第49課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞工程

1.闡明動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織，將它分散成單個(gè)細(xì)胞，

然后在適宜的培養(yǎng)條件下，讓這些細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖的技術(shù)。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。

課

2.簡(jiǎn)述干細(xì)胞在生物醫(yī)學(xué)工程中有廣泛的應(yīng)用價(jià)值。

標(biāo)

3.闡明動(dòng)物細(xì)胞融合是指通過(guò)物理、化學(xué)或生物學(xué)等手段，使兩個(gè)或多個(gè)

要

動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。

求

4.概述細(xì)胞融合技術(shù)是單克隆抗體制備的重要技術(shù)。

5.闡明動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)

胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)。

2024?浙江1月選考，13；2024?黑吉遼卷，14；2024?重

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)慶卷，8；2022?福建卷，3；2022?江蘇卷，14；2022?湖

考

北卷，6

情

2.動(dòng)物細(xì)胞融合技2024?江西卷，16；2023?遼寧卷,7；2023?北京卷,12；

分

術(shù)與單克隆抗體2022?山東卷，15；2022?福建卷，13

析

3.動(dòng)物體細(xì)胞核移2024?北京卷，11；2024?重慶卷，10；2024?江蘇卷，17；

植技術(shù)2023?天津卷，7；2023?海南卷，7

命題點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

主干知識(shí)?復(fù)盤(pán)再研必備知識(shí)

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)

［認(rèn)知覺(jué)醒］動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。

，.一

動(dòng)物細(xì)胞原代co,傳代

組織懸液培養(yǎng)培養(yǎng)軸培養(yǎng)

⑴體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞，應(yīng)當(dāng)置于中，為避免代謝產(chǎn)物的毒

害作用，應(yīng)

（2）在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先要對(duì)新鮮取材的動(dòng)物組織進(jìn)行處理，或用的

方法，或用等處理一段時(shí)間，將組織分散成單個(gè)細(xì)胞；然

后，用將細(xì)胞制成細(xì)胞懸液。

（3）所有動(dòng)物細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中都會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象嗎？

（4）人們通常將分瓶之前的細(xì)胞培養(yǎng)，即動(dòng)物組織經(jīng)處理后的初次培養(yǎng)稱為

培養(yǎng)，將分瓶后的細(xì)胞培養(yǎng)稱為培養(yǎng)。

（5）在進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用法收集；貼壁細(xì)胞需要重新

用酶等處理，使之分散成單個(gè)細(xì)胞，然后再用法收集。

提示（l）CCh培養(yǎng)箱定期更換培養(yǎng)液（2）機(jī)械胰蛋白酶、膠原蛋白酶培養(yǎng)

液（3）懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞不會(huì)，貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)（4）原代傳代（5）離心胰蛋

白離心

思維升華動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件

廠、除燃類、氨寒酸、無(wú)機(jī)鹽和維生素等細(xì)胞

（營(yíng)養(yǎng)x所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外,通常還需加入血清等一

些天然成分

/①對(duì)培界液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行滅菌處理

「晚"②在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行操作

?環(huán)沙

'③定期更換培養(yǎng)液，以便消除代謝物，防止

*細(xì)胞代謝物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害

溫度、、

哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的溫度多以36.5±（）.5七

pH和滲

透壓）為宜，多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4

氣體95%的空氣：其中。2為細(xì)胞代謝所必需的

5%的CO?:維持培親液的pH

環(huán)境

2.干細(xì)胞培養(yǎng)及其應(yīng)用

［認(rèn)知覺(jué)醒］在一定條件下，干細(xì)胞可以分化成其他類型的細(xì)胞。干細(xì)胞的應(yīng)

用前景吸引著眾多科學(xué)家投入到相關(guān)研究中。

（1）干細(xì)胞存在于____________________________________________________

等多種組織和器官中，包括胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞等。

⑵胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）存在于中，具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的

的細(xì)胞，并進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官甚至個(gè)體的潛能。

⑶一般認(rèn)為，成體干細(xì)胞具有性，只能分化成，

不具有發(fā)育成完整個(gè)體的能力。造血干細(xì)胞，主要存在于成體的

_____________________________________________________________________中。

（4）2006年，科學(xué)家通過(guò)體外誘導(dǎo)小鼠成纖維細(xì)胞，獲得了類似

的一種細(xì)胞，將它稱為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPS細(xì)胞），在治療阿爾茨海默病、心血管

疾病等領(lǐng)域的研究取得了新進(jìn)展。

提示（1）早期胚胎、骨髓和臍帶血（2）早期胚胎任何一種類型（3）組織特異

特定的細(xì)胞或組織骨髓、外周血和臍帶血（4）胚胎干細(xì)胞

L考點(diǎn)速覽

⑴營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)充足時(shí)，傳代培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞不會(huì)發(fā)生接觸抑制。（2023.海南卷，

7A）（X）

提示會(huì)發(fā)生接觸抑制。

⑵進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，血清應(yīng)經(jīng)過(guò)高溫處理后加入培養(yǎng)基。（2022?湖北卷，

