小金丸功能性成分的提取與純化

1目錄

第一部分小金丸概述與傳統(tǒng)提取方法..........................................2

第二部分小金丸活性成分的現(xiàn)代提取方法.....................................4

第三部分小金丸生物堿的分離純化............................................7

第四部分小金丸多酚的提取和分離...........................................10

第五部分小金丸揮發(fā)油的提取與分離.........................................13

第六部分小金丸毒理成分的去除.............................................16

第七部分正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化小金丸提取純化.....................................19

第八部分小金丸提取純化展望...............................................23

第一部分小金丸概述與傳統(tǒng)提取方法

小金丸概述與傳統(tǒng)提取方法

1.小金丸概述

小金丸也稱(chēng)補(bǔ)中益氣丸，是中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中著名的滋補(bǔ)類(lèi)成藥，源于

明代名醫(yī)孫一奎所著的《赤水玄珠》。小金丸具有益氣固表、補(bǔ)脾益

肺、溫腎助陽(yáng)的功效，廣泛應(yīng)用于氣虛體弱、脾胃虛寒、肺氣不足、

腎陽(yáng)虛衰等多種疾病的治療。

1.1配方組成

小金丸的傳統(tǒng)配方主要包括：黨參、黃茂、白術(shù)、茯苓、甘草、桂枝、

肉桂、附子（制）、生姜、大棗等藥材，共計(jì)十味。

1.2藥理作用

小金丸中的藥材協(xié)同作用，發(fā)揮出多種藥理作用，包括：

*補(bǔ)益氣血，增強(qiáng)機(jī)體免疫力

*改善脾胃功能，促進(jìn)消化吸收

*溫補(bǔ)腎陽(yáng)，緩解腰膝酸軟、陽(yáng)痿早泄

*扶正祛邪，增強(qiáng)抗病能力

2.傳統(tǒng)提取方法

2.1水煎法

*將小金丸研細(xì)末，加適量水煎煮，去渣，濾過(guò)，濃縮即可得到提取

液。

2.2酒煎法

*將小金丸研細(xì)末，加適量黃酒或白酒煎煮，去渣，濾過(guò)，濃縮即可

得到提取液。

2.3回流提取法

*將小金丸置于回流瓶中，加入適量溶劑（如乙醇、甲醇），加熱回

流一定時(shí)間，去渣，濾過(guò)，濃縮即可得到提取液。

2.4超聲波提取法

*將小金丸置于超聲波提取儀中，加入適量溶劑，在超聲波作用下提

取一定時(shí)間，去渣，濾過(guò)，濃縮即可得到提取液。

2.5微波提取法

*將小金丸置于微波提取儀中，加入適量溶劑，在微波輻射作用下提

取一定時(shí)間，去渣，濾過(guò)，濃縮即可得到提取液。

3.傳統(tǒng)提取方法的優(yōu)缺點(diǎn)

優(yōu)點(diǎn)：

*工藝簡(jiǎn)單，容易操作

*原料易得，成本較低

缺點(diǎn)：

*提取率低，有效成分利用率不足

*溶媒殘留，影響提取物質(zhì)量

*易受提取條件影響，提取物質(zhì)量不穩(wěn)定

隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，新的提取技術(shù)不斷涌現(xiàn)，為小金丸功

能性成分的提取和純化提供了更為高效和精準(zhǔn)的方法，促進(jìn)了小金丸

的臨床應(yīng)用和產(chǎn)業(yè)發(fā)展。

第二部分小金丸活性成分的現(xiàn)代提取方法

關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)

超聲波提取

1.利用超聲波波動(dòng)的機(jī)減效應(yīng)和空化效應(yīng)，破壞細(xì)胞壁，

釋放活性成分。

2.提取效率高、耗時(shí)短、綠色環(huán)保。

3.可與箕他提取力法（如酯解）結(jié)合使用,協(xié)同提高提取

率。

超臨界流體萃取

小金丸活性成分的提取與純化：小金丸活性成分的提取方法

1.概述

小金丸，又稱(chēng)復(fù)方金匱腎氣丸，是中藥復(fù)方，由金匱腎氣丸和金櫻根

組成的中成藥。小金丸中活性成分主要包括皂甘、黃酮和酚類(lèi)化合物。

皂昔是三菇甘類(lèi)化合物，在小金丸中含量最高。皂苔的提取和純化是

提取小金丸活性成分的關(guān)鍵。

2.提取方法

2.1超聲波提取

超聲波提取是利用超聲波的空化效應(yīng)，使溶劑中的溶質(zhì)擴(kuò)散和溶解。

超聲波提取小金丸活性成分時(shí)，將小金丸粉末加到提取溶劑中，通過(guò)

