DB23黑龍江省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布IDB23/T2581—2020本標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)GB/T1.1-2009的編寫(xiě)規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由黑龍江省林業(yè)和草原局提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：黑龍江省林業(yè)科學(xué)研究所、大興安嶺昌茂源農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司、黑龍江省美溪林業(yè)局、黑龍江省大興安嶺農(nóng)林科學(xué)院、林口縣青山國(guó)家落葉松良種基地等。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：王丹、舒鈺、楊晶、趙學(xué)麗、馬盈、溫愛(ài)亭、馬龍軍、唐仲秋、劉會(huì)鋒、李琪、孫峰巍、王建康、趙威、端木繁義、曲虹。DB23/T2581—20201興安杜鵑組培育苗技術(shù)規(guī)程本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了興安杜鵑（RhododendrondauricumL.）組培育苗技術(shù)的外植體采集制作、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)基配制、組織培養(yǎng)、煉苗移栽和生產(chǎn)檔案。本標(biāo)準(zhǔn)適用于興安杜鵑組培育苗。2規(guī)范性引用文件下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。NY/T2306—2013花卉種苗組培快繁技術(shù)規(guī)程3外植體采集制作3.1采集5月末至7月末的晴天，選擇生長(zhǎng)健壯的植株做采集母樹(shù)，剪取當(dāng)年生未木質(zhì)化枝條水培備用，長(zhǎng)度20cm～30cm為宜。3.2制作將枝條剪成帶1個(gè)～2個(gè)腋芽的幼嫩莖段，長(zhǎng)度2cm～3cm，去掉下端葉片，頂端葉片保留1/2。4培養(yǎng)條件4.1分化誘導(dǎo)及繼代增殖培養(yǎng)培養(yǎng)室的溫度控制在25℃±3℃,相對(duì)空氣濕度控制在70%～80%，光照強(qiáng)度為27μmol?m-2?s-1~36μmol?m-2?s-1，光照時(shí)間為12h/d。4.2生根培養(yǎng)光照時(shí)間為14h/d，其他同4.1。5培養(yǎng)基配制5.1培養(yǎng)基選擇5.1.1誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基配方;1/4MS+GA3(1.0mg/L）+IBA(0.5mg/L）+蔗糖（30g/L）+瓊脂（7g/LpH=5.4。MS培養(yǎng)基配方參見(jiàn)NY/T2306—2013中附錄F.1。DB23/T2581—202025.1.2繼代增殖培養(yǎng)基繼代增殖培養(yǎng)基配方：1/4MS+6-BA(1.0mg/L)+IBA(0.5mg/L)+蔗糖30g/L+瓊脂7.0g/L，pH=5.4。5.1.3生根培養(yǎng)基生根培養(yǎng)基配方：1/4MS+IBA(1.0mg/L)+GA3(0.5mg/L)+蔗糖30g/L+瓊脂7.0g/L，pH=5.4。5.2培養(yǎng)基制備將蒸餾水、基本培養(yǎng)基、蔗糖、瓊脂混合加熱溶解，再加入生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑（IBA、6-BA、GA3調(diào)節(jié)pH值，分裝入水洗干燥后的培養(yǎng)瓶中，封口。生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑配制方法參見(jiàn)NY/T2306—2013中附錄H。5.3培養(yǎng)基滅菌瓶裝培養(yǎng)基應(yīng)在10h內(nèi)完成高壓滅菌，壓力0.105MPa、溫度121℃、滅菌20min。5.4培養(yǎng)基保存滅菌后的培養(yǎng)基放入接種室，常溫條件下7d內(nèi)使用，2℃~4℃條件下15d內(nèi)使用。培養(yǎng)基應(yīng)保存于潔凈環(huán)境中，避光和防塵。6組織培養(yǎng)6.1外植體消毒6.1.1清洗用去污粉洗滌外植體2min～3min，流水沖洗干凈。6.1.2酒精處理用75%的酒精滅菌15s～30s，無(wú)菌水沖洗3次。6.1.3次氯酸鈉處理用1%的次氯酸鈉溶液浸泡經(jīng)酒精處理的外植體，浸泡過(guò)程中不斷輕搖培養(yǎng)瓶，浸泡10min～15min后倒出次氯酸鈉溶液，再用無(wú)菌水沖洗3次～5次。6.2接種外植體經(jīng)過(guò)消毒，放在無(wú)菌濾紙上吸干水分，去掉兩端損害部分，放入培養(yǎng)瓶中，每個(gè)培養(yǎng)瓶放3個(gè)～4個(gè)外植體，蓋上瓶蓋兒，標(biāo)注日期。6.3分化誘導(dǎo)培養(yǎng)將消毒好的莖段接種到5.1.1分化誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，待分化成高1.5cm～3cm的不定芽時(shí)進(jìn)行繼代增殖培養(yǎng)。6.4繼代增殖培養(yǎng)將不定芽接種到5.1.2繼代增殖培養(yǎng)基上，待分化為3cm～5cm高的叢生芽時(shí)進(jìn)行生根培養(yǎng)。6.5生根培養(yǎng)DB23/T2581—20203選取生長(zhǎng)健壯的叢生芽，接種到5.1.3生根培養(yǎng)基上，待叢生芽基部長(zhǎng)出3條～5條主根且有二級(jí)根出現(xiàn)時(shí)即可進(jìn)行煉苗移栽。7煉苗移栽7.1煉苗將培養(yǎng)瓶放置在散色光的溫室內(nèi)，溫度控制在25℃±3℃,封口培養(yǎng)3d。7.2移栽7.2.1基質(zhì)準(zhǔn)備將泥炭土+珍珠巖按1:1比例混合好裝入育苗容器中，育苗容器宜選用高為8cm、口徑為8cm的營(yíng)養(yǎng)缽，用2‰的高錳酸鉀溶液噴淋滅菌后備用。7.2.2洗苗取出已生二級(jí)根的組培苗放入清水中，清洗干凈根部培養(yǎng)基。7.2.3移栽將洗凈的組培苗移栽至已備好的營(yíng)養(yǎng)缽中，保持根系舒展，幼苗直立，基質(zhì)覆蓋至組培苗基部，稍壓實(shí)。7.3管理7.3.1溫度苗期溫度控制在18℃~28℃。宜用遮光度30%～50%的遮蔭網(wǎng)控制小拱棚內(nèi)溫度，當(dāng)溫度過(guò)高時(shí)，可適時(shí)通風(fēng)降溫。7.3.2空氣濕度采用薄膜小拱棚保持空氣濕度在70%～80%，當(dāng)?shù)谝黄氯~完全展開(kāi)時(shí)，可逐漸打開(kāi)薄膜降低濕度；30d后完全打開(kāi)薄膜，空氣濕度保持在60%～70