15I發(fā)有限責(zé)任公司、呼和浩特市農(nóng)牧技術(shù)推廣中心、烏拉特前旗農(nóng)1洋蔥、大蒜病毒鑒定技術(shù)規(guī)程脫氧核苷三磷酸、引物和緩沖液組成，反應(yīng)過(guò)程2洋蔥黃矮病毒(Onionyellowdwarfvirus,OYDV)。黃瓜花葉病毒(Cucumbermosaicvirus,CMV)。大蒜潛隱病毒(Garliclatent韭蔥黃條病毒(Leekyell洋蔥黃矮病毒(Onionyellowdwarfvirus,OYDV)。種植面積小于667m2(含667m2),抽檢100株。種植面積為667m2到6670m2(含6670m2),首個(gè)667m2抽100株，之后每增加667m2增檢50株。超過(guò)6670m2,前6670m2按上述方法抽3ab47.4瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)7.4.1瓊脂糖凝膠制備用Tris-乙酸緩沖液溶解瓊脂糖，制備質(zhì)量體積比為1%的瓊脂糖凝膠。瓊脂糖凝膠的制備按照SN/T2497.21執(zhí)行。7.4.2電泳檢測(cè)用Tris-乙酸緩沖液，在水平板電泳槽中進(jìn)行電泳。上樣、電泳按照SN/T2497.21執(zhí)行。電泳結(jié)束時(shí)，凝膠置于紫外燈或凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行觀測(cè)和拍照，獲取的圖片用于結(jié)果判定。8結(jié)果判定8.1異常結(jié)果根據(jù)瓊脂糖凝膠電泳圖，與圖中DNA相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)品相比，從陰性對(duì)照樣品擴(kuò)增到了預(yù)期大小的DNA片段，或從陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照樣品均未擴(kuò)增到預(yù)期大小的DNA片段。此時(shí)，判定為檢測(cè)錯(cuò)誤，應(yīng)重新進(jìn)行檢測(cè)。8.2陽(yáng)性結(jié)果從陰性對(duì)照樣品未擴(kuò)增到預(yù)期大小的DNA片段，從被檢測(cè)樣品擴(kuò)增到了預(yù)期大小的DNA片段。有陽(yáng)性對(duì)照時(shí)，從陽(yáng)性對(duì)照擴(kuò)增的DNA片段大小，與判定為陽(yáng)性的樣品中擴(kuò)增的DNA片段大小一致。此時(shí)，判定被檢測(cè)樣品為陽(yáng)性，即大蒜、洋蔥樣品攜帶了特定的病毒。8.3陰性結(jié)果從陰性對(duì)照和被檢測(cè)樣品中未擴(kuò)增到預(yù)期大小的DNA片段，從陽(yáng)性對(duì)照中擴(kuò)增到預(yù)期大小的DNA片段。此時(shí)，判定被檢測(cè)樣品為陰性，即大蒜、洋蔥樣品未攜帶被檢測(cè)病毒。9結(jié)果驗(yàn)證當(dāng)不具備陽(yáng)性對(duì)照，只有陰性對(duì)照時(shí)，應(yīng)當(dāng)隨機(jī)選取3～5個(gè)被判定為陽(yáng)性的樣品，對(duì)擴(kuò)增的DNA片段進(jìn)行序列測(cè)定，序列測(cè)定按照GB/T