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核酸相關(guān)知識(shí)點(diǎn)考試練習(xí)題集本練習(xí)題集圍繞核酸的結(jié)構(gòu)、功能、理化性質(zhì)及相關(guān)技術(shù)等核心知識(shí)點(diǎn)設(shè)計(jì),涵蓋選擇題、填空題、簡(jiǎn)答題三類題型,可用于核酸相關(guān)知識(shí)的自我檢測(cè)與鞏固。一、選擇題(每題僅有1個(gè)正確答案)1.核酸的基本組成單位是()A.氨基酸B.核苷酸C.脂肪酸D.單糖知識(shí)點(diǎn):核酸的化學(xué)組成,核苷酸是核酸的單體(核酸由核苷酸通過磷酸二酯鍵連接而成)。答案:B2.下列關(guān)于DNA與RNA結(jié)構(gòu)差異的描述,錯(cuò)誤的是()A.DNA含脫氧核糖,RNA含核糖B.DNA多為雙鏈結(jié)構(gòu),RNA多為單鏈結(jié)構(gòu)C.DNA含尿嘧啶(U),RNA含胸腺嘧啶(T)D.DNA的堿基為A、T、C、G,RNA的堿基為A、U、C、G知識(shí)點(diǎn):DNA與RNA的化學(xué)組成差異(堿基:DNA含T,RNA含U;戊糖:DNA含脫氧核糖,RNA含核糖)。答案:C3.維持DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要作用力是()A.糖苷鍵B.磷酸二酯鍵C.氫鍵和堿基堆積力D.肽鍵知識(shí)點(diǎn):DNA雙螺旋的穩(wěn)定機(jī)制(氫鍵維持堿基配對(duì),堿基堆積力維持縱向穩(wěn)定)。答案:C4.核酸在260nm波長(zhǎng)下有特征性吸收峰,其原因是()A.含磷酸基團(tuán)B.含脫氧核糖/核糖C.含堿基的共軛雙鍵D.含氫鍵知識(shí)點(diǎn):核酸的紫外吸收特性(嘌呤、嘧啶堿基含共軛雙鍵,在260nm處有強(qiáng)吸收)。答案:C5.下列功能中,僅RNA具備的是()A.攜帶遺傳信息B.催化生物化學(xué)反應(yīng)(核酶)C.參與能量代謝D.作為遺傳物質(zhì)的載體知識(shí)點(diǎn):RNA的特殊功能(部分RNA具有催化活性,即核酶;DNA是主要遺傳物質(zhì),也可攜帶遺傳信息)。答案:B二、填空題1.核酸分為____和____兩大類,前者主要承擔(dān)____的功能,后者參與____的合成。知識(shí)點(diǎn):核酸的分類與核心功能(DNA儲(chǔ)存遺傳信息,RNA參與蛋白質(zhì)合成的多個(gè)環(huán)節(jié))。答案:脫氧核糖核酸(DNA);核糖核酸(RNA);遺傳信息儲(chǔ)存;蛋白質(zhì)2.DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型由____和____于1953年提出,模型中堿基配對(duì)遵循____原則(A與____配對(duì),G與____配對(duì))。知識(shí)點(diǎn):DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的提出者及堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。答案:沃森(Watson);克里克(Crick);堿基互補(bǔ)配對(duì);T(胸腺嘧啶);C(胞嘧啶)3.核酸變性是指核酸分子中____被破壞,導(dǎo)致其____降低、____(OD260值)增加的過程。知識(shí)點(diǎn):核酸變性的概念(氫鍵斷裂,雙螺旋解旋,伴隨增色效應(yīng)和生物活性喪失)。答案:氫鍵;生物活性;紫外吸收4.核酸分離純化中,____法利用核酸與蛋白質(zhì)在不同pH和鹽濃度下的溶解度差異,____法基于核酸與硅膠膜的特異性吸附。知識(shí)點(diǎn):核酸純化的經(jīng)典方法(酚-氯仿抽提基于溶解度差異,硅膠柱法基于吸附作用)。