湖州市人民醫(yī)院微生物檢驗醫(yī)師資格認證一、單選題（共10題，每題2分，共20分）1.湖州市人民醫(yī)院臨床微生物實驗室常用的革蘭染色方法中，下列哪項操作錯誤？A.染色前需將標本涂片固定在載玻片上B.首先使用結晶紫染色1分鐘，然后rinsingwithdistilledwaterC.熒光顯微鏡下觀察革蘭陽性菌呈藍色或紫色D.革蘭陰性菌在脫色后仍保留紫色，但需復染沙弗寧2.某患者痰培養(yǎng)結果為銅綠假單胞菌，對慶大霉素的敏感性試驗采用K-B法，結果出現(xiàn)抑菌圈直徑15mm，根據(jù)CLSI標準，該菌株應如何判斷？A.耐藥（Resistant）B.中介（Intermediate）C.敏感（Susceptible）D.清晰度不足需重做3.在湖州市人民醫(yī)院兒科病房分離到一株產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌，首選的抗菌藥物不包括下列哪項？A.頭孢吡肟（Cefepime）B.亞胺培南（Imipenem）C.阿莫西林/克拉維酸（Amoxicillin/Clavulanate）D.哌拉西林/他唑巴坦（Piperacillin/Tazobactam）4.湖州市某社區(qū)居民送檢糞便培養(yǎng)，分離到一株志賀氏菌，該菌株的生化反應特征中，通常不包含以下哪項？A.ONPG試驗陽性B.麥芽糖發(fā)酵陽性C.乳糖發(fā)酵陽性D.H?S產(chǎn)生陽性5.某患者血液培養(yǎng)分離到一株酵母菌，顯微鏡觀察可見出芽，無假菌絲，最可能的鑒定結果是？A.熱帶假絲酵母菌（Candidatropicalis）B.白色假絲酵母菌（Candidaalbicans）C.光滑假絲酵母菌（Candidaglabrata）D.球擬酵母菌（Candidaparapsilosis）6.在湖州市人民醫(yī)院急診科，一例車禍患者送檢膿液培養(yǎng)，分離到一株革蘭陰性桿菌，氧化酶試驗陽性，麥芽糖發(fā)酵陽性，最可能的鑒定是？A.鮑曼不動桿菌（Acinetobacterbaumannii）B.嗜麥芽寡糖菌（Stenotrophomonasmaltophilia）C.腸桿菌科細菌（Enterobacteriaceae）D.厭氧菌7.某患者腦脊液培養(yǎng)結果為表皮葡萄球菌，該菌株的藥敏試驗中，通常對哪種藥物高度耐藥？A.萬古霉素（Vancomycin）B.頭孢呋辛（Cefuroxime）C.環(huán)丙沙星（Ciprofloxacin）D.青霉素（Penicillin）8.湖州市某醫(yī)院呼吸科分離到一株鮑曼不動桿菌，藥敏結果顯示對亞胺培南全耐藥，但對其余碳青霉烯類敏感，這種情況稱為？A.誘導型耐藥（Inducibleresistance）B.天然耐藥（Naturalresistance）C.獲得性耐藥（Acquiredresistance）D.耐藥機制未知9.在湖州市人民醫(yī)院檢驗科，進行真菌鑒定時，以下哪種方法最常用于初步篩查念珠菌屬？A.酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）B.光譜法（Matrix-AssistedLaserDesorption/IonizationTime-of-FlightMassSpectrometry,MALDI-TOFMS）C.液體培養(yǎng)基快速鑒定系統(tǒng)（VITEK2）D.傳統(tǒng)生化反應10.某患者尿培養(yǎng)分離到一株變形桿菌，該菌株的生化特征中，通常不包含以下哪項？A.