7C）（X）

提示高溫會(huì)使血清含有的促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)失活，從而使

培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢等。

（3）培養(yǎng)心肌細(xì)胞的時(shí)候既需要氧氣也需要二氧化碳。（2022?江蘇卷，14B）（J）

關(guān)鍵能力?提升深期典型例題

題型1動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（生命觀念）

[例1]（2024.黑吉遼卷，14）從小鼠胚胎中分離獲取胚胎成纖維細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)，

在傳代后的不同時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)細(xì)胞數(shù)目，結(jié)果如圖。下列敘述正確的是（）

r

E

yl

勺

；

一

卻

>

A.傳代培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)皿需密封防止污染

B.選?、俚募?xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)比②更合理

C.直接用離心法收集細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)

注：PGCs是用電生殖細(xì)胞.iPGCs是

誘號(hào)也原始生殖郵施.均有成為期原

細(xì)袍或精原如星的潛能，

受精卵阻止乙PGCs形成

其他

細(xì)胞、￡

PGCs

囊胚代

期

A.誘導(dǎo)后的iPGCs具有胚胎干細(xì)胞的特性

B.移植的iPGCs最終產(chǎn)生的配子具有相同的遺傳信息

C.該實(shí)驗(yàn)中，子一代的遺傳物質(zhì)來(lái)源于物種甲

D.通過(guò)該實(shí)驗(yàn)可以獲得甲的克隆

答案C

解析胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，iPGCs是誘導(dǎo)型原始生殖細(xì)胞，具有成為

卵原細(xì)胞或精原細(xì)胞的潛能，故誘導(dǎo)后的iPGCs不具有胚胎干細(xì)胞的特性，A錯(cuò)

誤：移植的iPCC*分化形成卵原細(xì)胞或精原細(xì)胞后，通過(guò)減數(shù)分裂形成配子，在

減數(shù)分裂過(guò)程中基因可能會(huì)發(fā)生重組，導(dǎo)致最終產(chǎn)生的配子的遺傳信息不一定相

同，B錯(cuò)誤；由圖可知，將物種甲處于囊胚期的iPGCs移植到阻止PGCs形成的

乙魚(yú)的胚胎中，培育出的乙魚(yú)的生殖腺中的細(xì)胞由甲魚(yú)的iPGCs增殖分化而來(lái),

該乙魚(yú)再與物種甲雜交，配子均是由物種甲的生殖細(xì)胞產(chǎn)生，故子一代的遺傳物

質(zhì)來(lái)源于物種甲，C正確；克隆屬于無(wú)性繁殖，該實(shí)驗(yàn)過(guò)程中涉及到有性生殖，

D錯(cuò)誤。

命題點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)與單克隆抗體

主干知識(shí)?復(fù)盤(pán)再研必備知識(shí)

1.動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)

［認(rèn)知覺(jué)醒］動(dòng)物細(xì)抱融合技術(shù)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)分別是動(dòng)物細(xì)胞工程和

植物細(xì)胞工程中重要的技術(shù)之一。

①動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和原生質(zhì)體融合技術(shù)的基本原理都是________________O

②誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合和誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法都包括;

與誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合相比，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合特有的方法是。

③植物體細(xì)胞雜交技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)，都能在一定程度上突破

的局限，使成為可能。

提示①細(xì)胞膜的流動(dòng)性②PEG融合法和電融合法滅活病毒誘導(dǎo)法③有

性雜交遠(yuǎn)緣雜交

2.單克隆抗體及其應(yīng)用

［認(rèn)知覺(jué)醒I動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)的重要應(yīng)用之一就是制備單克隆抗體，其過(guò)程

如下圖所示：

經(jīng)免疫的

第

第(

雜培養(yǎng)

雜

二

一

小鼠B淋誘能產(chǎn)生特

交

交液

次

次

導(dǎo)

巴細(xì)胞瘤定抗體的

篩

細(xì)

篩

融

細(xì)

骨

選

選

胞

合雜交瘤

胞小鼠

細(xì)細(xì)胞

腹腔

①雜交瘤細(xì)胞有何特點(diǎn)？

②圖示過(guò)程有兩次篩選，第一次是在誘導(dǎo)融合之后，利用特定的選擇培養(yǎng)基篩選

出_______細(xì)胞；第二次篩選是在第一次篩選的基礎(chǔ)上，利用96孔板培養(yǎng)，采用

的方法篩選出________________________________細(xì)胞o

③與采用傳統(tǒng)的血清分離法得到的抗體相比，單克隆抗體有何優(yōu)點(diǎn)？

④單克隆抗體有何應(yīng)用價(jià)值？

提示①既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠數(shù)量的特定抗體。②雜交瘤專一抗體

檢測(cè)能產(chǎn)生所需特定抗體的雜交瘤③能準(zhǔn)確地識(shí)別抗原的細(xì)微差異，與特定

抗原發(fā)生特異性結(jié)合，并且可以大量制備。④作為診斷試劑，用于疾病診斷和

病原體鑒定；作為運(yùn)載藥物的載體；用于治療疾病。

［深度思考1請(qǐng)根據(jù)以卜信息，設(shè)計(jì)一方法（不考慮機(jī)械方法），從培養(yǎng)液中篩選出

雜交瘤細(xì)胞，并寫(xiě)出其依據(jù)的原理。已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑，其

