紅細(xì)胞血型系統(tǒng)第1頁，共61頁。（優(yōu)選）紅細(xì)胞血型系統(tǒng)第2頁，共61頁。第一節(jié)紅細(xì)胞血型免疫學(xué)基礎(chǔ)第3頁，共61頁。重點提示紅細(xì)胞抗原、抗體概念紅細(xì)胞抗原、抗體特性紅細(xì)胞抗原、抗體分類紅細(xì)胞抗原抗體反應(yīng)特點及其影響因素第4頁，共61頁?？乖ˋg）定義：是指能夠刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答的物質(zhì)，并能與相應(yīng)的免疫應(yīng)答產(chǎn)物在體內(nèi)或體外發(fā)生特異性反應(yīng)。免疫原性-Ag刺激機體使之產(chǎn)生抗體或致敏淋巴細(xì)胞。 反應(yīng)原性-能與相應(yīng)抗體或致敏的淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)合。第5頁，共61頁。抗原（Ag）分類： 根據(jù)性質(zhì)-完全Ag：免疫原性+反應(yīng)原性

半Ag：反應(yīng)原性

與人類關(guān)系-同種Ag：人類個體之間 自身Ag：個體本身 異種Ag：不同種屬之間第6頁，共61頁?？乖瓫Q定簇定義：是呈立體排列的特殊化學(xué)基團，每一抗原可以有多個抗原決定簇（表位）。大多數(shù)存在于抗原表面。是抗原特異性的基礎(chǔ)。糖分子的血型抗原：ABO、Lweis等多肽的血型抗原：Rh、MN等第7頁，共61頁?？贵w（Ab）定義：是機體受到血型抗原刺激后，B細(xì)胞被活化、增殖分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生能與相應(yīng)抗原特異性結(jié)合、并引起免疫反應(yīng)的免疫球蛋白，免疫球蛋白廣泛存在于血液及體液中。

抗體都是免疫球蛋白(Ig)，但免疫球蛋白不一定都是抗體。

血型抗體主要是IgG和IgM。免疫球蛋白：是由漿細(xì)胞合成與分泌的，每種細(xì)胞克隆可以產(chǎn)生一種特異性抗體分子。第8頁，共61頁。

IgG結(jié)構(gòu)

單體(7S)IgG1,IgG2andIgG4IgG3第9頁，共61頁。

IgM結(jié)構(gòu)

五聚體(19S)區(qū)域大(CH4)J鏈C4JChain第10頁，共61頁?？乖贵w反應(yīng)特點高度特異性：最主要的特點可逆性：抗原抗體為非共價鍵結(jié)合，具有相對穩(wěn)定性，在某種條件下可以解離，如熱放散、乙醚放散等。

比例：抗體濃度過低—增加血清量 抗體濃度過高—前帶現(xiàn)象第11頁，共61頁。影響凝集反應(yīng)的因素溫度：多數(shù)抗體有溫度范圍限制。

溫度過高AgAb變性,過低降低生物活性IgM：4~27℃抗體活性較好。 IgG：37℃抗體活性較好。

抗體檢測程序可在不同溫度下進(jìn)行。冷抗體在＜37℃出現(xiàn)，多數(shù)無臨床意義，即在體內(nèi)不能縮短輸入紅細(xì)胞的壽命。第12頁，共61頁。影響凝集反應(yīng)的因素離子強度：低離子強度反應(yīng)介質(zhì)能增加抗體附著速度和抗體連接數(shù)量，減少常規(guī)抗體檢測中所要求的孵育時間。低離子強度可減少紅細(xì)胞周圍陽離子云，使帶負(fù)電荷紅細(xì)胞與帶正電荷IgG充分反應(yīng)。pH值：多數(shù)有臨床意義的抗體最適pH還沒有被最終確認(rèn)。一般認(rèn)為接近于生理pH。如抗D為6.5~7.0。特殊的如抗M為5.5。第13頁，共61頁。影響凝集反應(yīng)的因素孵育時間：血型抗體不同，AgAb結(jié)合達(dá)到平衡時間也不同。所需時間視免疫球蛋白類型及反應(yīng)條件而定。顯著性變量有免疫球蛋白類型、抗原構(gòu)型與抗體Fab位點特異性相互作用。 多數(shù)有臨床意義抗體在37℃孵育30min。低活性抗體或抗原在30min內(nèi)達(dá)不到平衡，可適當(dāng)延長孵育時間；低離子溶液可減少孵育時間；酶介質(zhì)試驗延長時間，可出現(xiàn)非特異性凝集。第14頁，共61頁。第二節(jié)ABO血型系統(tǒng)第15頁，共61頁。最具有臨床意義的血型系A(chǔ)BO血型系統(tǒng)Rh血型系統(tǒng)

