溫州市人民醫(yī)院分子病理質(zhì)控考核一、單選題（共10題，每題2分）1.溫州市人民醫(yī)院分子病理實驗室在接收外送樣本時，首要的質(zhì)控環(huán)節(jié)是？A.樣本編號核對B.樣本完整性評估C.樣本運輸溫度記錄D.樣本來源科室確認2.在進行FISH檢測時，若探針雜交信號弱或不均勻，最可能的原因是？A.樣本固定時間過長B.探針存儲條件不當(dāng)C.樣本DNA濃度過高D.顯色劑配制錯誤3.溫州地區(qū)常見肺癌病理類型中，EGFR突變檢測陽性率最高的亞型是？A.腺癌（LUAD）B.小細胞肺癌（SCLC）C.鱗狀細胞癌（LSCC）D.大細胞肺癌（LGC）4.在PCR檢測中，若出現(xiàn)非特異性擴增條帶，應(yīng)優(yōu)先調(diào)整哪個參數(shù)？A.引物退火溫度B.循環(huán)次數(shù)C.菌苗模板量D.聚合酶濃度5.溫州市人民醫(yī)院分子病理報告審核中，以下哪項屬于關(guān)鍵審核內(nèi)容？A.患者姓名與樣本編號一致性B.檢測方法學(xué)描述完整性C.篩查結(jié)果與臨床診斷符合度D.檢測費用明細6.在進行液體活檢ctDNA檢測時，若出現(xiàn)假陰性結(jié)果，最可能的原因是？A.樣本采集時間過晚B.檢測試劑盒靈敏度不足C.樣本保存不當(dāng)D.實驗室環(huán)境溫度波動7.溫州地區(qū)結(jié)直腸癌患者中，最常檢測的KRAS突變類型是？A.G12DB.G12VC.G12CD.G13D8.在IHC檢測中，若抗體染色背景高，最可能的原因是？A.抗體稀釋比例不當(dāng)B.樣本固定時間不足C.抗體封閉不充分D.顯色劑濃度過高9.溫州市人民醫(yī)院分子病理實驗室采用高通量測序（NGS）技術(shù)時，若發(fā)現(xiàn)某些基因位點檢出率異常，應(yīng)優(yōu)先檢查？A.樣本提取流程B.庫構(gòu)建過程C.測序平臺校準(zhǔn)D.數(shù)據(jù)分析軟件設(shè)置10.在分子病理質(zhì)控中，以下哪項屬于室內(nèi)質(zhì)控（IQC）的常規(guī)指標(biāo)？A.實驗室環(huán)境溫濕度B.試劑批間差值C.外部能力驗證成績D.設(shè)備校準(zhǔn)證書二、多選題（共5題，每題3分）1.溫州市人民醫(yī)院分子病理實驗室在樣本接收時，需重點核查哪些內(nèi)容？A.樣本標(biāo)簽與患者信息一致性B.樣本運輸條件符合要求C.樣本量是否滿足檢測需求D.樣本采集時間是否過晚2.在FISH檢測中，影響雜交信號質(zhì)量的因素包括？A.探針新鮮度B.樣本處理時間C.顯色劑pH值D.滴片質(zhì)量3.溫州地區(qū)乳腺癌患者中，常檢測的靶向基因包括？A.HER2B.PIK3CAC.BRCA1D.AKT14.在PCR檢測中，若出現(xiàn)擴增效率低，可能的原因有？A.引物二聚體形成B.聚合酶失活C.樣本DNA降解D.循環(huán)次數(shù)不足5.溫州市人民醫(yī)院分子病理實驗室進行分子檢測質(zhì)控時，以下哪些屬于外部質(zhì)控（EQA）的常見形式？A.參考實驗室盲樣測試B.實驗室間比對C.內(nèi)部質(zhì)控數(shù)據(jù)匯總D.檢測方法學(xué)驗證報告三、判斷題（共10題，每題1分）1.溫州市人民醫(yī)院分子病理實驗室的樣本保存溫度應(yīng)嚴格控制在-20℃以下。（√）2.在進行液體活檢時，樣本采集時間對ctDNA檢出率無影響。（×）3.EGFR突變檢測陽性率在溫州地區(qū)肺癌患者中低于KRAS突變。（×）4.IHC檢測中，抗體稀釋比例越高，染色效果越好。（×）5.溫州地區(qū)結(jié)直腸癌患者中，KRAS突變檢出率高于BRAF突變。（√）6.NGS檢測中，基因檢出率異常時無需檢查樣本提取流程。（×）7.室內(nèi)質(zhì)控（IQC）結(jié)果應(yīng)每月匯總分析一次。（√）8.液體活檢樣本運輸過程中需避免劇烈搖晃。（√）9.溫州市人民醫(yī)院分子病理實驗室的檢測報告審核應(yīng)由至少兩名技師完成。（√）10.FISH檢測中，探針雜交信號不均勻僅與樣本處理有關(guān)。（×）四、簡答題（共5題，每題5分）1.簡述溫州市人民醫(yī)院分子病理實驗室接收外送樣本時的質(zhì)控要點。2.列舉三種影響FISH檢測信號質(zhì)量的因素及解決方法。3.溫州地區(qū)常見腫瘤分子檢測中，哪些基因突變與靶向治療相關(guān)？4.說明PCR檢測中非特異性擴增條帶產(chǎn)生的原因及排查步驟。5.如何進行分子病理實驗室的室內(nèi)質(zhì)控（IQC）結(jié)果評估？五、論述題（共2題，每題10分）1.結(jié)合溫州地區(qū)腫瘤流行病學(xué)特點，論述分子病理檢測在臨床應(yīng)用中的重要性。