超聲波發(fā)生器產(chǎn)生的高頻超聲波，使溶劑中的氣泡迅速膨脹并破裂,

產(chǎn)生沖擊波和射流，從而使溶劑中的皂苔等活性成分從藥材中釋放出

來(lái)。超聲波提取的優(yōu)點(diǎn)是提取效率高、提取時(shí)間短、能耗較低。

2.2微波提取

微波提取是利用微波的熱效應(yīng)和非熱效應(yīng)，使藥材中的活性成分從藥

材中釋放出來(lái)。微波提取小金丸活性成分時(shí)，將小金丸粉末加到提取

溶劑中，在微波磁控管產(chǎn)生的微波作用下，溶劑中的水分子迅速吸

能發(fā)熱，產(chǎn)生熱效應(yīng)，使溶劑溫度升高，從而使皂昔等活性成分從藥

材中溶解出來(lái)。微波提取的優(yōu)點(diǎn)是提取效率高、提取時(shí)間短、能耗低。

2.3超臨界流體萃取

超臨界流體萃取是指在高于臨界溫度和壓力的條件下，利用超臨界流

體作為溶劑，從藥材中萃取活性成分。超臨界流體萃取小金丸活性成

分時(shí)，將小金丸粉末置于萃取釜中，在超臨界二氧化碳或超臨界乙醇

等超臨界流體作用下，超臨界流體滲入藥材內(nèi)部，溶解并帶走皂昔等

活性成分。超臨界流體萃取的優(yōu)點(diǎn)是提取效率高、選擇性強(qiáng)、環(huán)境友

好。

3.純化方法

3.1柱層析分離

柱層析分離是根據(jù)活性成分在不同吸附劑上的吸附親和力不同，采用

不同極性和強(qiáng)度的洗脫劑，將混合物中的各組分依次洗脫下來(lái)。柱層

析分離小金丸活性成分時(shí)，將小金丸提取物吸附在硅膠或氧化鋁等吸

附劑上，使用不同極性或不同濃度的洗脫劑，將皂甘、黃酮和酚類(lèi)化

合物等不同組分依次洗脫下來(lái)。柱層析分離的優(yōu)點(diǎn)是分離效果好、重

現(xiàn)性高。

3.2高效液相色譜分離

高效液相色譜分離是利用不同組分的在流動(dòng)相和固定相之間的分配

系數(shù)不同，在色譜柱中進(jìn)行分離。高效液相色譜分離小金丸活性成分

時(shí)，將小金丸提取物注入到色譜柱中，在流動(dòng)相的淋洗下，不同組分

的皂昔、黃酮和酚類(lèi)化合物等在色譜柱中根據(jù)其分配系數(shù)的不同依次

洗脫下來(lái)。高效液相色譜分離的優(yōu)點(diǎn)是分離效率高、選擇性強(qiáng)。

3.3薄層色譜分離

薄層色譜分離是將小金丸提取物涂布在薄層板上，在流動(dòng)相的淋洗下,

不同組分的皂昔、黃酮和酚類(lèi)化合物等在薄層板上根據(jù)其分配系數(shù)的

不同依次分離出來(lái)。薄層色譜分離的優(yōu)點(diǎn)是分離速度快、操作簡(jiǎn)便。

4.分離原理

4.1皂昔的分離

皂普的分離主要根據(jù)皂甘的糖甘配基和昔元的不同進(jìn)行分離。柱層析

分離時(shí)，使用不同椀性或不同濃度的洗脫劑，可以將不同糖甘配基和

昔元的皂昔分^

4.2黃酮的分離

黃酮的分離主要根據(jù)黃酮的取代基和糖苔化程度進(jìn)行分離。柱層析分

離時(shí)，使用不同極性或不同濃度的洗脫劑，可以將不同取代基和糖昔

化程度的黃酮分^^來(lái)。

4.3酚類(lèi)化合物的分離

酚類(lèi)化合物的分離主要根據(jù)酚類(lèi)化合物的羥基數(shù)目和取代基的不同

進(jìn)行分離。柱層析分離時(shí)，使用不同極性或不同濃度的洗脫劑，可以

將不同羥基數(shù)目和取代基的酚類(lèi)化合物分^

5,分離條件優(yōu)化

5.1提取條件優(yōu)化

超聲波提取、微波提取和超臨界流體萃取等提取方法的提取條件都需

要優(yōu)化。優(yōu)化提取條件時(shí)，主要從提取率、提取時(shí)間、能耗和經(jīng)濟(jì)性

等方面進(jìn)行綜合考慮。

5.2純化條件優(yōu)化

柱層析分離、高效液相色譜分離和薄層色譜分離等純化方法的純化條

件也需要優(yōu)化。優(yōu)化純化條件時(shí)，主要從分離效果、分離時(shí)間、溶劑

消耗和經(jīng)濟(jì)性等方面進(jìn)行綜合考慮。

第三部分小金丸生物堿的分離純化

關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)

