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文檔簡介
2025年細胞生物學實驗室操作規(guī)范考核試題及答案解析單位所屬部門:________姓名:________考場號:________考生號:________一、選擇題1.細胞生物學實驗中,用于固定細胞的化學物質通常是()A.乙醇B.甲醇C.丙酮D.以上都是答案:D解析:乙醇、甲醇和丙酮都是常用的細胞固定劑,它們能夠使細胞蛋白質變性凝固,保持細胞形態(tài)和內部結構,為后續(xù)的染色和觀察提供基礎。在實際操作中,可以根據實驗需求選擇不同的固定劑或混合使用。2.制作細胞涂片時,下列哪一步是錯誤的()A.細胞懸液應充分混勻B.涂片時用力過猛會導致細胞重疊C.涂片后應立即干燥D.涂片應均勻分布答案:C解析:細胞涂片制作完成后,通常需要經過固定、染色等步驟,而不是立即干燥。立即干燥會導致細胞變形甚至死亡,影響觀察結果。正確的操作應該是將涂片固定后,再進行染色和其他處理。3.在使用相差顯微鏡觀察活細胞時,下列哪一項是正確的()A.細胞需要經過染色B.細胞需要經過固定C.細胞不需要經過染色或固定D.細胞需要經過特殊處理答案:C解析:相差顯微鏡利用相差板和聚光器產生的光程差,使不同折射率的細胞結構產生不同的光強差異,從而觀察到活細胞的內部結構。因此,使用相差顯微鏡觀察活細胞時,不需要對細胞進行染色或固定,以保持細胞的自然狀態(tài)和生理活性。4.細胞培養(yǎng)過程中,CO2培養(yǎng)箱的主要作用是()A.提供無菌環(huán)境B.調節(jié)pH值C.提供溫度D.促進細胞生長答案:B解析:細胞培養(yǎng)過程中,CO2培養(yǎng)箱的主要作用是通入一定濃度的CO2,通過CO2與水反應產生碳酸,從而調節(jié)培養(yǎng)液的pH值,使其維持在適宜細胞生長的范圍內。一般來說,細胞培養(yǎng)常用的CO2濃度為5%。5.制備電鏡樣品時,下列哪一步是錯誤的()A.樣品需要經過固定B.樣品需要經過脫水C.樣品需要經過包埋D.樣品可以直接觀察答案:D解析:制備電鏡樣品需要經過一系列復雜的過程,包括固定、脫水、包埋、切片、染色等步驟,以獲得高分辨率的細胞結構圖像。樣品不能直接觀察,因為電鏡需要高真空環(huán)境,而生物樣品在真空中會迅速失水變形。6.流式細胞術主要用于()A.細胞計數B.細胞分選C.細胞表型分析D.以上都是答案:D解析:流式細胞術是一種能夠對單個細胞進行快速、多參數定量分析的技術,主要用于細胞計數、細胞分選和細胞表型分析等方面。通過激光照射細胞并檢測散射光和熒光信號,可以獲得細胞的大小、顆粒度、細胞周期、凋亡狀態(tài)等多種信息。7.在進行免疫熒光實驗時,下列哪一步是錯誤的()A.細胞需要經過固定B.細胞需要經過通透C.直接使用二抗D.需要使用封閉液答案:C解析:免疫熒光實驗通常需要經過固定、通透、封閉、一抗孵育、二抗孵育、熒光染色等步驟。固定是為了固定細胞結構,通透是為了使抗體進入細胞內部,封閉是為了防止非特異性結合,一抗和二抗分別用于特異性結合和信號放大,熒光染色是為了觀察結果。直接使用二抗是不正確的,因為二抗需要與一抗特異性結合,而一抗尚未加入。8.細胞增殖實驗中,常用的指標是()A.細胞數量B.細胞活力C.細胞形態(tài)D.以上都是答案:A解析:細胞增殖實驗主要用于檢測細胞的生長和繁殖能力,常用的指標是細胞數量,例如MTT法、CCK8法等都是通過檢測細胞代謝活性來反映細胞數量的變化。細胞活力和細胞形態(tài)也是重要的觀察指標,但它們通常不是細胞增殖實驗的主要指標。