中D途徑能被氨基喋聆阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑，但?般

不分裂增殖。小鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管只有D途徑，但能不斷分裂增殖，將這兩種

細(xì)胞在試管中混合，加入聚乙二醇促融，獲得雜交細(xì)胞。

提示為了篩選出雜交瘤細(xì)胞，除去其他細(xì)胞，可向培養(yǎng)液中加入氨基喋吟，收

集能無(wú)限增殖的細(xì)胞，因?yàn)榧尤氚被┮骱?，使D合成途徑阻斷，僅有D合成途

徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖，而人的淋巴細(xì)胞及其彼此融合

的細(xì)胞不能無(wú)限增殖，但人的淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜交細(xì)胞可以利用

淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA且無(wú)限增殖。

關(guān)鍵能力,提升深研典型例題

題型單克隆抗體的制備（科學(xué)思維）

［例1］（2023?北京卷，12）甲狀旁腺激素（PTH）水平是人類多種疾病的重要診斷指標(biāo)。

研究者制備單克隆抗體用于快速檢測(cè)PTH,有關(guān)制備過(guò)程的敘述錯(cuò)誤的是（）

A.需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

B.需要制備用PTH免疫的小鼠

C.利用抗原一抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞

D.篩選能分泌多種抗體的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞

答案D

解析單克隆抗體制備過(guò)程中需要對(duì)骨髓瘤細(xì)胞等進(jìn)行培養(yǎng)，即需要使用動(dòng)物細(xì)

胞培養(yǎng)技術(shù)，A正確；該操作的目的是制備單克隆抗體用于快速檢測(cè)PTH,故應(yīng)

用PTH刺激小鼠，使其產(chǎn)生相應(yīng)的B細(xì)胞，B1E確；抗原與抗體的結(jié)合具有特異

性，可利用抗原一抗體結(jié)合的原理篩選雜交瘤細(xì)胞，C正確；由于一種B細(xì)胞經(jīng)

分化形成漿細(xì)胞后通常只能產(chǎn)生一種抗體，故篩選出的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞無(wú)法分泌

多種抗體，D錯(cuò)誤。

［例2］（不定項(xiàng)）（2025?山東煙臺(tái)模擬）研究發(fā)現(xiàn)，免疫抑制受體TREM2（髓系細(xì)胞觸

發(fā)受體2）在腫瘤免疫逃逸過(guò)程中發(fā)揮了重要作用，TREM2抗體有望提高腫瘤治

療的效果。下圖為TREM2單克隆抗體的制備流程圖，下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是

（）

A.SP2/0細(xì)胞能在體外大量增殖，步驟②中融合的細(xì)胞都有此特性

B.步驟②常用的方法有PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)融合法等

C.通過(guò)步驟③即可獲得所需的雜交瘤細(xì)胞，步驟⑤⑥是克隆化培養(yǎng)過(guò)程

D.制備的TREM2單克隆抗體特異性強(qiáng)，能精準(zhǔn)殺死免疫逃逸的腫瘤細(xì)胞

答案ACD

解析步驟②中融合的細(xì)胞中包含兩個(gè)B淋巴細(xì)胞融合而來(lái)的細(xì)胞，這種融合細(xì)

胞沒(méi)有能在體外大量增殖的特性，A錯(cuò)誤：步驟②是動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程，常用的

技術(shù)有PEG融合法、電融合法、滅活病毒誘導(dǎo)融合法等，B正確；步驟③是用特

定培養(yǎng)基進(jìn)行“第一次篩選“，得到的是多種類型的雜交瘤細(xì)胞，步驟④是用專

一抗體進(jìn)行“第二次篩選“，得到能產(chǎn)生TREM2單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞，步

驟⑤⑥是將能產(chǎn)生TREM2單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔或者體外進(jìn)行

克隆化培養(yǎng)，C錯(cuò)誤；TREM2單克隆抗體具有強(qiáng)特異性，能與TREM2特異性結(jié)

合，削弱腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸能力，但不能直接殺死腫瘤細(xì)胞，D錯(cuò)誤。

命題點(diǎn)三動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物

I主干知識(shí)?復(fù)盤(pán)再研必備知識(shí)

1.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)

［認(rèn)知覺(jué)醒I2019年7月21日代孕貓?jiān)谂咛ヒ浦?6天后順利分娩，我國(guó)首例完

全自主培育的克隆貓“人蒜”誕生?！叭怂狻笔且恢环浅？蓯?ài)的短毛貓，小貓現(xiàn)

在健康狀況良好。這次成功培育克隆貓是世界為數(shù)不多的成功案例之一，標(biāo)志著

我國(guó)在克隆領(lǐng)域又邁進(jìn)了一大步。如圖為克隆貓“大蒜”培育過(guò)程的示意圖，請(qǐng)

