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文檔簡介
2025年醫(yī)衛(wèi)類病理學(xué)技術(shù)初級(師)專業(yè)實(shí)踐能力-相關(guān)專業(yè)知識參考題庫含答案解析一、單選題(共35題)1.關(guān)于特殊染色技術(shù)在病理診斷中的應(yīng)用,下列哪項描述正確且是PAS(過碘酸雪夫)染色的主要顯示對象?【選項】A.用于顯示神經(jīng)纖維,染色結(jié)果為藍(lán)色B.用于顯示中性黏液和基底膜,染色結(jié)果為紅色或紫紅色C.主要用于膠原纖維的區(qū)分,染色結(jié)果為綠色D.用于顯示黑色素,染色結(jié)果為棕黑色【參考答案】B【解析】PAS染色的基本原理是通過過碘酸氧化組織中的多糖類物質(zhì)(如糖原、中性黏液物質(zhì)、基底膜等),使其暴露出醛基,再與雪夫試劑結(jié)合形成紫紅色化合物。A項描述的是網(wǎng)狀纖維染色(如Gomori法);C項為Masson三色染色中膠原纖維的表現(xiàn);D項為Fontana-Masson黑色素染色特點(diǎn)。因此B正確。2.病理組織切片制作中,最常用于保存細(xì)胞核形態(tài)的固定液是?【選項】A.95%乙醇B.中性緩沖福爾馬林C.Bouin液D.丙酮【參考答案】B【解析】中性緩沖福爾馬林(10%福爾馬林溶液,pH7.2-7.4)是最常用的通用固定液,能良好保存細(xì)胞核形態(tài),且組織穿透性均衡。乙醇易導(dǎo)致組織收縮及核固縮;Bouin液雖適合固定睪丸等組織,但對核染色質(zhì)保存較差;丙酮多用于快速冷凍切片的固定,不適用于常規(guī)石蠟切片。3.免疫組化染色中,一抗選擇的基本原則是?【選項】A.抗體濃度越高,特異性越強(qiáng)B.抗體種屬來源應(yīng)與二抗匹配C.僅需考慮抗體敏感性,無需考慮組織抗原修復(fù)方式D.陽性對照可省略以節(jié)省成本【參考答案】B【解析】免疫組化染色中,一抗與二抗的種屬來源需匹配(如小鼠一抗需搭配抗小鼠二抗),否則無法結(jié)合。A錯誤:抗體濃度過高可能導(dǎo)致非特異性結(jié)合;C錯誤:抗原修復(fù)方式直接影響抗體結(jié)合效率;D錯誤:陽性對照是判斷染色有效性的必要條件,不可省略。4.PCR反應(yīng)體系中,實(shí)現(xiàn)DNA雙鏈解離的關(guān)鍵步驟及其溫度是?【選項】A.退火,55-65°CB.延伸,72°CC.變性,94-96°CD.初始變性,98°C【參考答案】C【解析】PCR反應(yīng)中變性步驟通過高溫(通常94-96°C)破壞DNA雙鏈的氫鍵,使其解離為單鏈,為引物結(jié)合提供模板。退火是引物與模板結(jié)合的步驟(溫度依引物Tm值而定);延伸為DNA合成步驟(72°C);初始變性僅在第一循環(huán)前進(jìn)行。5.肥大細(xì)胞染色常用的特異方法是?【選項】A.剛果紅染色B.甲苯胺藍(lán)染色C.蘇丹Ⅲ染色D.鍍銀染色【參考答案】B【解析】肥大細(xì)胞胞質(zhì)顆粒含肝素和組胺,甲苯胺藍(lán)可與其結(jié)合呈異染性紫紅色。剛果紅用于淀粉樣物質(zhì);蘇丹Ⅲ顯示脂質(zhì);鍍銀染色用于神經(jīng)纖維或網(wǎng)狀纖維。B為該類題目的經(jīng)典考點(diǎn)。6.顯微鏡觀察時,若需增強(qiáng)標(biāo)本的對比度并突出無色透明結(jié)構(gòu)(如細(xì)胞核),應(yīng)選用哪種濾光片?【選項】A.綠色濾光片B.藍(lán)色濾光片C.黃色濾光片D.紅色濾光片【參考答案】A【解析】綠色濾光片可提高光學(xué)顯微鏡的分辨率與對比度,尤其適用于蘇木精(藍(lán)色)染色后的細(xì)胞核觀察,因其可吸收互補(bǔ)色紅光,使藍(lán)色結(jié)構(gòu)更清晰。藍(lán)光多用于熒光觀察,黃/紅光較少用于常規(guī)染色切片。7.組織脫水過程中,若透明劑二甲苯殘留過多,對后續(xù)操作的影響是?【選項】A.石蠟無法浸透組織B.切片易碎裂成粉末狀C.染色時脫片率增加D.細(xì)胞核著色過深【參考答案】A【解析】二甲苯為石蠟與脫水劑(如乙醇)的媒介,若未徹底清除,石蠟無法滲入組織間隙,導(dǎo)致包埋后組織硬脆、切片困難。B多為脫水不足引起;C與載玻片處理或烤片溫度相關(guān);D與固定或染色時間相關(guān)。8.下列哪種病變在HE染色下可觀察到“絨毛心”特征性表現(xiàn)?【選項】A.風(fēng)濕性心包炎B.結(jié)核性心包炎C.尿毒癥性心包炎D.化膿性心包炎【參考答案】A【解析】“絨毛心”為風(fēng)濕性心包炎的典型表現(xiàn),因心包表面纖維素滲出伴隨機(jī)化,形成絨毛狀突起。結(jié)核性心包炎可見干酪樣壞死;化膿性心包炎以中性粒細(xì)胞浸潤為主;尿毒癥性心包炎多表現(xiàn)為纖維素性滲出但無絨毛結(jié)構(gòu)。9.在石蠟包埋操作中,組織浸蠟的最佳溫度范圍是?【選項】A.45-50°CB.56-58°CC.60-62°CD.65-68°C【參考答案】B【解析】石蠟熔點(diǎn)多在56-58°C之間,此溫度下蠟液流動性適中,既能充分滲入組織又不會因高溫破壞抗原或形態(tài)。溫度過低(如A)會導(dǎo)致浸蠟不全;過高(如C、D)易使組織變硬變脆。10.用于顯示含鐵血黃素的特殊染色方法是?【選項】A.普魯士藍(lán)染色B.剛果紅染色C.PAS染色D.油紅O染色【參考答案】A【解析】普魯士藍(lán)染色原理是三價鐵離子與亞鐵氰化鉀反應(yīng)生成藍(lán)色沉淀,特異性顯示含鐵血黃素。剛果紅染淀粉樣物質(zhì);PAS染多糖;油紅O為脂溶性染料,用于冰凍切片中的脂質(zhì)顯示。11.在病理組織學(xué)技術(shù)中,下列哪種染色方法常用于顯示彈性纖維?【選項】A.HE染色B.維多利亞藍(lán)染色C.剛果紅染色D.PAS染色【參考答案】B【解析】1.維多利亞藍(lán)染色是顯示彈性纖維的特異性染色方法,染色后彈性纖維呈藍(lán)綠色。2.HE染色為常規(guī)染色,無法特異性顯示彈性纖維。3.剛果紅染色用于顯示淀粉樣物質(zhì),遇偏光顯微鏡呈蘋果綠色雙折光。