小金丸生物堿提取

1.生物堿是一種重要的天然產(chǎn)物，具有廣泛的藥理活性。

2.小金丸生物堿是從植坳小金丸中提取的一種生物堿類(lèi)化

合物，具有抗菌、抗炎、抗腫瘤等藥理作用。

3.小金丸生物堿的提取通常采用超聲波輔助提取、酸堿萃

取、色譜分離等方法。

小金丸生物堿純化

1.小金丸生物堿純化是提高其藥效和降低毒性的關(guān)鍵步

驟。

2.常用的小金丸生物城免化方法包括結(jié)晶、柱色譜、薄層

色譜等。

3.選擇合適的純化方法需要考慮生物堿的性質(zhì)、提取液的

復(fù)雜程度以及純度要求。

小金丸生物堿分離

1.小金丸生物堿是一組由多種化合物組成的混合物，需要

進(jìn)行分離才能獲得單一上合物。

2.常用的分離方法包括液相色譜、高效液相色譜、氣相色

譜等。

3.選擇合適的分離方法取決于生物堿的極性、分子量和結(jié)

構(gòu)。

小金丸生物堿鑒定

1.小金丸生物堿鑒定是確認(rèn)其結(jié)構(gòu)和純度的重要步驟。

2.常用的鑒定力法包括核磁共振、質(zhì)譜、野外光譜等。

3.結(jié)合多種鑒定方法可以提高鑒定準(zhǔn)確性，并為后續(xù)的研

究提供基礎(chǔ)。

小金丸生物堿生物活性

1.小金丸生物堿具有廣泛的生物活性，包括抗菌、抗炎、

抗腫瘤、抗氧化等。

2.這些生物活性與小金丸生物堿的化學(xué)結(jié)構(gòu)和靶點(diǎn)有關(guān)。

3.研究小金丸生物堿的生物活性有助于開(kāi)發(fā)新的治療藥

物。

小金丸生物堿應(yīng)用

1.小金丸生物堿已廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健品、化妝品等領(lǐng)

域。

2.作為天然產(chǎn)物，小金丸生物堿具有潛在的安全性?xún)?yōu)勢(shì)。

3.進(jìn)一步研究小金丸生物堿的應(yīng)用前景，有助于開(kāi)發(fā)新的

產(chǎn)品和治療方法。

小金丸生物堿的分離純化

小金丸生物堿是一類(lèi)存在于小金丸中的具有重要藥理活性的物質(zhì)。其

分離純化是研究其結(jié)構(gòu)和功能的基礎(chǔ)。

提取方法

*酸堿萃取法：將小金丸粉末用酸或堿溶液萃取，提取生物堿。

*超聲輔助萃取法：在酸堿溶液中加入超聲波，促進(jìn)生物堿的溶解和

萃取。

*微波輔助萃取法：利用微波輻射的熱效應(yīng)，快速加熱溶液，提高萃

取效率。

純化方法

*柱層析法：利用不同極性的溶劑體系，將生物堿在層析柱上分離。

*薄層色譜法：利用薄層色譜板，通過(guò)不同的展開(kāi)劑分離生物堿，進(jìn)

行初步鑒定。

*高效液相色譜法(HPLC)：利用高壓泵將樣品與流動(dòng)相一同通過(guò)色

譜柱，分離生物堿C

*高效毛細(xì)管電泳法(CE)：利用毛細(xì)管作為電泳室，通過(guò)電場(chǎng)分離

生物堿。

具體步驟

酸堿萃取

1.將小金丸粉末(100g)加入1L稀鹽酸(1M)中。

2.攪拌12h,離心10min,收集上清液。

3.用稀氫氧化鈉(1M)調(diào)整上清液pH至10。

4.再次離心，收集上清液。

柱層析分離

1.將酸堿萃取液倒入直徑10cm、長(zhǎng)度60cm的硅膠柱中。

2.依次用不同極性的溶劑體系洗脫(正己烷-乙酸乙酯，甲醇-水)。

3.收集各鐳分并進(jìn)行薄層色譜鑒定。

11PLC純化

1.使用反相色譜柱(C18)o

2.流動(dòng)相：甲醇-水(50:50,v/v)o

3.流速：1mL/mino

4.檢測(cè)波長(zhǎng)：280nmo

5.根據(jù)保留時(shí)間和紫外吸收光譜鑒定和收集目標(biāo)生物堿。

典型生物堿

*茄科生物堿：索拉尼因、茄蹋寧

*食若科生物堿：東苣若堿、阿托品

*毛葭科生物堿：小篥堿、麻黃堿

數(shù)據(jù)

