.A錯誤：PAS染色用于糖原及基底膜，淀粉樣物質(zhì)可弱陽性但不特異；3.C錯誤：蘇丹Ⅲ染色用于脂肪，與淀粉樣物質(zhì)無關(guān)；4.D錯誤：鍍銀染色用于神經(jīng)纖維或網(wǎng)狀纖維。33.免疫組化染色中出現(xiàn)非特異性著色的原因不包括？【選項】A.內(nèi)源性過氧化物酶未阻斷B.一抗?jié)舛冗^高C.組織未充分脫蠟D.使用多聚賴氨酸防脫片劑【參考答案】D【解析】1.D正確：多聚賴氨酸是增強玻片粘附性的常規(guī)試劑，不會導(dǎo)致非特異性著色；2.A錯誤：內(nèi)源性過氧化物酶（如紅細(xì)胞）需用H?O?阻斷，未阻斷會導(dǎo)致假陽性；3.B錯誤：一抗?jié)舛冗^高易引起非特異性結(jié)合；4.C錯誤：脫蠟不全會阻礙抗體滲透，導(dǎo)致背景染色加深。34.HE染色中"分化"步驟的目的是？【選項】A.增強細(xì)胞核著色B.去除胞漿過量蘇木素C.促進伊紅染色D.中和堿性試劑【參考答案】B【解析】1.分化指用鹽酸乙醇褪去細(xì)胞核外多余的蘇木素染料，使核漿對比清晰（B正確）；2.A錯誤：分化減弱核染色，需自來水返藍(lán)后恢復(fù)；3.C錯誤：分化在伊紅染色前完成，兩者無直接關(guān)聯(lián)；4.D錯誤：中和堿性試劑需用緩沖液，而非分化步驟功能。35.下列哪種染色用于顯示幽門螺桿菌？【選項】A.抗酸染色B.Giemsa染色C.阿爾辛藍(lán)染色D.六胺銀染色【參考答案】B【解析】1.Giemsa染色可使幽門螺桿菌染成淡紫色，是胃黏膜活檢常用方法（B正確）；2.A錯誤：抗酸染色用于結(jié)核桿菌；3.C錯誤：阿爾辛藍(lán)染色黏液物質(zhì)；4.D錯誤：六胺銀染色用于真菌或肺孢子菌。二、多選題（共35題）1.關(guān)于組織固定液的選擇和使用，下列說法正確的有：A.10%中性緩沖甲醛適用于大多數(shù)常規(guī)病理標(biāo)本的固定B.乙醇固定能較好地保存組織中的糖原C.Bouin液對胚胎組織的固定效果優(yōu)于甲醛D.丙酮固定對酶活性的保存效果優(yōu)于甲醛【選項】A.10%中性緩沖甲醛適用于大多數(shù)常規(guī)病理標(biāo)本的固定B.乙醇固定能較好地保存組織中的糖原C.Bouin液對胚胎組織的固定效果優(yōu)于甲醛D.丙酮固定對酶活性的保存效果優(yōu)于甲醛【參考答案】ABCD【解析】1.A正確：10%中性緩沖甲醛是常規(guī)病理標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)固定液，可減少甲醛色素沉淀。2.B正確：乙醇能沉淀糖原并抑制水解酶活性，常用于糖原染色標(biāo)本的固定。3.C正確：Bouin液含苦味酸和乙酸，能快速滲透軟組織，尤其適合胚胎和內(nèi)分泌組織固定。4.D正確：丙酮能快速脫水固定且對酶活性破壞較小，常用于冷凍切片的酶組織化學(xué)染色。2.免疫組織化學(xué)染色中可能造成假陰性的原因包括：A.未進行抗原修復(fù)B.一抗?jié)舛冗^高C.內(nèi)源性過氧化物酶未阻斷D.染色過程中組織干燥【選項】A.未進行抗原修復(fù)B.一抗?jié)舛冗^高C.內(nèi)源性過氧化物酶未阻斷D.染色過程中組織干燥【參考答案】ACD【解析】1.A正確：甲醛固定會遮蔽抗原表位，未修復(fù)將導(dǎo)致抗原結(jié)合失敗。2.B錯誤：一抗?jié)舛冗^高易導(dǎo)致非特異性結(jié)合（假陽性），而非假陰性。3.C正確：未阻斷內(nèi)源性酶會與顯色底物反應(yīng)掩蓋真實信號。4.D正確：組織干燥會破壞抗原結(jié)構(gòu)并阻礙試劑滲透。3.下列染色方法中屬于特殊染色技術(shù)的有：A.PAS染色顯示糖原B.Masson三色染色顯示膠原纖維C.