ICS13.080

CCSZ18

37

山東省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB37/T4481.4—2021

土壤中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)

質(zhì)譜法第4部分：霜脲氰殘留量的測(cè)定

Determinationofpesticideresiduesinsoil—Liquidchromatography-tandemmass

spectrometry—Part4:Determinationofcymoxanilresidues

2021-12-29發(fā)布2022-01-29實(shí)施

山東省市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB37/T4481.4—2021

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件是DB37/T4481《土壤中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法》的第4部分。DB37/T4481

已經(jīng)發(fā)布了以下部分：

——第1部分：9種三唑類殺菌劑殘留量的測(cè)定；

——第2部分：六種除草劑殘留量的測(cè)定；

——第3部分：壬基酚二氧乙烯醚、壬基酚和4-正壬基酚殘留量的測(cè)定；

——第4部分：霜脲氰殘留量的測(cè)定。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任。

本文件由山東省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并組織實(shí)施。

本文件由山東省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。

I

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引言

作為土壤中農(nóng)藥殘留分析的一部分，本文件規(guī)定了土壤中霜脲氰殘留量液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方

法，方法的檢出限、精密度等均能滿足土壤樣品檢驗(yàn)的要求，對(duì)產(chǎn)地環(huán)境的保護(hù)、農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)業(yè)的健康、

可持續(xù)發(fā)展有積極和深遠(yuǎn)的意義。

II

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土壤中農(nóng)藥殘留量的測(cè)定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法第4部分：霜脲

氰殘留量的測(cè)定

1范圍

本文件規(guī)定了土壤中霜脲氰殘留量液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測(cè)定方法。

本文件適用于土壤中霜脲氰殘留量的測(cè)定。

注：本標(biāo)準(zhǔn)的方法定量限為0.01mg/kg，線性范圍為0.01mg/L～0.5mg/L。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過(guò)文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)用水規(guī)格和實(shí)驗(yàn)方法

3術(shù)語(yǔ)和定義

本文件沒(méi)有需要界定的術(shù)語(yǔ)和定義。

4原理

試樣經(jīng)乙腈提取，提取液經(jīng)凈化后，用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測(cè)，外標(biāo)法定量。

5試劑與材料

除非另有說(shuō)明，在分析中僅使用分析純的試劑，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。

5.1試劑

5.1.1乙腈（CH3CN，CAS號(hào)：75-05-8）。

5.1.2甲醇（CH3OH，CAS號(hào)：65-56-1）：色譜純。

5.1.3乙酸銨（CH3COONH4，CAS號(hào)：631-61-8）：色譜純。

5.1.4氯化鈉（NaCl，CAS號(hào)：7647-14-5）：140℃烘烤4h。

5.1.5無(wú)水硫酸鎂（MgSO4，CAS號(hào)：7487-88-9）：650℃灼燒4h，置干燥器中貯存?zhèn)溆谩?/p>

5.1.6甲酸（HCOOH，CAS號(hào)：64-18-6）：色譜純。

5.2溶液配制

0.05%甲酸+2mmol/L乙酸銨水溶液：準(zhǔn)確吸取0.5mL甲酸于1000mL容量瓶中，準(zhǔn)確稱取0.154g乙

酸銨于上述1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，然后將其置于超聲波中超聲15min，現(xiàn)配現(xiàn)用。

5.3標(biāo)準(zhǔn)品

1

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霜脲氰標(biāo)準(zhǔn)品(cymoxanil,C7H10N4O3，CAS號(hào)：57966-95-7)：純度≥96%。

5.4標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

5.4.1霜脲氰標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液（100mg/L）：準(zhǔn)確稱取10mg（精確至0.1mg）霜脲氰標(biāo)準(zhǔn)品于10mL容

量瓶中，用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混勻，-18℃冷凍避光保存，有效

期6個(gè)月。

5.4.2霜脲氰標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（10mg/L）：準(zhǔn)確吸取1mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液于10mL容量瓶中，用甲醇稀釋