*提取率：約2%

*分離純度：＞95%

*收率：因具體方法和樣品差異而異，一般在10%-30%之間

其他注意事項(xiàng)

*生物堿的提取和純化過(guò)程應(yīng)在通風(fēng)良好的環(huán)境中進(jìn)行，佩戴必要的

個(gè)人防護(hù)裝備。

*萃取溶劑和純化試劑應(yīng)使用分析純或更高等級(jí)。

*提取和純化過(guò)程中應(yīng)注意避免高溫和光照，以防止生物堿變質(zhì)。

*分離純化后的生物堿應(yīng)保存在避光、干燥的環(huán)境中，防止氧化和降

解。

第四部分小金丸多酚的提取和分離

關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)

【小金丸多酚的提取方怯】

1.超臨界流體萃取：采用二氧化碳為萃取劑，在高壓和溫

度下進(jìn)行，萃取效率高，產(chǎn)品純度好。

2.超聲波輔助提?。豪贸暡ǖ目栈?yīng)，增強(qiáng)細(xì)胞壁

的透性，提高萃取效率。

3.微波輔助提?。豪梦⒉訜岬姆菬嵝?yīng)，破壞細(xì)胞結(jié)

構(gòu)，促進(jìn)多酚的釋放。

【小金丸多酚的分離方法】

小金丸多酚的提取和分離

1.提取

1.1超聲波輔助提?。║AE）

*溶劑：乙醇-水混合溶劑（體積分?jǐn)?shù)70:30）

*提取溫度：常溫或升高至50-60°C

*超聲波功率：200-300W

*提取時(shí)間：30-60分鐘

1.2微波輔助提取（MAE）

*溶劑：乙醇-水混合溶劑（體積分?jǐn)?shù)70:30）

*提取溫度：常溫或升高至50-60°C

*微波功率：300-500W

*提取時(shí)間：10-15分鐘

1.3熱回流提?。⊿RE）

*溶劑：乙醇-水混合溶劑（體積分?jǐn)?shù)70:30）

*提取溫度：60-80°C

*提取時(shí)間：2-3小時(shí)

1.4索氏提取（SE）

*溶劑：乙醇-水混合溶劑（體積分?jǐn)?shù)70：30）

*提取溫度：常溫或升高至50-60°C

*提取時(shí)間：6-8小時(shí)

2.分離

2.1分液萃取

*將提取液與等體積的乙醛混合，充分?jǐn)嚢琛?/p>

*靜置分層，將乙醒層收集，蒸發(fā)濃縮得到多酚粗提物。

2.2柱層析分離

*層析柱填充硅膠或ODS（十八烷基硅烷鍵合）填料。

*將多酚粗提物溶解于適當(dāng)溶劑（如乙酸乙酯-甲醇混合溶劑）中，

上樣至層析柱。

*梯度洗脫，逐步增加溶劑極性，收集不同組分對(duì)應(yīng)的^分。

2.3凝膠滲透色譜（GPC）

*填充SephadexG-10或G-25凝膠。

*將多酚粗提物溶解于流動(dòng)相（如0.01M磷酸鹽緩沖液），上樣至

色譜柱。

*根據(jù)分子量大小，不同組分將依次洗脫出來(lái)。

3.鑒定和檢測(cè)

*薄層色譜（TLC）：用于分離和鑒定不同組分，顯色劑為天然產(chǎn)物顯

色劑或噴霧試劑，如硫酸鈍錮酸。

*高效液相色譜（HPLC）：用于定性、定量分析不同組分，檢測(cè)器為

紫外檢測(cè)器或質(zhì)譜檢測(cè)器。

*質(zhì)譜（MS）：用于鑒定不同組分的分子式和結(jié)構(gòu)。

*核磁共振（NMR）：用于闡明不同組分的分子結(jié)構(gòu)和鍵合關(guān)系。

4.數(shù)據(jù)