9.在進行細胞融合實驗時,下列哪一項是正確的()A.融合率越高越好B.融合率越低越好C.融合率應控制在一定范圍內D.融合率與實驗目的無關答案:C解析:細胞融合實驗通常是為了獲得雜交細胞,例如雜交瘤細胞等,融合率是衡量實驗成功與否的重要指標。融合率過高或過低都可能影響實驗結果,因此應該將融合率控制在一定范圍內,以獲得最佳的實驗效果。10.細胞凋亡實驗中,常用的檢測方法是()A.TUNEL法B.MTT法C.流式細胞術D.以上都是答案:D解析:細胞凋亡實驗有多種檢測方法,包括TUNEL法、流式細胞術、AnnexinVFITC/PI雙染法等。TUNEL法檢測DNA片段化,流式細胞術檢測細胞凋亡相關蛋白表達和細胞膜通透性變化,AnnexinVFITC/PI雙染法可以區(qū)分早期凋亡、晚期凋亡和壞死細胞。MTT法主要用于檢測細胞活力,與細胞凋亡檢測無關。因此,以上都是細胞凋亡實驗中常用的檢測方法。11.細胞培養(yǎng)過程中,維持培養(yǎng)箱內濕度在90%以上的主要目的是()A.防止培養(yǎng)液蒸發(fā)B.為細胞提供水分C.模擬體內環(huán)境D.有利于CO2溶解答案:A解析:細胞培養(yǎng)箱內維持高濕度主要是為了防止培養(yǎng)液表面因蒸發(fā)而形成濃度梯度,影響細胞生長。同時,高濕度也有助于維持細胞培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定,防止細胞因干燥而損傷。雖然模擬體內環(huán)境和CO2溶解也與濕度有關,但維持高濕度的首要目的是防止蒸發(fā)。12.使用相差顯微鏡觀察細胞時,視野中光線較暗的部分通常是()A.細胞核B.細胞質C.細胞器D.背景區(qū)域答案:D解析:相差顯微鏡通過利用相差板和聚光器產生的光程差,使不同折射率的細胞結構(如細胞核、細胞質、細胞器)產生不同的光強差異,從而在視野中呈現出明暗不同的圖像。通常,視野中的背景區(qū)域(未對焦或遠離焦平面的區(qū)域)因為缺乏特定的光程差,光線較弱,顯得較暗。13.在進行WesternBlot實驗時,蛋白質條帶出現彌散現象可能是由于()A.蛋白質濃度過高B.蛋白質濃度過低C.電泳條件不合適D.抗體濃度過高答案:C解析:WesternBlot實驗中,蛋白質條帶出現彌散現象通常是由于電泳條件不合適導致的。例如,電壓過高、電泳時間過長或緩沖液pH值不合適等都可能導致蛋白質條帶彌散。蛋白質濃度過高或過低、抗體濃度過高雖然也可能影響實驗結果,但通常不會導致條帶彌散。14.細胞計數時,使用血球計數板的主要優(yōu)點是()A.計數速度快B.計數結果準確C.可進行活死細胞區(qū)分D.可用于所有類型細胞答案:B解析:血球計數板是一種常用的細胞計數工具,通過其特定的刻度系統,可以實現對細胞數量的精確計數。雖然計數速度相對較慢,且不能直接區(qū)分活死細胞或用于所有類型細胞,但其計數結果的準確性是其主要優(yōu)點。15.制作臨時裝片觀察細胞時,通常使用的固定液是()A.甲醇B.乙醇C.丙酮D.以上都是答案:D解析:制作臨時裝片觀察細胞時,常用的固定液包括甲醇、乙醇和丙酮。這些固定液能夠迅速使細胞蛋白質變性凝固,固定細胞形態(tài)和內部結構,為后續(xù)的觀察提供基礎。實際操作中,可以根據實驗需求選擇不同的固定劑或混合使用。16.流式細胞術進行細胞分選時,主要依據的是()A.細胞大小B.細胞表面標記C.細胞內熒光強度D.以上都是答案:D解析:流式細胞術進行細胞分選時,主要依據細胞的大小、細胞表面標記和細胞內熒光強度等多個參數。