第九章維生素類藥物的分析

AnalysisofVitamins⊙維生素（vitamins）是維持人類機體正常代謝功能所必需的一類活性物質(zhì)，主要用于機體的能量轉(zhuǎn)移和代謝調(diào)節(jié)?！洋w內(nèi)不能自行合成，須從食物中攝取。⊙維生素有vitaminA、B、C、D、E、K、葉酸、煙酸、煙酰胺等數(shù)十種。均屬有機化合物，并非同屬一類化合物，各具不同的理化性質(zhì)和生理作用?！寻慈芙庑苑诸悺獌纱箢悾? 脂溶性維生素:維生素A、D、E、K等; 水溶性維生素:維生素B1、B2、C、煙酸、泛酸和葉酸等。分析方法有：生物法、微生物法、化學法和物理化學法。依據(jù)藥物的生物特性及理化性質(zhì)進行建立。⊙維生素A⊙維生素B1⊙維生素C⊙維生素D⊙維生素E⊙第一節(jié)維生素A(VitA)Retinol(視黃醇，VitA1)VAacetate(醋酸酯)VApolmitate(棕櫚酸酯)912345678一、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)晶型及熔點黃色棱形結(jié)晶62℃~64℃淡黃色棱形結(jié)晶57℃~58℃無定型或結(jié)晶28℃～29℃天然維生素A主要是全反式維生素A具有一個共軛多烯醇/酯側(cè)鏈的環(huán)己烯結(jié)構(gòu)：

尚有多種其它(多烯順反)異構(gòu)體

VitA及異構(gòu)體：名稱形式紫外吸收（乙醇）相對生物效價（%）順反異構(gòu)λmax（nm）維生素A醇醋酸酯325325.518321584100全反式新維生素Aa醇醋酸酯32832816861431752-順新維生素Ab醇醋酸酯319320.51376972.7244-順新維生素Ac醇醋酸酯311310.5907.8858.8152,4-二順異維生素Aa醇醋酸酯32332314771199216-順異維生素Ab醇醋酸酯3243241379806.5242,6-二順異構(gòu)體具有相似的化學性質(zhì)，光譜特性和生物效價不同溶解性：與氯仿、乙醚、環(huán)己烷或石油醚能任意混合， 在乙醇中微溶，在水中不溶。912345678溶于植物油中供臨床使用。不穩(wěn)定性：有多個不飽和鍵，易被空氣中氧或氧化劑氧化， 易被紫外光裂解， 特別在加熱和金屬離子存在時，更易氧化變質(zhì)。 生成無生物活性的環(huán)氧化合物、維生素A醛。912345678912345678對酸不穩(wěn)定，遇Lewis或無水氯化氫乙醇液，可發(fā)生脫水反應，生成脫水維生素A： 酯較穩(wěn)定。密封在涼暗處保存外，還需充氮氣或加入合適的抗氧劑。

紫外吸收特性共軛多烯醇的側(cè)鏈結(jié)構(gòu)，λmax(nm):

325nm～328nm， 可鑒別和含量測定。與三氯化銻呈色在無水無醇氯仿中與三氯化銻試劑作用，

生成不穩(wěn)定的碳正離子，顯藍色，漸變成紫紅色。

鑒別、比色法含量測定。二、鑒別試驗：紫外吸收與三氯化銻呈色VitA含量表示IU(internationalUnit)國際單位：1IUofvitaminAisequivalenttotheactivityof0.300μgofall-(E)-retinol.

1IUofvitaminAisequivalenttotheactivityof:0.344μgofall-(E)-retinolacetate,0.359μgofall-(E)-retinolpropionate,0.550μgofall-(E)-retinolpalmitate,1mgofretinolequivalentisequivalentto3333IU.三、含量測定：效價(IU/g)： 按WHO規(guī)定VAacetate

VAalcohol 效價(IU/g)2.907×106

3.33×106 1gpureVAacetate≈2.907×106IU采用紫外吸收光譜法測定換算因子：每1百分吸收值()所相當?shù)男r(IU/g)值溶劑維生素A醋酸酯維生素A醇λmax（nm）換算因子λmax（nm）換算因子環(huán)己烷32815301900326.517551900異丙醇3251600183032518201830第一法（等波長差法）：用于純度高的維生素A醋酸酯

λl＝328nm，λ2=316nm，λ3＝340nm，Δλ=12nm

λ3－λl＝λl－λ2。測定VAacetate→環(huán)己烷為溶劑，測定λmax，及五波長吸光度：300、316、328、340、360干擾排除與測定λmax在326～329之間根據(jù)判定值確定計算方法：第二法:等吸收比法；測定波長：300，310，325，334nm維生素A醇形式測定λ1＝325nm，λ2＝310nm，λ3＝334nm。第一法未通過；λmax不在326～329nm，必須經(jīng)皂化：

酯乙醚提取VA醇，洗滌，過濾溶于異丙醇Aλ2λ1λ3nmAλ2λ1λ3nmVitAsamplepureVAacetateimpurities校正公式由來A325(校正)=6.815A325-2.555A310-4.260A334λmax在323～327之間判定法?第二節(jié)維生素B1(VitB1)ThiamineHydrochloride鹽酸硫胺氯化4-甲基-3[(2-甲基-4-氨基-5-嘧啶基)甲基]-5-(2-羥基乙基)噻唑鎓鹽酸鹽

NaOH－H2O硫色素反應噻唑環(huán)在堿性介質(zhì)中可開環(huán)，再與嘧啶環(huán)上的氨基環(huán)合，經(jīng)鐵氰化鉀等氧化劑氧化成具有熒光的硫色素，后者溶于正丁醇中呈藍色熒光。

環(huán)合[O]－2H硫色素Thiochtome生成沉淀反應分子結(jié)構(gòu)中含有雜環(huán)，易與生物堿沉淀劑(碘化鉍鉀、碘化汞鉀、苦味酸等)，硅鎢酸，雷氏鹽等作用形成組成恒定的沉淀維生素B1在堿性加熱條件下反應放出H2S,與Pb(Ac)2試液形成黑色PbS↓含量測定Assay紫外分光光度法：非水溶液滴定法Non-aqueousTitrimetry硫色素熒光法ThiochroneFluoremetry第三節(jié)維生素C(VitC)612345烯二醇結(jié)構(gòu)，具有內(nèi)酯環(huán)，且有2個手性碳原子（C4、5）性質(zhì)極為活潑，且具旋光性。

L-抗壞血酸L-去氫抗壞血酸L-二酮古羅糖酸有生物活性有生物活性無生物活性-2H+2HH2OOH-(H+)50℃藍色H2O-3H2O糠醛-CO2戊糖含量測定＊碘量法＊2,6-二氯靛酚法第四節(jié)維生素D(VitD)抗佝僂病維生素的總稱。已知的維生素D類物質(zhì)有10種之多，均為甾醇的衍生物。

第五節(jié)維生素E(VitE)R1R2﹡﹡VitE(dl-α-TocopherylAcetate)ChP