4.PAS染色主要顯示糖原、黏液等多糖類物質(zhì),呈紫紅色。12.免疫組織化學(xué)技術(shù)中,抗原修復(fù)最常用的緩沖液是?【選項】A.PBS緩沖液(pH7.4)B.EDTA緩沖液(pH9.0)C.檸檬酸鹽緩沖液(pH6.0)D.Tris-HCl緩沖液(pH8.0)【參考答案】C【解析】1.檸檬酸鹽緩沖液(pH6.0)是抗原熱修復(fù)的常用緩沖液,能有效暴露因甲醛固定遮蔽的抗原表位。2.EDTA緩沖液(pH9.0)適用于某些難修復(fù)抗原(如核抗原),但非常規(guī)選擇。3.PBS和Tris-HCl多用于洗滌或稀釋步驟,而非抗原修復(fù)。13.在病理制片過程中,下列哪種固定液適用于糖原保存?【選項】A.10%中性福爾馬林B.Carnoy液C.Bouin液D.Zenker液【參考答案】B【解析】1.Carnoy液(乙醇-氯仿-冰醋酸混合液)能快速固定組織并較好保存糖原,避免水溶性物質(zhì)流失。2.中性福爾馬林是常規(guī)固定液,但會致糖原部分溶解。3.Bouin液含苦味酸,適合睪丸等組織固定,但破壞糖原。4.Zenker液含汞鹽,適用于結(jié)締組織和骨髓染色。14.下列哪種顯微鏡技術(shù)可用于觀察病毒包涵體?【選項】A.相差顯微鏡B.熒光顯微鏡C.普通光學(xué)顯微鏡D.電子顯微鏡【參考答案】C【解析】1.病毒包涵體(如狂犬病Negri小體)可通過普通光學(xué)顯微鏡觀察HE染色切片。2.相差顯微鏡用于觀察活細(xì)胞動態(tài),熒光顯微鏡需特異性標(biāo)記,電子顯微鏡用于超微結(jié)構(gòu)觀察。15.免疫熒光技術(shù)中,陰性對照應(yīng)選擇?【選項】A.未加一抗的組織B.未加二抗的組織C.已知陽性組織D.已知陰性組織【參考答案】A【解析】1.陰性對照需排除非特異性染色,未加一抗可驗(yàn)證二抗及自發(fā)熒光影響。2.未加二抗無法驗(yàn)證一抗特異性,已知陽性/陰性組織分別為陽性對照和陰性對照的補(bǔ)充。16.HE染色中,細(xì)胞核呈藍(lán)色的原理是?【選項】A.伊紅與核酸結(jié)合B.蘇木精與核酸磷酸基結(jié)合C.蘇木精與細(xì)胞質(zhì)蛋白結(jié)合D.伊紅與核糖體結(jié)合【參考答案】B【解析】1.蘇木精為堿性染料,通過鋁離子媒介與DNA/RNA的磷酸基結(jié)合,使細(xì)胞核顯藍(lán)色。2.伊紅是酸性染料,與胞質(zhì)內(nèi)帶正電荷蛋白結(jié)合呈紅色,與核染色無關(guān)。17.用于診斷淀粉樣變性的特殊染色方法是?【選項】A.普魯士藍(lán)染色B.蘇丹III染色C.剛果紅染色D.網(wǎng)狀纖維染色【參考答案】C【解析】1.剛果紅染色后淀粉樣物質(zhì)呈橘紅色,偏光顯微鏡下呈蘋果綠色雙折光,為特異性診斷方法。2.普魯士藍(lán)染色顯示含鐵血黃素,蘇丹III染色顯示脂質(zhì),網(wǎng)狀纖維染色顯示基底膜相關(guān)結(jié)構(gòu)。18.下列哪種抗體類型最適用于凝集反應(yīng)?【選項】A.IgGB.IgAC.IgMD.IgE【參考答案】C【解析】1.IgM為五聚體結(jié)構(gòu),可同時結(jié)合多個抗原表位,在凝集反應(yīng)中交聯(lián)效率最高。2.IgG為單體,凝集能力較弱;IgA、IgE與凝集反應(yīng)無關(guān)。19.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中,最常用于標(biāo)記抗體的酶是?【選項】A.辣根過氧化物酶(HRP)B.堿性磷酸酶(AP)C.葡萄糖氧化酶D.β-半乳糖苷酶【參考答案】A【解析】1.HRP因底物選擇廣(如TMB、DAB)、顯色敏感、成本低,成為ELISA最常用標(biāo)記酶。2.AP雖穩(wěn)定性高,但底物昂貴;葡萄糖氧化酶和β-半乳糖苷酶應(yīng)用較少。20.病理切片脫蠟不徹底可能導(dǎo)致?【選項】A.細(xì)胞核染色過深B.染色不均或脫片C.切片透明度下降D.組織收縮變形【參考答案】B【解析】1.脫蠟不徹底使后續(xù)水化及染料滲透受阻,導(dǎo)致染色不均或組織脫片。2.其他選項與脫水、固定或染色時間控制相關(guān),而非脫蠟步驟直接影響。21.1.在常規(guī)H&E染色中,關(guān)于伊紅(Eosin)的作用描述正確的是:【選項】A.主要染細(xì)胞核呈藍(lán)色B.屬于堿性染料,與胞質(zhì)嗜堿性結(jié)構(gòu)結(jié)合C.常用濃度為0.5%-1%的醇溶性溶液D.染色后細(xì)胞質(zhì)呈現(xiàn)紅色或粉紅色【參考答案】D【解析】伊紅屬于酸性染料,主要與胞質(zhì)中的堿性成分(如蛋白質(zhì))結(jié)合,染色后細(xì)胞質(zhì)呈紅色或粉紅色。A錯誤:細(xì)胞核由蘇木精(堿性染料)染成藍(lán)色。B錯誤:伊紅為酸性染料,作用于胞質(zhì)嗜酸性結(jié)構(gòu)。C錯誤:常用伊紅Y濃度為0.25%-0.5%水溶液或醇溶液,而非0.5%-1%。22.2.組織固定時,中性緩沖甲醛溶液(NBF)的主要優(yōu)勢在于:【選項】A.固定速度快于普通甲醛B.可最大限度保存組織抗原性C.對脂肪組織固定效果最佳D.能完全避免細(xì)胞收縮【參考答案】B【解析】中性緩沖甲醛(pH7.2-7.4)能減少甲醛與蛋白質(zhì)的交聯(lián)過度,更好保存抗原表位,是免疫組化首選固定液。A錯誤:固定速度與普通甲醛無明顯差異。C錯誤:脂肪組織固定需專用固定劑(如OCT冷凍固定)。D錯誤:甲醛固定仍會導(dǎo)致輕度組織收縮。23.3.剛果紅染色用于顯示下列哪種物質(zhì)時,在偏振光顯微鏡下呈蘋果綠色雙折光?【選項】A.纖維素B.淀粉樣蛋白C.黑色素D.黏液【參考答案】B【解析】剛果紅染色是淀粉樣變性的特異性染色,淀粉樣蛋白沉積物在偏振光下呈現(xiàn)特征性蘋果綠色雙折光。A錯誤:纖維素常用LendrumMSB染色。C錯誤:黑色素常用Fontana-Masson染色。D錯誤:黏液常用阿爾辛藍(lán)染色。24.4.免疫組織化學(xué)技術(shù)的基本原理是:【選項】A.抗原與熒光染料的直接結(jié)合B.抗體-抗原的特異性結(jié)合反應(yīng)C.金屬離子與組織蛋白的螯合作用D.