回答下列有關(guān)問(wèn)題:

有①細(xì)胞培養(yǎng)

從死亡的貓“大\

蒜”身體取出活

的體細(xì)胞

-④球核

加照HEflfi代孕貓

采集卵

卵母細(xì)胞母細(xì)胞克隆貓

供體貓“大蒜”

⑴從卵母細(xì)胞供體貓?bào)w內(nèi)采集卵母細(xì)胞，體外培養(yǎng)至期，去核后得到的

去核卵母細(xì)胞是核移植中的(填“供體”或“受體”)。

(2)采用去核卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞的原因是什么？

(3)將供體細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞后，形成；用物理或化學(xué)方法激活重

構(gòu)胚，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程。

(4)將發(fā)育至特定階段的胚胎植入代孕貓進(jìn)行孕育，分娩出克隆貓“大蒜”?？寺?/p>

貓“大蒜”與死亡的“大蒜”的性狀表現(xiàn)不完全相同，主要原因是什么？

(5)“大蒜”克隆成功，說(shuō)明了_________________________________________

具有全能性。

提示(1)MII受體(2)①體積大、易操作；②營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富；③具有激發(fā)細(xì)胞

核全能性表達(dá)的物質(zhì)。（3）重構(gòu)胚（4）①克隆動(dòng)物的細(xì)胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來(lái)自受體卵

母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)；②生物的性狀不僅與遺傳物質(zhì)有關(guān)，還受環(huán)境的影響。［5）動(dòng)

物細(xì)胞的細(xì)胞核

2.動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)的應(yīng)用前景和存在的問(wèn)題

畜牧加速家畜遺傳改良進(jìn)程,促進(jìn)優(yōu)良畜群

生河-繁育

通過(guò)建立轉(zhuǎn)基因體細(xì)胞系,再利用體細(xì)

胞核移植技術(shù)培育的轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物可

國(guó)可以作為生物反應(yīng)器,生存醫(yī)用蛋白

也包'轉(zhuǎn)基因克隆動(dòng)物的細(xì)胞、組織或器官可

\以用于異種移植

I暹盥有望增加瀕危物種的存活數(shù)量

-使人類更深入地r解胚胎發(fā)育及喪老過(guò)程

?體細(xì)胞核移植技術(shù)的成功率非常低

，舉相對(duì)于技術(shù)研究,理論研究相對(duì)滯后

翳人許多克隆動(dòng)物存在健康問(wèn)題,表現(xiàn)出遺傳和生

u理缺陷等

I關(guān)鍵能力?提升深班典型例題

題型細(xì)胞核移植過(guò)程和克隆動(dòng)物（科學(xué)探究）

［例1］（2021?遼寧卷，13）如圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡(jiǎn)易流程

圖，有關(guān)敘述正確的是（）

重

代

組

移

孕

一

胚

.內(nèi)

植

胎

生

A.后代丁的遺傳性狀由甲和丙的遺傳物質(zhì)共同決定

B.過(guò)程①需要提供95%空氣和5%CO2的混合氣體

C.過(guò)程②常使用顯微操作去核法對(duì)受精卵進(jìn)行處理

D.過(guò)程③將激活后的重組細(xì)胞培養(yǎng)至原腸胚后移植

答案B

解析后代丁的細(xì)胞核的遺傳物質(zhì)來(lái)自甲，細(xì)胞質(zhì)的遺傳物質(zhì)來(lái)自乙，則丁的遺

傳性狀由甲和乙的遺傳物質(zhì)共同決定，A錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中需要提供95%空

氣（保證細(xì)胞的有氧呼吸）和5%CO,（維持培養(yǎng)液的pH）的混合氣體，B正確：過(guò)程

②常使用顯微操作去核法對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行處理，C錯(cuò)誤；過(guò)程③將激活后的重組

細(xì)胞培養(yǎng)至囊胚或桑甚胚后移植，D錯(cuò)誤。

［例2］（不定項(xiàng)）（2025?山東德州檢測(cè)）在保護(hù)粵東黑豬豬種遺傳資源各項(xiàng)生物技術(shù)

中，體細(xì)胞核移植技術(shù)因具有繼承親本性狀完整、實(shí)驗(yàn)周期短、保種效力強(qiáng)的優(yōu)

點(diǎn)而備受關(guān)注，下圖為部分相關(guān)操作流程。據(jù)圖分析正確的是（）

嚴(yán)4從屠宰場(chǎng)母豬獲取的卵巢.處理—、

后，5%CO,條件下培芥

小耳花豬將供體細(xì)胞注入剪下吟東黑豬的豬瓶贏

去核的卵母細(xì)胞耳組織.進(jìn)行培

-------魯/

通過(guò)顯微I

操作去核^將重構(gòu)胚移入同期發(fā)情

誓處理的杜洛克母豬體內(nèi)

