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文檔簡介
橡膠木木醋液對火龍果潰瘍病的防控分析題目:橡膠木木醋液對火龍果潰瘍病的防控分析摘要根據(jù)海南省火龍果協(xié)會報道,2019年年底海南島火龍果種植面積約13萬余畝,年產(chǎn)值近30萬噸,年產(chǎn)值約62.4億,但火龍果潰瘍病問題突出,防治困難,嚴重影響果實品質(zhì)和經(jīng)濟效益。本研究利用海南橡膠木在生產(chǎn)生物炭過程中產(chǎn)生的木醋液對患有潰瘍病的火龍果進行為期四個月的施用,以患有潰瘍病的火龍果為研究對象進行火龍果盆栽實驗,共設(shè)置7個處理:對照組(CK)、0.5%橡膠木木醋液(A1)、2%橡膠木木醋液(A2)、5%橡膠木木醋液(A3)、5%橡膠木木醋液+鈣鎂銅硅離子(B)、農(nóng)藥組(C)、無病清水(D)。觀測了四個月期間患病火龍果在不同處理下的出芽高度、發(fā)病指數(shù)等農(nóng)藝性狀;采用ICP-OES測定分析了患病火龍果根際土、枝莖、嫩芽中鈣、銅、鐵、鉀、鎂和錳元素含量,研究木醋液是否可以增強火龍果抗病性能,主要結(jié)果如下:(1)本研究實驗處理中的A1組、B組和C組對火龍果潰瘍病的抑菌效果明顯,分別為CK組的3.42倍、1.38倍和1.22倍,同時A1組抑菌效果為C組的2.81倍,0.5%濃度木醋液處理組抑菌效果超過CK組和農(nóng)藥處理,對潰瘍病的抑菌效果最好。(2)5min浸泡處理下CK組抑菌效果是0min和2min浸泡處理的109.88%和107.97%,A1組抑菌效果是0min和2min浸泡處理的193.76%和105.62%,C組抑菌效果是0min和2min浸泡處理的110.57%和104.75%,火龍果潰瘍病的抑菌效果與浸泡時間正相關(guān),5min的浸泡時間對火龍果潰瘍病的抑菌效果最好。(3)木醋液在一定程度上可以增加潰瘍病火龍果根際土中鈣、銅、鐵、鎂、錳元素含量,推測木醋液對土壤具有一定改良作用。所有處理中鈣含量都高于CK組,A3處理組根際土中鈣含量最高為0.8067g/kg,分別是CK組、C處理組和D處理組的1.47倍、1.08倍和6.63倍。B處理組由于施加了銅離子導(dǎo)致銅含量最高,其余處理組中A3組根際土中銅含量最高為30.82mg/kg,分別為CK組、C組和D組的1.61倍、1.36倍、1.59倍。A3處理鐵含量最高為29.47mg/kg,分別為CK組、C組和D組的1.5倍、1.39倍和1.46倍。C組和D組鎂含量最高分別為0.18g/kg和0.17g/kg,木醋液處理組中A1組鎂含量最高為0.13g/kg,為CK組和C組的2.66倍和0.73倍,A3組錳含量最高為146.43mg/kg,分別是CK組、C組和D組的1.46倍、1.67倍和1.57倍。(4)木醋液還可增加火龍果莖組織中鈣、銅、鉀元素含量,有利于火龍果莖組織的發(fā)育和生長,達到更理想的防治效果?;瘕埞o組織中鈣含量與木醋液濃度成正相關(guān),A3組鈣含量最高為18.74g/kg,分別是CK組、C組和D組的1.31倍、1.81倍和0.82倍。除B處理組外,木醋液處理組中A1組銅含量最高為20.28mg/kg,分別是CK組、C組和D組的1.2倍、0.87倍和0.97倍,除CK組外,A1組鉀含量最高為38.99g/kg,分別是CK組、C組和D組的0.99倍、1.09倍和1.35倍。(5)不同濃度木醋液處理下芽組織中鈣含量與木醋液濃度也成正相關(guān),A3組鈣含量最高為10.8g/kg,分別是CK組、B組、C組和D組的1.02倍,0.93倍、0.98倍和1.51倍。不同處理組中A2組鉀含量最高為47.23g/kg,分別是CK組、C組和D組的1.22倍、1.05倍和1.28倍。(6)植物不同組織部位的元素含量表明,潰瘍病火龍果中不同生理部位的元素含量分布具有一定生物蓄積性,鈣、鉀、鎂、錳元素在枝莖和嫩芽中含量高于根際土中含量,其中鈣和鎂在莖組織和芽組織中含量分別為根際土中含量的20倍和80倍。銅元素在枝莖中含量最高,鐵元素主要集中分布在火龍果嫩芽部位,在根際土、莖組織和芽組織中含量比例為1:1:95。具體蓄積系數(shù)未進行研究,基于此實驗,本實驗室以后還將針對這些元素能否轉(zhuǎn)移為可吸附態(tài)以及對相關(guān)生物活性進行研究。關(guān)鍵詞:木醋液;火龍果;潰瘍??;微量元素AbstractAccordingtothereportofthePitayaAssociationofHainanProvince,attheendof2019,theplantingareaofpitayainHainanIslandwasabout130000mu,withanannualoutputvalueofnearly300000tonsandanoutputvalueofabout6.24billion.However,theproblemofpitayacankerwasprominent,andthecontrolwasdifficult,whichseriouslyaffectedthequalityandeconomicbenefitsofthefruit.Inthisstudy,weusedthewoodvinegarproducedintheproductionofbiocharfromHainanrubberwoodtotreatthecankerpitayafruitforfourmonths.Takingthecankerpitayafruitastheresearchobject,wecarriedoutthepottedexperimentofpitayafruit.Therewereseventreatments:controlgroup(CK),0.5%rubberwoodvinegar(A1),2%rubberwoodvinegar(A2),5%rubberwoodvinegar(A3)5%rubberwoodvinegar+calciummagnesiumcoppersiliconion(b),pesticidegroup(c),disease-freewater(d).Thesproutingheight,diseaseindexandotheragronomiccharactersofdiseasedpitayafruitinfourmonthswereobservedunderdifferenttreatments.Thecontentsofcalcium,copper,iron,potassium,magnesiumandmanganeseinrhizospheresoil,stemandshootsofdiseasedpitayafruitweredeterminedandanalyzedbyICP-OES.Themainresultswereasfollows:(1)GroupA1,groupBandgroupCintheexperimentaltreatmenthaveobviousbacteriostaticeffectonpitayacanker,whichare3.42times,1.38timesand1.22timesofCKgroup,respectively.Atthesametime,groupA1has2.81timesofgroupC,andthebacteriostaticeffectof0.5%woodvinegartreatmentgroupisbetterthanthatofCKgroupandpesticidetreatment.(2)ThebacteriostaticeffectofCKgroupwas109.88%and107.97%ofthatof0minutesand2minutes,thatofA1groupwas193.76%and105.62%ofthatof0minutesand2minutes,andthatofCgroupwas110.57%and104.75%ofthatof0minutesand2minutes,ThebacteriostaticeffectofPitayacankerwaspositivelycorrelatedwiththesoakingtime.Thebestbacteriostaticeffectwas5minutessoakingtime.(3)Tosomeextent,woodvinegarcanincreasethecontentofcalcium,copper,iron,iron,magnesiumandmanganeseintherhizospheresoilofpitayacanker.ThehighestcontentofcalciumintherhizospheresoilofA3groupwas0.81g/kg,whichwas1.47times,1.08timesand6.63timesofCKgroup,CgroupandDgrouprespectively.ThehighestcontentofcopperingroupBwasduetotheapplicationofcopperions,andthehighestcontentofcopperingroupA3was30.82mg/kg,whichwas1.61times,1.36timesand1.59timesofCK,CgroupandDgroup.ThehighestironcontentofA3treatmentgroupwas29.47mg/kg,whichwas1.5times,1.39timesand1.46timesofCKgroup,CgroupandDgroup.ThehighestcontentofmagnesiumingroupCandgroupDwas0.18g/kgand0.17g/kg.ThehighestcontentofmagnesiumingroupA1was0.13g/kg,2.66and0.73timesofthatingroupCKandgroupC,andthehighestcontentofmanganeseingroupA3was146.43mg/kg,1.46,1.67and1.57timesofthatingroupCK,groupCandgroupD.(4)Woodvinegarcanalsoincreasethecontentofcalcium,copperandpotassiuminpitayastemtissue,whichisconducivetothedevelopmentandgrowthofPitayastemtissueandachievesabettercontroleffect.ThehighestcalciumcontentofgroupA3was18.74g/kg,whichwas1.31times,1.81timesand0.82timesofgroupCK,groupCandgroupDrespectively.ExceptforgroupB,thehighestcoppercontentingroupA1was20.28mg/kg,whichwas1.2times,0.87timesand0.97timesofthatingroupCK,groupCandgroupDrespectively.ExceptforgroupCK,thehighestpotassiumcontentingroupA1was38.99g/kg,whichwas0.99times,1.09timesand1.35timesofthatingroupCK,groupCandgroupDrespectively.(5)ThehighestcalciumcontentofgroupA3was10.8g/kg,whichwas1.02times,0.93times,0.98timesand1.51timesofgroupCK,groupB,groupCandgroupD,respectively.ThehighestcontentofpotassiumingroupA2was47.23g/kg,whichwas1.22times,1.05timesand1.28timesofthatingroupCK,groupCandgroupD.(6)ThecontentofelementsindifferentpartsofplanttissueshowedthatthedistributionofelementsindifferentphysiologicalpartsofPitayacankerhadacertainbioaccumulation.Thecontentofcalcium,potassium,magnesiumandmanganeseinbranchandshootwashigherthanthatinrhizospheresoil,andthecontentofcalciumandmagnesiuminstemandshoottissuewas20timesand80timesofthatinrhizospheresoil.Thecontentofcopperisthehighestinthebranchesandstems,andironismainlydistributedinthebudsofpitayafruit.Theproportionofcopperintherhizospheresoil,stemtissueandbudtissueis1:1:95.Thespecificaccumulationcoefficienthasnotbeenstudied.Basedonthisexperiment,ourlaboratorywillstudywhethertheseelementscanbetransferredtoadsorbablestateandrelatedbiologicalactivitiesinthefuture.Keywords:Woodvinegar;pitayafruit;cankerdisease;microelements目錄1文獻綜述 91.1研究背景 91.1.1海南火龍果及橡膠木產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀 91.1.2火龍果潰瘍病特點及防治現(xiàn)狀 91.2木醋液研究現(xiàn)狀 101.2.1木醋液成分分析 101.2.2木醋液應(yīng)用前景 111.2.2.1植物生長調(diào)節(jié)劑 111.2.2.2防治病蟲害 111.2.2.3土壤改良劑 121.2.2.4除臭和堆肥 121.3選題目的和意義 131.4研究內(nèi)容與技術(shù)路線 131.4.1研究內(nèi)容 131.4.2技術(shù)路線 142實驗部分 142.1實驗材料、試劑、儀器及設(shè)備 142.2試驗方法 142.2.1實驗設(shè)計 142.2.2種植火龍果 152.2.2.1測定火龍果新枝長度、重量、患病級數(shù) 152.2.3噴灑橡膠木木醋液 152.2.4記錄火龍果生長數(shù)據(jù) 162.2.5樣品處理及元素測定 162.2.5.1ICP-OES樣品測定 162.3數(shù)據(jù)處理 163結(jié)果與討論 173.1不同濃度橡膠木木醋液處理對火龍果潰瘍病的抑菌效果 173.2不同時間木醋液浸泡處理對火龍果潰瘍病的抑菌效果 173.3火龍果根際土、莖和芽元素含量分析 183.3.1火龍果根際土中元素含量分析 183.3.2火龍果莖組織中元素含量分析 193.3.3火龍果芽組織中元素含量分析 194結(jié)論 205致謝 22參考文獻 23
1文獻綜述1.1研究背景1.1.1海南火龍果及橡膠木產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀根據(jù)海南島火龍果協(xié)會數(shù)據(jù)表明,2019年年底海南島火龍果種植面積約13萬余畝,年產(chǎn)值近30萬噸,產(chǎn)值約60億,市場銷售量和種植面積逐年增長[1-3]。目前,海南島有20多家中型以上的橡膠木加工廠,將橡膠原木制作成橡膠木家具、建筑材料、生物質(zhì)顆粒燃料乳膠原料等產(chǎn)品,每年的橡膠原木加工量共約為24.5萬立方米[4]。然而,海南島每年橡膠木利用率僅為9.91%,橡膠木原木利用率較低,橡膠副產(chǎn)物沒有得到合理利用,以致造成資源流失和環(huán)境污染,隨著生物炭技術(shù)的發(fā)展,生物質(zhì)炭可應(yīng)用于農(nóng)業(yè)領(lǐng)域從而起到改良土壤、增加肥力的作用,同時可有效減少溫室氣體排放,降低重金屬污染風(fēng)險等。利用橡膠木生產(chǎn)生物炭木醋液可有效實現(xiàn)橡膠木的資源化利用。1.1.2火龍果潰瘍病特點及防治現(xiàn)狀近年來,火龍果受到莖斑病、褐斑病、潰瘍病等危害,其中火龍果潰瘍病在整個海南各水果產(chǎn)區(qū)廣泛流行,主要危害莖和果實,嚴重影響果實品質(zhì)和商品率,在濕熱多雨季節(jié)尤為嚴重,制約了火龍產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。國內(nèi)張榮等[5],戴俊等[6],易潤華等[7],李敏等[8]對火龍果潰瘍斑進行了病原菌鑒定、生物學(xué)特性研究。該病菌初期形成圓形白斑,逐漸轉(zhuǎn)變成褐斑,發(fā)病后形成火山口突起狀的典型潰瘍斑[7]。適合海南火龍果潰瘍病菌生長和產(chǎn)孢的溫度范圍為25~35℃,病原菌在pH為4~10范圍內(nèi)的PDA培養(yǎng)基上均能生長,孢子萌發(fā)最適pH為4~5。光照對菌絲生長影響不明顯,對有機氮源硝酸鉀利用效果最好。偏酸的土壤時致病菌的溫床,因此,改變偏酸的土質(zhì),可大大降低土壤致病菌的存活和萌發(fā)基數(shù)。目前市場上火龍果潰瘍病主要依靠農(nóng)藥和化學(xué)防治,如使用吡唑醚菌酯?氟唑菌酰胺懸浮劑、氟吡菌酰胺?戊唑醇懸浮劑等殺菌劑。而農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的使用意義重大,近年來“農(nóng)殘超標”成了農(nóng)產(chǎn)品安全的首要問題[9],農(nóng)藥的大量使用,不僅對環(huán)境造成了極大影響,也直接或間接影響著農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量,本研究利用海南本地橡膠木木醋液來部分代替農(nóng)藥使用,以期為火龍果潰瘍病防治提供新方法,為減藥減肥提供參考,同時為橡膠木木醋液的資源化利用和實踐提供理論依據(jù)。1.2木醋液研究現(xiàn)狀木醋液是生物質(zhì)在其熱解炭化過程中產(chǎn)生的氣體經(jīng)冷凝回收分離得到的有機液體組分。