酶促顯色反應(yīng)的催化機(jī)制【參考答案】B【解析】免疫組化核心原理是利用抗體與抗原的特異性結(jié)合反應(yīng),通過標(biāo)記物(如酶、熒光素)定位靶抗原。A錯誤:免疫熒光法需抗體標(biāo)記熒光而非直接結(jié)合。C錯誤:金屬螯合是特殊染色(如網(wǎng)狀纖維染色)原理。D錯誤:酶促顯色是標(biāo)記系統(tǒng)的一部分,非核心原理。25.5.組織脫水過程中,乙醇梯度設(shè)置的常見順序是:【選項】A.95%→100%→85%→75%B.75%→85%→95%→100%C.100%→95%→85%→70%D.50%→70%→90%→100%【參考答案】B【解析】脫水需由低濃度乙醇逐步升高,避免組織劇烈收縮變形。標(biāo)準(zhǔn)梯度為75%→85%→95%→無水乙醇(100%)。A、C、D均存在濃度跳躍或逆序,容易導(dǎo)致組織收縮或脫水不全。26.6.下列哪種病變進(jìn)行PAS(過碘酸-Schiff)染色時呈陽性反應(yīng)?【選項】A.含鐵血黃素沉積癥B.糖原累積癥C.鈣鹽沉積D.纖維素性壞死【參考答案】B【解析】PAS染色可特異性顯示多糖(如糖原、黏蛋白)。糖原累積癥因糖原異常沉積呈強(qiáng)陽性。A錯誤:含鐵血黃素需普魯士藍(lán)染色。C錯誤:鈣鹽用VonKossa染色。D錯誤:纖維素用MSB染色。27.7.制作冷凍切片時,最適宜的組織處理溫度是:【選項】A.-4℃至-10℃B.-15℃至-20℃C.-25℃至-30℃D.-80℃至-196℃【參考答案】B【解析】常規(guī)冷凍切片在-15℃至-20℃低溫下進(jìn)行,可平衡組織硬度與切片完整性。溫度過低(如-30℃以下)會導(dǎo)致組織脆裂;過高(如-10℃以上)則組織過軟難以切片。28.8.關(guān)于蘇木精染液的特性,錯誤的是:【選項】A.常用氧化汞作為氧化劑B.需加入冰醋酸防止沉淀C.成熟染液需暴露空氣自然氧化D.可溶解于乙醇和甘油【參考答案】C【解析】蘇木精配制后需經(jīng)氧化生成蘇木紅才具染色能力。C錯誤:Harris蘇木精需人工加入氧化劑(如氧化汞)氧化,而非自然氧化。A、B、D均為正確描述。29.9.制作石蠟切片時,組織包埋方向的關(guān)鍵原則是:【選項】A.保持組織與包埋盒邊緣平行B.盡可能增大組織與刀刃的接觸面C.確保需要觀察的切面與蠟塊底面垂直D.避免組織間留有氣泡【參考答案】C【解析】需觀察的切面應(yīng)與蠟塊底面垂直,以確保切片時切出完整目標(biāo)平面。A、B與切片質(zhì)量無關(guān);D屬包埋操作細(xì)節(jié),非方向性原則。30.10.封固劑中性樹膠的使用特點(diǎn)是:【選項】A.溶于水,用于臨時封片B.折射率與玻璃相近,適合長期保存C.需與熒光染料混合使用D.易導(dǎo)致切片褪色,僅用于快速診斷【參考答案】B【解析】中性樹膠為二甲苯溶劑型封固劑,折射率(~1.52)與玻璃接近,透明度高,可長期保存切片。A錯誤:中性樹膠不溶于水。C錯誤:熒光封片需專用抗淬滅劑。D錯誤:樹膠化學(xué)穩(wěn)定性好,不易使切片褪色。31.在病理學(xué)技術(shù)中,石蠟切片最常用的切片厚度范圍是?【選項】A.1~2微米B.3~5微米C.6~8微米D.10~15微米【參考答案】B【解析】石蠟切片常規(guī)厚度為3~5微米。過?。ㄈ?~2微米)易導(dǎo)致組織斷裂,而過厚(如8微米以上)會影響顯微鏡透光性和細(xì)胞結(jié)構(gòu)觀察。特殊染色或特定組織可調(diào)整厚度,但診斷性HE染色首選此范圍。32.免疫組織化學(xué)染色中,抗原修復(fù)最常用的方法是?【選項】A.酶消化法B.高壓熱修復(fù)法C.微波修復(fù)法D.酸水解修復(fù)法【參考答案】B【解析】高壓熱修復(fù)法(120℃高壓處理)能更徹底暴露因甲醛固定掩蔽的抗原表位,適用性廣于微波修復(fù)法;酶消化法僅對部分抗原有效,酸水解易破壞組織結(jié)構(gòu)。33.下列哪種固定液會導(dǎo)致組織過度硬化,影響切片效果?【選項】A.10%中性緩沖甲醛B.Bouin液C.Zenker液D.丙酮【參考答案】C【解析】Zenker液含升汞,固定時間過長會使組織硬脆,切片易碎裂;Bouin液對肌肉固定佳但染色需脫苦味酸;丙酮主要用于冷凍切片,甲醛硬化作用溫和。34.腎穿刺活檢標(biāo)本進(jìn)行電鏡觀察時,首選的固定液是?【選項】A.4%多聚甲醛B.2.5%戊二醛C.10%福爾馬林D.Carnoy液【參考答案】B【解析】戊二醛能更完好保存細(xì)胞超微結(jié)構(gòu),多聚甲醛次之;10%福爾馬林主要用于光鏡標(biāo)本,Carnoy液對糖原固定特異但不適用電鏡。35.HE染色中,伊紅主要染色的成分是?【選項】A.細(xì)胞核B.膠原纖維C.細(xì)胞質(zhì)和胞外基質(zhì)D.彈力纖維【參考答案】C【解析】伊紅為酸性染料,與帶正電荷的胞質(zhì)蛋白及間質(zhì)成分(如膠原)結(jié)合呈粉紅色;蘇木素為堿性染料,主要染核內(nèi)核酸。二、多選題(共35題)1.關(guān)于固定劑的選擇及應(yīng)用,下列哪些說法是正確的?【選項】A.10%中性緩沖福爾馬林是常規(guī)病理標(biāo)本的首選固定劑B.Bouin固定液適用于睪丸、眼球等富含糖原的組織C.Zenker固定液含升汞,需特殊處理以避免重金屬沉淀D.丙酮適用于快速冷凍切片的固定,但對細(xì)胞結(jié)構(gòu)保存較差E.戊二醛主要用于電鏡標(biāo)本的固定【參考答案】A、C、D、E【解析】A正確:中性緩沖福爾馬林可減少組織收縮和甲醛色素沉淀,是常規(guī)固定金標(biāo)準(zhǔn)。B錯誤:Bouin液適合固定結(jié)締組織和造血組織,糖原固定應(yīng)選Carnoy液(含乙醇)。C正確:Zenker液含升汞和重鉻酸鉀,需碘酒脫汞處理以避免切片殘留黑色沉淀。D正確:丙酮能快速固定冷凍切片,但易致細(xì)胞收縮及蛋白質(zhì)變性。E正確:戊二醛對細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)保存更佳,是電鏡常規(guī)固定劑。2.下列特殊染色技術(shù)與其主要應(yīng)用匹配正確的是?