甲基紅試驗陽性B.V-P試驗陽性C.動力試驗陽性D.乳糖發(fā)酵陽性二、多選題（共5題，每題3分，共15分）1.湖州市人民醫(yī)院兒科常見的耐藥菌感染中，以下哪些屬于多重耐藥菌（MDRO）？A.產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌B.耐碳青霉烯類腸桿菌科細菌（CRE）C.鮑曼不動桿菌D.碳青霉烯耐藥金黃色葡萄球菌（PRSA）2.在湖州市某社區(qū)醫(yī)院分離到一株耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA），以下哪些藥物對其有效？A.萬古霉素（Vancomycin）B.利奈唑胺（Linezolid）C.頭孢吡肟（Cefepime）D.達托霉素（Daptomycin）3.湖州市人民醫(yī)院檢驗科進行細菌藥敏試驗時，以下哪些試驗屬于常規(guī)紙片擴散法（K-B法）？A.β-內(nèi)酰胺酶抑制劑結合試驗（如頭孢他啶-他唑巴坦）B.萬古霉素敏感試驗（Etest）C.酶抑制劑增強試驗（如氨芐西林/克拉維酸）D.碳青霉烯類藥物敏感試驗（如亞胺培南）4.志賀菌屬的鑒定中，以下哪些生化反應通常陽性？A.麥芽糖發(fā)酵B.乳糖發(fā)酵C.ONPG試驗D.H?S產(chǎn)生5.在湖州市某醫(yī)院血液培養(yǎng)中分離到一株酵母菌，以下哪些特征有助于初步鑒別其種類？A.出芽方式（單芽或雙芽）B.菌落形態(tài)（光滑或粗糙）C.菌絲有無D.生化反應譜三、判斷題（共10題，每題1分，共10分）1.湖州市人民醫(yī)院檢驗科進行真菌鑒定時，MALDI-TOFMS的鑒定準確率通常低于傳統(tǒng)生化反應。（×）2.產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌對頭孢吡肟敏感，因此可以臨床使用該藥物。（×）3.腸桿菌科細菌的IMViC試驗通常結果為++--。（√）4.表皮葡萄球菌在血平板上形成灰白色、光滑、濕潤的菌落。（√）5.鮑曼不動桿菌屬于條件致病菌，但在免疫力低下患者中可引起嚴重感染。（√）6.志賀菌屬的菌株通常對多種抗生素耐藥，因此臨床治療需依據(jù)藥敏結果選擇藥物。（√）7.碳青霉烯類耐藥的金黃色葡萄球菌（PRSA）對萬古霉素也耐藥。（×）8.嗜麥芽寡糖菌是一種機會致病菌，常在呼吸道感染中分離到。（×）9.腦膜炎奈瑟菌是一種革蘭陰性球菌，常在患者咽拭子中分離到。（√）10.布魯氏菌屬的菌株通常在顯微鏡下可見兩端濃染的球桿菌。（√）四、簡答題（共3題，每題5分，共15分）1.簡述湖州市人民醫(yī)院檢驗科進行細菌藥敏試驗的質控要點。2.如何鑒別銅綠假單胞菌與其他假單胞菌屬的細菌？3.簡述真菌培養(yǎng)中，如何初步判斷念珠菌是否為侵襲性感染？五、論述題（共2題，每題10分，共20分）1.結合湖州市人民醫(yī)院的實際情況，論述臨床微生物實驗室如何加強多重耐藥菌（MDRO）的監(jiān)測與管理。2.詳細說明革蘭陰性桿菌碳青霉烯酶的檢測方法及其臨床意義。答案與解析一、單選題答案與解析1.D解析：革蘭陰性菌脫色后需復染沙弗寧，呈現(xiàn)紅色或粉色，而非紫色。2.A解析：根據(jù)CLSI標準，慶大霉素抑菌圈直徑≤13mm為耐藥。3.C解析：阿莫西林/克拉維酸對產(chǎn)ESBLs的菌株無效，因其僅對β-內(nèi)酰胺酶有抑制作用，而ESBLs會破壞該復合物。4.D解析：志賀菌屬通常不產(chǎn)生H?S，而大腸埃希菌等腸桿菌科細菌H?S陽性。