A公司21226A61K36/17(2006.01)A61P37/08(2006.01)麻黃非生物堿類組分在制備治療過敏性哮生物堿類組分在制備治療過敏性哮喘藥物中的具有降低致敏大鼠血清中免疫球蛋白E(IgE)和顯減少全血和肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸性粒細胞(EOS)數(shù)量，具有明顯減少肺組織炎癥面積21.麻黃非生物堿類組分在制備治療過敏性哮喘藥物中的應(yīng)用。2.如權(quán)利要求1所述的麻黃非生物堿類組分在制備治療過敏性哮喘藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述治療過敏性哮喘藥物的有效成分為麻黃非生物堿類組分，所述治療過敏性哮喘藥物還含有藥學(xué)上可接受的載體。3.如權(quán)利要求1所述的麻黃非生物堿類組分在制備治療過敏性哮喘藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述麻黃非生物堿類組分與具有治療哮喘功能的藥物進行組合，共同作為所述治療過敏性哮喘藥物的有效成分，所述治療過敏性哮喘藥物還含有藥學(xué)上可接受的載體。3技術(shù)領(lǐng)域[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及麻黃非生物堿類組分在制備治療過敏性哮喘藥物中的應(yīng)用。背景技術(shù)[0002]哮喘是一種常見病、多發(fā)病，對人類健康造成了很多不利影響。目前全球哮喘患者約3億人，我國哮喘患者約3000萬，每年有近20萬人死于哮喘[1。當前哮喘治療一般使用糖皮質(zhì)激素來控制氣道的慢性炎癥。然而，激素類藥物只能減輕癥狀，無法針對哮喘的根本原因進行治療，并且長期使用副作用較大。過敏性哮喘的發(fā)病機制復(fù)雜，是一種由嗜酸性粒細胞、T淋巴細胞等炎癥細胞、肥大細胞、氣道上皮細胞參與的氣道慢性過敏反應(yīng)炎癥性疾病[2]。現(xiàn)代社會帶來的生活方式及環(huán)境上的變化，使得過敏性哮喘疾病有逐年增加的趨勢[3]。SchrenketC.A.Mey.)或木賊麻黃(EphedraequisetinaBge.)的干燥草質(zhì)莖[4的藥物使用。生物堿類成分被認為是麻黃平喘的有效成分，該類成分具有類似腎上腺素的交感神經(jīng)興奮作用5。但近年來由于麻黃生物堿類成分的合成品苯丙胺類成分多具有成癮性或毒性而被各國禁用6,給我國豐富的麻黃資源的開發(fā)、利用造成了很大影響。近年來，隨著對麻黃的研究不斷深入，有關(guān)麻黃非生物堿類成分的藥理作用報道亦不斷增多。有研究顯示，麻黃中的非生物堿類成分具有降血壓、降血糖、抗氧化、抗凝血以及抑制免疫等藥理作用5]。這為進一步開發(fā)、利用麻黃資源提供了新的思路。發(fā)明內(nèi)容[0004]本發(fā)明的目的是提供一種麻黃非生物堿類組分新的用途，即麻黃非生物堿類組分在制備治療過敏性哮喘藥物中的應(yīng)用。[0006]麻黃非生物堿類組分在制備治療過敏性哮喘藥物中的應(yīng)用。[0007]進一步，所述治療過敏性哮喘藥物的有效成分為麻黃非生物堿類組分，所述治療過敏性哮喘藥物還含有藥學(xué)上可接受的載體。[0008]進一步，所述麻黃非生物堿類組分與具有治療哮喘功能的藥物進行組合，共同作為所述治療過敏性哮喘藥物的有效成分，所述治療過敏性哮喘藥物還含有藥學(xué)上可接受的[0009]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明通過藥效學(xué)實驗表明麻黃非生物堿類組分具有降低致敏大鼠血清中免疫球蛋白E(IgE)和白三烯(LT)含量的作用，麻黃非生4物堿類組分明顯減少全血和肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸性粒細胞(EOS)數(shù)量，具有明顯減少肺組織炎癥面積的作用，麻黃非生物堿類組分首次應(yīng)用在治療過敏性哮喘的藥物中，為新藥篩選提供了基礎(chǔ)，在制備治療過敏性哮喘藥物方面具有良好的應(yīng)用前景。