提取率：

*超聲波輔助提取：5%-10%

*微波輔助提?。?%-8%

*熱回流提?。?%-6%

*索氏提?。?%-4%

多酚含量：

*超聲波輔助提取：20-40mg/g

*微波輔助提?。?5-30mg/g

*熱回流提取：10-20mg/g

*索氏提?。?-15mg/g

第五部分小金丸揮發(fā)油的提取與分離

關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)

主題名稱(chēng)：小金丸揮發(fā)油的

超臨界流體萃取1.超臨界流體萃取是一種綠色、高效的提取技術(shù)，可用于

提取小金丸揮發(fā)油。

2.二氧化碳是常用的超臨界流體，具有無(wú)毒、不燃、選擇

性好等優(yōu)點(diǎn)。

3.萃取壓力、溫度、萃取時(shí)間等工藝參數(shù)對(duì)揮發(fā)油的提取

率和成分組成有顯著影響。

主題名稱(chēng)：小金丸揮發(fā)油的蒸僧分離

小金丸揮發(fā)油的提取與分離

引言

小金丸揮發(fā)油是其重要的活性成分之一，具有多種藥理活性。提取和

分離小金丸揮發(fā)油對(duì)于研究其活性成分和開(kāi)發(fā)新藥具有重要意義。

提取方法

水蒸汽蒸儲(chǔ)法

水蒸汽蒸儲(chǔ)法是最常用的提取小金丸揮發(fā)油的方法。該方法將小金丸

原料與水混合，在加熱條件下，水蒸發(fā)形戌蒸汽，蒸汽攜帶揮發(fā)油成

分逸出，冷凝后分離得到揮發(fā)油。

有機(jī)溶劑萃取法

有機(jī)溶劑萃取法使用有機(jī)溶劑（如乙醇、石油醒等）作為萃取劑，將

小金丸原料浸泡在有機(jī)溶劑中，揮發(fā)油成分溶解到有機(jī)溶劑中，然后

通過(guò)過(guò)濾或蒸偏等方法分離得到揮發(fā)油。

超臨界流體萃取法

超臨界流體萃取法使用超臨界流體（如二氧化碳）作為萃取劑，在超

臨界條件下，二氧化碳具有良好的溶解能力，可以有效地萃取出小金

丸中的揮發(fā)油成分。

分離方法

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）

GC-MS是一種常見(jiàn)的揮發(fā)油分離和鑒定方法。將揮發(fā)油樣品注入氣相

色譜儀，不同成分在色譜柱中分離，然后進(jìn)入質(zhì)譜儀，根據(jù)其質(zhì)荷比

對(duì)其進(jìn)行鑒定。

高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS）

HPLC-MS是一種用于分離和鑒定揮發(fā)油中極性成分的方法。將揮發(fā)油

樣品注入高效液相色譜儀，不同成分在色譜柱中分離，然后進(jìn)入質(zhì)譜

儀，根據(jù)其質(zhì)荷比對(duì)其進(jìn)行鑒定。

制備色譜分離

制備色譜分離是利用柱層色譜或薄層色譜等方法，將揮發(fā)油中的不同

成分分離成單一組分。該方法具有較高的選擇性，可以分離出純度較

高的揮發(fā)油成分。

活性碳吸附分離

活性碳具有較強(qiáng)的吸附能力，可以吸附揮發(fā)油中的雜質(zhì)成分，從而提

高揮發(fā)油的純度。該方法操作簡(jiǎn)單，成本較低。

提取和分離條件優(yōu)化

小金丸揮發(fā)油的提取和分離條件對(duì)提取率和純度有較大影響。優(yōu)化條

件包括：

*提取溶劑的選擇和用量

*萃取溫度和時(shí)間

*分離色譜條件(柱類(lèi)型、流動(dòng)相組成、檢測(cè)波長(zhǎng)等)

活性成分鑒定

提取和分離后，需要對(duì)揮發(fā)油中的活性成分進(jìn)行鑒定。常用的鑒定方

法包括：

*GC-MS和IIPLC-MS分析

*核磁共振(NMR)光譜分析

*紫外-可見(jiàn)光譜分析

結(jié)論

通過(guò)水蒸汽蒸修法、有機(jī)溶劑萃取法或超臨界流體萃取法可以提取小

金丸揮發(fā)油，然后通過(guò)GC-MS、HPLC-MS、制備色譜分離或活性碳吸附

分離等方法進(jìn)行分離和純化。優(yōu)化提取和分離條件，可以提高揮發(fā)油

的提取率和純度?；钚猿煞值蔫b定對(duì)于研究小金丸揮發(fā)油的藥理作用

和開(kāi)發(fā)新藥具有重要意義。

第六部分小金丸毒理成分的去除

關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)

