ICS65.020.30CCSB43DB61TechnicalSpecificationsforDairyGoaPart7:Artificialinsemination陜西省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布IDB61/T1521.7—2021 12規(guī)范性引用文件 13術(shù)語(yǔ)和定義 14精液采集與品質(zhì)評(píng)定 25精液的稀釋、保存與運(yùn)輸 26輸精 37記錄 4附錄A（資料性）公羊精液稀釋液制備 5附錄B（資料性）種公羊精液品質(zhì)檢查記錄 6附錄C（資料性）母羊輸精記錄表 7DB61/T1521.7—2021DB61/T1521《奶山羊養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)范》分為如下部分：—第1部分：關(guān)中奶山羊良種鑒定；—第2部分：引進(jìn)奶山羊良種鑒定；—第3部分：雙基因良種選育；—第4部分：種公羊飼養(yǎng)管理；—第5部分：后備羊培育；—第6部分：泌乳奶山羊健康養(yǎng)殖；—第7部分：人工授精；—第8部分：胚胎移植；—第9部分：苜蓿半干青貯；—第10部分：疫病防控；—第11部分：機(jī)器擠奶。本文件為DB61/T1521的第7部分。本文件根據(jù)GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)則起草。本部分由西北農(nóng)林科技大學(xué)提出。本部分由陜西省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳歸口。本部分起草單位：西北農(nóng)林科技大學(xué)、陜西省畜牧技術(shù)推廣總站、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國(guó)奶業(yè)協(xié)會(huì)奶山羊?qū)I(yè)委員會(huì)、陜西關(guān)中奶山羊產(chǎn)業(yè)研究院、陜西省奶山羊養(yǎng)殖工程技術(shù)研究中心、陜西省羊產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新與產(chǎn)業(yè)發(fā)展戰(zhàn)略聯(lián)盟、寶雞市畜牧獸醫(yī)中心、云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院、楊凌職業(yè)技術(shù)學(xué)院、隴縣畜產(chǎn)局、三原縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心。本部分主要起草人：李廣、田秀娥、侯金星、付明哲、安小鵬、胡建宏、陸梅、付乃安、譚向榮、王建民、洪瓊花、逄國(guó)良、張磊、楊少華，吳雙虎。本部分首次發(fā)布。本部分由西北農(nóng)林科技大學(xué)負(fù)責(zé)解釋。聯(lián)系信息如下：?jiǎn)挝唬何鞅鞭r(nóng)林科技大學(xué)電話址：陜西楊凌示范區(qū)西農(nóng)路22號(hào)郵編：712100DB61/T1521.7—20211奶山羊養(yǎng)殖技術(shù)規(guī)范第7部分：人工授精本部分規(guī)定了奶山羊種公羊選擇與調(diào)教、精液采集與品質(zhì)檢查、精液的稀釋、保存與運(yùn)輸、輸精等技術(shù)要求。本部分適用于奶山羊的人工授精。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T5458液氮生物容器GB20557山羊冷凍精液3術(shù)語(yǔ)和定義下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本部分。