其成分組成復(fù)雜,主要以酸類、酚類、酮類和醛類為主,還有醇類、酯類、胺類、吡啶以及鉀、鈣、鎂、鋅、錳、鐵等元素。其中酸類物質(zhì)和酚類物質(zhì)相對含量較高。產(chǎn)量很大,不同的熱解溫度其產(chǎn)物的組成不同,通常在900℃時木材熱解過程中會產(chǎn)生30%~35%的木醋液[10]。隨制炭工業(yè)的發(fā)展,除木材以外的植物(如花生殼、玉米核、松塔、雜草等)也可通過干餾得到與木醋液性質(zhì)相似的液體,通常稱為木醋液或植物酸[11]。近些年來,木醋液的研究與應(yīng)用進入了新的發(fā)展階段,開始作為抑菌劑、殺蟲劑、抗氧化劑以及植物生長調(diào)節(jié)劑等被應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和農(nóng)藥等領(lǐng)域[12]。作為一種很好的天然植物素材,木醋液的制取和精制過程都不會產(chǎn)生污染,對環(huán)境和人畜無毒害作用,被廣泛應(yīng)用于農(nóng)林業(yè)、畜牧業(yè)、工業(yè)、環(huán)境保護、食品加工保鮮及醫(yī)療衛(wèi)生等諸多領(lǐng)域。1.2.1木醋液成分分析制備得到的粗木醋液中含有易氧化、易聚合、易變色的化學(xué)成分,所以其性質(zhì)不穩(wěn)定,生物質(zhì)經(jīng)熱解制備得到的粗木醋液含有焦油和有害物質(zhì),需要通過精制得到不同用途的精制醋液,才可以被利用。木醋液常用的精制方法主要有:靜置法、蒸餾法、萃取法、活性炭吸附法和膜過濾法[13-15]。多數(shù)研究者皆利用GC/MS對樣品進行分離定性,檢出不同原料木醋液主要成分的相對含量。其中有機酸和酚類物質(zhì)是木醋液中最具特征的成分,在木醋液中含量也較高。表1-1六種不同原料木醋液有機物成分比較Table1-1Componentanalysisofwoodvinegarfromdifferentrawmaterials原料有機物種類有機酸(%)酚類(%)醇類(%)酮類(%)參考文獻稻殼9733.1911.7215.1123.72[16]花生殼8441.2714.5112.0919.30[17]山核桃7156.5616.127.689.92[18]玉米芯6654.7118.020.6914.90[19]松塔5540.2321.731.0719.66[19]核桃枝5950.1228.210.5710.47[19]1.2.2木醋液應(yīng)用前景1.2.2.1植物生長調(diào)節(jié)劑木醋液作為一種天然的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)資料,也被作為新型葉面肥使用。采用低溫炭化花生殼得到的木醋液對促進番茄長勢和品質(zhì)均有顯著提高[20]。楊華[21]和王貴林等[22]研究木醋液對大白菜、蘿卜、番茄、黃瓜等蔬菜種子發(fā)芽和幼根生長的影響,實驗結(jié)果表明:木醋液對蔬菜種子的發(fā)芽生長有明顯的促進作用,其中對蘿卜、大白菜種子的發(fā)芽和根莖部的生長促進效果十分明顯,對番茄和黃瓜,只對發(fā)芽后根和莖部的生長有明顯促進作用。楊華對蔬菜種子的研究還得出木醋液培養(yǎng)液可明顯增加蔬菜種子種苗的側(cè)根數(shù),從而加強種苗從土壤吸取養(yǎng)分的能力,增加生命力,促進作物生長。劉曉光等[23]研究木醋液對山杏種子發(fā)芽和生根的影響,實驗結(jié)果表明:木醋液具有抑制與促進的雙重功效,濃度較低或中等濃度時能促進植物種子發(fā)芽、生根和根系發(fā)育,高濃度木醋液反而會起到抑制作用。許淑瓊等以草莓為實驗材料,秋季噴灑四次1000倍木醋液后,次年草莓產(chǎn)量提高了21.6%。閆鈺等[24]利用木醋液對辣椒進行葉面噴施溫室實驗及李忠徽等[25]所做的生物實驗表明,葉面噴施木醋液能提高辣椒的株高、產(chǎn)量以及果實中維生素C含量,稀釋50倍以上的木醋液灌澆可以促進辣椒生長。常青等[26]研究木醋液浸種和澆灌對茄子種子發(fā)芽的影響,實驗結(jié)果得出:適宜稀釋倍數(shù)的木醋液浸種可以幫助茄子種子解除休眠,稀釋50~200倍都對茄子發(fā)芽有一定促進作用,反之稀釋倍數(shù)小于或等于50倍時,會對茄子種子萌發(fā)產(chǎn)生抑制作用。木醋液對番茄、大白菜、蘿卜、黃瓜、茄子等蔬菜種子以及山杏種子、草莓、辣椒等植物均含有生長促進物質(zhì),促進植物種子的生根發(fā)芽、株高產(chǎn)量等,是良好的植物生長調(diào)節(jié)劑。1.2.2.2防治病蟲害及殺菌劑木醋液作為一種純天然物質(zhì)具有應(yīng)用安全、無污染、無殘留等優(yōu)點,對病蟲害防治具有良好的安全防控意義,既充分利用廢棄植物資源、降低環(huán)境污染,又為有機生態(tài)農(nóng)業(yè)發(fā)展探索新途徑。全順子等[27]進行木醋液防治作物,針對蔬菜和果樹主要病害的室內(nèi)外實驗。結(jié)果表明木醋液原液刮皮涂藥法防治蘋果腐爛病效果明顯高于常用藥腐必清,200倍木醋液對黃瓜和西瓜枯萎病防治效果優(yōu)于甲基托布津和乙磷鋁。席新明等[28]研究木醋液與沼液及生物農(nóng)藥耦合噴施對蘋果樹病害的防治效果,得出木醋液和沼液耦合施用對生物農(nóng)藥具有顯著增效作用,說明木醋液具有顯著的生物農(nóng)藥減量效果。郭運玲等[29]研究分析了不同質(zhì)量濃度木醋液對玉米大斑病菌菌絲生長、菌絲形態(tài)和分生孢子萌芽的抑制作用,發(fā)現(xiàn)質(zhì)量濃度為25.25mg/mL的木醋液對玉米大斑病菌菌株11-09D菌絲生長的抑制率為100%,且木醋液對玉米大斑病菌孢子萌發(fā)具有明顯抑制作用,說明木醋液有可能成為防治玉米大斑病的一種新型高效抑菌劑。徐巖巖等[30]以精制山杏殼木醋液為材料,采用抑菌圖法與盆栽驗證法,研究表明5.0%精制山杏殼木醋液不僅可以有效抑制甜瓜細菌性果腐病病原菌,還可以促進甜瓜幼苗的生長,而10.0%的精制山杏殼木醋液可以替代硫酸鏈霉素用于甜瓜細菌性果腐病的防治。劉勇等[31]通過研究不同濃度木醋液對桃園炭疽病病原菌的抑菌效果和田間試驗結(jié)果表明,稀釋300倍的木醋液對炭疽病病原菌具有70%以上的抑菌效果,能較好控制炭疽病危害。