【選項】A.PAS染色——基底膜、真菌細(xì)胞壁B.Masson三色染色——膠原纖維C.普魯士藍(lán)染色——含鐵血黃素D.銀染(Gomori法)——網(wǎng)狀纖維E.剛果紅染色——黏液物質(zhì)【參考答案】A、B、C、D【解析】A正確:PAS染色通過顯示多糖成分標(biāo)記基底膜及真菌壁。B正確:Masson三色中膠原纖維呈藍(lán)色,肌纖維呈紅色。C正確:普魯士藍(lán)通過Fe3?與亞鐵氰化鉀反應(yīng)檢測含鐵血黃素。D正確:Gomori銀染法可使網(wǎng)狀纖維顯黑色,用于肝硬化等診斷。E錯誤:剛果紅染色針對淀粉樣物(呈蘋果綠色雙折光),黏液物質(zhì)常用阿辛藍(lán)染色。3.免疫組化技術(shù)中,關(guān)于抗原修復(fù)的表述正確的有:【選項】A.熱修復(fù)法(HIER)適用于甲醛交聯(lián)導(dǎo)致抗原掩蔽的情況B.酶消化法(如胰蛋白酶)可分解蛋白暴露出抗原表位C.EDTA修復(fù)液優(yōu)于檸檬酸鹽緩沖液對核抗原的修復(fù)效果D.高壓修復(fù)會破壞部分脆弱抗原E.抗原修復(fù)后需自然冷卻以防止抗原重新交聯(lián)【參考答案】A、B、C、D【解析】A正確:HIER通過高溫破壞甲醛交聯(lián)鍵恢復(fù)抗原性。B正確:蛋白酶可分解連接抗原的蛋白質(zhì),提高抗體結(jié)合率。C正確:EDTA螯合鈣離子更強(qiáng)效,對核抗原(如ER、PR)修復(fù)更佳。D正確:高壓可能使部分不耐熱抗原變性失活。E錯誤:修復(fù)后需快速冷卻以維持抗原構(gòu)象,自然冷卻易致再交聯(lián)。4.關(guān)于染色原理,下列描述錯誤的有:【選項】A.蘇木精為堿性染料,主要使細(xì)胞核著藍(lán)色B.伊紅屬于酸性染料,易與帶正電荷的胞質(zhì)成分結(jié)合C.媒染劑(如硫酸鋁銨)可增強(qiáng)蘇木精的染色親和力D.分化步驟通過過染鹽酸乙醇去除多余蘇木精E.返藍(lán)處理常使用弱堿性溶液(如氨水)【參考答案】B、D【解析】B錯誤:伊紅與帶負(fù)電胞質(zhì)成分(經(jīng)伊紅酸性電離后帶正電)結(jié)合。D錯誤:分化液為1%鹽酸乙醇,僅去除核外非特異性蘇木精著色。A、C、E均為正確描述。5.組織脫水透明過程中需避免的操作包括:【選項】A.脫水乙醇濃度梯度跳躍過大(如70%直接升至無水乙醇)B.透明劑二甲苯浸泡時間超過2小時C.脂肪組織脫水時間與其他組織相同D.使用丙酮替代乙醇進(jìn)行脫水E.透明步驟未徹底導(dǎo)致石蠟滲透不完全【參考答案】A、B、C、E【解析】A錯誤:梯度應(yīng)逐步遞增(如70%-85%-95%-100%)以防組織變形。B錯誤:二甲苯久置易使組織硬脆,一般每道30-60分鐘。C錯誤:脂肪組織需延長脫水時間(因疏水性阻礙試劑滲透)。D正確:丙酮可作為快速脫水劑,但收縮性強(qiáng)于乙醇。E錯誤:透明不徹底將阻礙石蠟浸潤,影響切片連續(xù)性。6.HE染色中出現(xiàn)“核染色過深”的可能原因有:【選項】A.蘇木精染色時間過長B.分化步驟不充分C.返藍(lán)時間不足D.組織固定不及時導(dǎo)致核酸降解E.切片脫蠟不徹底【參考答案】A、B、E【解析】A正確:蘇木精過染使核著色過深。B正確:分化不足未能去除非特異性著色。E正確:脫蠟殘留阻礙染料滲透,局部染色異常加深。C錯誤:返藍(lán)不足僅使核呈灰色而非過深。D錯誤:核酸降解會導(dǎo)致核染色淺淡。7.關(guān)于組織處理時間的控制,正確的有:【選項】A.骨組織需延長脫鈣時間后再進(jìn)行脫水B.胃鏡小活檢標(biāo)本應(yīng)縮短脫水時間防硬脆C.含氣器官(如肺)需單獨(dú)處理以避免氣泡殘留D.脂肪組織的透明時間需縮短E.腦組織脫水時間過短易致切片時龜裂【參考答案】A、B、C【解析】A正確:骨組織需完全脫鈣(通過X線或化學(xué)檢測確認(rèn))后才能脫水。B正確:小標(biāo)本處理時間過長易硬脆,需縮短脫水透明各步驟時長。C正確:肺組織需用真空泵排氣泡,避免影響試劑滲透。D錯誤:脂肪組織因疏水性需延長透明時間。E錯誤:腦組織脫水過長會變硬,應(yīng)控制總時長。8.冷凍切片操作中,正確的注意事項包括:【選項】A.組織應(yīng)速凍至-20℃以下防止冰晶形成B.OCT包埋劑需提前30分鐘冷凍以充分滲透C.切片厚度通常為4-6μmD.防卷板角度調(diào)節(jié)不當(dāng)可致切片褶皺E.未固定的新鮮組織需延長染色時間【參考答案】A、C、D【解析】A正確:速凍(如液氮)可減少冰晶損傷細(xì)胞結(jié)構(gòu)。B錯誤:OCT應(yīng)隨組織一同速凍,無需預(yù)冷(影響包埋貼合度)。C正確:較薄切片(4-6μm)利于細(xì)胞學(xué)觀察。D正確:防卷板與刀片角度需匹配,防止切片卷曲或皺褶。E錯誤:未固定組織染色時間需縮短(細(xì)胞通透性更高)。9.下列包埋材料與其適用場景匹配正確的有:【選項】A.石蠟——常規(guī)病理組織學(xué)檢查B.火棉膠——大塊眼球或神經(jīng)組織C.環(huán)氧樹脂——骨髓活檢塑料包埋D.明膠——冰凍切片臨時支持E.碳蠟——快速石蠟替代法【參考答案】A、B、C、E【解析】D錯誤:明膠多用于整體器官包埋,冰凍切片用OCT。A正確:石蠟為最廣泛應(yīng)用的標(biāo)準(zhǔn)包埋劑。B正確:火棉膠柔韌性好,適合大塊易碎組織。C正確:環(huán)氧樹脂硬度高,利于骨髓等堅硬組織薄切。E正確:碳蠟水溶性可用于快速處理(無需脫蠟)。10.關(guān)于微生物染色技術(shù),表述正確的有:【選項】A.抗酸染色陽性菌(如結(jié)核桿菌)呈紅色B.Gram染色中碘液作用是增強(qiáng)染料結(jié)合C.六胺銀染色用于檢測真菌和肺孢子蟲D.墨汁負(fù)染可顯示隱球菌莢膜E.Warthin-Starry染色用于螺旋體檢測【參考答案】A、B、C、D、E【解析】A正確:抗酸菌因分枝菌酸抵抗酸酒精脫色而保留紅色。B正確:碘液作為媒染劑形成結(jié)晶紫-碘復(fù)合物增強(qiáng)結(jié)合力。C正確:六胺銀使真菌細(xì)胞壁中幾丁質(zhì)顯黑色。D正確:墨汁不能穿透莢膜,背景黑色中菌體呈透亮?xí)炄Α正確:WS染色通過銀染標(biāo)記螺旋體(黑色細(xì)絲狀)。