5.B解析：無假菌絲的酵母菌多為白色假絲酵母菌，而熱帶假絲酵母菌和光滑假絲酵母菌常形成假菌絲。6.A解析：氧化酶陽性、麥芽糖發(fā)酵陽性的革蘭陰性桿菌多為鮑曼不動桿菌。7.D解析：表皮葡萄球菌對青霉素高度耐藥，萬古霉素仍是首選治療藥物。8.A解析：亞胺培南全耐藥但其他碳青霉烯類敏感，提示存在誘導型耐藥機制（如金屬loadd碳青霉烯酶）。9.B解析：MALDI-TOFMS是目前真菌鑒定的金標準，可快速準確鑒別念珠菌屬。10.A解析：變形桿菌的甲基紅試驗通常為陰性，而V-P試驗陽性。二、多選題答案與解析1.A,B,C,D解析：以上均為湖州市醫(yī)院兒科常見的MDRO。2.A,B,D解析：PRSA對萬古霉素、利奈唑胺、達托霉素敏感，但對頭孢吡肟無效。3.A,C,D解析：K-B法常用于β-內(nèi)酰胺酶抑制劑結合試驗、酶抑制劑增強試驗和碳青霉烯類藥物敏感試驗，Etest為紙片法但原理不同。4.A,C解析：志賀菌屬通常麥芽糖發(fā)酵陽性，ONPG陽性，乳糖發(fā)酵陰性，不產(chǎn)生H?S。5.A,B,C,D解析：以上均為酵母菌鑒定的關鍵特征。三、判斷題答案與解析1.×解析：MALDI-TOFMS的鑒定準確率遠高于傳統(tǒng)生化反應。2.×解析：產(chǎn)ESBLs的大腸埃希菌對頭孢吡肟也可能耐藥，需結合藥敏結果。3.√解析：腸桿菌科細菌IMViC試驗典型結果為++--（吲哚陽性、甲基紅陽性、V-P陰性、硫化氫陰性）。4.√解析：表皮葡萄球菌菌落特征符合描述。5.√解析：鮑曼不動桿菌為條件致病菌，但在免疫力低下患者中可致嚴重感染。6.√解析：志賀菌屬耐藥性高，需依據(jù)藥敏結果治療。7.×解析：PRSA對萬古霉素敏感，但對達托霉素、利奈唑胺等仍有效。8.×解析：嗜麥芽寡糖菌多在導管相關感染中分離，而非呼吸道。9.√解析：腦膜炎奈瑟菌為革蘭陰性球菌，常見于咽拭子培養(yǎng)。10.√解析：布魯氏菌兩端濃染的球桿菌特征典型。四、簡答題答案與解析1.細菌藥敏試驗質控要點-使用標準菌株（如大腸埃希菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC25923、銅綠假單胞菌ATCC27853）進行每日質控。-定期使用Etest或紙片法進行藥敏重復性驗證。-確保培養(yǎng)基pH值、溫濕度符合標準（如M-H瓊脂pH7.2-7.4，35±1℃）。-監(jiān)測紙片擴散法的抑菌圈直徑，確保在標準范圍內(nèi)。2.銅綠假單胞菌與其他假單胞菌屬鑒別-銅綠假單胞菌氧化酶陽性，而其他假單胞菌屬（如熒光假單胞菌）氧化酶陰性。-麥芽糖發(fā)酵陽性（銅綠假單胞菌）vs.麥芽糖發(fā)酵陰性（熒光假單胞菌）。-莢膜多糖抗原檢測（銅綠假單胞菌陽性）。3.真菌侵襲性感染初步判斷方法-血培養(yǎng)多次陽性或連續(xù)培養(yǎng)陽性。-腦脊液或深部組織培養(yǎng)分離到酵母菌或霉菌。-臨床表現(xiàn)符合敗血癥或腦膜炎特征（如高熱、寒戰(zhàn)、意識障礙）。-血清D-二聚體或降鈣素原升高。五、論述題答案與解析1.湖州市人民醫(yī)院MDRO監(jiān)測與管理-建立MDRO監(jiān)測系統(tǒng)，每日統(tǒng)計臨床送檢標本中的MDRO檢出率。-對MDRO感染患者實施接觸隔離，并加強環(huán)境消毒。-定期開展多科室MDRO防控培訓，提高醫(yī)務人員意識。-優(yōu)化抗菌藥物使用流程，減少不合理用藥。-與疾控中心合作，共享MDRO監(jiān)測數(shù)據(jù)，制定區(qū)域防控策略。2.革蘭陰性桿菌碳青霉烯酶檢測方法及臨床