蘇木精-伊紅（HE）染色D.剛果紅染色顯示淀粉樣物質(zhì)【選項】A.PAS染色顯示糖原B.Masson三色染色顯示膠原纖維C.蘇木精-伊紅（HE）染色D.剛果紅染色顯示淀粉樣物質(zhì)【參考答案】ABD【解析】1.A正確：PAS屬特殊染色，通過高碘酸氧化糖原后與Schiff試劑結(jié)合顯色。2.B正確：Masson三色染色屬于結(jié)締組織多色染色法，可區(qū)分膠原與肌纖維。3.C錯誤：HE染色是常規(guī)染色技術(shù)。4.D正確：剛果紅染色是淀粉樣物質(zhì)的特異性診斷方法。4.影響冰凍切片質(zhì)量的關(guān)鍵因素包括：A.組織冷凍速度B.切片厚度C.室溫濕度D.冷凍前固定時間【選項】A.組織冷凍速度B.切片厚度C.室溫濕度D.冷凍前固定時間【參考答案】ABC【解析】1.A正確：快速冷凍可減少冰晶形成，防止組織空泡化。2.B正確：5-10μm厚度為佳，過厚易碎，過薄難以完整展片。3.C正確：高濕度會導(dǎo)致切片粘刀，低濕度易致組織脫水卷曲。4.D錯誤：冰凍切片通常采用新鮮未固定組織，固定會降低冷凍效率。5.關(guān)于常規(guī)石蠟切片的脫水透明步驟，下列操作錯誤的是：A.梯度乙醇脫水（70%→80%→95%→100%）B.二甲苯透明前需充分脫水C.透明時間越長組織脆性越小D.脫水劑溫度應(yīng)維持在60℃【選項】A.梯度乙醇脫水（70%→80%→95%→100%）B.二甲苯透明前需充分脫水C.透明時間越長組織脆性越小D.脫水劑溫度應(yīng)維持在60℃【參考答案】CD【解析】1.A正確：梯度乙醇防止組織急劇收縮。2.B正確：殘留水分會導(dǎo)致透明劑渾濁，影響浸蠟。3.C錯誤：過度透明會溶解脂類且增加組織脆性。4.D錯誤：高溫會加速乙醇揮發(fā)并硬化組織，常規(guī)室溫操作即可。6.適用于核酸原位雜交的組織處理要求包括：A.4%多聚甲醛固定B.DEPC水處理試劑和容器C.常規(guī)石蠟包埋D.蛋白酶K消化【選項】A.4%多聚甲醛固定B.DEPC水處理試劑和容器C.常規(guī)石蠟包埋D.蛋白酶K消化【參考答案】ABD【解析】1.A正確：多聚甲醛能更好地保持核酸結(jié)構(gòu)，優(yōu)于普通甲醛。2.B正確：DEPC可滅活RNA酶，防止RNA降解。3.C錯誤：冷凍切片更利于核酸保存，石蠟包埋可能造成部分降解。4.D正確：蛋白酶K消化可暴露靶核酸并增加探針滲透性。7.免疫熒光技術(shù)中容易導(dǎo)致熒光淬滅的操作是：A.蓋玻片使用甘油封片B.觀察前用DAPI復(fù)染C.熒光標(biāo)本長期室溫保存D.使用吖啶橙作為復(fù)染劑【選項】A.蓋玻片使用甘油封片B.觀察前用DAPI復(fù)染C.熒光標(biāo)本長期室溫保存D.使用吖啶橙作為復(fù)染劑【參考答案】CD【解析】1.A錯誤：甘油可延緩淬滅，是常用封片介質(zhì)。2.B錯誤：DAPI與熒光染料激發(fā)波長不同，不影響信號。3.C正確：光照和氧化會加速熒光染料分解，應(yīng)-20℃避光保存。4.D正確：吖啶橙的激發(fā)光譜廣，易與其他染料發(fā)生交叉淬滅。8.HE染色中細(xì)胞核著色過深的可能原因包括：A.蘇木精染色時間過長B.分化液濃度過低C.伊紅染液pH偏酸性D.自來水返藍(lán)時間不足【選項】A.蘇木精染色時間過長B.分化液濃度過低C.伊紅染液pH偏酸性D.自來水返藍(lán)時間不足【參考答案】ABD【解析】1.A正確：過度染色使核內(nèi)DNA與蘇木精過度結(jié)合。2.B正確：分化不足無法去除非特異性結(jié)合染料。3.C錯誤：伊紅pH影響胞漿染色，與核染色無關(guān)。4.D正確：返藍(lán)不充分會維持蘇木精的紅色狀態(tài)而非藍(lán)色。9.關(guān)于微波抗原修復(fù)技術(shù)，下列說法正確的有：A.