11.關(guān)于蘇木精-伊紅(HE)染色技術(shù)的描述,下列哪些說法正確?【選項】A.分化步驟使用鹽酸酒精可去除細(xì)胞核多余蘇木精B.伊紅染色時間過長會導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)著色過深C.水洗不徹底易導(dǎo)致染色偏藍(lán)D.細(xì)胞核復(fù)染常用堿性染色劑E.脫水不徹底是切片產(chǎn)生云霧狀渾濁的主要原因【參考答案】ABDE【解析】A正確:1%鹽酸酒精用于分化,可移除非特異性結(jié)合的蘇木精。B正確:伊紅染色超過3分鐘會導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)紅色過深,影響對比度。C錯誤:水洗不徹底主要導(dǎo)致蘇木精殘留,呈紫黑色而非偏藍(lán)。D正確:蘇木精為堿性染色劑,與細(xì)胞核內(nèi)酸性物質(zhì)結(jié)合。E正確:脫水不徹底會使二甲苯無法完全透明,產(chǎn)生云霧狀渾濁。12.下列哪些是制作冰凍切片的關(guān)鍵控制點(diǎn)?【選項】A.組織速凍溫度需低于-25℃B.切片厚度通??刂圃?-8μmC.防卷板角度調(diào)節(jié)不當(dāng)易致切片褶皺D.OCT包埋劑過量會導(dǎo)致切片黏附不穩(wěn)E.冷凍時間超過2小時會引發(fā)冰晶偽影【參考答案】ABCD【解析】A正確:速凍需-25℃以下以減少冰晶形成。B正確:5-8μm是常規(guī)診斷用切片標(biāo)準(zhǔn)厚度。C正確:防卷板與刀片角度不匹配是褶皺主因。D正確:OCT過量會降低組織與載玻片黏附力。E錯誤:冰晶偽影主要與速凍溫度不足相關(guān),與冷凍時長無直接關(guān)聯(lián)。13.關(guān)于特殊染色應(yīng)用,下列匹配正確的是:【選項】A.Masson三色染色——區(qū)分肌纖維與膠原纖維B.剛果紅染色——顯示淀粉樣蛋白C.PAS染色——標(biāo)記中性黏液物質(zhì)D.革蘭染色——鑒別抗酸桿菌E.網(wǎng)織纖維染色——評估肝纖維化程度【參考答案】ABCE【解析】A正確:Masson染色中肌纖維呈紅色,膠原纖維呈藍(lán)色。B正確:剛果紅與淀粉樣蛋白結(jié)合后產(chǎn)生蘋果綠雙折光。C正確:PAS染色可使糖原和中性黏液物質(zhì)呈紫紅色。D錯誤:革蘭染色用于細(xì)菌分類,抗酸桿菌用齊尼染色。E正確:網(wǎng)織纖維染色(如Gomori法)可量化肝纖維化分期。14.下列哪些因素會導(dǎo)致免疫組化假陽性結(jié)果?【選項】A.內(nèi)源性過氧化物酶未阻斷B.一抗?jié)舛冗^高C.組織自發(fā)熒光D.抗原修復(fù)液pH值錯誤E.血清封閉不充分【參考答案】ABE【解析】A正確:紅細(xì)胞、粒細(xì)胞等內(nèi)源性酶可引起非特異性顯色。B正確:一抗?jié)舛冗^高會增強(qiáng)非特異性結(jié)合。C錯誤:自發(fā)熒光影響熒光法而非常規(guī)免疫組化。D錯誤:pH值錯誤主要導(dǎo)致假陰性而非假陽性。E正確:血清封閉不足會留下未飽和結(jié)合位點(diǎn)造成背景著色。15.關(guān)于細(xì)胞凋亡檢測,下列描述正確的有:【選項】A.TUNEL法標(biāo)記DNA斷裂片段B.Caspase-3活化是早期凋亡標(biāo)志C.流式細(xì)胞術(shù)可區(qū)分凋亡與壞死細(xì)胞D.電鏡下觀察染色質(zhì)邊集是金標(biāo)準(zhǔn)E.AnnexinV用于檢測細(xì)胞膜磷脂酰絲氨酸外翻【參考答案】ACDE【解析】A正確:TUNEL通過末端標(biāo)記斷裂DNA檢測晚期凋亡。B錯誤:Caspase-3活化屬中期事件,早期標(biāo)志為線粒體膜電位變化。C正確:流式結(jié)合AnnexinV/PI可區(qū)分凋亡(單陽性)與壞死(雙陽性)。D正確:電鏡可觀察到特征性凋亡小體。E正確:AnnexinV結(jié)合PS外翻是早期凋亡標(biāo)志。16.組織固定不當(dāng)可能引發(fā)哪些后果?【選項】A.甲醛固定過度致組織硬化脆裂B.醇類固定劑保存糖原效果優(yōu)于甲醛C.未中性緩沖甲醛會產(chǎn)生福爾馬林色素D.Zenker液固定后需碘處理去除汞沉淀E.Bouin液因其強(qiáng)酸性不適于DNA分析【參考答案】ABCDE【解析】A正確:>48小時甲醛固定會使組織過度交聯(lián)。B正確:乙醇能更好保存糖原(如Carnoy液)。C正確:酸性甲醛與血紅蛋白結(jié)合形成棕黑色顆粒。D正確:Zenker液含汞,需Lugol碘液和硫代硫酸鈉除汞。E正確:Bouin液中苦味酸可降解核酸。17.顯微鏡操作中,下列哪些說法正確?【選項】A.油鏡使用后需用二甲苯擦拭鏡頭B.100倍物鏡的工作距離短于40倍物鏡C.柯勒照明調(diào)節(jié)可優(yōu)化視野均勻度D.相差顯微鏡需環(huán)形光闌與相板匹配E.熒光顯微鏡需定期校準(zhǔn)汞燈中心點(diǎn)【參考答案】BCDE【解析】A錯誤:現(xiàn)代顯微鏡鏡頭需用專用鏡頭紙而非二甲苯(損傷鍍膜)。B正確:100倍油鏡工作距離約0.1mm,40倍物鏡約0.6mm。C正確:柯勒照明通過聚光鏡和視場光闌調(diào)節(jié)實(shí)現(xiàn)均勻照明。D正確:環(huán)形光闌與相板共軛是相差顯微鏡成像關(guān)鍵。E正確:汞燈光心偏移會降低熒光強(qiáng)度,需每月校準(zhǔn)。18.分子病理技術(shù)中,下列措施可防止RNA降解的有:【選項】A.離體組織立即放入RNA保存液B.操作臺面定期用RNase清除劑處理C.使用DEPC水配制緩沖液D.標(biāo)本長期保存于-80℃E.提取過程保持冰上操作【參考答案】ABDE【解析】A正確:專用保存液(如RNAlater)能迅速滲透穩(wěn)定RNA。B正確:實(shí)驗(yàn)環(huán)境需去除RNase污染。C錯誤:DEPC水僅用于試劑配制,不能直接處理器械或臺面。D正確:-80℃可長期保存RNA樣本。E正確:低溫降低RNase活性。19.下列染色法與對應(yīng)結(jié)果顯示正確的是:【選項】A.Giemsa染色——幽門螺桿菌呈淡紫色B.