3.1種公羊breedingbuck符合品種特征，生長(zhǎng)發(fā)育正常，能提供合格精液的優(yōu)秀種用公羊。3.2鮮精freshsemen現(xiàn)場(chǎng)采集的合格精液。3.3冷凍精液frozensemen新鮮精液經(jīng)冷凍程序處理后，保存于液氮中的精液。3.4假陰道artificialvagina采集種公羊精液的專(zhuān)用器械。3.5輸精槍inseminationgun（AIgun）將精液輸入母羊生殖道的專(zhuān)用器械。3.6人工授精artificialinsemination(AI)DB61/T1521.7—20212將采集合格的種公羊精液，借助輸精槍輸入到母羊子宮頸口，使其受胎的方法。3.7腹腔鏡輸精laparoscopicartificialinsemination借助腹腔鏡觀察判斷母羊子宮、卵泡發(fā)育情況，適時(shí)將合格精液輸入到母羊子宮角，使其受胎的方法。4精液采集與品質(zhì)評(píng)定4.1采精前的準(zhǔn)備4.1.1場(chǎng)地準(zhǔn)備清潔消毒采精室、精液處理室等。4.1.2器械準(zhǔn)備清洗消毒安裝假陰道，調(diào)試顯微鏡、恒溫箱、水浴鍋等。4.1.3稀釋液準(zhǔn)備包括鮮精保存稀釋液和冷凍保存稀釋液。常用稀釋液制備見(jiàn)附錄A。4.2種公羊采精根據(jù)GB20557有關(guān)規(guī)定執(zhí)行。4.3精液品質(zhì)評(píng)定4.3.1射精量射精量一般為0.5mL～1.5mL。4.3.2感官檢查正常精液為乳白色或乳黃色，呈云霧狀，略帶腥味。凡帶有腐敗臭味，出現(xiàn)紅色、褐色及綠色的精液均不可用。4.3.3顯微鏡檢測(cè)借助顯微鏡檢測(cè)精液品質(zhì)指標(biāo)，新鮮精液的精子密度20億/mL以上、精子活力0.7以上、畸形率14%DB61/T1521.7—202135精液的稀釋、保存與運(yùn)輸5.1稀釋與保存5.1.1精液稀釋檢查合格的精液用稀釋液按照等溫倍比稀釋?zhuān)Ｒ?guī)稀釋比例為1:2～1:4，高倍稀釋比例為1:5～1:15。稀釋后液態(tài)保存的精液有效精子數(shù)不低于5000萬(wàn)個(gè)/支，精子活力不低于0.6；稀釋后冷凍保存的精液有效精子數(shù)不低于5000萬(wàn)個(gè)/支，精子活力不低于0.3。5.1.2精液保存5.1.2.1常溫保存時(shí)將稀釋后的精液保存在室溫條件（20℃~26℃),不超過(guò)3h。5.1.2.2低溫保存時(shí)將稀釋后的精液經(jīng)1h～2h緩慢降至4℃~5℃,保存于4℃冰箱，不超過(guò)2d。5.1.2.3冷凍保存按照GB20557標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行，將制備的冷凍精液細(xì)管浸泡在液氮中貯存，液氮罐應(yīng)符合GB/T5458的規(guī)定。5.2運(yùn)輸5.2.1根據(jù)每日發(fā)情母羊數(shù)，準(zhǔn)備精液需要量。精液應(yīng)標(biāo)明種公羊號(hào)、采精時(shí)間、精子密度及活力。5.2.2長(zhǎng)途運(yùn)輸?shù)男迈r精液應(yīng)放入專(zhuān)用保溫瓶中，精液溫度保持在2℃~5℃；冷凍精液放入液氮罐中運(yùn)輸，罐中液氮不少于2/3。5.2.3精液運(yùn)輸過(guò)程中，嚴(yán)防劇烈振蕩，并盡可能縮短途中運(yùn)輸時(shí)間。6輸精6.1輸精前準(zhǔn)備6.1.1輸精員及輔助者穿戴工作服與乳膠手套。6.1.2清潔消毒輸精室、精液準(zhǔn)備室及工具。6.1.3檢查輸精室光源，清洗消毒輸精槍、開(kāi)膣器、腹腔鏡等器具。6.1.4精液品質(zhì)檢查合格后裝至輸精槍中。6.1.5采取公羊試情法鑒定發(fā)情，早晚各一次，將接受爬跨的母羊確定為發(fā)情羊。