A.卵母細(xì)胞需在卵巢中成熟后再移除核

B.5%CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH

C.重構(gòu)胚的遺傳物質(zhì)完全來(lái)自粵東黑豬

D.該技術(shù)證明了動(dòng)物體細(xì)胞具有全能性

答案B

解析卵母細(xì)胞需將其在體外培養(yǎng)至MII期成熟后再移除核，A錯(cuò)誤；5%CO2

的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH,為細(xì)胞的體外培養(yǎng)提供適宜的外界環(huán)境，B正確；

結(jié)合題圖可知，重構(gòu)胚的遺傳物質(zhì)大部分來(lái)自粵東黑豬，少部分來(lái)自小耳花豬（提

供細(xì)胞質(zhì)），C錯(cuò)誤；該技術(shù)證明了動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性，D錯(cuò)誤。

■關(guān)鍵?真題必刷

1.（2024?江西卷，16改編）某病毒顆粒表面有一特征性的大分子結(jié)構(gòu)蛋白S（含有多

個(gè)不同的抗原決定基，每一個(gè)抗原決定基能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生一種抗體）。為了建立

一種靈敏、高效檢測(cè)S蛋白的方法，研究人員采用雜交瘤技術(shù)制備了抗一S單克

隆抗體（如圖）。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

篩選單一

類型雜交》

倏0痛細(xì)胞Z

一三二「單克隆

注射抗原B淋巴'抗體A

免疫小鼠細(xì)胞，用總1

QQ,⑥/細(xì)胞雜交——?

嚕動(dòng)一a困合瘤細(xì)胞福選單?

9y類型雜交單克隆

培養(yǎng)什慎分散件微瘤細(xì)胞抗體B

描細(xì)胞揄細(xì)胞

A.利用膠原蛋白酶處理，可分散貼壁生長(zhǎng)的骨髓瘤細(xì)胞

B.制備的單克隆抗體A和單克隆抗體B可能是不同的單克隆抗體

C.用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞可傳代培養(yǎng)，但不能凍存

D.單克隆抗體A和單克隆抗體B都能夠特異性識(shí)別S蛋白

答案C

解析由于動(dòng)物細(xì)胞之間通過(guò)膠原蛋白相連，所以動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，用胰蛋

白酶或膠原蛋白酶處理貼壁生長(zhǎng)的動(dòng)物細(xì)胞可使其分散，A正確；蛋白S含有多

個(gè)不同的抗原決定基導(dǎo)致篩選的單一類型雜交瘤細(xì)胞可能不同，因此從體外培養(yǎng)

液或小鼠腹水中提取到的單克隆抗體A和單克隆抗體B可能是不同的單克隆抗體,

但可結(jié)合同種抗原，B王確；用于生產(chǎn)單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞可凍存，C錯(cuò)誤；

單克隆抗體A和單克隆抗體B都來(lái)自篩選出的雜交瘤細(xì)胞，都能夠特異性識(shí)別S

蛋白，DJF確。

2.(2022.山東卷，15)如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，

在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡(jiǎn)稱雙抗。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是

()

WW

抗體1抗體2抗體3

A.雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合

B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運(yùn)送至靶細(xì)胞

C.篩選雙抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原

D.同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞

答案D

解析根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合的原理推測(cè),雙抗可同時(shí)與2種抗原結(jié)合,

A正確；根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結(jié)合的特性，利用雙抗可以將蛋白類藥

物運(yùn)送至靶細(xì)胞，從而使藥物發(fā)揮相應(yīng)的作用，B正確；由于雙抗是在兩種不同

的抗原刺激下，B細(xì)胞增殖、分化產(chǎn)生不同的漿細(xì)胞分泌形成的，因此，篩選雙

抗時(shí)需使用制備單克隆抗體時(shí)所使用的2種抗原來(lái)進(jìn)行抗原一抗體檢測(cè)，從而實(shí)

現(xiàn)對(duì)雙抗的篩選，C正確；同時(shí)注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化形成不同的漿細(xì)

胞，而不是分化成產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞，D錯(cuò)誤.

3.（2023?天津卷，7）多種方法獲得的早期胚胎，均需移植給受體才能獲得后代。下

圖列舉了幾項(xiàng)技術(shù)成果。

/①試管動(dòng)物（如：高產(chǎn)試管奶牛）

早期則幽受體/②克降動(dòng)物（如：克隆猴）

胚胎子宮、、③轉(zhuǎn)基因動(dòng)物（如：乳汁中含人干

擾素的山羊）

下列敘述正確的是（）

A.經(jīng)胚胎移植產(chǎn)生的后代，其遺傳特性與受體均保持一致

B.①過(guò)程需獲得MII期的去核卵母細(xì)胞

C.②能大幅改良動(dòng)物性狀

D.③可通過(guò)②技術(shù)實(shí)現(xiàn)擴(kuò)大化生產(chǎn)，①②可通過(guò)③技術(shù)實(shí)現(xiàn)性狀改良

答案D

解析胚胎移植的受體只提供胚胎發(fā)育的場(chǎng)所，對(duì)移入胚胎的遺傳特性無(wú)任何影

響，A錯(cuò)誤；①過(guò)程為試管動(dòng)物的培育過(guò)程，是由供體母牛超數(shù)排卵后經(jīng)發(fā)情配

種或人工授精獲得胚胎產(chǎn)生后代的過(guò)程，若涉及體外受精技術(shù)，采集到的卵母細(xì)