阿爾辛藍(lán)染色——酸性黏液呈藍(lán)色C.維多利亞藍(lán)染色——乙型肝炎表面抗原呈綠色D.抗酸染色——結(jié)核桿菌呈紅色E.六胺銀染色——真菌細(xì)胞壁呈黑色【參考答案】ABDE【解析】A正確:Giemsa染色下Hp呈現(xiàn)彎曲淡紫色桿菌。B正確:阿爾辛藍(lán)在pH2.5時結(jié)合酸性黏液多糖。C錯誤:維多利亞藍(lán)顯示HBsAg為藍(lán)色,綠色為對比復(fù)染色。D正確:抗酸桿菌經(jīng)石炭酸復(fù)紅染色后不被鹽酸酒精脫色。E正確:六胺銀將真菌細(xì)胞壁幾丁質(zhì)還原為金屬銀沉淀。20.病理檔案管理系統(tǒng)需包含的核心功能有:【選項】A.標(biāo)本接收時自動生成唯一病理號B.切片與蠟塊存儲位置精準(zhǔn)定位C.免疫組克結(jié)果與HIS系統(tǒng)實(shí)時對接D.報告審核三級醫(yī)師電子簽名E.超過5年標(biāo)本自動提醒銷毀【參考答案】ABD【解析】A正確:病理號是追溯標(biāo)本的核心標(biāo)識。B正確:需記錄冰箱編號/層架位置以實(shí)現(xiàn)快速檢索。C錯誤:免疫組化結(jié)果屬于內(nèi)部數(shù)據(jù),與醫(yī)院信息系統(tǒng)(HIS)對接非必須。D正確:報告需經(jīng)初檢/復(fù)檢/審核三級簽名確認(rèn)。E錯誤:常規(guī)標(biāo)本保存期限為15年(婦幼標(biāo)本30年),無自動銷毀功能。21.1.下列哪些固定液中含有甲醛成分?()A.中性緩沖甲醛固定液B.Zenker固定液C.Bouin固定液D.4%多聚甲醛固定液【選項】A.中性緩沖甲醛固定液B.Zenker固定液C.Bouin固定液D.4%多聚甲醛固定液【參考答案】ACD【解析】A.中性緩沖甲醛固定液的主要成分是甲醛,正確。B.Zenker固定液含重鉻酸鉀、升汞和冰醋酸,不含甲醛,錯誤。C.Bouin固定液由苦味酸、甲醛和冰醋酸組成,含甲醛,正確。D.4%多聚甲醛固定液為甲醛聚合物,水解后釋放甲醛,正確。22.2.下列關(guān)于特殊染色的應(yīng)用,正確的是?()A.VG染色可顯示膠原纖維B.剛果紅染色用于顯示淀粉樣物質(zhì)C.PAS染色可顯示黏液和糖原D.普魯士藍(lán)染色用于顯示黑色素【選項】A.VG染色可顯示膠原纖維B.剛果紅染色用于顯示淀粉樣物質(zhì)C.PAS染色可顯示黏液和糖原D.普魯士藍(lán)染色用于顯示黑色素【參考答案】ABC【解析】A.VG(VanGieson)染色使膠原纖維呈紅色,正確。B.剛果紅染色中淀粉樣物質(zhì)呈磚紅色,正確。C.PAS(過碘酸雪夫)染色可染糖原、黏液等呈紫紅色,正確。D.普魯士藍(lán)染色用于檢測含鐵血黃素中的三價鐵,黑色素常用Fontana-Masson染色,錯誤。23.3.免疫組織化學(xué)染色中,導(dǎo)致假陰性結(jié)果的常見原因包括?()A.抗體效價過低B.抗原修復(fù)不充分C.組織固定時間過長D.DAB顯色時間過長【選項】A.抗體效價過低B.抗原修復(fù)不充分C.組織固定時間過長D.DAB顯色時間過長【參考答案】ABC【解析】A.抗體效價過低會導(dǎo)致抗原-抗體結(jié)合不充分,造成假陰性,正確。B.抗原修復(fù)不充分時靶抗原無法暴露,影響結(jié)合,正確。C.固定時間過長可能掩蓋抗原表位,正確。D.DAB顯色時間過長易導(dǎo)致背景加深甚至假陽性,而非假陰性,錯誤。24.4.常規(guī)石蠟切片的標(biāo)準(zhǔn)厚度范圍是?()A.1~2微米B.3~5微米C.5~7微米D.7~10微米【選項】A.1~2微米B.3~5微米C.5~7微米D.7~10微米【參考答案】AB【解析】A.部分薄切片(如甲狀腺)可采用1~2微米,屬標(biāo)準(zhǔn)范圍。B.多數(shù)組織常規(guī)切片厚度為3~5微米,正確。C.5~7微米過厚,易出現(xiàn)細(xì)胞重疊,非常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)。D.7~10微米為冷凍切片常用厚度,不適用于石蠟切片。25.5.適用于電子顯微鏡標(biāo)本固定的固定液是?()A.10%中性福爾馬林B.2.5%戊二醛C.4%重鉻酸鉀D.1%鋨酸【選項】A.10%中性福爾馬林B.2.5%戊二醛C.4%重鉻酸鉀D.1%鋨酸【參考答案】BD【解析】A.福爾馬林主要用于光鏡固定,電鏡固定效果差。B.戊二醛能良好保存超微結(jié)構(gòu),是常用電鏡固定液,正確。C.重鉻酸鉀多用于混合固定液(如Zenker液),非電鏡獨(dú)立固定劑。D.鋨酸可固定脂類并增強(qiáng)電子密度,常用于后固定,正確。26.6.下列組織處理方法中,適用于脂肪染色的是?()A.冷凍切片B.石蠟切片經(jīng)二甲苯透明C.火棉膠包埋D.碳蠟包埋【選項】A.冷凍切片B.石蠟切片經(jīng)二甲苯透明C.火棉膠包埋D.碳蠟包埋【參考答案】AD【解析】A.冷凍切片無需有機(jī)溶劑處理,可保留脂肪,適用于蘇丹染色,正確。B.石蠟切片需經(jīng)二甲苯透明,會溶解脂肪,不適用。C.火棉膠包埋仍需脫水透明,脂肪易丟失。D.碳蠟(聚乙烯醇)為水溶性包埋劑,能較好保存脂肪,正確。27.7.HE染色中,影響細(xì)胞核著色深淺的關(guān)鍵因素包括?()A.蘇木素染液的pH值B.蘇木素的氧化程度C.分化時間D.伊紅染色溫度【選項】A.蘇木素染液的pH值B.蘇木素的氧化程度C.分化時間D.伊紅染色溫度【參考答案】ABC【解析】A.蘇木素在堿性環(huán)境下(pH>7)易結(jié)合核染色質(zhì),正確。B.充分氧化的蘇木素(如成熟染液)染色力強(qiáng),正確。C.分化時間過長會導(dǎo)致核著色淺,反之則深,正確。D.伊紅染細(xì)胞質(zhì),溫度主要影響染色速度,對核著色無直接影響。28.8.下列試劑中,可作為組織脫水劑使用的是?()A.福爾馬林B.無水乙醇C.甘油D.丙酮【選項】A.福爾馬林B.無水乙醇C.甘油D.丙酮【參考答案】BD【解析】A.福爾馬林為固定劑,無脫水作用。B.無水乙醇是常規(guī)脫水劑,可取代組織中的水,正確。C.甘油常用于封固或透明,非脫水劑。