段曉玲等[32]采用抑菌圈實驗方法得出,白樺木醋液、雜木木醋液、木屑木醋液及蒸餾木屑木醋液4中木醋液對大腸桿菌(Escherichiacoli)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilisl)均有抑制作用,可作為天然抑菌劑,在醫(yī)療衛(wèi)生、食品加工等行業(yè)有廣闊應(yīng)用前景。1.2.2.3土壤改良劑木醋液可增加土壤2~2.5mm級團粒的百分含量,改善土壤通氣和透水性,降低土壤pH值,增加土壤中微生物的數(shù)量[33],提高土壤有機質(zhì)含量,改善微生物群落功能多樣性和代謝活性[39-40],提高土壤質(zhì)量,進而提高土地生產(chǎn)力[34]。而且土壤EC值會隨木醋液灌施量增大而升高[35],可有效改良鹽堿土壤物理性質(zhì)[36]和土壤連作障礙問題。適宜濃度木醋液還能提高土壤細菌的種類進而活躍度[37]、,調(diào)節(jié)土壤酶活性[38]。從而使土壤結(jié)構(gòu)性能變好。韓浩章等[41]對樟幼苗土壤特性的研究得出低濃度(0.2%、1%)木醋液處理促進了土壤轉(zhuǎn)化酶、土壤脲酶、土壤蛋白酶和土壤過氧化氫酶的活性提高,改良了植物土壤生長環(huán)境。Lashari等[42]實驗得出,木醋液和生物質(zhì)炭混合堆肥可提高土壤肥沃性,顯著降低土壤含鹽量,使小麥產(chǎn)量增加。魏德福等[43]研究得出連作多年的平貝母地經(jīng)過木醋液、木醋液肥、醋炭粉的綜合改良后土壤狀況得到較大改善,土質(zhì)疏松,含水量和養(yǎng)分增加,土壤有機質(zhì)含量增加50.7%。同時經(jīng)改良和綜合防治后,平貝母地產(chǎn)量平均提高22.9%。1.2.2.4除臭、消毒和堆肥近年研究指出,木醋液在處理養(yǎng)殖場臭氣污染方面具有很大潛力。孫天竹等[44]研究表明,木醋液有機成分中的高含量乙酸可與禽舍中主要臭氣成分氨氣作用后達到除臭效果。陳雙貴等[45]研究出竹醋液除臭消毒實驗裝置,一定稀釋倍數(shù)的竹醋液能有效消除豬舍臭氣,殺滅細菌。顏海龍等[46]將蘋果木醋液為實驗材料,進行木醋液對畜禽糞便的臭氣降解試驗,效果明顯,噴灑后空氣質(zhì)量得到較大改善。針對我國每年畜禽糞便的大排放量,堆肥使得畜禽糞便得到減量化、無害化處理,面對傳統(tǒng)堆肥發(fā)酵過程出現(xiàn)的氮元素損失情況,王磊元等[47]研究表明,木醋液對堆肥過程中產(chǎn)生的氨氣有吸附作用,使大量氨氣沉淀最終以銨態(tài)氮的形勢存在而減少氮素的損失。同時促進堆肥后期銨態(tài)氮向硝態(tài)氮的轉(zhuǎn)化,加速堆肥物料的快速腐熟。李文哲等[48]的研究也表明在堆肥過程中添加一定稀釋倍數(shù)的木醋液既可有效保氮又可提高堆肥品質(zhì)。1.3選題目的和意義由于海南地區(qū)全年溫濕度偏高而有利于火龍果潰瘍病的發(fā)生和傳播,并且該病可依靠帶病種苗和孢子傳播至其他果園,防治十分困難。農(nóng)藥的化學(xué)防治對植物和農(nóng)田土壤危害較大,利用海南豐富的橡膠木資源在生產(chǎn)生物炭過程中產(chǎn)生的木醋液具有良好的抗菌、抗病毒、殺蟲等作用。本文以患有潰瘍病的火龍果為實驗對象,通過添加不同濃度的橡膠木木醋液,探討火龍果生長情況及其根際土、枝莖、嫩芽中幾種元素含量分布情況,以期在一定程度上達到農(nóng)藥減產(chǎn)甚至替代部分農(nóng)藥防治的作用,并為后續(xù)橡膠木木醋液在火龍果潰瘍病防治方面的開發(fā)和利用提供理論基礎(chǔ)。1.4研究內(nèi)容與技術(shù)路線1.4.1研究內(nèi)容本文以海南省東方市果園患潰瘍病火龍果為研究對象,探討不同濃度橡膠木木醋液對火龍果潰瘍病的防治效果、主要在火龍果生長農(nóng)藝性狀和根際土、枝莖、嫩芽中幾種元素含量分布影響,主要研究內(nèi)容包括以下三個方面:(1)不同處理橡膠木木醋液(0.5%、2%、5%、5%+鈣鎂銅硅離子、農(nóng)藥)條件下,橡膠木木醋液對患病火龍果的抑菌情況,以發(fā)芽率/發(fā)病率的值體現(xiàn)出來。(2)同一濃度不同浸泡時間(0、2min、5min)條件下,患病火龍果發(fā)病率及發(fā)芽率的變化情況。(3)不同處理橡膠木醋液(0.5%、2%、5%、5%+鈣鎂銅硅離子、農(nóng)藥)條件下,火龍果根際土、枝莖、嫩芽中幾種元素含量分布情況。1.4.2技術(shù)路線圖1-1橡膠木木醋液對火龍果潰瘍病的抑菌影響和防治分析技術(shù)路線Fig.1-1Technicalrouteofanalysisonthebacteriostaticeffectandcontrolofrubberwoodvinegaronpitayacanker2實驗部分2.1實驗材料、試劑、儀器及設(shè)備實驗材料:海南省東方市果園患病火龍果枝莖、橡膠木木醋液、綠綺30%吡唑醚菌酯殺菌劑。實驗試劑:六水合氯化鎂、氯化鈣、五水合硫酸銅、硅酸鉀、硝酸、次氯酸儀器及設(shè)備:ICP-OES、萬分之一電子天平、馬弗爐、粉碎機2.2試驗方法2.2.1實驗設(shè)計本實驗于2018年11月18日開始挖取??诓藞@沙地土,將挖取得土壤用篩網(wǎng)過篩,得到種植所用土壤。每盆火龍果種植土壤大約2kg,同時加入有機肥100g,攪拌混勻。實驗分別設(shè)置0、2min、5min三個浸泡時間,設(shè)置患病清水組(CK)、0.5%(A1)、2%(A2)、5%(A3)橡膠木木醋液、5%木醋液+鈣鎂銅硅離子組(B)、農(nóng)藥組(C)、無病清水組(D),各處理均設(shè)置4個重復(fù)。2.2.2種植火龍果2.2.2.1測定火龍果新枝長度、重量、患病級數(shù)通過對比彭超等[12]研究方法觀察確定火龍果棱莖病害患病級數(shù)并盡量裁取患病等級為2級左右的枝條,于處理液中按不同時間浸泡后拍照詳細記錄火龍果莖上潰瘍病病斑的數(shù)量、大小、位置以及火龍果莖的重量、粗細生長情況和基本特征。將浸泡后的火龍果莖分別扦插種植在花盆里,供試火龍果品種種植在海南大學(xué)熱帶農(nóng)林學(xué)院試驗園。