適用于甲醛固定的石蠟切片B.修復(fù)液pH值影響修復(fù)效果C.可替代蛋白酶消化步驟D.修復(fù)溫度應(yīng)控制在100℃以上【選項】A.適用于甲醛固定的石蠟切片B.修復(fù)液pH值影響修復(fù)效果C.可替代蛋白酶消化步驟D.修復(fù)溫度應(yīng)控制在100℃以上【參考答案】AB【解析】1.A正確：微波通過加熱打開甲醛交聯(lián)的抗原表位。2.B正確：堿性修復(fù)液（pH9.0）對多數(shù)抗原效果優(yōu)于中性液。3.C錯誤：某些膜抗原仍需蛋白酶輔助暴露。4.D錯誤：97-98℃微沸狀態(tài)即可，沸騰過度易致組織脫落。10.病理診斷中需聯(lián)合銀染技術(shù)的疾病包括：A.真菌感染B.結(jié)核分枝桿菌感染C.神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤D.胃幽門螺桿菌感染【選項】A.真菌感染B.結(jié)核分枝桿菌感染C.神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤D.胃幽門螺桿菌感染【參考答案】ACD【解析】1.A正確：Grocott六胺銀染色是真菌鑒別的金標(biāo)準(zhǔn)。2.B錯誤：結(jié)核菌常用抗酸染色而非銀染。3.C正確：Grimelius銀染可標(biāo)記神經(jīng)內(nèi)分泌顆粒。4.D正確：Warthin-Starry銀染可清晰顯示幽門螺桿菌。11.關(guān)于常用特殊染色技術(shù)的應(yīng)用，下列描述正確的是：【選項】A.PAS染色可用于顯示基膜樣物質(zhì)和黏液物質(zhì)B.剛果紅染色主要用于顯示神經(jīng)纖維C.蘇丹III染色是顯示中性脂肪的特異性染色方法D.普魯士藍(lán)染色用于檢測含鐵血黃素沉積E.甲苯胺藍(lán)染色可特異性顯示肥大細(xì)胞顆?！緟⒖即鸢浮緼、C、D、E【解析】1.PAS染色可顯示糖原、黏液物質(zhì)和基膜樣物質(zhì)（如腎小球基膜），故A正確；2.剛果紅染色用于淀粉樣物質(zhì)而非神經(jīng)纖維（常用銀染），B錯誤；3.蘇丹III與中性脂肪特異性結(jié)合呈橙紅色，C正確；4.普魯士藍(lán)反應(yīng)使含鐵血黃素顯藍(lán)色，D正確；5.甲苯胺藍(lán)可使肥大細(xì)胞異染顆粒呈紫紅色，E正確。12.下列哪些因素會導(dǎo)致HE染色切片出現(xiàn)細(xì)胞核著色淺淡？【選項】A.蘇木精染液氧化不足B.分化液濃度過低C.組織固定時間超過48小時D.伊紅染色時間過長E.切片脫蠟不徹底【參考答案】A、B、E【解析】1.蘇木精需氧化為蘇木紅才能染色，氧化不足直接導(dǎo)致核著色淺（A正確）；2.分化液濃度不足會過度脫色（B正確）；3.固定過久主要影響抗原性而非核染色（C錯誤）；4.伊紅影響胞漿染色，與核著色無關(guān)（D錯誤）；5.脫蠟不徹底阻礙染液滲透（E正確）。13.免疫組化實驗中可能出現(xiàn)假陰性的原因包括：【選項】A.抗原修復(fù)不充分B.一抗體濃度過高C.DAB顯色時間不足D.內(nèi)源性過氧化物酶未阻斷E.組織自溶嚴(yán)重【參考答案】A、C、E【解析】1.抗原修復(fù)不足使靶抗原無法暴露（A正確）；2.抗體濃度過高導(dǎo)致非特異性結(jié)合，與假陰性無關(guān)（B錯誤）；3.DAB顯色時間短則信號未充分顯現(xiàn)（C正確）；4.內(nèi)源性酶未阻斷易產(chǎn)生假陽性（D錯誤）；5.組織自溶破壞抗原結(jié)構(gòu)（E正確）。14.關(guān)于冷凍切片技術(shù)，正確的操作要點是：【選項】A.組織塊需經(jīng)甲醛預(yù)固定B.切片厚度應(yīng)控制在4-6μmC.