D.丙酮脫水能力比乙醇強(qiáng),但易使組織變脆,仍屬脫水劑,正確。29.9.下列染色方法中,可用于顯示含鐵血黃素的是?()A.普魯士藍(lán)染色B.革蘭染色C.抗酸染色D.Perls染色【選項】A.普魯士藍(lán)染色B.革蘭染色C.抗酸染色D.Perls染色【參考答案】AD【解析】A.普魯士藍(lán)染色是三價鐵的特異性染色法,正確。B.革蘭染色用于細(xì)菌分類(如G?/G?),無關(guān)。C.抗酸染色用于結(jié)核桿菌等,無關(guān)。D.Perls染色即普魯士藍(lán)染色的別名,正確。30.10.關(guān)于組織透明劑的敘述,正確的是?()A.二甲苯是最常用的透明劑B.苯可替代二甲苯但毒性更大C.氯仿不適用于小塊組織透明D.水不能作為透明劑使用【選項】A.二甲苯是最常用的透明劑B.苯可替代二甲苯但毒性更大C.氯仿不適用于小塊組織透明D.水不能作為透明劑使用【參考答案】ABD【解析】A.二甲苯與石蠟相容性佳,是常規(guī)透明劑,正確。B.苯透明效果類似但毒性強(qiáng),臨床少用,正確。C.氯透適用于大塊組織(如腦),對小組織亦有效,表述錯誤。D.水不能替代有機(jī)透明劑使組織透亮,正確。31.下列有關(guān)病理特殊染色方法的描述,正確的是:【選項】A.PAS染色能顯示組織中的糖原和中性黏液物質(zhì)B.剛果紅染色用于顯示淀粉樣物質(zhì),在偏光顯微鏡下呈蘋果綠色雙折光C.蘇木精-伊紅(HE)染色中,細(xì)胞核被染成紅色,細(xì)胞質(zhì)被染成藍(lán)色D.網(wǎng)狀纖維染色(如Gordon-Sweets法)常用銀氨溶液浸染,使網(wǎng)狀纖維呈黑色E.抗酸染色中,結(jié)核分枝桿菌被染成藍(lán)色,背景呈紅色【參考答案】A、B、D【解析】A正確:PAS染色通過高碘酸氧化多糖的羥基,與無色品紅結(jié)合形成紫紅色產(chǎn)物,用于顯示糖原、中性黏液等。B正確:剛果紅與淀粉樣物質(zhì)結(jié)合后,在偏光顯微鏡下呈現(xiàn)特征性蘋果綠色雙折光。C錯誤:HE染色中蘇木精將細(xì)胞核染成藍(lán)色,伊紅將細(xì)胞質(zhì)染成紅色。D正確:Gordon-Sweets法利用銀氨溶液使網(wǎng)狀纖維還原析出銀顆粒呈黑色。E錯誤:抗酸染色中結(jié)核分枝桿菌被染成紅色,背景為藍(lán)色(常用亞甲藍(lán)復(fù)染)。32.關(guān)于組織固定液的選擇,正確的是:【選項】A.中性甲醛是最常用的固定液,適用于大多數(shù)常規(guī)病理標(biāo)本B.Bouin液含苦味酸,適用于胚胎組織及結(jié)締組織染色C.Zenker液含升汞,固定后需流水沖洗以去除沉淀D.95%乙醇是快速冷凍切片的理想固定液E.Carnoy液含冰醋酸,能有效固定糖原但會溶解紅細(xì)胞【參考答案】A、B、C、E【解析】A正確:中性甲醛滲透性好,是常規(guī)病理標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)固定液。B正確:Bouin液對胚胎組織和結(jié)締組織固定效果佳,但苦味酸易導(dǎo)致組織硬化。C正確:Zenker液含重鉻酸鉀和升汞,固定后需流水沖洗12小時以去除汞結(jié)晶。D錯誤:95%乙醇易使組織收縮,不適于冷凍切片;冷凍切片多用丙酮或甲醇短時固定。E正確:Carnoy液中的冰醋酸可固定糖原,但會溶解紅細(xì)胞。33.下列哪些是免疫組織化學(xué)技術(shù)的關(guān)鍵步驟或注意事項?【選項】A.抗原修復(fù)可通過熱誘導(dǎo)表位修復(fù)(HIER)或酶消化法實(shí)現(xiàn)B.一抗孵育時間越長,染色特異性越強(qiáng)C.內(nèi)源性過氧化物酶需用3%過氧化氫甲醇溶液阻斷D.DAB顯色后需用蘇木精復(fù)染細(xì)胞核以輔助定位E.抗體稀釋液通常選擇含1%牛血清白蛋白(BSA)的PBS緩沖液【參考答案】A、C、D、E【解析】A正確:抗原修復(fù)可解除甲醛固定導(dǎo)致的抗原掩蔽,常用胃蛋白酶消化或微波加熱法。B錯誤:一抗孵育時間過長可能導(dǎo)致非特異性結(jié)合,需嚴(yán)格按說明書操作。C正確:3%過氧化氫甲醇可阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性,減少假陽性。D正確:DAB顯色后蘇木精復(fù)染可清晰顯示細(xì)胞核與陽性信號的位置關(guān)系。E正確:BSA可減少非特異性吸附,提高抗體結(jié)合特異性。34.細(xì)胞學(xué)檢查適用于以下哪些標(biāo)本類型?【選項】A.漿膜腔積液離心沉淀物B.宮頸刮片C.細(xì)針穿刺甲狀腺結(jié)節(jié)D.胃鏡活檢組織塊E.痰液涂片【參考答案】A、B、C、E【解析】A正確:漿膜腔積液經(jīng)離心后取沉淀物涂片,可用于檢測腫瘤細(xì)胞。B正確:宮頸刮片是宮頸癌篩查的經(jīng)典細(xì)胞學(xué)標(biāo)本。C正確:細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)(FNAC)適用于甲狀腺、乳腺等淺表腫物。D錯誤:胃鏡活檢為組織病理學(xué)標(biāo)本,需石蠟包埋切片。E正確:痰液涂片常用于肺癌細(xì)胞學(xué)篩查。35.顯微鏡使用與維護(hù)的注意事項包括:【選項】A.油鏡使用后需立即用二甲苯擦拭鏡頭B.顯微鏡光源亮度應(yīng)逐步調(diào)節(jié)以避免突變損傷燈泡C.高倍鏡觀察時可直接用粗調(diào)節(jié)螺旋調(diào)焦D.標(biāo)本觀察時應(yīng)從低倍鏡開始,逐步轉(zhuǎn)至高倍鏡E.物鏡轉(zhuǎn)換時應(yīng)手握物鏡轉(zhuǎn)盤而非直接扳動物鏡【參考答案】B、D、E【解析】A錯誤:油鏡清潔應(yīng)先用擦鏡紙蘸少量二甲苯輕拭,避免二甲苯殘留腐蝕鏡片。B正確:突然高亮度易縮短燈泡壽命,建議緩慢調(diào)節(jié)。C錯誤:高倍鏡焦距短,粗調(diào)易壓碎玻片,應(yīng)使用細(xì)調(diào)節(jié)螺旋。D正確:低倍鏡視野大、景深長,利于快速定位目標(biāo)區(qū)域。