第16頁，共61頁。ABO血型系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)1900年KarlLandsteiner首先發(fā)現(xiàn)了人類紅細(xì)胞的同種凝集現(xiàn)象，隨后發(fā)現(xiàn)了人類第一個血型系統(tǒng)—ABO血型。開創(chuàng)了免疫血液學(xué)研究和臨床應(yīng)用新紀(jì)元。

為常規(guī)血型鑒定方法的確立與發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。第17頁，共61頁。ABO血型系統(tǒng)的獨特性質(zhì)Landsteiner原則：紅細(xì)胞上如果缺乏某種抗原，血清中則存在相應(yīng)抗體。規(guī)則抗體。組織抗原：許多組織細(xì)胞上有規(guī)律地存在著A、B、H抗原（消化道、呼吸道、泌尿系統(tǒng)上皮細(xì)胞）以及分泌型人的分泌液（唾液、眼淚、尿液、消化液、膽汁、乳液、羊水、卵巢囊腫液、腹水等）中存在著A、B、H血型物質(zhì)。第18頁，共61頁。ABO血型的定型原則凡紅細(xì)胞上具有A抗原者為A型，有B抗原者為B型，A抗原和B抗原均無者為O型,A抗原和B抗原均有者為AB型。血型紅細(xì)胞抗原血清抗體AA抗-BBB抗-AO無抗-A、BABA、B無第19頁，共61頁。第20頁，共61頁。ABO血型抗原ABO血型基因位于第九對染色體。A基因和B基因編碼的糖基轉(zhuǎn)移酶，分別產(chǎn)生形成A抗原和B抗原的糖分子。O型人紅細(xì)胞缺乏A抗原和B抗原，但帶有大量H抗原，H抗原是A抗原和B抗原的前體物質(zhì)。第21頁，共61頁。第22頁，共61頁。N-乙酰葡萄糖胺N-乙酰半乳糖胺D-半乳糖L-巖藻糖第23頁，共61頁。L-巖藻糖N-乙酰半乳糖胺N-乙酰葡萄糖胺D-半乳糖第24頁，共61頁。

ABO抗原發(fā)育

在胚胎早期A抗原和B抗原就開始產(chǎn)生，到出生時，其抗原數(shù)目大約是成人25～50%，與抗A和抗B試劑血清反應(yīng)比成人弱，18個月后才能充分表現(xiàn)出抗原性。第25頁，共61頁。ABO血型抗體存在于缺少相應(yīng)抗原的人血清中。新生兒ABO抗體很少；無抗體成人罕見。天然抗體：無明確的免疫途徑所產(chǎn)生的抗體。有IgM類（主要是A和B型）和IgG類（主要是O型）。IgM可被唾液中血型物質(zhì)中和。O型-抗A,B：識別A抗原和B抗原表位共同的結(jié)構(gòu)部分，具有交叉反應(yīng)性。第26頁，共61頁。ABO抗體的發(fā)育出生時正常的抗-A抗-B還沒產(chǎn)生或較弱。

3個月左右開始發(fā)育。

5~6歲時具有較高效價。老年人抗體水平一般低于年輕人。第27頁，共61頁。ABO血型的亞型ABO亞型的紅細(xì)胞同屬于一種血型抗原，但在結(jié)構(gòu)上有細(xì)微差異，性能也不完全相同，由于抗原弱在用已知抗體檢測抗原和用已知抗原檢測血清抗體時，部分不符合ABO血型正反定型特點。例A亞型：A抗原減少，與抗A凝集強度減弱，H抗原活性明顯增強。第28頁，共61頁。A1與A2的區(qū)別A1及A2紅細(xì)胞與抗A試劑凝集反應(yīng)結(jié)果均很強，凝集反應(yīng)強度差別不明顯。其血清學(xué)區(qū)別主要依據(jù)雙花扁豆（Dolichosbiflous)種子提取液制備的抗A1與紅細(xì)胞的反應(yīng)來確認(rèn)。在相同試驗條件下，抗A1能凝集A1紅細(xì)胞而不能凝集A2紅細(xì)胞。第29頁，共61頁。其他亞型的特點A3和B3：最大血清學(xué)特征是混合凝集外觀。Ax和Bx：與抗-A或抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清凝集很弱，但與抗-A,B凝集反應(yīng)增強。Am和Bm：與抗-A或抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清不出現(xiàn)凝集反應(yīng)。第30頁，共61頁。幾種A亞型紅細(xì)胞上的A抗原第31頁，共61頁。cisAB雙親中一人為O型，一人為AB型。A基因和B基因位于同一條染色體上。兩個基因可同時繼承和同時遺傳。A抗原強度強于A2B，弱于A1B。B抗原弱，類似B3表型。H抗原性很強。第32頁，共61頁。ABO血型遺傳ABO血型的遺傳為復(fù)等位基因顯性遺傳，其遺傳原則為：ABO血型是由兩個遺傳基因結(jié)合而成。遺傳時絕大多數(shù)情況下，這兩個遺傳基因必然分開。第33頁，共61頁。