至刻度，混勻，4℃下保存，有效期1個(gè)月。

5.5材料

5.5.1乙二胺-N-丙基硅烷化硅膠（PSA）：40μm～60μm。

5.5.2十八烷基硅烷鍵合硅膠(C18)：50μm。

5.5.3微孔濾膜（有機(jī)相）：0.22μm。

6儀器和設(shè)備

6.1液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜：配備電噴霧離子源（ESI）。

6.2天平：感量0.00001g和感量0.01g。

6.3恒溫水浴振蕩器（往復(fù)式）。

6.4瓶口分液器。

6.5旋渦混勻器。

6.6氮吹儀。

6.7離心機(jī)：5000r/min。

6.8離心管：50mL、15mL。

6.9土壤篩：2mm孔徑。

7試樣制備

土壤鮮樣，除去石塊、動(dòng)植物殘?bào)w等雜物，風(fēng)干后過(guò)2mm孔徑篩，裝入潔凈容器，密封，標(biāo)明標(biāo)記，

于-18℃條件下保存?zhèn)溆谩?/p>

8分析步驟

8.1提取

稱取混勻后的試樣10g（精確至0.01g），于50mL具塞離心管中，加入10mL水浸泡1h，然后準(zhǔn)確

加入乙腈10.0mL，于40℃水浴振蕩器上振蕩提取30min后，加入5g氯化鈉，渦旋振蕩1min，5000r/min

離心5min，待凈化。

8.2凈化

取上清液2.0mL于15mL離心管中，分別加入100mg無(wú)水硫酸鎂、100mgPSA、100mgC18，渦旋1min，

過(guò)0.22μm濾膜后上機(jī)測(cè)定。

8.3儀器參考條件

2

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8.3.1液相色譜參考條件

色譜柱：C18，100mm×2.1mm（i.d.），1.9μm，或性能相當(dāng)者。

柱溫：40℃。

流速：0.2mL/min。

進(jìn)樣量：1.0μL。

流動(dòng)相組成及梯度洗脫程序見(jiàn)表1。

表1流動(dòng)相及梯度洗脫程序

時(shí)間流動(dòng)相A（甲醇）流動(dòng)相B（0.05%甲酸+2mmol/L乙酸銨水溶液）

min%%

01090

4.0955

7.0955

7.21090

8.3.2質(zhì)譜參考條件

離子化模式：電噴霧離子源（ESI）。

去溶劑氣（N2）：15mL/min。

碰撞氣：3mL/min。

碰撞氣類型：氬氣。

DL管溫度：250℃。

加熱模塊溫度：400℃。

掃描方式：正離子模式。

質(zhì)譜掃描模式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)，監(jiān)測(cè)條件見(jiàn)表2。

表2霜脲氰多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)的條件

碰撞能碰撞能

中文名稱保留時(shí)間電離模式定量離子對(duì)定性離子對(duì)

VV

霜脲氰5.75+199.1/128.1-8199.1/111.1-18

8.4標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

準(zhǔn)確吸取適量4.4.2中配制的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，用基質(zhì)空白提取液稀釋，配制成質(zhì)量濃度為0.005mg/L、

0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L、0.5mg/L系列基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液，供液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀測(cè)定。以

測(cè)得峰面積為縱坐標(biāo)、對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線?；|(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液現(xiàn)配

現(xiàn)用。

8.5定性及定量測(cè)定

8.5.1定性及定量測(cè)定

被測(cè)試樣中目標(biāo)化合物色譜峰的保留時(shí)間與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)色譜峰的保留時(shí)間相比較，相對(duì)誤差應(yīng)在±

2.5%之內(nèi)。

8.5.2定量離子、定性離子及子離子豐度比

3

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在相同實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行樣品測(cè)定時(shí)，如果檢出的色譜峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)樣品相一致，并且在扣除

背景后的樣品質(zhì)譜圖中，目標(biāo)化合物的質(zhì)譜定性離子應(yīng)出現(xiàn)，而且同一檢測(cè)批次，對(duì)同一化合物，樣品

中目標(biāo)化合物的2個(gè)離子的相對(duì)豐度比與濃度相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)溶液相比，其相對(duì)偏差不超過(guò)表3規(guī)定的范圍，

則可判斷樣品中存在霜脲氰。本文件的霜脲氰標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)多反應(yīng)監(jiān)測(cè)色譜圖和質(zhì)譜圖參照附錄A。