E正確:直接扳動物鏡可能導(dǎo)致光軸偏移,影響成像質(zhì)量。三、判斷題(共30題)1.用于電鏡觀察的組織標(biāo)本固定首選中性緩沖甲醛溶液,因其能更好地保存超微結(jié)構(gòu)?!具x項】正確()錯誤()【參考答案】錯誤【解析】中性緩沖甲醛溶液主要用于常規(guī)光鏡標(biāo)本固定,而電鏡標(biāo)本需使用戊二醛和鋨酸雙固定才能有效保存超微結(jié)構(gòu)。甲醛分子量較大,滲透慢,無法滿足電鏡對細(xì)胞器細(xì)微結(jié)構(gòu)的保存要求。2.梯度乙醇脫水時,應(yīng)從高濃度向低濃度逐步進(jìn)行以避免組織過度收縮。【選項】正確()錯誤()【參考答案】錯誤【解析】梯度脫水必須從低濃度(如70%)向高濃度(如無水乙醇)逐步過渡。若反向操作,高濃度乙醇會迅速抽取組織水分,導(dǎo)致細(xì)胞收縮變形甚至脆裂,影響后續(xù)切片質(zhì)量。3.PAS染色中,過碘酸的作用是氧化組織中的糖原生成醛基,便于后續(xù)與無色品紅結(jié)合顯色。【選項】正確()錯誤()【參考答案】正確【解析】過碘酸可特異性氧化糖類1,2-乙二醇基形成雙醛基,醛基與Schiff試劑(無色品紅)結(jié)合生成紫紅色復(fù)合物,從而定位糖原或黏多糖分布。4.石蠟包埋時,包埋箱溫度應(yīng)設(shè)定為高于石蠟熔點(diǎn)10℃以上以保證充分浸透。【選項】正確()錯誤()【參考答案】錯誤【解析】包埋箱溫度通常比石蠟熔點(diǎn)高2-3℃(如常規(guī)熔點(diǎn)為56-58℃的石蠟設(shè)定60℃)。過高溫度會導(dǎo)致組織變硬、抗原損傷,且蠟液黏度降低反而影響支撐效果。5.免疫組化染色中,抗原修復(fù)步驟僅適用于甲醛固定、石蠟包埋的標(biāo)本?!具x項】正確()錯誤()【參考答案】錯誤【解析】冷凍切片、其他固定劑(如戊二醛)處理的標(biāo)本同樣可能因蛋白交聯(lián)掩蓋抗原表位,需通過酶消化或熱誘導(dǎo)表位修復(fù)(HIER)暴露抗原,并非僅限甲醛固定標(biāo)本。6.HE染色中蘇木素主要使細(xì)胞質(zhì)呈藍(lán)色,伊紅使細(xì)胞核呈紅色?!具x項】正確()錯誤()【參考答案】錯誤【解析】蘇木素為堿性染料,通過明礬媒染后帶正電荷,主要結(jié)合DNA/RNA等酸性成分使細(xì)胞核呈藍(lán)色;伊紅為酸性染料,結(jié)合堿性蛋白使胞質(zhì)/膠原呈紅色。題干描述完全顛倒。7.脫水不徹底可直接導(dǎo)致石蠟切片時組織碎裂,但不影響染色效果?!具x項】正確()錯誤()【參考答案】錯誤【解析】脫水不完全會使組織殘留水分,阻礙石蠟浸透,不僅切片易碎裂,后續(xù)染色中水溶性物質(zhì)(如未結(jié)合的固定劑)也會干擾染料附著,導(dǎo)致染色不均或脫片。8.冷凍切片技術(shù)適用于需快速病理診斷的術(shù)中標(biāo)本,但不宜長期保存?!具x項】正確()錯誤()【參考答案】正確【解析】冷凍切片通過低溫速凍固化組織,可在15分鐘內(nèi)完成制片供病理診斷,但冰晶易破壞細(xì)胞形態(tài),且未經(jīng)過石蠟包埋的標(biāo)本難以長期保存組織結(jié)構(gòu)。9.Masson三色染色中,膠原纖維被染成紅色,肌纖維染成藍(lán)色?!具x項】正確()錯誤()【參考答案】錯誤【解析】Masson染色中,麗春紅-酸性品紅復(fù)合染料使肌纖維呈紅色,苯胺藍(lán)或亮綠使膠原纖維呈藍(lán)色(或綠色),題干描述的染色結(jié)果相反,屬常見記憶混淆點(diǎn)。10.廢棄的二甲苯必須用專用容器密封收集,不可直接倒入下水道。【選項】正確()錯誤()【參考答案】正確【解析】二甲苯屬于易燃有毒有機(jī)溶劑,直接傾倒會污染環(huán)境并危害人體健康。按《危險廢物管理條例》,需用防漏容器標(biāo)識存放,交由專業(yè)機(jī)構(gòu)處理,實(shí)驗(yàn)室須嚴(yán)格執(zhí)行。11.中性緩沖福爾馬林是電鏡標(biāo)本固定的首選固定液。【選項】正確()錯誤()【參考答案】錯誤【解析】錯誤。中性緩沖福爾馬林廣泛用于常規(guī)病理標(biāo)本的光鏡組織固定,因其能保持組織形態(tài)并減少甲醛色素沉淀。而電鏡標(biāo)本固定需使用戊二醛和鋨酸等專用固定劑,以實(shí)現(xiàn)超微結(jié)構(gòu)的高精度保存,中性福爾馬林無法滿足電鏡分辨率要求。12.HE染色中蘇木精染液配制時需加入氧化汞以促進(jìn)蘇木精氧化成熟?!具x項】正確()錯誤()【參考答案】正確【解析】正確。Harris蘇木精的配制需加入氧化汞作為氧化劑,使蘇木精轉(zhuǎn)化為具有染色能力的蘇木紅,此過程稱為“成熟”。未充分氧化的蘇木精染色力弱且易沉淀,氧化汞可加速反應(yīng),但需嚴(yán)格控制用量以免過度氧化導(dǎo)致染色偏藍(lán)。13.Masson三色染色中,膠原纖維被染成紅色,肌纖維染成藍(lán)色?!具x項】正確()錯誤()【參考答案】錯誤【解析】錯誤。Masson三色染色中,膠原纖維呈藍(lán)色或綠色(取決于配方),肌纖維和細(xì)胞質(zhì)呈紅色,細(xì)胞核呈棕黑色?;煜R蛉旧襟E差異導(dǎo)致,實(shí)際操作中需嚴(yán)格控制染色時間及分化程度。14.免疫組化染色中,抗原熱修復(fù)可選擇EDTA緩沖液(pH9.0)作為修復(fù)液?!具x項】正確()錯誤()【參考答案】正確【解析】正確。EDTA堿性修復(fù)液(pH8.0-9.0)適用于多數(shù)核抗原(如Ki-67、p53)的修復(fù),其螯合作用能解離甲醛交聯(lián)的鈣離子,暴露出抗原表位。而pH6.0的檸檬酸鹽緩沖液則對膜/胞質(zhì)抗原更有效,需根據(jù)靶抗原特性選擇修復(fù)液。15.冷凍切片時,組織置于-20℃速凍可完全避免冰晶形成?!具x項】正確()錯誤()【參考答案】錯誤【解析】錯誤。-20℃冷凍速度不足,組織內(nèi)水分仍會形成較大冰晶,導(dǎo)致細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞。
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