ICS1110010

CCSC.30.

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T46454—2025/ISO162562021

:

臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和體外診斷系統(tǒng)

感染性疾病相關(guān)酵母樣真菌抗微生物

藥物的體外活性檢測(cè)微量肉湯稀釋

參考方法

Clinicallaboratorytestingandinvitrodiagnostictestsystems—

Brothmicro-dilutionreferencemethodfortestingtheinvitroactivityof

antimicrobialagentsagainstyeastfungiinvolvedininfectiousdiseases

ISO162562021IDT

(:,)

2025-10-05發(fā)布2026-05-01實(shí)施

國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局發(fā)布

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T46454—2025/ISO162562021

:

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

術(shù)語(yǔ)和定義

3………………1

試驗(yàn)程序

4…………………2

概述

4.1…………………2

稀釋板和方法

4.1.1…………………2

使用一次性微量稀釋板的條件

4.1.2………………3

培養(yǎng)基

4.2………………3

通則

4.2.1……………3

肉眼判讀法

4.2.2……………………3

光度判讀法

4.2.3……………………3

抗真菌藥物

4.3…………………………3

通則

4.3.1……………3

原液的配制

4.3.2……………………3

工作液的配制

4.3.3…………………4

微量肉湯稀釋板的制備

4.4……………6

肉眼判讀測(cè)試制備肉眼判讀法

4.4.1———…………6

光度判讀測(cè)試的制備光度判讀法

4.4.2———………6

微量稀釋板的貯存

4.5…………………6

接種物的制備

4.6………………………6

概述

4.6.1……………6

肉眼判讀接種物制備

4.6.2…………6

光度判讀接種物制備

4.6.3…………6

微量稀釋板的接種

4.7…………………7

微量稀釋板的孵育

4.8…………………7

概述

4.8.1……………7

肉眼判讀法

4.8.2……………………7

光度判讀法

4.8.3……………………7

結(jié)果讀取

4.9MIC………………………7

概述

4.9.1……………7

肉眼判讀方法

4.9.2…………………7

Ⅰ

GB/T46454—2025/ISO162562021

:

光度判讀方法

4.9.3…………………8

值的解釋

4.10MIC………………………8

質(zhì)量控制

5(QC)……………8

附錄資料性培養(yǎng)基

A()RPMI-1640…………………11

概述

A.1………………11

附錄資料性麥?zhǔn)狭蛩徜^濁度標(biāo)準(zhǔn)

B()0.5……………13

參考文獻(xiàn)

……………………14

Ⅱ

GB/T46454—2025/ISO162562021

:

前言

本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

本文件等同采用臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和體外診斷系統(tǒng)感染性疾病相關(guān)酵母樣真菌

ISO16256:2021《

抗微生物藥物的體外活性檢測(cè)微量肉湯稀釋參考方法

》。

本文件做了下列最小限度的編輯性改動(dòng)

:

為便于理解條款增加了部分注釋見(jiàn)

———,(4.7)。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任

。。

本文件由國(guó)家藥品監(jiān)督管理局提出

。

本文件由全國(guó)醫(yī)用臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室和體外診斷系統(tǒng)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口

(SAC/TC136)。

本文件起草單位北京市醫(yī)療器械檢驗(yàn)研究院北京市醫(yī)用生物防護(hù)裝備檢驗(yàn)研究中心復(fù)旦大學(xué)

:()、

附屬華山醫(yī)院中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院上海市東方醫(yī)院同濟(jì)大學(xué)附屬東方醫(yī)院溫州市康泰

、、()、

生物科技有限公司山東省醫(yī)療器械和藥品包裝檢驗(yàn)研究院河南省藥品醫(yī)療器械檢驗(yàn)院河南省疫苗

、、(

批簽中心鄭州安圖生物工程股份有限公司梅里埃診斷產(chǎn)品上海有限公司

)、、()。

本文件主要起草人畢春雷胡付品楊啟文吳文娟唐運(yùn)偉李承芝張娟麗李彬汪少穎

:、、、、、、、、。

Ⅲ

GB/T46454—2025/ISO162562021

:

引言

抗微生物藥物體外敏感性試驗(yàn)通常是針對(duì)可能導(dǎo)致疾病的微生物尤其是那些被認(rèn)為對(duì)常用的抗

,

微生物藥物可能表現(xiàn)出獲得性耐藥性的微生物種屬該試驗(yàn)在耐藥性監(jiān)測(cè)敏感性的流行病學(xué)研究以

。、

及新型抗微生物藥物與現(xiàn)有抗微生物藥物之間的比較等方面也很重要

。

稀釋法常被用來(lái)測(cè)定抗微生物藥物的最低抑菌濃度是

(minimuminhibitoryconcentration,MIC),

抗真菌藥物敏感性試驗(yàn)的參考方法法通常用于耐藥性監(jiān)測(cè)為研究和注冊(cè)目的新抗微生物藥物

。MIC、

的比較性研究對(duì)于常規(guī)方法所得結(jié)果不可靠或臨床需要定量結(jié)果的微生物試驗(yàn)確定在常規(guī)檢測(cè)中得

、,

出模棱兩可結(jié)果的微生物的敏感性在稀釋法試驗(yàn)中通過(guò)檢測(cè)微生物在含有系列稀釋濃度抗微生物

。,

藥物的一系列瓊脂平板瓊脂稀釋法上或肉湯肉湯稀釋法中能否產(chǎn)生可見(jiàn)生長(zhǎng)來(lái)確定

()()MIC。

抗微生物藥物的值是指在規(guī)定的體外試驗(yàn)條件下和規(guī)定的時(shí)間內(nèi)能抑制某特定微生物出現(xiàn)

MIC,

肉眼可見(jiàn)或光學(xué)可測(cè)量生長(zhǎng)的抗微生物藥物的最低濃度以毫克每升為單位值可提供

[(mg/L)]。MIC

微生物對(duì)抗微生物藥物的敏感性信息并指導(dǎo)臨床醫(yī)師制定相應(yīng)治療決策由于所用方法可能影響試

,。

驗(yàn)結(jié)果為了確保實(shí)驗(yàn)室內(nèi)和室間結(jié)果的重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)室需要進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制及標(biāo)準(zhǔn)化通常認(rèn)為

,,。

肉湯稀釋法的檢測(cè)結(jié)果值在真實(shí)終點(diǎn)上下一個(gè)倍比稀釋度內(nèi)即倍比稀釋系列的個(gè)孔

(MIC)MIC(±1

或管是具有重現(xiàn)性的

)。

肉湯稀釋法是一種向含濃度遞增通常是兩倍的抗微生物藥物的相同體積肉湯的一系列容器中接

()

種已知數(shù)量微生物的技術(shù)

。

微量肉湯稀釋法指的是在微量稀釋板上進(jìn)行的肉湯稀釋試驗(yàn)

。

本文件所描述的參考方法預(yù)期用于酵母樣真菌的純培養(yǎng)物的檢測(cè)方法起初顯示給出相似的氟康

。

唑如果不是完全一致最大差異在內(nèi)[3]此外方法顯示批準(zhǔn)的抗真菌藥物兩株質(zhì)控菌

MIC,,2mg/L。,

株給出的結(jié)果相似如本文件中描述盡管光度法的質(zhì)量控制結(jié)果可略低于肉眼判讀法希望使

MIC,,。

用本文件進(jìn)行新的抗真菌藥物研究或作為與診斷器械給出結(jié)果相比較的參考方法的實(shí)驗(yàn)室可

,MIC,

基于結(jié)果判讀是通過(guò)肉眼觀察方法[5]還是使用光度法方法[2,10]來(lái)選擇使用

MIC(CLSI)(EUCAST)

哪個(gè)程序選項(xiàng)在任何一種情況下所選程序的細(xì)節(jié)需嚴(yán)格遵守在中報(bào)告的質(zhì)量控

。。ISO16256:2012,

制測(cè)試是使用微量肉湯稀釋板進(jìn)行的生產(chǎn)者未以某種方式處理用于目視或光度計(jì)方法的塑料板

,。

Ⅳ

GB/T46454—2025/ISO162562021

:

臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)和體外診斷系統(tǒng)

感染性疾病相關(guān)酵母樣真菌抗微生物

藥物的體外活性檢測(cè)微量肉湯稀釋

參考方法

警示———使用本文件可能涉及危險(xiǎn)性材料操作和設(shè)備本文件無(wú)意陳述使用本文件所涉及的所

、。

有安全問(wèn)題使用本文件前使用者有責(zé)任建立適當(dāng)?shù)陌踩徒】荡胧┎⒋_定法規(guī)限制的適用性

。,。

1范圍

本文件描述了檢測(cè)酵母樣真菌抗真菌藥物的敏感性的方法包括引起感染的念珠菌屬和新型隱球

,

菌本文件描述的參考方法尚未用于雙相型真菌的酵母相菌研究如皮炎芽生菌和或莢膜組織胞漿菌

。,/

莢膜變種另外在檢測(cè)絲狀真菌霉菌標(biāo)準(zhǔn)化中涉及幾個(gè)未在當(dāng)前程序闡述的其他問(wèn)題這些方法不

。()。

在本文件范圍內(nèi)

。

本文件描述的微量肉湯稀釋參考法能通過(guò)兩種途徑之一實(shí)現(xiàn)一是通過(guò)肉眼確定方

。MIC(CLSI

法[1,5]第二種途徑通過(guò)光度法確定方法[2,10]反映了在規(guī)定試驗(yàn)條件下藥物

),MIC(EUCAST)。MIC

的活性并考慮在其他因素下能對(duì)臨床管理目的進(jìn)行解釋如藥物的藥理學(xué)或抗真菌耐藥機(jī)制另外

,