表2-1火龍果棱莖病害特征描述Table2-1Descriptionofdiseasecharacteristicsofpitayastem患病等級特征描述0級莖節(jié)(果)顏色正常,完全無病斑1級莖節(jié)(果)出現(xiàn)小斑點,但斑點不合并成塊或片狀,直徑小于1.0cm;病斑面積小于整節(jié)得5%2級莖節(jié)(果)中病斑直徑大于1.0cm;偶爾有連接合并成片狀或塊狀;病斑面積為莖節(jié)的6%-25%3級莖節(jié)(果)中的病斑基本連成塊或片狀,顏色變成深褐色,甚至灰白色,并出現(xiàn)少量子實體,病斑面積為整個莖節(jié)得26%-40%2.2.3涂刷橡膠木木醋液橡膠木木醋液濃度梯度:分別取5ml、20ml、50ml橡膠木木醋液原液于1000ml塑料量杯中,稀釋定容,搖勻。得到濃度為0.5%、2%、5%橡膠木木醋液。用毛刷蘸取所得橡膠木木醋液涂刷至對應(yīng)火龍果枝莖上。農(nóng)藥組:取30%吡唑醚菌酯乳油稀釋1500倍后用毛刷蘸取涂刷在對應(yīng)火龍果莖枝上。離子組:取42.40g六水合氯化鎂于量杯中加水稀釋至500ml得相對濃度為2%的Mg2+;取13.87g氯化鈣于量杯中加水稀釋至500ml得相對濃度為2%的Ga2+;取9.83g五水合硫酸銅于量杯中加水稀釋至500ml得相對濃度為2%的Cu2+;取19.3g硅酸鉀于量杯中加水稀釋至500ml得相對濃度為2%的SiO32-。先涂刷5%橡膠木木醋液,再間隔半天涂刷所配鎂離子、鈣離子、銅離子和硅酸根離子溶液。農(nóng)藥處理每間隔15天涂刷一次,其他處理每間隔7天涂刷一次。2.2.4記錄火龍果生長數(shù)據(jù)每隔一月測量每株火龍果枝莖上潰瘍病病斑的大小、位置以及火龍果莖的粗細及長度,同時記錄火龍果病菌的變化。將每次測量時潰瘍病斑面積占總表皮面積的占比值定為其發(fā)病率,將嫩芽的長度記為發(fā)芽長度。最終通過發(fā)芽長度與發(fā)病率的比值在代表抑菌效果。2.2.5樣品處理及元素測定枝莖和嫩芽樣品:分別裁取每株火龍果的部分枝莖和新芽,剪碎后裝入信封紙袋稱重后放入馬弗爐中,在180度下烘30分鐘后,在80度下繼續(xù)烘12h至樣品完全烘干后稱重,將烘干后的樣品置于粉碎機中磨碎過篩(100目)后得到處理后的枝莖樣品。根際土壤樣品處理:分別取每株火龍果適量根際土晾干,用研缽磨碎后過篩(100目)裝入自封袋后標記即為處理后土壤樣品。通過Optima8000電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀(ICP-OES)分別測定了根際土、枝莖、嫩芽中的鈣、銅、鐵、鉀、鎂、錳元素。樣品制備均參照魯如坤(1999)[49]的分析方法。2.2.5.1ICP-OES樣品測定稱取經(jīng)預(yù)處理的樣品置于三角燒瓶中,加入10mL濃HNO3浸泡24h,在電熱板上加熱,消化完全,搖勻放冷,滴加HCLO42mL,微火加熱,消化至終點,過濾后移至50mL容量瓶中定容以供測試。(精密度:1mg/L混合多元素標準溶液,重復(fù)測定十次的RSD≤0.5%。)2.3數(shù)據(jù)處理火龍果生長數(shù)據(jù)和火龍果根際土、枝莖、嫩芽元素含量數(shù)據(jù)用OriginPro2017、SPSS25和Excel2017進行分析。3結(jié)果與討論3.1不同濃度橡膠木木醋液處理對火龍果潰瘍病的抑菌效果火龍果發(fā)病率與每株火龍果發(fā)芽長度的比值表示火龍果潰瘍病的發(fā)病程度。即發(fā)病率/發(fā)芽長度的值越小,說明其發(fā)病程度越低,即生長情況越良好。不同處理下火龍果潰瘍病的抑菌程度為0.06~0.04,橡膠木木醋液濃度處理組平均值為0.03,處理組中的0.5%濃度木醋液(A1)組、5%濃度木醋液+離子組(B)及農(nóng)藥組(C)的對火龍果潰瘍病的抑菌效果都低于空白組,分別為CK組的0.29倍、0.72倍和0.81倍,結(jié)果表明:0.5%橡膠木木醋液濃度組對潰瘍病的抑菌效果最好。不同處理下對火龍果潰瘍病的抑菌效果:0.5%木醋液>5%木醋液+鈣鎂銅硅離子>農(nóng)藥>對照>5%木醋液>2%木醋液(見圖3-1)圖3-1不同濃度橡膠木木醋液處理對火龍果潰瘍病的抑菌效果Fig.3-1Thebacteriostaticeffectofdifferentconcentrationsofrubberwoodvinegaronpitayacanker.3.2不同時間橡膠木木醋液浸泡處理對火龍果潰瘍病的抑菌效果在不同浸泡時間條件下,同一處理的橡膠木木醋液浸泡處理對火龍果潰瘍病的抑菌效果(見圖3-2),即隨著浸泡時間的增加,火龍果潰瘍病的抑菌效果抑菌程度越好(發(fā)病率/發(fā)芽長度的值越?。?,尤其5min的浸泡時間對火龍果潰瘍病的抑菌效果最好。圖3-2不同時間的木醋液浸泡處理對火龍果潰瘍病的抑菌效果Fig3-2Thebacteriostaticeffectofdifferentsoakingtimeofwoodvinegaronpitayacanker3.3火龍果根際土、莖和芽元素含量分析本實驗測定了樣品相關(guān)元素含量,部分元素具有生物學(xué)意義,是植物正常生長所必需的且在植物體內(nèi)的作用有很強的專一性,是不可缺乏和不可替代的[50],但對植物的生長發(fā)育起著至關(guān)重要的作用。3.3.1火龍果根際土中元素含量分析不同處理下被測火龍果根際土中各元素含量分布具有差異性(見表3-1),木醋液在一定程度上可以增加潰瘍病火龍果根際土中鈣、銅、鐵、鎂、錳元素含量,推測木醋液對土壤具有一定改良作用。不同處理中鈣含量為0.55g/kg~0.80g/kg,與CK組相比,其他處理鈣含量均有提高,A3處理組根際土中鈣含量最高為0.8067g/kg,分別是CK組、C處理組和D處理組的1.47倍、1.08倍和6.63倍。B處理組由于施加了銅離子導(dǎo)致銅含量最高,其余處理組中A3組根際土中銅含量最高為30.82mg/kg,分別為CK組、C組和D組的1.61倍、1.36倍、1.59倍。A3處理鐵含量最高為29.47mg/kg,分別為CK組、C組和D組的1.5倍、1.39倍和1.46倍。C組和D組鎂含量最高分別為0.18g/kg和0.17g/kg,木醋液處理組中A1組鎂含量最高為0.13g/kg,為CK組和C組的2.66倍和0.73倍,A3組錳含量最高為146.43mg/kg,分別是CK組、C組和D組的1.46倍、1.67倍和1.57倍。