胞需要培養(yǎng)到MI【期，但無(wú)需去核，卵母細(xì)胞去核屬于②克隆動(dòng)物操作程序，B

錯(cuò)誤；②過(guò)程為核移植克隆動(dòng)物，屬于無(wú)性生殖，可保持親本性狀，但不能大幅

改良動(dòng)物性狀，C錯(cuò)誤；③過(guò)程為通過(guò)轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得動(dòng)物，轉(zhuǎn)基因動(dòng)物可通過(guò)

②克隆技術(shù)實(shí)現(xiàn)擴(kuò)大化生產(chǎn)，而試管動(dòng)物和克隆動(dòng)物均可通過(guò)③轉(zhuǎn)基因技術(shù)，進(jìn)

行外源基因的導(dǎo)入，實(shí)現(xiàn)性狀改良，D正確。

4.（2024?重慶卷，8）科研小組以某種硬骨魚(yú)為材料在魚(yú)鰭（由不同組織構(gòu)成）“開(kāi)窗”

研究組織再生的方向性和機(jī)制（題圖所示），下列敘述不合理的是（）

H梅活性低H梅活性高

處

理

近端遠(yuǎn)端近端遠(yuǎn)端

A.“窗口”愈合過(guò)程中，細(xì)胞之間的接觸會(huì)影響細(xì)胞增殖

B.對(duì)照組“窗口”遠(yuǎn)端，細(xì)胞不具有增殖和分化的潛能

C“窗口”再生的方向與兩端H酶的活性高低有關(guān)，F(xiàn)可抑制遠(yuǎn)端H酶活性

D.若要比較尾鰭近、遠(yuǎn)端的再生能力，則需沿鰭近、遠(yuǎn)端各開(kāi)“窗口”觀察

答案B

解析“窗口”愈合過(guò)程中存在細(xì)胞增殖以增加細(xì)胞的數(shù)量，正常細(xì)胞增殖過(guò)程

中存在接觸抑制，即細(xì)胞之間的接觸會(huì)影響細(xì)胞增殖，A正確；處理組與對(duì)照組

比較發(fā)現(xiàn)，添加F后，“窗口”遠(yuǎn)端的細(xì)胞繼續(xù)增殖和分化，說(shuō)明對(duì)照組“窗口”

遠(yuǎn)端的細(xì)胞具有增殖和分化的潛能，B錯(cuò)誤；由圖可知，“窗口”再生的方向與

兩端H酶的活性高低有關(guān)，由活性低的向活性高的方向再生，添加F后可抑制遠(yuǎn)

端H酶活性，使組織再生的方向往中間延伸，C正確；圖中的近端和遠(yuǎn)端為同一

個(gè)“窗口”，只能判斷出再生的方向，若要判斷出再生的能力，則需沿鰭近、遠(yuǎn)

端各開(kāi)“窗口”分別觀察，D正確。

限時(shí)練49動(dòng)物細(xì)胞工程

（時(shí)間：30分鐘）

一、選擇題

1.（2025?福建三明適應(yīng)）懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)因細(xì)胞密度過(guò)大、有害代謝產(chǎn)物積

累等因素而分裂受阻。生產(chǎn)上常用灌流式培養(yǎng)避免這種現(xiàn)象出現(xiàn)。灌流式培養(yǎng)是

在細(xì)胞培養(yǎng)管內(nèi)，一邊不斷注入新鮮培養(yǎng)液，一邊將培養(yǎng)液的上清液不斷移出。

下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.懸浮培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，通常置于95%02和5%CO2的培養(yǎng)箱

B.配制灌流式培養(yǎng)液時(shí)應(yīng)考慮細(xì)胞生存的液體環(huán)境滲透壓

C.灌流速率要適宜，否則培養(yǎng)液的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)無(wú)法被充分利用

D.灌流式培養(yǎng)是在細(xì)胞密度達(dá)到較高或營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)較低時(shí)進(jìn)行

答案A

解析進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常置于含有95%空氣和5%CCh的混合氣體的培

養(yǎng)箱中培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞外液的滲透壓是相對(duì)穩(wěn)定且適宜的，這樣

有利于維持細(xì)胞的正常形態(tài)和功能，因此配制灌流式培養(yǎng)液時(shí)應(yīng)考慮細(xì)胞生存的

液體環(huán)境滲透壓，B正確；過(guò)高的灌流速率，會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)的細(xì)胞不能及時(shí)利用營(yíng)

養(yǎng)物質(zhì)，而使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)不能得到充分利用，C正確；懸浮培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞會(huì)因細(xì)

胞密度過(guò)大、有害代謝產(chǎn)物積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻，所

以灌流式培養(yǎng)是在細(xì)胞密度達(dá)到較高或營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)較低時(shí)進(jìn)行，D正確。