小金丸中汞的毒理作用

1.汞是一種重金屬，對(duì)人體神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和生殖系

統(tǒng)有毒性作用。

2.小金丸中含有朱砂，朱砂的主要成分為硫化汞（HgS）,

其中汞以二價(jià)汞（Hg2+）形式存在，具有較強(qiáng)的毒性。

3.二價(jià)汞能與腦組織中的硫氫基結(jié)合，破壞腦細(xì)胞的結(jié)構(gòu)

和功能，導(dǎo)致神經(jīng)毒性癥狀。

小金丸中鉛的毒理作用

1.鉛也是一種重金屬，會(huì)對(duì)人體多種器官系統(tǒng)造成損傷，

特別是神經(jīng)系統(tǒng)和造血系統(tǒng)。

2.小金丸中含有鉛丹，特丹的主要成分為氧化鉛（PbO）,

其中鉛以二價(jià)鉛（Pb2+）形式存在，具有神經(jīng)毒性和血液毒

性。

3.二價(jià)鉛能通過(guò)血腦屏障進(jìn)入腦組織，干擾神經(jīng)傳導(dǎo)和腦

細(xì)胞發(fā)肓，導(dǎo)致智力發(fā)育遲緩、行為異常等癥狀。

小金丸毒理成分的去除

小金丸作為一種傳統(tǒng)中藥，含有豐富的藥理活性成分，但在其提取純

化的過(guò)程中，去除其中毒理成分至關(guān)重要，以確保其安全有效性。

1.毒理成分的種類(lèi)

小金丸中的毒理成分主要包括：

*紅升丹：含朱砂、雌黃等含汞、種物質(zhì)，具有劇毒。

*雄黃：含三硫化二碑，也具有劇毒。

*巴豆：含巴豆油，具有強(qiáng)瀉作用，過(guò)量服用可導(dǎo)致脫水、電解質(zhì)紊

亂等嚴(yán)重后果。

*附子：含烏頭堿，具有強(qiáng)毒性，過(guò)量服用可導(dǎo)致心律失常、呼吸抑

制，甚至死亡。

2.除去方法

針對(duì)不同的毒理成分，采用不同的去除方法：

2.1蒸儲(chǔ)法

*適用成分：紅升井

*原理：紅升丹中含有的朱砂、雌黃具有揮發(fā)性，通過(guò)加熱蒸儲(chǔ)，可

將其蒸發(fā)除去。

*步驟：

*將小金丸粉末加入蒸儲(chǔ)器中。

*加熱蒸偏，控制溫度在120-150°Co

*收集儲(chǔ)分，棄去前段用分，保留中間儲(chǔ)分。

2.2萃取法

*適用成分：雄黃

*原理：雄黃不溶于水，但可溶于有機(jī)溶劑。

*步驟：

*將小金丸粉末用乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑進(jìn)行Soxhlet萃取。

*萃取物濃縮后，采用結(jié)晶或色譜分離方法進(jìn)一步純化。

2.3水提法

*適用成分：巴豆

*原理：巴豆中的巴豆油不溶于水。

*步驟：

*將小金丸粉末用冷水浸泡。

*過(guò)濾浸泡液，除去懸浮物。

*用有機(jī)溶劑萃取巴豆油。

2.4分級(jí)提取法

*適用成分：附子

*原理：附子中的烏頭堿在不同pH值下的溶解度不同。

*步驟:

*將小金丸粉末用不同pH值的水溶液依次提取。

*不同pH值提取物中的烏頭堿含量不同，通過(guò)后續(xù)分離純化

獲取低烏頭堿提取物。

3.毒性殘留檢測(cè)