答案:酚-氯仿抽提;硅膠柱(或離心柱)吸附5.RNA按功能與結(jié)構(gòu)可分為____、____和____,其中____是蛋白質(zhì)合成的直接模板。知識(shí)點(diǎn):RNA的主要類型及功能(mRNA攜帶遺傳信息,tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸,rRNA構(gòu)成核糖體)。答案:信使RNA(mRNA);轉(zhuǎn)運(yùn)RNA(tRNA);核糖體RNA(rRNA);mRNA三、簡(jiǎn)答題1.比較DNA與RNA的結(jié)構(gòu)和功能差異。答題要點(diǎn):結(jié)構(gòu)差異:①戊糖:DNA含脫氧核糖,RNA含核糖;②堿基:DNA含T(胸腺嘧啶),RNA含U(尿嘧啶);③鏈數(shù):DNA多為雙鏈(雙螺旋),RNA多為單鏈(局部可形成雙鏈結(jié)構(gòu),如tRNA的三葉草結(jié)構(gòu))。功能差異:①DNA:儲(chǔ)存、傳遞遺傳信息(遺傳物質(zhì)的核心載體);②RNA:參與遺傳信息的表達(dá)(mRNA為翻譯模板,tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸,rRNA構(gòu)成核糖體)、催化反應(yīng)(核酶)、調(diào)控基因表達(dá)(非編碼RNA)等。2.簡(jiǎn)述核酸變性與復(fù)性的概念及影響因素。答題要點(diǎn):變性:核酸分子(如DNA雙螺旋)中氫鍵斷裂,雙螺旋解旋為單鏈的過程(不涉及磷酸二酯鍵斷裂)。影響因素:高溫(如DNA的熱變性)、極端pH、尿素/甲酰胺等變性劑。復(fù)性:變性的核酸單鏈在適宜條件下(如溫度緩慢降低、離子強(qiáng)度適宜),通過堿基互補(bǔ)配對(duì)重新形成雙鏈的過程(如DNA的退火)。影響因素:溫度(接近Tm值時(shí)復(fù)性效率高)、核酸濃度(濃度高利于互補(bǔ)鏈碰撞)、離子強(qiáng)度(適量陽離子中和磷酸基團(tuán)負(fù)電荷,利于鏈結(jié)合)。3.說明PCR技術(shù)的基本原理與主要步驟。答題要點(diǎn):原理:基于DNA的半保留復(fù)制,通過熱循環(huán)使DNA模板在體外快速擴(kuò)增。TaqDNA聚合酶(耐高溫)催化子鏈合成,引物(短單鏈DNA)與模板特異性結(jié)合提供3’-OH末端。步驟(循環(huán)進(jìn)行):①變性:94℃左右,模板DNA解旋為單鏈;②退火:引物與模板的互補(bǔ)區(qū)結(jié)合(溫度依引物Tm值而定,通常50~65℃);③延伸:72℃左右,Taq酶以dNTP為原料,沿引物3’端延伸合成新鏈。4.列舉兩種核酸定量的方法,并闡述其原理。答題要點(diǎn):紫外分光光度法:利用核酸(堿基)在260nm的特征吸收,1OD260≈50μg/mL雙鏈DNA、40μg/mLRNA。通過OD260/OD280比值(純DNA≈1.8,純RNA≈2.0)判斷純度(比值偏低提示蛋白污染)。熒光定量法:如SYBRGreenI染料,可特異性結(jié)合雙鏈DNA,結(jié)合后熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng)。通過標(biāo)準(zhǔn)曲線(已知濃度的核酸為標(biāo)準(zhǔn)),根據(jù)樣品的熒光強(qiáng)度計(jì)算濃度(靈敏度高于紫外法,可區(qū)分單/雙鏈)。5.解釋“核酸分子雜交”的概念,并舉例說明其應(yīng)用。答題要點(diǎn):概念:互補(bǔ)的核酸單鏈(DNA-DNA、DNA-RNA、RNA-RNA)在一定條件下(如適宜溫度、離子強(qiáng)度),通過堿基互補(bǔ)配對(duì)形成雙鏈雜交分子的過程。應(yīng)用:①Southernblot:檢測(cè)DNA樣品中的特定序列(如基因拷貝數(shù)、突變);②Northernblot:檢測(cè)RNA樣品中的特定mRNA
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