將待配母羊進(jìn)行保定，先用清水清洗外陰，再用1/3000新潔爾滅消毒，最后用生理鹽水清洗，消毒紙巾擦凈。6.2人工輸精6.2.1輸精時(shí)間發(fā)情后12h輸精一次，間隔8h～12h復(fù)配一次。6.2.2輸精方式6.2.2.1子宮頸口輸精將開(kāi)膣器與地面呈35°夾角斜向插入陰道5cm左右，再平行插入10cm左右，旋轉(zhuǎn)90°打開(kāi)開(kāi)膣器，查找子宮頸外口，再將輸精槍緩慢插入子宮頸外口內(nèi)0.5cm～1.0cm處。每只羊輸入0.2mL精液。輸精槍及開(kāi)膣器在每只母羊使用后嚴(yán)格浸泡消毒3min后再用。6.2.2.2子宮角輸精DB61/T1521.7—202146.2.2.2.1輸精母羊準(zhǔn)備。待配母羊輸精前12h～24h禁食，手術(shù)部位剃毛并擦洗消毒；術(shù)前母羊保定在專(zhuān)用輸精架上，頭低尾高，軀體與地面保持45°夾角～60°夾角。6.2.2.2.2術(shù)前麻醉。輸精前5min～10min按說(shuō)明書(shū)注射獸用麻醉劑。6.2.2.2.3解凍后的冷凍精液細(xì)管裝入羊腹腔鏡輸精槍中。6.2.2.2.4將腹腔鏡的套管針在腹中線兩側(cè)距離乳房5cm～10cm處分別刺入腹腔皮膚，一側(cè)套管上插入腹腔鏡，另一側(cè)套管插上輸精槍。找到子宮角后，用輸精槍外套管的前端細(xì)針刺入子宮角內(nèi)，輸入精液量0.1mL～0.2mL，輸入有效精子數(shù)不少于5000萬(wàn)個(gè)，對(duì)側(cè)子宮角也以同樣方式輸精，并檢查輸精部位是否正常。6.2.2.2.5母羊輸精結(jié)束后從腹腔內(nèi)取出腹腔鏡等清洗消毒，創(chuàng)口用碘伏消毒。6.2.2.2.6解除保定后的母羊2h～3h留觀。7記錄7.1標(biāo)記輸精母羊。7.2準(zhǔn)確記錄輸精工作與數(shù)據(jù)，定期統(tǒng)計(jì)分析。7.3種公羊采精及母羊輸精記錄表見(jiàn)附錄B和附錄C。DB61/T1521.7—20215（資料性）公羊精液稀釋液制備A.1公羊精液稀釋液制備A.1.1液態(tài)保存稀釋液A.1.1.1稀釋液配方A.1.1.1.1生理鹽水羊精液稀釋液生理鹽水100mL，加入青霉素500單位/mL～1000單位/mL，鏈霉素500μg/mL～1000μg/mL。A.1.1.1.2鮮羊奶羊精液稀釋液新鮮羊奶隔水煮沸后靜置脫脂，加入青霉素500單位/mL～1000單位/mL，鏈霉素500μg/mL～1000μg/mL。A.1.1.1.3葡檸羊精液稀釋液葡萄糖3g，檸檬酸三鈉1.4g，加蒸餾水至100mL，加入青霉素500單位/mL～1000單位/mL，鏈霉素500μg/mL～1000μg/mL，調(diào)整pH至6.6～6.8。A.1.1.1.4葡檸乙羊精液稀釋液葡萄糖3g，檸檬酸鈉1.3g，乙二胺四乙酸二鈉(EDTA)0.1g，蒸餾水加至100mL。加入青霉素500單位/mL～1000單位/mL，鏈霉素500μg/mL～1000μg/mL，pH6.6～6.8。使用前加卵黃達(dá)到5%～20%濃度。A.1.1.2羊精液稀釋液配制方法羊精液稀釋液按照如下方法配制：a)按照配方規(guī)定準(zhǔn)確稱(chēng)取各種試劑和藥品；b)將稱(chēng)量好的試劑藥品放入干凈的玻璃量筒或量杯內(nèi)；c)加入符合標(biāo)準(zhǔn)的蒸餾水或羊奶至規(guī)定數(shù)量。d)用干凈玻璃棒輕輕攪動(dòng)，使量筒或量杯內(nèi)的試劑和藥品充分溶解。e)稀釋液在使用時(shí)加入青、鏈霉素各1000單位/mL和2%維生素B12。A.1.2冷凍精液稀釋液按GB20557規(guī)定的方法制備。A.1.3精液稀釋液精液稀釋后檢測(cè)精子活率與精子數(shù)，分析稀釋效果；輸精前可在常溫（室溫）或低溫（4℃)條件下短時(shí)保存，一般1d～2d。DB61/T1521.7—20216（資料性）種公羊精液品質(zhì)檢查