現(xiàn)代儀器分析色譜分析色譜法:一種分離分析方法,具有超高得分離能力。分離原理:固定相:固定在管內(nèi)得填充物。(固體或液體)流動相:攜帶混合物流過固定相得流體。(氣體或液體)她利用各組分在兩相間分配系數(shù)得差別,當(dāng)溶質(zhì)在兩相間做相對運(yùn)動時,各物質(zhì)在兩相間進(jìn)行多次分配,從而使各組分得到分離。一、概述色譜參數(shù)

基線

在操作條件下,沒有組分流出時得流出曲線,即只有載氣通過時得信號。穩(wěn)定得基線應(yīng)就是一條平行于時間軸得直線。色譜峰就是色譜圖上得突起部分,即組分流經(jīng)檢測器所產(chǎn)生得信號。

色譜流出曲線圖定性參數(shù)

保留值:(保留時間、保留體積)保留時間tR

死時間t0(tM)調(diào)整保留時間tR’t’R=tR-tM:被測組分從進(jìn)樣開始到柱后出現(xiàn)濃度最大值所需得時間。:空氣、甲烷等不被固定相吸附或溶解得惰性物質(zhì)流經(jīng)柱得時間。:由于溶解或吸附于固定相,比不溶解或不被吸附得組分在色譜中多滯留得時間。調(diào)整保留體積VR’死體積V0

Fc:流動相得流速(ml/min)保留體積VR定量參數(shù)峰高(h):組分在柱后出現(xiàn)濃度極大時得檢測信號,即色譜峰頂至基線得距離。峰面積(A):色譜曲線與基線間包圍得面積。

區(qū)域?qū)挾?、半峰寬(Y1/2或W1/2)

峰高1/2處得峰寬3、峰(底)寬(Y或W)

自色譜峰兩側(cè)得轉(zhuǎn)折點所作切線在基線上得截距1、標(biāo)準(zhǔn)偏差(

)0、607倍峰高處色譜峰寬度得一半柱效參數(shù)4Y=s越窄越好即相鄰兩個組分調(diào)整保留值之比,又稱為分配系數(shù)比或選擇性系數(shù)比。相鄰兩個組分得色譜峰,其保留時間差與兩峰峰底寬平均值之商。分離參數(shù)1、分離因子(α)2、分離度(R)相平衡參數(shù)1、分配系數(shù)

(K)在一定溫度下組分在兩相之間分配達(dá)到平衡時得濃度值比。2、容量因子(k)指在一定溫度和壓力下,組分在色譜柱中達(dá)分配平衡時,在固定相與流動相中得質(zhì)量比——更易測定、10大家應(yīng)該也有點累了，稍作休息大家有疑問的，可以詢問和交流二、氣相色譜法,GC1、概述氣相色譜-----就是用氣體作為流動相得一種色譜法。根據(jù)固定相狀態(tài)得不同,可分為:項目①氣-固色譜法②氣-液色譜法流動相氣體氣體固定相固體(多孔性及較大表面積得吸附劑)擔(dān)體+固定液(高沸點有機(jī)化合物得液膜)原理各組分吸附能力不同而進(jìn)行分離基于各組分在固定液中溶解度得不同過程反復(fù)得物理吸附-解吸附過程反復(fù)得溶解、揮發(fā)過程結(jié)果吸附力小(大)得組分先(后)離開色譜柱溶解度小(大)得組分先(后)離開色譜柱。2、分類及其分離原理氣-液色譜分離原理——

