一、工作簡況

（一）任務(wù)來源、修訂單位、修訂人

1、任務(wù)來源：食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)整合工作方案（2014年-2015年），項(xiàng)目編號為

ZHENGHE-2014-267

2、修訂單位：北京市營養(yǎng)源研究所

3、主要修訂人：李東、何梅、葉穎慧、高寶華、崔亞娟、王夢倩、唐華澄。

（二）簡要起草過程

2014年食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)整合工作方案（2014年-2015年）將《GB/T5009.124-2003食品

中氨基酸的測定》列入制修訂計(jì)劃。本標(biāo)準(zhǔn)起草分3個(gè)階段：國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)收集及匯總、標(biāo)準(zhǔn)修定

及驗(yàn)證階段和形成征求意見稿。

二、國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)情況

目前國內(nèi)外發(fā)布的關(guān)于氨基酸檢測的標(biāo)準(zhǔn)情況見表1。

表1國內(nèi)外氨基酸測定標(biāo)準(zhǔn)列表

分類標(biāo)準(zhǔn)號標(biāo)準(zhǔn)名稱

GB/T5009.124-2003食品中氨基酸的測定

NY/T1618-2008鹿茸中氨基酸的測定氨基酸分析儀法

國內(nèi)NY/T7649-1987谷物籽粒氨基酸測定的前處理方法

標(biāo)準(zhǔn)SN/T0930-2000進(jìn)出口花粉中全氨基酸的測定方法氨基酸自動分析儀法

GB/T18654.11-2008養(yǎng)殖魚類種質(zhì)檢驗(yàn)第11部分：肌肉中主要氨基酸含量的測定

GB/T18246-2000飼料中氨基酸的測定

國際AOAC994.12Aminoacidsinfeeds

標(biāo)準(zhǔn)ISO13903AnimalfeedingstuffsDeterminationofaminoacidcontent

以上標(biāo)準(zhǔn)主要測定方法均為酸水解-氨基酸分析儀法。

三、標(biāo)準(zhǔn)中各項(xiàng)主要技術(shù)修改內(nèi)容的依據(jù)及方法驗(yàn)證

（一）標(biāo)準(zhǔn)中各項(xiàng)主要技術(shù)修改內(nèi)容的依據(jù)

本標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容有：1范圍、2原理、3試劑和材料、4儀器和設(shè)備、5分析步驟、6分

析結(jié)果的表述、7精密度、8其他，以及附錄A混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)工作液色譜圖。

1范圍

修訂后內(nèi)容：

（1）、刪除了原標(biāo)準(zhǔn)1范圍中“本標(biāo)準(zhǔn)不適用于蛋白質(zhì)含量低的水果、蔬菜、飲料和淀粉

類食品中氨基酸的測定。”及“其最低檢出限為10pmol?！?/p>

修訂原因及依據(jù)：

(1)、修訂后標(biāo)準(zhǔn)5分析步驟中增加了對于蛋白質(zhì)含量低的水果、蔬菜、飲料和淀粉類食品

的分析測定步驟，并對檢出限和定量限做了規(guī)定。

(2)、“其最低檢出限為10pmol”移至“8其他”部分，對檢出限重新規(guī)定。

3試劑和材料

修訂后內(nèi)容：

3.1.6不同pH和離子強(qiáng)度的洗脫用緩沖溶液：向儀器廠商購買或參照儀器說明書配制。

3.1.7茚三酮溶液：向儀器廠商購買或參照儀器說明書配制。

修訂原因及依據(jù)：

原標(biāo)準(zhǔn)3試劑中給出了緩沖液及茚三酮溶液的具體配制方法，但不同品牌、不同型號的儀

器緩沖溶液和茚三酮溶液的配制方法是不同的。因此，若使用者按標(biāo)準(zhǔn)中給出溶液配制方法操作，

可能造成色譜峰無法完全分離的現(xiàn)象。此外，市場上有配制好的儀器配套溶液出售，購買后可直

接上機(jī)使用。

3.3標(biāo)準(zhǔn)品

修訂后內(nèi)容：

3.3.1氨基酸標(biāo)準(zhǔn)品：固體，純度≥98%；

3.3.2混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液（2.5mmol/mL）：經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

修訂原因及依據(jù)：

目前市場上可以直接購買到每一種氨基酸單獨(dú)的標(biāo)準(zhǔn)品及混合氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，使用者可以

根據(jù)自身的經(jīng)濟(jì)實(shí)力和操作水平選擇兩種不同的標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方式。

4儀器和設(shè)備

增加并更新了部分實(shí)驗(yàn)必要的儀器設(shè)備，對部分儀器的精度進(jìn)行了要求。

5分析步驟

5.3試樣水解

修訂后內(nèi)容：

在水解管內(nèi)加6mol/L鹽酸溶液（3.2.1）10mL~15mL（視試樣蛋白質(zhì)含量而定），對于含水

量高的試樣（如牛奶、飲料、水果等），當(dāng)稱樣量大于等于0.5g時(shí)，可先加入等體積的濃鹽酸（3.1.1）

混勻后，用6mol/L鹽酸溶液（3.2.1）補(bǔ)充至10mL。加入苯酚（3.1.2）3滴~4滴，……

……準(zhǔn)確吸取濾液1.0mL于15mL或25mL試管內(nèi)，用試管濃縮儀或平行蒸發(fā)儀在40℃~50℃

減壓干燥。

修訂原因及依據(jù)：

（1）原標(biāo)準(zhǔn)6.2水解對含水量高的試樣及加酸量表述不清。對于稱樣量小于0.5g的樣品，

直接加入10mL6mol/L鹽酸溶液即可。

（2）試管濃縮儀或平行蒸發(fā)儀可以自動控溫，同時(shí)具有振動功能，可防止溶液在抽真空過

程中“爆沸”溢出，比原標(biāo)準(zhǔn)6.2水解中使用的真空干燥器更適宜進(jìn)行真空干燥操作。

（3）目前氨基酸自動分析儀的進(jìn)樣瓶為1ml、1.5mL和2mL，若進(jìn)樣前將殘留物1mLpH2.2

檸檬酸鈉緩沖溶液溶解，待測液略顯不足。參考《GB/T18246-2000飼料中氨基酸的測定》，修

改為“加入1.0mL~5.0mLpH2.2檸檬酸鈉緩沖溶液（3.2.1）溶解”。

（4）由于氨基酸分析儀的管路比普通液相色譜細(xì)，參照《ISO13903Animalfeedingstuffs

Determinationofaminoacidcontent》，改為加入3.0mLpH2.2檸檬酸鈉緩沖溶液溶解后，使用0.2μm

濾膜過濾。

6分析結(jié)果的表述

修訂后內(nèi)容：

樣品中氨基酸的含量按式（1）計(jì)算：

cfVM

X100…………………(1)

im109

修訂原因及依據(jù)：

原標(biāo)準(zhǔn)公式中的過于復(fù)雜，不便于使用者理解和計(jì)算。對公式進(jìn)行了修改，簡化參數(shù)，便于

使用。

7精密度

修訂后內(nèi)容：增加了方法在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)

平均值的10%。

修訂原因及依據(jù)：原標(biāo)準(zhǔn)中沒有精密度的表達(dá)是由7個(gè)實(shí)驗(yàn)室間進(jìn)行重復(fù)性和再現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)確

定的。根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，確定了本標(biāo)準(zhǔn)的平行樣品測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的