表3定性測(cè)定時(shí)時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差

相對(duì)離子豐度＞50%＞20%至50%＞10%至20%≤10%

允許相對(duì)偏差±20%±25%±30%±50%

8.6測(cè)定

將標(biāo)準(zhǔn)工作溶液與待測(cè)溶液分別注入液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀中，以保留時(shí)間和定性離子定性，樣品

中霜脲氰質(zhì)量濃度應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)工作曲線質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，超過(guò)工作曲線最高點(diǎn)時(shí)則應(yīng)稀釋后再進(jìn)行分析，

采用外標(biāo)法定量。

8.7平行試驗(yàn)

按8.1～8.6的規(guī)定對(duì)同一試樣進(jìn)行平行試驗(yàn)測(cè)定。

8.8空白試驗(yàn)

除不加試樣外，按照8.1～8.6的規(guī)定進(jìn)行平行操作。

9數(shù)據(jù)處理

試樣中霜脲氰殘留含量，按式（1）計(jì)算：

?×?×?1×?3

X=·····································································(1)

?×??×?2

式中：

X——試樣中霜脲氰殘留量，單位為毫克每千克(mg/kg)；

ρ——霜脲氰標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的質(zhì)量濃度，單位為毫克每升(mg/L)；

As——霜脲氰標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的峰面積；

A——樣品中霜脲氰的峰面積；

V1——提取溶劑總體積，單位為毫升(mL)；

V2——吸取出用于檢測(cè)的提取溶液的體積，單位為毫升(mL)；

V3——樣品定容體積，單位為毫升(mL)；

m——樣品質(zhì)量，單位為克(g)。

注：計(jì)算結(jié)果應(yīng)扣除空白值，測(cè)定結(jié)果用平行測(cè)定的算術(shù)平均值表示，保留2位有效數(shù)字，當(dāng)結(jié)果大于1mg/kg時(shí)，

保留3位有效數(shù)字。

10精密度

在重復(fù)性條件下，2次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差不大于重復(fù)性限（r），重復(fù)性限（r）的數(shù)據(jù)應(yīng)按照

附錄B執(zhí)行。

在再現(xiàn)性條件下，2次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差不大于再現(xiàn)性限（R），再現(xiàn)性（R）的數(shù)據(jù)應(yīng)按照附

錄C執(zhí)行。

4

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11回收率

本文件的添加水平和回收率范圍應(yīng)符合附錄D的要求。

5

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附錄A

（資料性）

霜脲氰標(biāo)準(zhǔn)溶液多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）色譜圖及質(zhì)譜圖

霜脲氰標(biāo)準(zhǔn)溶液多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）色譜圖見(jiàn)圖A.1。

圖A.1霜脲氰標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.1mg/L）多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）色譜圖

霜脲氰標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)譜圖見(jiàn)圖A.2。

圖A.2霜脲氰標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.1μg/mL）質(zhì)譜圖

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附錄B

（規(guī)范性）

實(shí)驗(yàn)室重復(fù)性限（r）數(shù)據(jù)

實(shí)驗(yàn)室重復(fù)性限（r）數(shù)據(jù)見(jiàn)B.1。

表B.1實(shí)驗(yàn)室重復(fù)性限（r）數(shù)據(jù)

含量重復(fù)性限含量重復(fù)性限含量重復(fù)性限

名稱

mg/kgrmg/kgrmg/kgr

霜脲氰0.011.7×10-30.058.1×10-30.55.3×10-2

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附錄C

（規(guī)范性）

實(shí)驗(yàn)室再現(xiàn)性限（R）數(shù)據(jù)

實(shí)驗(yàn)室再現(xiàn)性限（R）數(shù)據(jù)見(jiàn)表C.1。

表C.1實(shí)驗(yàn)室再現(xiàn)性限（R）數(shù)據(jù)

含量再現(xiàn)性限含量再現(xiàn)性限含量再現(xiàn)性限

名稱

mg/kgRmg/kgRmg/kgR

霜脲氰0.011.8×10-30.058.7×10-30.55.9×10-2

8

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附