2.（2024?山東男島模擬）研究表明，髓系細(xì)胞觸發(fā)受體2（TREM2）是一種免疫抑制受

體，在腫瘤免疫逃逸中發(fā)揮重要作用。因此，TREM2抗體藥物有望提高腫瘤免

疫療法的療效。下圖為TREM2單克隆抗體的制備流程圖，下列說(shuō)法正確的是

()

M

昌

A.步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗體的雜交瘤細(xì)

胞

B.經(jīng)步驟②誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞既能分泌TREM2抗體又可無(wú)限增殖

C.步驟③和④的培養(yǎng)孔中均含有TREM2蛋白，依據(jù)的原理都是抗原一抗體雜交

D.步驟⑥和植物組織培養(yǎng)均需使用二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)

答案A

解析步驟①向小鼠注射TREM2蛋白，讓小鼠發(fā)生免疫反應(yīng)，獲得能產(chǎn)生抗體

的B淋巴細(xì)胞；步驟⑤向小鼠腹腔注射雜交瘤細(xì)胞，目的是獲得單克隆抗體，A

正確；經(jīng)步驟②誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞只有特異的雜交瘤細(xì)胞才能既能分泌TREM2

抗體又可無(wú)限增殖，B錯(cuò)誤；步驟③是特定培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞，步驟④是抗

原一抗體雜交，C錯(cuò)誤；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中二簞化碳用于調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH,而

植物組織培養(yǎng)的過(guò)程中不需要二氧化碳培養(yǎng)箱，D錯(cuò)誤。

3.（2024?九省聯(lián)考江西卷，11）脂質(zhì)體可作為運(yùn)載工具，將藥物分子運(yùn)送到特定的

細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用。為了提高藥物運(yùn)送的特異性，可在脂質(zhì)體表面連接識(shí)別特定細(xì)

胞的單克隆抗體，形成藥物一脂質(zhì)體一單克隆抗沐復(fù)合物（見(jiàn)圖）。下列敘述錯(cuò)誤

的是（）

單克隆

抗體

脂質(zhì)體

6藥物

A.脂質(zhì)體的作用是幫助復(fù)合物通過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸進(jìn)入特定細(xì)胞內(nèi)

B.可將雜交瘤細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)來(lái)獲取大量的單克隆抗體

C.復(fù)合物中的藥物借助單克隆抗體和細(xì)胞表面抗原的相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)運(yùn)送的特異

性

D.單克隆抗體的制備需使用特定的選擇培養(yǎng)基來(lái)篩選雜交瘤細(xì)胞

答案A

解析脂質(zhì)體的作用是幫助復(fù)合物通過(guò)胞吞進(jìn)入特定細(xì)胞內(nèi)，A錯(cuò)誤；單克隆抗

體和細(xì)胞表面抗原可以特異性結(jié)合，運(yùn)送藥物到特定的細(xì)胞，藥物起到殺傷作用，

C正確。

4.（2025?遼寧沈陽(yáng)三模）精準(zhǔn)爆破腫瘤細(xì)胞的“生物導(dǎo)彈”即抗體一藥物偶聯(lián)物

（ADC）能對(duì)腫瘤細(xì)胞進(jìn)行選擇性殺傷，該物質(zhì)由抗體、藥物（如細(xì)胞毒素）和接頭三

部分組成，其作用機(jī)制如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

抗體

A.ADC通過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，需要消耗細(xì)胞代謝產(chǎn)生的ATP

B.ADC中抗體的制備過(guò)程運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合等技術(shù)手段

C.ADC中的抗體能特異性識(shí)別腫瘤細(xì)胞表面的抗原并與之結(jié)合

D.ADC中藥物的作用是通過(guò)誘發(fā)腫瘤細(xì)胞凋亡，從而殺傷腫瘤細(xì)胞

答案A

解析結(jié)合題圖可知，ADC通過(guò)胞吞的方式進(jìn)入腫瘤細(xì)胞，需要消耗細(xì)胞代謝產(chǎn)

生的ATP,A錯(cuò)誤；ADC中抗體的制備過(guò)程運(yùn)用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)（動(dòng)物細(xì)胞工程

的基礎(chǔ)）和動(dòng)物細(xì)胞融合（涉及B淋巴細(xì)胞和骨髓疸細(xì)胞的融合）等技術(shù)手段，B正

確；ADC中的抗體能特異性識(shí)別腫瘤細(xì)胞表面的抗原并與之結(jié)合，因而抗體一藥

物偶聯(lián)物（ADC）對(duì)正常細(xì)胞的損害較小，對(duì)機(jī)體的副作用較小，C正確；由圖可

知，藥物在腫瘤細(xì)胞內(nèi)被釋放并起作用，加速腫瘤細(xì)胞的凋亡，從而殺傷腫瘤細(xì)

胞，D正確。

5.（2025?山東泰安模擬預(yù)測(cè)）雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的檢測(cè)抗原含量的方法，

流程如圖所示。其中固相抗體是經(jīng)由固相載體連接后的單克隆抗體，酶標(biāo)抗體是

一種具酶活性的抗體，二者可與抗原的不同部位特異性結(jié)合。下列有關(guān)分析錯(cuò)誤

洗

去游

指

示

離

醴

的

底

物

標(biāo)