表3-1患病火龍果根際土中六種元素的含量Table3-1ContentsofsixelementsinrhizospheresoilofdiseasedPitaya處理Ca(g/kg)Cu(mg/kg)Fe(mg/kg)K(g/kg)Mg(g/kg)Mn(mg/kg)CK0.55±0.0819.17±1.4319.71±0.923.04±0.150.05±0.01100.00±8.23A10.65±0.0327.26±4.0523.08±3.972.98±0.340.13±0.03108.17±15.14A20.62±0.0622.54±3.5319.26±0.813.02±0.140.07±0.0194.84±7.16A30.81±0.1230.82±2.0629.47±0.962.99±0.190.07±0.00146.43±26.53B0.75±0.09149.67±25.0017.48±1.4173.00±0.310.04±0.0087.22±3.08C0.75±0.0922.68±1.9321.25±1.503.49±0.140.18±0.02108.91±6.25D0.12±0.0119.44±1.5720.25±0.331.73±0.390.17±0.0392.89±14.733.3.2火龍果莖組織中元素含量分析不同處理下火龍果火龍果枝莖中鈣,銅、鐵、鉀、鎂和錳元素含量不同(見表3-2),火龍果莖組織中鈣含量為12.7g/kg~22.77g/kg,與木醋液濃度成正相關(guān),A3組鈣含量為18.74g/kg,分別是CK組、C組和D組的1.31倍、1.81倍和0.82倍。除B處理組外,其余處理組莖組織中銅含量為14.07mg/kg~23.41mg/kg,木醋液處理組中A1組銅含量最高為20.28mg/kg,分別是CK組、C組和D組的1.2倍、0.87倍和0.97倍,火龍果莖組織中鉀含量為28.99g/kg~39.22g/kg,除CK組外,A1組鉀含量最高為38.99g/kg,分別是CK組、C組和D組的0.99倍、1.09倍和1.35倍。莖組織中鎂含量和錳含量分別為5.20g/kg~8.85g/kg和95.83mg/kg~186.38mg/kg。表3-2患病火龍果莖組織中五種元素的含量Table3-2ContentsoffiveelementsinthebranchesandstemsofdiseasedPitaya處理Ca(g/kg)Cu(mg/kg)Fe(g/kg)K(g/kg)Mg(g/kg)Mn(mg/kg)CK14.21±1.9416.87±2.780.56±0.0439.22±2.068.85±0.8195.83±16.01A112.70±2.9020.28±2.960.16±0.0338.99±3.485.20±0.44123.00±16.50A215.54±1.3214.07±0.890.16±0.0230.69±3.257.43±1.14135.21±23.33A318.74±0.9115.00±1.310.18±0.0231.72±3.128.36±0.19114.90±22.40B15.05±1.41287.79±37.380.14±0.0036.56±1.797.65±1.12133.09±11.88C10.33±1.2023.41±0.660.38±0.0535.63±5.717.55±0.85140.73±0.95D22.77±0.5620.99±0.10.15±0.0028.99±1.018.18±0.08186.38±3.413.3.3火龍果芽組織中元素含量分析不同處理下火龍果芽組織中鈣含量為6.69g/kg~11.63g/kg,鈣含量與木醋液濃度也成正相關(guān),A3組鈣含量最高為10.8g/kg,分別是CK組、B組、C組和D組的1.02倍,0.93倍、0.98倍和1.51倍。除B組加入銅離子導(dǎo)致銅含量過高外,其他處理組中銅含量為16.07mg/kg~25.58mg/kg,芽組織中鐵含量為0.04g/kg~0.65g/kg,木醋液處理對火龍果芽組織中銅和鐵含量影響并不明顯。A2組鉀含量最高為47.23g/kg,分別是CK組、C組和D組的1.22倍、1.05倍和1.28倍。芽組織中鎂含量為6.35g/kg~8.29g/kg,而且鎂在火龍果根際土、莖、芽中含量比例約為1:83:80,具有一定蓄積性(見表3-3)。表3-3患病火龍果芽組織中六種元素的含量Table3-3ContentsofsixelementsinthebudsofdiseasedPitaya處理Ca(g/kg)Cu(mg/kg)Fe(g/kg)K(g/kg)Mg(g/kg)Mn(mg/kg)CK10.61±1.1518.12±2.450.31±0.0438.67±2.826.91±0.5588.12±6.28A16.69±0.0316.07±0.230.11±0.0135.86±3.297.29±0.65183.63±1.26A27.67±0.1317.11±0.420.20±0.0247.23±0.256.35±0.12116.91±2.72A310.80±0.3616.32±1.420.07±0.0041.45±2.696.91±0.9551.70±1.22B11.63±1.1668.53±7.210.04±0.0040.26±1.807.88±0.40146.44±14.94C11.02±1.4125.58±3.130.65±0.0444.89±7.078.29±0.58355.25±1.70D7.15±0.3219.38±0.410.14±0.0036.97±0.495.72±0.1691.15±3.914結(jié)論(1)本研究實驗處理中的A1組、B組和C組對火龍果潰瘍病的抑菌效果明顯,分別為CK組的3.42倍、1.38倍和1.22倍,同時A1組抑菌效果為C組的2.81倍,0.5%濃度木醋液處理組抑菌效果超過CK組和農(nóng)藥處理,對潰瘍病的抑菌效果最好。(2)在移栽患病火龍果前,進行一個初步的浸泡處理時,2%木醋液處理組(A1)組出現(xiàn)反常,其他處理在一定時間,隨著浸泡時間的增加,發(fā)病率與發(fā)芽長度的比值越低、抑菌程度越高。朱學(xué)強等[51]研究表明,稀釋1000倍木醋液浸種能顯著促進幼苗生長,同時增加其對營養(yǎng)元素的吸收。本實驗中5min浸泡時間為最佳浸泡時間,在此浸泡時間下火龍果潰瘍病發(fā)病程度最低。