具體實施方式[0010]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明。[0011]實施例1[0012]麻黃非生物堿類組分的制備：[0013](1)制備麻黃85%乙醇提取物：[0014]稱取麻黃干燥草質(zhì)莖50g,用8倍量的85%乙醇水浴加熱回流提取，水浴溫度80℃,提取3次，每次2小時，合并提取液并濃縮至其固含量為217.5mg/mL,調(diào)節(jié)pH值至6.0,將濃縮后的提取液配成濃度為109mg/mL的溶液；[0016]用AC18SPE柱(華譜新創(chuàng)科技有限公司)處理步驟(1)中得到的提取液；AC18SPE柱右時，加提取液上樣18.5mL,上樣結(jié)束時，抽干SPE柱，收集上樣流出液記為Fo;SPE柱用120mL0.1%甲酸-水淋洗，記為淋洗1,收集并抽干淋洗液1,記為Fi;用120mL含有10%甲醇-90%(0.1%甲酸-水)溶液淋洗，記為淋洗2,收集并抽干淋洗液2,記為F2;然后用100~[0017]實施例2[0018]麻黃非生物堿類組分藥效學(xué)實驗：[0019]1.模型建立[0020]致敏：大鼠一次性腹腔注射含卵白蛋白1mg和氫氧化鋁10mg的生理鹽水混懸液[0021]攻擊：大鼠致敏后15天、16天、17天每天尾靜脈注射卵白蛋白生理鹽水溶液(15mg/模成功7]。[0022]正常對照組注射等體積生理鹽水。[0023]2.分組與給藥對照組，孟魯司特1mg/kg組，麻黃非生物堿類組分高劑量組(200mg/kg)和麻黃非生物堿類組分低劑量組(100mg/kg)。各給藥組于致敏前1h至末次攻擊前1h每天灌胃給藥1次，共計18次，正常對照組及模型對照組給予同體積(10mL/kg)5%吐溫-80水溶液。[0025]3.測定指標及方法[0026]3.1外周血IgE與LT檢測[0027]大鼠末次攻擊后24h,300mg/kg水合氯醛腹腔注射麻醉，腹主動脈采血，3000rpm離[0028]3.2全血嗜酸性粒細胞計數(shù)5[0029]全血鏡下計數(shù)白細胞數(shù)；全血涂片，瑞氏-計數(shù)200個白細胞中嗜酸性粒細胞所占百分數(shù)，按全血白細胞數(shù)×嗜酸性粒細胞%,計算嗜酸性粒細胞數(shù)量。[0030]3.3肺泡灌洗液嗜酸性粒細胞計數(shù)[0031]大鼠腹主動脈采血處死，消毒后打開胸腔，左側(cè)肺支氣管插管，緩慢注入D-Hanks取少量白細胞涂片，按全血方法進行白細胞分類計數(shù)，剩余沉淀用4mL生理鹽水稀釋，鏡下進行白細胞計數(shù)，按全血方法計算嗜酸性粒細胞數(shù)量。[0032]3.4組織病理學(xué)檢查[0033]大鼠腹主動脈采血處死后，立即剖去右側(cè)肺組織，10%多聚甲醛固定，石蠟包埋切[0035]I級：鏡下目測炎癥反應(yīng)面積占總面積<25%;[0036]Ⅱ級：鏡下目測炎癥反應(yīng)面積占總面積<50%;[0037]Ⅲ級：鏡下目測炎癥反應(yīng)面積占總面積<75%;[0038]IV級：鏡下目測炎癥反應(yīng)面積占總面積>75%。[0040]計量資料以x±s表示，方差齊性采用F檢驗，兩組間均數(shù)差異性采用t檢驗(方差不齊時采用t檢驗校正公式),P<0.05認為有統(tǒng)計學(xué)意義。[0042]4.1對過敏性哮喘大鼠血清IgE、LT含量的影響[0043]各組大鼠于最后一次尾靜脈注射OVA后24h,按300mg/kg的劑量向大鼠腹腔注射水合氯醛麻醉大鼠，腹主動脈采血轉(zhuǎn)移至無菌離心管，2500r/min離心(4℃),15min后取上清，標準曲線并計算各組大鼠血清中LT與IgE水平。