速凍時使用OCT包埋劑防冰晶D.切取組織后需立即冷凍以防自溶E.-20℃為最適切片溫度【參考答案】B、C、D【解析】1.甲醛固定會改變組織性質(zhì)，冷凍切片應(yīng)直接速凍（A錯誤）；2.4-6μm厚度可保證結(jié)構(gòu)完整（B正確）；3.OCT包埋劑減少冰晶偽影（C正確）；4.立即冷凍防止酶降解（D正確）；5.常規(guī)冷凍切片溫度為-18℃至-22℃，非固定值（E錯誤）。15.下列染色組合可用于鑒別霍奇金淋巴瘤中的R-S細(xì)胞的是：【選項】A.CD15+/CD30+B.CD20+/PAX5+C.CD3+/CD5+D.CD45+/CD79a+E.LCA+/CD68+【參考答案】A、B【解析】1.R-S細(xì)胞典型標(biāo)志為CD15和CD30共表達(dá)（A正確）；2.部分亞型表達(dá)B細(xì)胞標(biāo)志PAX5及弱CD20（B正確）；3.CD3/CD5為T細(xì)胞標(biāo)志（C錯誤）；4.CD45/CD79a為普通B細(xì)胞標(biāo)志（D錯誤）；5.CD68為組織細(xì)胞標(biāo)志（E錯誤）。16.影響組織脫水效果的關(guān)鍵因素包括：【選項】A.脫水劑濃度梯度設(shè)置B.組織厚度超過5mmC.脫水時間不足D.脫水溫度控制在45℃E.使用丙酮替代乙醇【參考答案】A、B、C【解析】1.梯度酒精脫水是標(biāo)準(zhǔn)流程（A正確）；2.組織過厚導(dǎo)致脫水不全（B正確）；3.時間不足使水分殘留（C正確）；4.脫水溫度一般不超過40℃（D錯誤）；5.丙酮易使組織硬化，不常規(guī)使用（E錯誤）。17.關(guān)于Masson三色染色法的結(jié)果判定正確的是：【選項】A.膠原纖維呈藍(lán)色B.肌纖維呈紅色C.紅細(xì)胞呈橙紅色D.細(xì)胞核呈黑褐色E.黏液呈淡紫色【參考答案】A、B、C【解析】1.膠原纖維被苯胺藍(lán)染成藍(lán)色（A正確）；2.肌纖維被酸性品紅染紅（B正確）；3.紅細(xì)胞被麗春紅染橙紅（C正確）；4.核應(yīng)呈棕黑色而非黑褐色（D錯誤）；5.黏液呈淡藍(lán)色（E錯誤）。18.下列情況需使用酸性脫鈣液的是：【選項】A.骨髓活檢組織B.嬰幼兒骨組織C.需保留骨基質(zhì)蛋白D.緊急術(shù)中快速診斷E.牙釉質(zhì)脫鈣【參考答案】A、D【解析】1.骨髓組織鈣化少，宜用甲酸快速脫鈣（A正確）；2.嬰幼兒骨推薦EDTA溫和脫鈣（B錯誤）；3.酸性液會破壞骨蛋白（C錯誤）；4.硝酸可快速脫鈣滿足急癥（D正確）；5.牙釉質(zhì)需用特殊脫鈣液（E錯誤）。19.原位雜交技術(shù)質(zhì)量控制的關(guān)鍵指標(biāo)包括：【選項】A.陽性對照組織顯示明確信號B.探針濃度為1μg/mLC.陰性對照無特異性染色D.細(xì)胞核復(fù)染清晰E.內(nèi)源性mRNA完全降解【參考答案】A、C、D【解析】1.陽性對照驗證實驗系統(tǒng)有效性（A正確）；2.探針濃度需預(yù)實驗確定（B錯誤）；3.陰性對照排除非特異結(jié)合（C正確）；4.核復(fù)染助于定位（D正確）；5.需保留目標(biāo)mRNA（E錯誤）。20.有關(guān)電鏡標(biāo)本制備，正確的描述是：【選項】A.戊二醛-鋨酸雙固定為金標(biāo)準(zhǔn)B.脫水后需環(huán)氧樹脂浸透C.超薄切片厚度50-100nmD.醋酸鈾染色增強膜結(jié)構(gòu)對比E.組織塊需小于1mm3【參考答案】A、B、C、D、E【解析】1.戊二醛固定蛋白+鋨酸固定脂質(zhì)（A正確）；2.樹脂浸透實現(xiàn)包埋（B正確）；3.超薄切片標(biāo)準(zhǔn)厚度為50-100nm（C正確）；4.醋酸鈾染色突出細(xì)胞膜（D正確）；5.