體

抗

上

？

工o

1V

■

A.固相抗體的使用量應(yīng)明顯多于待測(cè)抗原的數(shù)量

B.酶標(biāo)抗體作用是與待測(cè)抗原結(jié)合并催化其分解

C.制備相應(yīng)單克隆抗體時(shí)需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)

D.若不洗去游離的酶標(biāo)抗體會(huì)導(dǎo)致測(cè)量結(jié)果偏高

答案B

解析固相載體連接后的單克隆抗體，具有特異性，故其使用量應(yīng)明顯多于待測(cè)

抗原的數(shù)量才能識(shí)別并結(jié)合更多的抗原，A正確；酶標(biāo)抗體可與抗原特異性結(jié)合，

并催化指示底物分解，B錯(cuò)誤；制備相應(yīng)單克隆抗體時(shí)需要使用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技

術(shù)，C正確；若不洗去游離的酶標(biāo)抗體，酶標(biāo)抗體持續(xù)催化底物分解，會(huì)導(dǎo)致測(cè)

量結(jié)果偏高，D正確。

6.（2025?重慶開(kāi)學(xué)考）我國(guó)研究人員經(jīng)體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出第一批靈長(zhǎng)類動(dòng)物

——食蟹猴，流程如圖所示，①?⑥表示過(guò)程，該動(dòng)物可作為研究癌癥等人類疾

病的動(dòng)物模型。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

包一

成纖維細(xì)|

胞的培畛雌rW性食T蟹猴

成纖維細(xì)胞點(diǎn)卵母

才細(xì)胞

?^-0-0

重構(gòu)胚

代孕&⑤⑥

母猴次^―

A.過(guò)程①用含血清的液體培養(yǎng)基，置于95%空氣和5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

B.過(guò)程②表示的卵母細(xì)胞去核，實(shí)際去除的是紡錘體一染色體復(fù)合物

C.可用Ca?一載體或乙醇激活重構(gòu)胚，使其完成分裂和發(fā)育進(jìn)程

D.代孕母猴分娩的食蟹猴性狀表現(xiàn)與提供卵母細(xì)胞的雌性食蟹猴無(wú)關(guān)

答案D

解析提供的去核卵母細(xì)胞含有的細(xì)胞質(zhì)基因，也會(huì)遺傳給食蟹猴，因此食蟹猴

性狀表現(xiàn)和提供卵母細(xì)胞的雌性食蟹猴有關(guān)，D錯(cuò)誤。

7.（2025?遼寧遼陽(yáng)市模擬）科研人員在制備雜交瘤細(xì)胞的過(guò)程中，獲得了能夠產(chǎn)生

雙特異性抗體（簡(jiǎn)稱雙抗）的雙雜交瘤細(xì)胞，雙抗可以同時(shí)結(jié)合兩種抗原。如圖是

抗EGFR/CD3雙特異性抗體作用結(jié)果的示意圖，該雙抗既能與腫瘤細(xì)胞表面的受

體EGFR結(jié)合，也能與T細(xì)胞表面的抗原CD3結(jié)合。己知顆粒酶、穿孔素是T

細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡。下列說(shuō)法正確的是（）

A.將兩種抗原分別注射到小鼠體內(nèi)產(chǎn)生細(xì)胞免疫以制備雙抗

B.T細(xì)胞分泌顆粒酶和穿孔素促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡，體現(xiàn)了免疫監(jiān)視功能

C.分離出兩種T細(xì)胞并與瘤細(xì)胞結(jié)合，能獲得可產(chǎn)生雙抗的雙雜交瘤細(xì)胞

D.抗EGFR/CD3雙特異性抗體能同時(shí)與兩種細(xì)胞結(jié)合，說(shuō)明抗體不具有專一性

答案B

解析為了制備抗EGFR/CD3雙特異性抗體，科研人員需要將抗原CD3注射到

小鼠體內(nèi)產(chǎn)生B淋巴細(xì)胞，制備產(chǎn)生抗CD3抗體的雜交瘤細(xì)胞，將抗原EGFR

注射到小鼠體內(nèi)產(chǎn)生B淋巴細(xì)胞，制備產(chǎn)生抗EGFR抗體的雜交瘤細(xì)胞，然后通

過(guò)一定的方法誘導(dǎo)兩種雜交瘤細(xì)胞融合，從而得到雙雜交瘤細(xì)胞，該過(guò)程涉及體

液免疫，A、C錯(cuò)誤；免疫監(jiān)視是指機(jī)體識(shí)別和清除突變的細(xì)胞，防止腫瘤的發(fā)

生的功能，所以T細(xì)胞分泌顆粒酶和穿孔素促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡，體現(xiàn)了免疫監(jiān)

視功能，B正確；抗EGFR/CD3雙特異性抗體能與腫瘤細(xì)胞表面的受體EGFR結(jié)

合，同時(shí)又能與T細(xì)胞表面的抗原CD3結(jié)合，該抗體仍然具有專一性，D錯(cuò)誤。

8.（不定項(xiàng)）（2025