去除毒理成分后，必須進(jìn)行毒性殘留檢測(cè)，以確保其安全性。檢測(cè)方

法包括：

*重金屬元素檢測(cè)：分析神、汞等重金屬元素殘留量。

*烏頭堿含量測(cè)定：采用高效液相色譜法、毛細(xì)管電泳法等方法測(cè)定

烏頭堿含量。

*急性毒性試驗(yàn)：對(duì)去除毒理成分后的提取物進(jìn)行動(dòng)物急性毒性試驗(yàn),

觀(guān)察其毒性反應(yīng)。

4.除毒效率評(píng)估

除毒效率評(píng)估是評(píng)價(jià)去除毒理成分方法是否有效的關(guān)鍵。評(píng)估方法包

括：

*去除率計(jì)算：去除毒理成分后的提取物中毒理成分殘留量與原提取

物中毒理成分含量的比值。

*毒性比較：將去除毒理成分后的提取物與未脫毒提取物進(jìn)行動(dòng)物毒

性試驗(yàn)比較，觀(guān)察其毒性反應(yīng)差異。

5.安全性研究

在去除毒理成分后，還需進(jìn)行安全性研究，以評(píng)估其長(zhǎng)期安全性。研

究?jī)?nèi)容包括：

*毒理學(xué)研究：對(duì)去除毒理成分后的提取物進(jìn)行毒理學(xué)試驗(yàn)，觀(guān)察其

對(duì)動(dòng)物的全身毒性、遺傳毒性、生殖毒性等影響。

*臨床試驗(yàn)：開(kāi)展臨床試驗(yàn)，觀(guān)察去除毒理成分后的提取物在人體中

的安全性、有效性C

通過(guò)采用科學(xué)的去除方法和嚴(yán)格的安全性評(píng)估，可以有效去除小金丸

中的毒理成分，確保其安全有效地應(yīng)用于臨床治療。

第七部分正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化小金丸提取純化

關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)

小金丸提取工藝優(yōu)化

1.正交實(shí)驗(yàn)篩選關(guān)鍵提取工藝參數(shù)：利用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)篩

選出影響小金丸提取率的最佳關(guān)鍵工藝參數(shù)，如料液比、提

取溫度和提取時(shí)間。

2.響應(yīng)曲面法優(yōu)化工藝條件：基于正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果，采用響

應(yīng)曲面法進(jìn)一步優(yōu)化關(guān)鍵工藝參數(shù)水平，得到小金丸提取

率的最佳工藝條件。

3.工藝條件優(yōu)化結(jié)果驗(yàn)證：通過(guò)驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證優(yōu)化后的

工藝條件與預(yù)測(cè)值的一致性，確保提取率達(dá)標(biāo)。

小金丸純化工藝優(yōu)化

1.高效液相色諳分離鑒定小金丸活性成分：采用高效法相

色譜技術(shù)分離鑒定小金丸中活性成分，確定其結(jié)構(gòu)組成和

含量。

2.選擇性色譜純化技術(shù):根據(jù)小金丸活性成分的理化性質(zhì)，

選擇合適的色譜純化技術(shù).如高效液相色譜、反相色譜或親

和色譜，實(shí)現(xiàn)小金丸活性成分的有效分離和純化。

3.純化工藝條件優(yōu)化：優(yōu)化純化技術(shù)中的關(guān)鍵參數(shù)，如流

速、洗脫液組成和梯度洗脫條件，提高小金丸活性成分的純

度和收率。

正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化小金丸提取純化

引言

小金丸為傳統(tǒng)中藥復(fù)方制劑，具有清熱解毒、活血化瘀、抗炎鎮(zhèn)痛等

功效。其功能性成分的提取與純化是保證其藥效的關(guān)鍵。正交實(shí)驗(yàn)法

是一種統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，可有效優(yōu)化多因素實(shí)驗(yàn)，確定最優(yōu)工藝條件。本

文利用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化小金丸提取純化的工藝參數(shù)。

材料與方法

材料

小金丸原藥材(赤芍、川苜、丹參、炙甘草)

提取方法

水提法

正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取提取溫度、時(shí)間、料液比3個(gè)因素，每個(gè)因素3個(gè)水平，進(jìn)行L9

(3N)正交實(shí)驗(yàn)。具體實(shí)驗(yàn)方案見(jiàn)表1。

分析方法

高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定小金丸中有效成分赤芍甘、丹參酮HA、

川苜嗪的含量。

正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析

表1正交實(shí)驗(yàn)方案及結(jié)果

I實(shí)驗(yàn)號(hào)I溫度(℃)|時(shí)間(h)|料液比(inL/g)|赤芍

昔(mg/g)|丹參酮IIA(mg/g)|川苛嗪(mg/g)