小組織塊保證滲透效率（E正確）。21.下列有關(guān)組織固定液的描述中，正確的是：【選項】A.10%中性福爾馬林需用磷酸鹽緩沖液配制B.Bouin固定液適用于胚胎組織且需避光保存C.Zenker固定液含氯化汞，固定后組織需流水沖洗24小時D.4%多聚甲醛滲透力強，但對抗原保存效果優(yōu)于福爾馬林E.Carnoy固定液含冰醋酸，不適用于富含脂肪的組織【參考答案】ABDE【解析】A正確：中性福爾馬林需用pH7.2-7.4磷酸鹽緩沖液配制以避免酸性損傷。B正確：Bouin液含苦味酸，需避光保存且對胚胎組織穿透力強。C錯誤：Zenker固定后需用碘酒處理汞沉淀，流水沖洗僅需6-12小時。D正確：多聚甲醛交聯(lián)程度低，更利于抗原表位保留。E正確：Carnoy液中冰醋酸會溶解脂肪細(xì)胞，導(dǎo)致脂肪組織結(jié)構(gòu)破壞。22.PAS染色技術(shù)中，下列敘述符合操作規(guī)范的是：【選項】A.過碘酸作為氧化劑需新鮮配制B.雪夫試劑與組織中的醛基發(fā)生反應(yīng)顯紅色C.淀粉酶消化可區(qū)分中性粘多糖與糖原D.染色后需用Harris蘇木素復(fù)染細(xì)胞核E.染色結(jié)果中基底膜呈紫紅色陽性反應(yīng)【參考答案】ABCDE【解析】全選。A項：過碘酸易分解，需臨用配制；B項：雪夫試劑與醛基結(jié)合生成紅色化合物；C項：淀粉酶消化后糖原消失而粘多糖保留；D項：蘇木素復(fù)染核是標(biāo)準(zhǔn)流程；E項：基底膜含糖蛋白，PAS反應(yīng)呈紫紅色（如腎小球基底膜）。23.免疫組化染色假陽性的常見原因包括：【選項】A.內(nèi)源性過氧化物酶未阻斷B.抗原修復(fù)時間不足C.一抗?jié)舛冗^高D.組織自發(fā)性熒光E.血清封閉不充分【參考答案】ACE【解析】A正確：紅細(xì)胞、粒細(xì)胞等含內(nèi)源性酶可催化顯色。C正確：高濃度一抗導(dǎo)致非特異性結(jié)合。E正確：未封閉蛋白結(jié)合位點引起非特異吸附。B錯誤：抗原修復(fù)不足導(dǎo)致假陰性。D錯誤：自發(fā)性熒光影響熒光法而非顯色法。24.適用于神經(jīng)組織特殊染色的方法是：【選項】A.Luxolfastblue染色（髓鞘）B.Bielschowsky鍍銀染色（神經(jīng)纖維）C.Masson三色染色（膠原纖維）D.Congored染色（淀粉樣物）E.Nissl染色（神經(jīng)元尼氏體）【參考答案】ABE【解析】ABE均針對神經(jīng)結(jié)構(gòu)：Luxol染髓鞘藍(lán)色，Bielschowsky顯示軸突及神經(jīng)原纖維，Nissl染粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。C用于結(jié)締組織，D針對淀粉樣變性，故排除。25.影響石蠟切片質(zhì)量的關(guān)鍵環(huán)節(jié)包括：【選項】A.脫水時酒精梯度濃度差＞20%B.透明劑二甲苯體積需為組織塊5倍以上C.浸蠟溫度恒定62℃±1℃D.切片厚度設(shè)置為4μmE.攤片水溫控制在42-45℃【參考答案】ACDE【解析】B錯誤：透明劑需完全浸沒組織即可，無固定體積比要求。A正確：濃度梯度突變易致組織收縮；C正確：高溫蠟破壞抗原，低溫切片易碎；D正確：診斷用切片常規(guī)厚度；E正確：水溫過低切片皺褶，過高蠟帶融化。26.關(guān)于冷凍切片的描述，正確的是：【選項】A.OCT包埋劑可減少冰晶形成B.組織速凍時異戊烷液氮法優(yōu)于直接液氮浸泡C.-20℃切片適用于脂肪豐富組織D.未固定組織需用丙酮后固定E.染色時需延長蘇木素染色時間【參考答案】ABD【解析】A正確：OCT為水溶性包埋劑，減少冰晶偽影。B正確：直接液氮沸騰導(dǎo)致組織裂損。