2.分析溫州市人民醫(yī)院分子病理實驗室在樣本管理、檢測流程及質(zhì)控方面的優(yōu)化建議。答案與解析一、單選題答案與解析1.B解析：樣本完整性評估是首要環(huán)節(jié)，確保樣本未降解或污染。編號核對、運輸溫度記錄和科室確認雖重要，但完整性評估直接影響檢測結(jié)果的可靠性。2.B解析：探針需在低溫（-20℃）保存，若儲存不當(dāng)，探針活性下降導(dǎo)致信號弱。固定時間過長、DNA濃度過高和顯色劑錯誤雖影響信號，但非首要原因。3.A解析：溫州地區(qū)EGFR突變陽性率最高的為腺癌（LUAD），與全國及華東地區(qū)數(shù)據(jù)一致。其他類型突變率較低。4.A解析：引物退火溫度是影響特異性最關(guān)鍵的參數(shù)。其他選項雖可能影響擴增，但調(diào)整溫度可優(yōu)先解決非特異性問題。5.C解析：篩查結(jié)果與臨床診斷符合度是審核重點，確保檢測指導(dǎo)臨床決策。其他選項雖需審核，但非核心內(nèi)容。6.B解析：試劑盒靈敏度不足是假陰性常見原因。采集時間、保存條件和環(huán)境溫度雖重要，但靈敏度是直接影響檢出率的關(guān)鍵因素。7.C解析：溫州地區(qū)結(jié)直腸癌KRAS突變以G12C最常見，與華東地區(qū)高發(fā)基因型一致。其他類型檢出率較低。8.A解析：抗體稀釋比例不當(dāng)會導(dǎo)致背景高。固定時間、封閉和顯色劑雖影響染色，但稀釋比例是首要排查因素。9.B解析：庫構(gòu)建過程直接影響NGS數(shù)據(jù)質(zhì)量。樣本提取、平臺校準(zhǔn)和軟件設(shè)置雖重要，但檢出率異常優(yōu)先檢查庫構(gòu)建。10.B解析：試劑批間差值是IQC常規(guī)指標(biāo)，反映試劑穩(wěn)定性。環(huán)境溫濕度、外部能力驗證和校準(zhǔn)證書屬于支持性質(zhì)控內(nèi)容。二、多選題答案與解析1.A、B、C解析：樣本標(biāo)簽、運輸條件和樣本量是接收時的核心核查內(nèi)容。采集時間雖重要，但非首要核查點。2.A、B、C解析：探針新鮮度、樣本處理時間和顯色劑pH值直接影響FISH信號。滴片質(zhì)量雖重要，但非直接因素。3.A、B、C解析：溫州地區(qū)乳腺癌常檢測HER2、PIK3CA和BRCA1。AKT1突變率較低。4.A、B、C解析：引物二聚體、聚合酶失活和DNA降解均影響擴增效率。循環(huán)次數(shù)不足雖可能，但非首要原因。5.A、B解析：盲樣測試和實驗室間比對是EQA常見形式。內(nèi)部質(zhì)控和驗證報告屬于IQC或方法學(xué)驗證內(nèi)容。三、判斷題答案與解析1.√解析：樣本需在-20℃保存，避免降解影響檢測。2.×解析：采集時間對ctDNA檢出率有顯著影響，過早或過晚均可能導(dǎo)致假陰性。3.×解析：溫州地區(qū)EGFR突變率高于KRAS。4.×解析：稀釋比例過高或過低均影響染色效果，需優(yōu)化比例。5.√解析：KRAS突變率在結(jié)直腸癌中較高，與地區(qū)基因型相關(guān)。6.×解析：檢出率異常需排查樣本提取、庫構(gòu)建等環(huán)節(jié)。7.√解析：IQC結(jié)果需定期匯總，評估檢測穩(wěn)定性。8.√解析：劇烈搖晃可能導(dǎo)致樣本溶血或釋放DNA碎片。9.√解析：雙人審核可減少錯誤，提高報告可靠性。10.×解析：信號不均勻與探針質(zhì)量、樣本處理及顯色條件均有關(guān)。四、簡答題答案與解析1.外送樣本接收質(zhì)控要點-核對樣本標(biāo)簽與患者信息一致性；-檢查樣本運輸條件（溫度、時間）；-評估樣本量是否滿足檢測需求；-確認樣本未污染或降解。2.FISH檢測信號影響因素及解決方法-探針新鮮度：使用未開封或新鮮復(fù)溶的探針；-樣本處理：優(yōu)化固定時間（4-6小時）；-顯色劑pH值：調(diào)整至6.0-6.5。3.溫州地區(qū)靶向治療相關(guān)基因-乳腺癌：HER2、PIK3CA、BRCA1；-肺癌：EGFR、ALK、ROS1；-結(jié)直腸癌：KRAS、BRAF、NRAS。4.PCR非特異性擴增排查步驟-調(diào)整引物退火溫度；-優(yōu)化引物濃度；-檢查模板質(zhì)量；-嘗試不同引物對。5.IQC結(jié)果評估方法-每月匯總質(zhì)控數(shù)據(jù)（如Ct值、重復(fù)性）；-分析批間差值是否在允許范圍內(nèi)；-發(fā)現(xiàn)異常時追溯實驗流程并糾正。五、論述題答案與解析1.分子病理檢測的臨床應(yīng)用價值-溫州地區(qū)腫瘤高發(fā)類型（如肺癌、結(jié)直腸癌）需精準(zhǔn)分