[0044]同正常對照組大鼠比較，模型對照組大鼠血清IgE、LT含量明顯增高(P<0.01);同模型對照組比較，麻黃非生物堿類組分高低劑量組血清IgE、LT含量均明顯下降，結(jié)果見表[0045]表1麻黃非生物堿類組分對過敏性哮喘大鼠血清IgE、LT含量的影響組別劑量/mgkg1n正常對照組19.96±6.61#17.44±3.64**6[0048]同模型對照組比較(vsmodelgroup):*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001[0049]4.2對過敏性哮喘大鼠全血與BALT中EOS數(shù)量的影響[0050]取血后處死大鼠，酒精消毒，剖開胸腔，將5mLD-Hanks液通過與大鼠左側(cè)肺支氣管相連的導(dǎo)管緩慢注大鼠左肺部，10s后緩慢回抽，重復(fù)3次后回收約4mLBALF液，轉(zhuǎn)移到5mL無菌離心管中，1000r/min離心(4℃)15min,倒去上清，沉淀細胞用4mL生理鹽水重新懸浮稀釋。取少量重懸液，鏡下進行白細胞計數(shù)；取少量重懸液制作白細胞分類計數(shù)，統(tǒng)計200個白細胞中EOS所占百分數(shù)。按全血中白細胞數(shù)×EOS%,計算全[0052]同正常對照組大鼠比較，模型對照組大鼠全血與BALF中EOS數(shù)明顯增高(p<0.01)。同模型對照組比較，麻黃非生物堿類組分高、低劑量組全血和BALF中EOS數(shù)量均明顯[0053]表2麻黃非生物堿類組分對過敏性哮喘大鼠全血與BALF中EOS數(shù)的影響組別劑量/mgkg?1n全血(×10?)肺泡灌洗液(×10?)正常對照組7.56±3.51#12.51±1.08***[0055]同正常組比較(vssalinegroup):##P<0.01[0056]同模型對照組比較(vsmodelgroup):*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001[0057]4.3過敏性哮喘大鼠肺組織病理形態(tài)的影響[0058]取血后處死大鼠，立即取右側(cè)肺組織，以10%多聚甲醛固定，石蠟包埋，切片機切片，HE染色，在顯微鏡下觀察肺組織病理學(xué)改變。以鏡下目測炎癥反應(yīng)面積占總面積的百分比來評價炎癥反應(yīng)程度，并分為五個等級，0級：未見炎癥反應(yīng)，I級：炎癥面積占總面積<25%,Ⅱ級：炎癥面積占總面積<50%,Ⅲ級：炎癥反應(yīng)面積占總面積<75%,IV級：炎癥面積占總面積>75%。[0059]正常對照組大鼠肺組織結(jié)構(gòu)正常，肺泡腔內(nèi)無炎細胞浸潤、滲出；模型對照組的肺中性粒細胞較少，肺內(nèi)未見明顯的白細胞滲出和液體滲出，主要表現(xiàn)為成纖維細胞為主的炎癥；同模型對照組比較，麻黃非生物堿類組分高、低劑量組肺組織炎癥面積均明顯減小。結(jié)果見表3。[0060]表3麻黃非生物堿類組分對過敏性哮喘大鼠肺組織炎癥的影響7組別n正常炎癥面積012710003424222[0062]本發(fā)明以卵白蛋白為抗原，復(fù)制大鼠過敏性哮喘模型，通過特異性IgE的產(chǎn)生，全血和BALF中EOS數(shù)量變化、血清中炎麻黃非生物堿類組分的抗過敏性哮喘活性進行了考察。結(jié)果表明，模型組大鼠血清中IgE、LT含量明顯增高，全血及BALF中EOS數(shù)量明顯增多，肺組織炎性細胞浸潤明顯加重；與對照組相比，麻黃非生物堿類組分可明顯降低大鼠血清IgE和LTS的含量，明顯減少全血和BALF中的EOS數(shù)量，明顯減小肺組織炎癥面積。因此，麻黃非生物堿類組分可能通過抑制炎癥細胞的滲出，減少炎癥介質(zhì)的釋放，降低炎癥反應(yīng)，起到抗I型過敏反應(yīng)的作用，從而可應(yīng)用于治療過敏性哮喘的藥物中。[0063]本發(fā)明涉及到的參考文獻：managementandprevention:GINAexecutivesummary.[J].Eur.Respir.J.2008,31(1):[0065][2]朱萬春.諸葛洪祥.粉螨性哮喘發(fā)病機制研究進展[J].環(huán)境與健康雜志，2007,24(3):184-186.[0066][3]石志紅，石志福.支氣管哮喘的國內(nèi)外研究進展[J].中國民族醫(yī)藥雜