C錯誤：脂肪組織需-30℃以下切片。D正確：丙酮固定保存細(xì)胞形態(tài)。E錯誤：冷凍切片細(xì)胞核更易著色，蘇木素時間需縮短。27.下列染色組合與對應(yīng)結(jié)構(gòu)匹配正確的是：【選項】A.維多利亞藍(lán)+彈性纖維B.苯胺藍(lán)+網(wǎng)狀纖維C.蘇丹Ⅲ+中性脂肪D.鋨酸+髓磷脂E.Alcianblue+酸性粘多糖【參考答案】ACDE【解析】B錯誤：網(wǎng)狀纖維用銀染（如Gomori），苯胺藍(lán)用于Masson染色膠原纖維。A正確：維多利亞藍(lán)特異性染彈性纖維；C正確：蘇丹Ⅲ溶于脂質(zhì)顯橙紅色；D正確：鋨酸使髓磷脂顯黑色；E正確：Alcianblue在pH2.5染硫酸化粘多糖。28.透射電鏡樣本制備注意事項包括：【選項】A.戊二醛與鋨酸雙重固定B.脫水至100%丙酮后環(huán)氧樹脂滲透C.超薄切片厚度50-100nmD.醋酸鈾染色增強核酸對比度E.鉛染色需隔絕二氧化碳【參考答案】ACDE【解析】B錯誤：脫水劑應(yīng)為乙醇或丙酮，但環(huán)氧樹脂滲透前需用丙酮置換。其他均正確：A為電鏡標(biāo)準(zhǔn)固定流程；C為超薄切片常規(guī)厚度；D中醋酸鈾染核酸/膜結(jié)構(gòu)；E中鉛染遇CO?生成碳酸鉛沉淀需隔絕空氣。29.HE染色中分化步驟的作用是：【選項】A.去除細(xì)胞質(zhì)多余蘇木素B.調(diào)節(jié)細(xì)胞核著色深淺C.提高染色特異性D.增強伊紅對比度E.消除組織自發(fā)熒光【參考答案】ABC【解析】分化液（如1%鹽酸酒精）主要作用：A去除胞質(zhì)非特異性蘇木素著色；B控制核染色強度；C使核質(zhì)對比清晰。D錯誤：伊紅對比度由染色時間控制；E與熒光染色相關(guān)，HE染色不涉及。30.顯微攝影技術(shù)要求中，正確的操作是：【選項】A.柯勒照明調(diào)整光源居中B.使用綠色濾光片提高分辨率C.物鏡數(shù)值孔徑?jīng)Q定最大放大倍數(shù)D.曝光時間隨物鏡倍數(shù)增加而延長E.白平衡需用空白載玻片校準(zhǔn)【參考答案】ABD【解析】C錯誤：總放大倍數(shù)=物鏡×目鏡，與數(shù)值孔徑無關(guān)。數(shù)值孔徑?jīng)Q定分辨率（R=0.61λ/NA）。E錯誤：白平衡需用染色玻片（如HE）。A正確：柯勒照明保證光線均勻；B正確：綠光波長適中減少色差；D正確：高倍鏡通光量減少需延長曝光。31.關(guān)于組織固定的目的，下列哪些描述是正確的？A.防止組織自溶和腐敗B.使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)凝固，保持細(xì)胞形態(tài)C.增強組織對染料的親和力D.完全滅活所有酶活性E.增加組織硬度以便切片【選項】A.僅A、B、E正確B.僅A、B、C、E正確C.僅A、C、D正確D.僅A、D、E正確【參考答案】B【解析】1.組織固定的主要目的包括防止組織自溶和腐敗（A正確），通過凝固蛋白質(zhì)保持細(xì)胞形態(tài)（B正確）。2.部分固定劑（如甲醛）可增強組織對染料的親和力（C正確），但并非所有固定劑均有此作用。3.固定不能完全滅活所有酶活性，如部分酶需特殊固定方式（D錯誤）。4.固定確實可通過硬化組織提升切片質(zhì)量（E正確）。32.下列染色方法中，屬于特殊染色技術(shù)的是？A.HE染色B.PAS染色顯示糖原C.抗酸染色檢測結(jié)核桿菌D.革蘭氏染色區(qū)分細(xì)菌類別E.免疫組化檢測HER2蛋白【選項】A.僅A、B、C正確B.僅B、C、D正確C.僅A、D、E正確D.僅B、C、D、E正確【參考答案】B【解析】1.HE染色為常規(guī)染色（A錯誤），而PAS染色用于糖原、黏液等特殊成分（B正確）。