ABO血型遺傳第34頁，共61頁。第35頁，共61頁。ABO血型遺傳學(xué)意義診斷和預(yù)防由于母嬰血型不合而引起的新生兒溶血病。組織和器官移植時需血型鑒定和配型。疑難血型鑒定時家系分析。人類學(xué)研究。第36頁，共61頁。第三節(jié)H及Lewis血型系統(tǒng)第37頁，共61頁。H血型系統(tǒng)本系統(tǒng)只有1個H抗原（H1）。

除了罕見的孟買血型（Oh）外，所有人紅細(xì)胞表面都表達(dá)H抗原。H抗原是A抗原和B抗原的前體物質(zhì)，只有H抗原無AB抗原的紅細(xì)胞是O型紅細(xì)胞。

紅細(xì)胞H抗原數(shù)量與ABO血型相關(guān)，O型紅細(xì)胞H抗原數(shù)量最多，而A型、B型紅細(xì)胞上的H抗原絕大部分已被轉(zhuǎn)化，H抗原較弱。第38頁，共61頁。第39頁，共61頁。孟買血型非常少見。缺乏H基因（基因為hh）和分泌基因（基因為sese），不能形成H物質(zhì)。與抗-A，抗-B，抗-H無凝集反應(yīng)，正定型易誤作O型。血清含抗-A、抗-B、抗-H，反定型與ABO細(xì)胞均出現(xiàn)凝集反應(yīng)。只能輸相同血型人的血液。第40頁，共61頁。類孟買型缺乏H基因，其基因為hh，至少有一個Se基因。雖然不能檢測出紅細(xì)胞表面H抗原，但有少量的A和/B抗原，記為Ah、Bh、ABh。正定型被檢紅細(xì)胞與抗-H無凝集反應(yīng)，與抗-A、抗-B弱凝集反應(yīng)，甚至用吸收放散試驗才能檢出A和/B抗原。類孟買型分泌液及血漿中含有Ⅰ型鏈A和（或）B血型物質(zhì)，紅細(xì)胞從血漿中吸附A和/B抗原，從而表達(dá)微弱的A和/B抗原。唾液中含有少量的ABH物質(zhì)。血液中存在抗-H/抗-HI、抗-A或抗-B。第41頁，共61頁。Lewis血型系統(tǒng)Lea

和Leb

是Lewis系統(tǒng)主要的抗原抗原的發(fā)生：Lewis抗原不是由紅細(xì)胞產(chǎn)生的,而是存在于血漿中。是從血漿中吸附到紅細(xì)胞表面。這兩種抗原的表達(dá)由Le基因控制，只要有一個Le基因，該個體就可表達(dá)Lewis抗原,而le/le型的個體不表達(dá)Lewis抗原.Le基因(FUT3基因)能產(chǎn)生一種糖基轉(zhuǎn)移酶,將L-巖藻糖結(jié)合到前體鏈的次末端GlcNAc上，形成Lea抗原。第42頁，共61頁。

Lewis抗原

人類出生時Le抗原缺失或極其微弱。臍帶血樣本主要是Le(a-b-)。如果有Le及Se基因，則出生10天后RBC為Le(a+b-),12~18個月為Le(a+b+),2或3歲為Le(a-b+)。Lewis定型不能作為嬰兒親子鑒定的依據(jù)。第43頁，共61頁。