(3)木醋液在一定程度上可以增加潰瘍病火龍果根際土中鈣、銅、鐵、鎂、錳元素含量,推測木醋液對土壤具有一定改良作用,同時木醋液可以替代農(nóng)藥施用達到相同甚至更優(yōu)的防治效果。不同組織部位中的元素含量與木醋液的濃度也具有一定相關(guān)性,其中不同濃度木醋液處理鈣含量與木醋液濃度成正相關(guān)性,鎂含量與木醋液濃度成負相關(guān),鐵元素主要集中在根際土中。木醋液處理錳含量明顯高于CK組、農(nóng)藥處理和健康植株,提高了火龍果根際土中錳的含量。(4)適宜稀釋度的木醋液能夠顯著提高植物葉片中氮、磷、鉀等營養(yǎng)元素的含量,提高植物光合作用和有機物質(zhì)的積累,有利于植物果實的生長發(fā)育和糖分積累[52]。本實驗通過對患病火龍果根際土、枝莖和嫩芽中不同元素含量的分析得出,木醋液在一定程度上可以增加火龍果枝莖中銅、鉀、錳元素含量,增加嫩芽中鎂和錳元素含量。不同濃度木醋液處理下枝莖和嫩芽中銅含量無較大差異,但從不同組織部位來看,銅元素在莖組織中含量最高。鈣含量與木醋液濃度成正相關(guān)性,鉀、鎂和錳元素在莖組織和芽組織中含量分布差異性較大,鐵元素主要集中分布在火龍果嫩芽部位。鉀含量在根際土、莖和芽中含量分布比例約為1:11:13,大部分鉀元素都集中在枝莖和嫩芽從而參與光合作用等過程,具有一定蓄積性。致謝衷心感謝我的導(dǎo)師黃青老師從我進入實驗室開始,到課程論文、畢業(yè)論文選題、構(gòu)思、實驗指導(dǎo)、數(shù)據(jù)處理、最終定稿等各個階段都給予我細心的指引和教導(dǎo),使我對橡膠木木醋液的資源化利用有了深刻認識,并最終得以完成畢業(yè)論文。感謝王青青師姐和郭根茂師兄在實驗操作、論文數(shù)據(jù)處理等方面的指導(dǎo)和幫助,感謝劉銀師姐、王嘉鑫學(xué)姐、李云哲學(xué)長、劉小亮學(xué)弟、胡雯同學(xué)等在實驗過程中的幫助,幫助我辛苦的準備和處理樣品,感謝他們的幫助讓我的實驗順利進行,非常感謝!最后,非常感謝各位學(xué)院的老師們在這四年里的關(guān)心、指導(dǎo)和幫助,正因為所有老師們悉心指導(dǎo)和栽培,才得以成長和順利畢業(yè),為大學(xué)畫上一個圓滿的句號。感謝所有朋友、同學(xué)和室友們的關(guān)心和幫助,感謝家人的鼓勵和支持,感謝他們和我一路走來,讓我在此過程中倍感溫暖!參考文獻陳圓,嚴婉榮,趙志祥,等.海南省火龍果產(chǎn)業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀及可持續(xù)發(fā)展前景[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技,2015,(018):326-327.彭超,羅志文,范鴻雁,等.海南地區(qū)火龍果病害調(diào)查[C].中國園藝學(xué)會現(xiàn)代果業(yè)標準化示范區(qū)創(chuàng)建暨果樹優(yōu)質(zhì)高效生產(chǎn)技術(shù)交流會.韓冰,韓劍.海南省火龍果產(chǎn)業(yè)發(fā)展形勢及其建議[J].中國南方果樹,2015(05):161-163.李家寧,林位夫,謝貴水,等.海南橡膠樹木材加工利用現(xiàn)狀[J].熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué),2010,30(03):67-70.張榮,劉愛媛,白成艷,等.火龍果潰瘍病的癥狀觀察和病原菌鑒定[J].果樹學(xué)報,2013(5):854-856.戴俊,王會會,符碧海,等.火龍果潰瘍病和莖腐病病原菌的生物學(xué)特性測定[J].中國南方果樹(1).易潤華,甘羅軍,晏冬華,等.火龍果潰瘍病病原菌鑒定及生物學(xué)特性[J].植物保護學(xué)報,2013,40(2):102-108.李敏,胡美姣,薛丁榕,等.火龍果黑斑病菌[Bipolariscactivora(Petrak)Alcorn]生物學(xué)特性研究[J].熱帶作物學(xué)報,2013,34(9):1770-1775蔡大旺.淺談“農(nóng)藥使用量零增長”活動[J].新農(nóng)業(yè),2019,892(07):17-18.袁振宏,吳創(chuàng)之,馬隆龍,等.生物質(zhì)能利用原理與技術(shù)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2005,10(5):1911-1922.徐晴晴,李曉慶,孟雨田,等.木醋液應(yīng)用研究進展[J].黑龍江生態(tài)工程職業(yè)學(xué)院學(xué)報,2017(2彭超,羅志文,范鴻雁,等.海南地區(qū)火龍果病害調(diào)查[C].中國園藝學(xué)會現(xiàn)代果業(yè)標準化示范區(qū)創(chuàng)建暨果樹優(yōu)質(zhì)高效生產(chǎn)技術(shù)交流會.劉長風(fēng),李敏,高品一,等.木醋液的來源、成分及其應(yīng)用研究進展[J].中國農(nóng)學(xué)通報,2016,32(01):28-32.Fagern?s,Leena;Kuoppala,Eeva;Tiilikkala,Kari;Oasmaa,Anja.Chemicalcompositionofbirchwoodslowpyrolysisproducts[J].Energy&Fuels,2012,26(2):1275-1283.WititsiriS.Productionofwoodvinegarsfromcoconutshellsandadditionalmaterialsforcontroloftermiteworkers,Odontotermessp.andstripedmealybugs,Ferrisiavirgate[J].SongklanakarinJournalofScience&Technology,2011,33(3):349-354.王建剛.稻殼木醋液化學(xué)成分氣相色譜質(zhì)譜分析[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2
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