2.抗酸染色（C正確）與革蘭氏染色（D正確）為針對病原微生物的特殊染色技術(shù)。3.免疫組化屬于分子病理技術(shù)，非傳統(tǒng)特殊染色（E錯誤）。33.中性福爾馬林緩沖液的特點包括：A.pH維持在7.2-7.4B.能保存細(xì)胞內(nèi)DNA完整性C.固定24小時后需及時更換液體D.組織收縮程度小于未緩沖福爾馬林E.適用于所有免疫組化標(biāo)記【選項】A.僅A、B、D正確B.僅A、C、E正確C.僅B、D、E正確D.僅A、D、E正確【參考答案】A【解析】1.中性福爾馬林緩沖液pH為7.2-7.4（A正確），減少酸性環(huán)境對DNA的破壞（B正確）。2.該固定液無需頻繁更換（C錯誤），且因緩沖作用減緩組織收縮（D正確）。3.部分抗原（如磷蛋白）仍可能被福爾馬林破壞，故不適用所有免疫組化（E錯誤）。34.HE染色中分化操作的目的是：A.去除細(xì)胞核過量蘇木素B.減少細(xì)胞質(zhì)伊紅著色C.增強細(xì)胞核與胞質(zhì)對比度D.促進染液滲透E.延長染色保存時間【選項】A.僅A、C正確B.僅B、D正確C.僅A、B、E正確D.僅C、D、E正確【參考答案】A【解析】1.分化指用酸性酒精洗脫細(xì)胞核多余蘇木素（A正確），使核染色適度清晰，提升核質(zhì)對比（C正確）。2.分化不直接影響伊紅著色（B錯誤）或染液滲透（D錯誤），亦無法延長保存時間（E錯誤）。35.下列哪種因素會直接導(dǎo)致免疫組化假陽性結(jié)果？A.抗原修復(fù)過度B.一抗?jié)舛冗^低C.DAB顯色時間不足D.內(nèi)源性過氧化物酶未阻斷E.組織固定時間過長【選項】A.僅A、D正確B.僅B、C正確C.僅A、C、E正確D.僅B、D、E正確【參考答案】A【解析】1.抗原修復(fù)過度可能暴露非特異結(jié)合位點（A正確），內(nèi)源性酶未阻斷會引發(fā)非特異顯色（D正確）。2.一抗?jié)舛冗^低（B錯誤）和DAB時間不足（C錯誤）導(dǎo)致假陰性，固定過長影響抗原性但不直接導(dǎo)致假陽性（E錯誤）。三、判斷題（共30題）1.福爾馬林緩沖液的最佳固定pH值為4.0左右，可使細(xì)胞核染色質(zhì)保持最佳形態(tài)?！具x項】正確（?）?錯誤（?）【參考答案】錯誤【解析】福爾馬林緩沖液的理想pH值范圍為6.8-7.2（中性環(huán)境）。pH值過低（如4.0）會導(dǎo)致細(xì)胞收縮和染色質(zhì)凝固不良，影響后續(xù)染色效果。臨床常用磷酸鹽緩沖福爾馬林（PBS-FA）維持中性環(huán)境以保證組織固定質(zhì)量。2.HE染色中，蘇木素染液常規(guī)染色時間為15-20分鐘，以保證細(xì)胞核充分著色。【選項】正確（?）?錯誤（?）【參考答案】錯誤【解析】蘇木素常規(guī)染色時間為5-10分鐘，過度染色會導(dǎo)致細(xì)胞核深染、胞質(zhì)非特異性著色及脫片風(fēng)險增加。實際操作需根據(jù)染液濃度和新舊程度調(diào)整時間，并通過顯微鏡觀察控制染色終點。3.抗原修復(fù)可采用檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）高壓加熱法，條件為121℃維持2-3分鐘?！具x項】正確（?）?錯誤（?）【參考答案】正確【解析】高壓加熱法是常用抗原修復(fù)技術(shù)，檸檬酸鹽緩沖液在高溫高壓條件下可分解甲醛交聯(lián)鍵，恢復(fù)抗原表位。標(biāo)準(zhǔn)操作為高壓鍋121℃加熱2-3分鐘，冷卻后PBS沖洗，適用于多數(shù)抗體檢測。4.免疫組化染色中，阻斷內(nèi)源性過氧化物酶需使用3%H?O?溶液，作用時間為30分鐘。【選項】正確（?）?錯誤（?）【參考答案】正確【解析】3%H?O?