Lewis抗原

妊娠期間Lewis抗原變化。妊娠期間Lewis抗原量下降。孕婦可一過性出現(xiàn)Le(a-b-)，可能產(chǎn)生Lewis抗體。生產(chǎn)后,隨著正常Lewis表型的恢復(fù),抗體逐漸消失。第44頁，共61頁。

Lewis抗體

大多數(shù)是IgM，室溫下表現(xiàn)明顯凝集反應(yīng),甚至由于反定型細(xì)胞表達(dá)Lewis抗原，易導(dǎo)致ABO血型定型錯誤。Lewis抗體只產(chǎn)生于Le(a-b-)個體的血清中,一般是自然產(chǎn)生的天然抗體。紅細(xì)胞表型為Le(a-b+)者不產(chǎn)生Lea抗體,因為唾液和血漿中含有少量的Lea.。常見抗-Lea,抗-Leb發(fā)現(xiàn)少見。第45頁，共61頁。

Lewis抗體

在Le(a-b-)個體的血清中容易同時發(fā)現(xiàn)抗-Lea和抗-Leb。大多在室溫下反應(yīng)性良好,在37℃也可以觀察到反應(yīng)但是弱于室溫反應(yīng)。使用間接抗人球蛋白試驗有時可檢出IgG抗體，凝集反應(yīng)可能更弱。Lewis抗體在體外可被血漿中可溶性的Lewis物質(zhì)中和。由于Lewis抗體不能通過胎盤，并且出生時Lewis抗原發(fā)育較差,所以此抗體不會引起新生兒溶血病。第46頁，共61頁。

Lewis血型系統(tǒng)與輸血

Lewis抗原容易被紅細(xì)胞膜吸附或者從膜上洗脫，輸入的紅細(xì)胞在進(jìn)入血液循環(huán)幾天之內(nèi)可能會出現(xiàn)受血者的Lewis表型。受血者血漿中的Lewis抗體容易被供血者血漿中的Lewis血型物質(zhì)中和。所以Lewis抗體極少在體內(nèi)引起溶血。在輸血或交叉配血之前沒有必要檢測供血者是否具有Lewis抗原。因為與供者交叉配血相合就保證了輸血的安全性。如果37℃或抗球蛋白法配血不合,應(yīng)重新選擇。第47頁，共61頁。第四節(jié)Rh血型系統(tǒng)第48頁，共61頁。Rh血型系統(tǒng)1939年Levine和Stetsen在一生產(chǎn)死胎的婦女血清中檢測到的抗體，是人類發(fā)現(xiàn)的第一例Rh抗體。臨床意義僅次于ABO血型系統(tǒng)。第49頁，共61頁。Rh血型系統(tǒng)抗原至今已發(fā)現(xiàn)Rh血型系統(tǒng)的抗原50余個。最具有臨床意義的有5個，即D、C、c、E、e及其相應(yīng)的特異性抗體。Rh抗原只存在于紅細(xì)胞膜，不存在于其他組織細(xì)胞膜上或體液中。第50頁，共61頁。Rh血型系統(tǒng)抗原Rh抗原的發(fā)育胎兒早期就開始發(fā)育并維持一生，臍帶血或新生兒紅細(xì)胞其Rh抗原性與成人相同。Rh血型抗原的免疫原性抗原強度僅次于A抗原和B抗原。Rh血型抗原中的免疫原性順序D>E>c

>C>e。Rh抗原均顯示劑量效應(yīng)。第51頁，共61頁。Rh血型陽性和陰性判定根據(jù)紅細(xì)胞上D抗原的有無可將人類紅細(xì)胞分為Rh陽性和Rh陰性，即紅細(xì)胞上缺乏D抗原的人是Rh陰性；紅細(xì)胞有D抗原的人是Rh陽性。Rh陰性分布頻率：白種人15～20% 中國漢族約0.34%第52頁，共61頁。RhD抗原D：正常D抗原。弱D(weakD)：抗原數(shù)量少，抗原決定簇質(zhì)量正常。不完全D(partialD)：抗原數(shù)目基本正常，缺少部分D抗原決定簇。增強性D：抗原數(shù)量增加，抗原性增強。第53頁，共61頁。第54頁，共61頁。Rh抗體大部分是IgG類抗體，通常情況下，用鹽水法不與Rh陽性紅細(xì)胞（-D-紅細(xì)胞例外）出現(xiàn)凝集反應(yīng)。偶爾有抗D及抗E血清含有IgM類抗體，室溫能凝集相應(yīng)抗