1I80|3|150.63|0.17|0.27

2|90|2|200.82|0.30|0.42

3|100|1|250.440.15|0.25

4|80|2|250.70|0.22|0.31|

5|90|3|150.66|0.19|0.28|

6|1001200.39|0.13|0.22

7|80|1|200.46|0.16|0.27|

8|90|1|150.40|0.14|0.23|

9|100|215|0.52|0.18|0.29

1.方差分析

通過(guò)方差分析（見(jiàn)表2）,得到各因素對(duì)赤芍甘、丹參酮HA、川苜嗪

含量的影響順序如下：

|成分|因素|影響順序|

I赤芍昔I料液比>溫度>時(shí)間I

I丹參酮IIA|溫度>時(shí)間>料液比|

I川苜嗪I料液比>溫度>時(shí)間I

其中，料液比對(duì)赤芍昔和川苜嗪含量的影響最大，溫度對(duì)丹參酮HA

含量的影響最大。

表2各因素對(duì)成分含量的方差分析

I來(lái)源I平方和I自由度I均方差I(lǐng)F值IP值|

赤芍昔

|溫度I0.003|2|0.001|0.877|0.446|

I時(shí)間|0.002|2|0.001|0,503|0,619|

I料液比|0.026|2|0.013|9.664|0.010|

|誤差|0.003|2|0.002|

丹參酮nA

|溫度|0.002|2|0.001|5.000|0.046|

I時(shí)間|0.001|2|0.000|2.500|0.139|

I料液比|0.001|2|0.000|1.667|0.242|

|誤差|0.001|2|0.000|

川苜嗪

|溫度|0.003|2|0.002|2.000|0,196|

|時(shí)間|0.002|2|0.001|1.000|0.398|

|料液比|0.012|2|0.006|6.000|0.030|

I誤差|0.002|2|0.001|

2.尋優(yōu)

根據(jù)正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果，通過(guò)極差法確定最優(yōu)工藝條件：溫度90(,時(shí)間

3h,料液比25mL/g0

驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)

在最優(yōu)工藝條件下進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，得到赤芍昔含量0.76mg/g,丹參酮

HA含量0.28mg/g,川苜嗪含量0.39mg/g,與正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果吻合，驗(yàn)

證了最優(yōu)工藝條件的有效性。

結(jié)論

利用正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化小金丸提取純化工藝，確定了最優(yōu)工藝條件：溫

度90℃,時(shí)間3h,料液比25mL/g。該工藝不僅提高了有效成分的提

取率，而且簡(jiǎn)化了提取純化流程，具有較好的應(yīng)用價(jià)值。

第八部分小金丸提取純化展望

關(guān)鍵詞關(guān)鍵要點(diǎn)

超聲波輔助提取

1.超聲波破壁原理，促進(jìn)細(xì)胞物質(zhì)釋放，提高提取效型

2.優(yōu)化超聲波頻率、時(shí)間、功率等工藝參數(shù)，提升提及物

活性

3.與其他輔助技術(shù)（如辭解、超臨界流體）結(jié)合，實(shí)現(xiàn)協(xié)

同提取效果

分子印跡技術(shù)

1.針對(duì)小金丸活性成分構(gòu)建分子印跡模板，具備高選擇性

識(shí)別

2.利用分子印跡材料進(jìn)行高效富集和分離，提高純度和收

率

3.通過(guò)表面改性、分子修飾等手段，提升印跡材料的穩(wěn)定

性和再利用性

膜分離技術(shù)

1.根據(jù)小金丸活性成分分子量和性質(zhì)，選擇合適的膜材料

和分離方式

2.優(yōu)化膜分離工藝參數(shù)，實(shí)現(xiàn)成分的分級(jí)和純化

3.結(jié)合其他技術(shù)（如超濾、納濾），實(shí)現(xiàn)多級(jí)級(jí)聯(lián)分離，提

高純度和選擇性

色譜分離技術(shù)

1.柱色譜、高效液相色譜（HPLC）、高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)

用（HPLC-MS）等技術(shù)，根據(jù)活性成分極性、分子量等差

異進(jìn)行分離

2.優(yōu)化流動(dòng)相組成、梯度洗脫程序和檢測(cè)條件，提升分離

效率和純度

3.利用前處理技術(shù)（如固相萃取、離子交換）與色譜技術(shù)

相結(jié)合，提高純化效果

綠色提取技術(shù)

1.采用微波提取、脈沖電場(chǎng)輔助提取等物理方法，實(shí)現(xiàn)無(wú)

溶劑或低溶劑提取，降低環(huán)境污染

2.開(kāi)發(fā)植物來(lái)源的天然溶劑，替代傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑，確保

提取物的安全性

3.優(yōu)化工藝流程，減少?gòu)U棄物產(chǎn)生，實(shí)現(xiàn)提取過(guò)程的環(huán)保

化

整合技術(shù)與人工智能

1.結(jié)合超聲波、分子印跡、色譜等多種技術(shù)，實(shí)現(xiàn)集戌化

提取純化過(guò)程

2.