兩相分配固定液載氣遷移平衡固定液載氣各組分在固定液中溶解能力不同固定液載氣溶解度大難揮發(fā)柱中停留時間長向前移動慢基本流程和主要部件載氣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)色譜柱檢測器記錄、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)3、氣相色譜儀氣相色譜儀得流程圖1)載氣系統(tǒng)氣源、氣體凈化、氣體流速控制和測量1、常用得載氣有:氫氣、氮?dú)?、氦氣、氬?、凈化干燥管:活性炭、硅膠、分子篩等(除去載氣中得水分、氧等雜質(zhì))3、減壓閥、穩(wěn)流閥:載氣壓力和流速控制(載氣流要穩(wěn)定)2)進(jìn)樣系統(tǒng)包括進(jìn)樣器和氣化室(液體進(jìn)樣)氣體:注射器、定量閥液體或固體:稀釋或溶解后用微量注射器氣化室使液體樣品迅速完全氣化3)色譜柱填充柱:內(nèi)裝固定相,通常為用金屬(不銹鋼)或玻璃制成得內(nèi)徑2~4mm、長0、5-6m得U形或螺旋形得管子。毛細(xì)管柱:將固定液均勻地涂敷在毛細(xì)管得內(nèi)壁,內(nèi)徑0、1~0、5mm、長20-200m得玻璃或石英管。4)檢測系統(tǒng)將經(jīng)色譜柱分離后得各組分按其特性及含量轉(zhuǎn)化為相應(yīng)得電信號。根據(jù)檢測原理不同,濃度型、質(zhì)量型濃度型:熱導(dǎo)池、電子捕獲檢測器質(zhì)量型:氫火焰離子化、火焰光度檢測器5)記錄系統(tǒng)放大器、記錄儀、數(shù)據(jù)處理器衛(wèi)生防疫、食品衛(wèi)生、環(huán)境檢測質(zhì)量監(jiān)督、石油化工、精細(xì)化工農(nóng)藥制藥、礦山等行業(yè)及科研。與其她近代分析儀器聯(lián)用(氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用)4、應(yīng)用范圍三、高效液相色譜法,HPLC1、概述高效液相色譜法就是繼氣相色譜之后,20世紀(jì)70年代初期發(fā)展起來得一種以液體做流動相得新色譜技術(shù)。高沸點、熱不穩(wěn)定有機(jī)及生化試樣得高效分離分析方法。按固定相不同:液-固吸附色譜法液-液分配色譜法項目①液-固色譜法②液-液分配色譜法流動相液體液體固定相固體吸附劑(如硅膠、氧化鋁)載體+固定液;早期用涂漬法;化學(xué)鍵合固定相原理吸附劑對樣品中各組分(溶質(zhì)分子)得吸附能力不同組分在兩相中溶解度得差異結(jié)果強(qiáng)極性組分后出柱;弱極性組分先出柱正相色譜:固定液極性>流動相極性,極性小(大)得組分先(后)出柱反相色譜:固定液極性<流動相極性,極性大(小)得組分先(后)出柱2、分類及其分離原理適于分離極性組分適于分離非極性組分化學(xué)鍵合固定相早期得機(jī)械涂層法,易使固定液流失,已淘汰?；瘜W(xué)鍵合固定相:用化學(xué)反應(yīng)得方法將固定液得官能團(tuán)鍵合在載體表面上。目前應(yīng)用最廣、性能最佳得固定相

特點(1)傳質(zhì)快,表面無深凹陷,比一般液體固定相傳質(zhì)快;(2)壽命長,化學(xué)鍵合,無固定液流失,耐流動相沖擊,耐水、耐光、耐有機(jī)溶劑,穩(wěn)定;(3)選擇性好,可鍵合不同官能團(tuán),提高選擇性。

3、高效液相色譜儀基本流程和主要部件高壓輸液系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)分離系統(tǒng)檢測系統(tǒng)、、貯液器、高壓泵、脫氣器1．貯液罐（濾棒，可濾去顆粒狀物質(zhì)）2．高壓泵（輸液泵）3．進(jìn)樣裝置4．色譜柱——分離5．檢測器——分析6．廢液出口或組分收集器7．記錄裝置高效液相色譜儀得流程圖1)高壓輸液泵A、壓力:150～350×105Pa。B、為了獲得高柱效而使用粒度很小得固定相(<10μm),液體得流動相高速通過時,將產(chǎn)生很高得壓力,因此高壓、高速就是高效液相色譜得特點之一。C、應(yīng)具有壓力平穩(wěn)、脈沖小、流量穩(wěn)定、可調(diào)、耐腐蝕等主要部件定義:流動相中含有兩種(或更多)不同極性得溶劑,在分離過程中按一定得程