能有效滅活組織內(nèi)源性過氧化物酶，避免DAB顯色時產(chǎn)生假陽性。阻斷時間通常為10-30分鐘，過長可能破壞抗原表位，需根據(jù)組織類型（如富含血細(xì)胞的組織）調(diào)整濃度和時間。5.PAS染色檢測糖原時，無需用淀粉酶消化即可特異性顯示糖原顆粒?！具x項】正確（?）?錯誤（?）【參考答案】錯誤【解析】PAS染色陽性物質(zhì)包括糖原、黏多糖等。為特異性顯示糖原，必須在染色前用淀粉酶消化處理（37℃孵育1小時），否則無法區(qū)分糖原與其他PAS陽性物質(zhì)（如基底膜）。6.組織脫水程序中，乙醇濃度梯度應(yīng)從低到高（如70%→80%→90%→無水乙醇）逐步置換水分?！具x項】正確（?）?錯誤（?）【參考答案】正確【解析】梯度脫水可避免組織劇烈收縮變形：低濃度乙醇（70%-80%）置換游離水，高濃度（90%-100%）置換結(jié)合水。若直接使用高濃度乙醇，會導(dǎo)致表層蛋白凝固阻礙內(nèi)部脫水。7.冰凍切片制作時，切片機溫度應(yīng)設(shè)置為-20℃，以確保組織硬度適宜。【選項】正確（?）?錯誤（?）【參考答案】錯誤【解析】常規(guī)冰凍切片溫度為-25℃至-30℃。溫度過高（如-20℃）會導(dǎo)致組織硬度不足，切片易碎或皺褶；脂肪或脂質(zhì)豐富組織需更低溫度（-30℃以下），而淋巴結(jié)等疏松組織可適當(dāng)調(diào)高至-20℃。8.PCR反應(yīng)中，TaqDNA聚合酶在94-96℃變性步驟中仍能保持活性?！具x項】正確（?）?錯誤（?）【參考答案】錯誤【解析】Taq酶最適活性溫度為72℃，94-96℃高溫會導(dǎo)致其不可逆失活。實際PCR循環(huán)需在變性后降溫至55-65℃（退火）和72℃（延伸）階段激活酶活性，每次變性后需補充新酶。9.中性樹膠是病理切片封固的首選介質(zhì)，因其折光率（1.52）與玻璃接近且不易結(jié)晶?！具x項】正確（?）?錯誤（?）【參考答案】正確【解析】中性樹膠（折光率1.518-1.521）能最大限度保持染色清晰度，長期存放不易變黃或龜裂。需用二甲苯稀釋至適當(dāng)濃度，避免氣泡或膠體過厚影響顯微鏡觀察。10.甲苯胺藍(lán)染色可用于肥大細(xì)胞顆粒顯示，因其與肝素多糖發(fā)生異染性反應(yīng)呈紫紅色。【選項】正確（?）?錯誤（?）【參考答案】正確【解析】甲苯胺藍(lán)為堿性染料，與肥大細(xì)胞顆粒內(nèi)硫酸肝素結(jié)合后發(fā)生異染現(xiàn)象（由藍(lán)色變?yōu)樽霞t色）。該染色特異性高，是診斷肥大細(xì)胞增生性疾病的關(guān)鍵技術(shù)。11.糖元染色（PAS染色）中使用的氧化劑是阿爾辛藍(lán)?！具x項】正確（）錯誤（）【參考答案】錯誤【解析】糖元染色（PAS染色）的氧化劑為高碘酸，用于氧化糖分子中的乙二醇基生成醛基；阿爾辛藍(lán)主要用于酸性黏液物質(zhì)的染色，兩者作用機制不同，不可混淆。12.中性福爾馬林固定液的常規(guī)濃度為10%（即含4%甲醛）?！具x項】正確（）錯誤（）【參考答案】正確【解析】中性福爾馬林固定液的標(biāo)準(zhǔn)配方為40%甲醛原液10ml加磷酸緩沖液90ml，實際甲醛濃度為4%，因此描述正確。13.冰凍切片時，組織無需經(jīng)過脫水、透明和浸蠟步驟即可直接切片?！具x項】正確（）錯誤（）【參考答案】正確【解析】冰凍切片通過快速冷凍使組織固化，無需常規(guī)石蠟切片流程中的脫水、透明和浸蠟處理，可直接用低溫切片機切片。14.HE染色中，蘇木精染液的成熟需加入氧化汞以促進蘇木精氧化為蘇木紅。【選項】正確（）錯誤（）【參考答案】正確【解析】配制Harris蘇木精染液時需加入氧化汞作為氧化劑，促進蘇木精轉(zhuǎn)化為具有染色能力的蘇木紅