通過激光照射細胞并檢測散射光和熒光信號,根據設定的閾值和參數范圍,可以選擇性地分選出特定類型的細胞。因此,以上都是流式細胞術進行細胞分選時主要依據的參數。17.免疫組化實驗中,用于封閉非特異性結合的試劑通常是()A.蛋白質AB.蛋白質GC.封閉液D.抗體答案:C解析:免疫組化實驗中,為了防止抗體與非特異性結合位點結合,導致背景染色過強,通常需要在加一抗之前使用封閉液進行封閉。封閉液通常含有高濃度的非特異性蛋白,如牛血清白蛋白(BSA)或脫脂奶粉,可以競爭性結合抗體上的非特異性結合位點,從而提高實驗的特異性。18.細胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基中通常包含哪些成分()A.葡萄糖B.氨基酸C.維生素D.以上都是答案:D解析:細胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基需要提供細胞生長和繁殖所需的多種營養(yǎng)成分。通常,培養(yǎng)基中包含葡萄糖、氨基酸、維生素、無機鹽、微量元素等多種成分,以及生長因子和激素等促進細胞生長的物質。因此,以上都是細胞培養(yǎng)基中通常包含的成分。19.細胞凋亡過程中,常用于檢測DNA片段化的方法是()A.TUNEL法B.MTT法C.AnnexinVFITC/PI雙染法D.活性氧檢測法答案:A解析:細胞凋亡過程中,DNA會斷裂成小片段,TUNEL(末端脫氧核苷酸轉移酶介導的dUTP缺口末端標記法)是檢測DNA片段化的常用方法。通過TUNEL法可以在凋亡細胞的DNA斷裂處標記熒光信號,從而識別凋亡細胞。MTT法主要用于檢測細胞活力,AnnexinVFITC/PI雙染法主要用于區(qū)分早期凋亡、晚期凋亡和壞死細胞,活性氧檢測法主要用于檢測細胞內活性氧水平,與DNA片段化檢測無關。20.在進行細胞培養(yǎng)時,下列哪項操作是不正確的()A.培養(yǎng)基應提前預熱B.培養(yǎng)瓶應滅菌處理C.培養(yǎng)過程中應避免光照D.培養(yǎng)基應定期更換答案:C解析:細胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基應提前預熱至37℃左右,以減少溫度變化對細胞的影響。培養(yǎng)瓶應經過嚴格滅菌處理,以防止雜菌污染。雖然細胞對光照的敏感性因種類而異,但許多細胞在培養(yǎng)過程中需要一定的光照(通常是散射光或弱光)以維持正常的生理活動,完全避免光照通常是不正確的。培養(yǎng)基應定期更換,以補充營養(yǎng)物質并去除代謝廢物。二、多選題1.細胞培養(yǎng)過程中,影響細胞生長的因素包括()A.溫度B.pH值C.氧氣濃度D.營養(yǎng)物質E.細胞密度答案:ABCDE解析:細胞培養(yǎng)過程中,細胞生長受到多種因素的影響。溫度是細胞進行新陳代謝和生長的必要條件,通常哺乳動物細胞培養(yǎng)需要在37℃恒溫條件下進行。pH值會影響酶的活性和細胞代謝,細胞培養(yǎng)常用的pH值范圍是7.27.4。氧氣濃度是細胞進行有氧呼吸的必要條件,通常細胞培養(yǎng)需要維持5%的CO2濃度來調節(jié)pH值。營養(yǎng)物質包括葡萄糖、氨基酸、維生素、無機鹽等,是細胞生長和繁殖的基礎。細胞密度會影響細胞間的接觸抑制和生長狀態(tài),過高或過低的細胞密度都不利于細胞生長。2.使用相差顯微鏡觀察細胞時,可以觀察到哪些細胞結構()A.細胞核B.細胞質C.細胞器D.細胞膜E.細胞間隙答案:ABCD解析:相差顯微鏡通過利用相差板和聚光器產生的光程差,使不同折射率的細胞結構(如細胞核、細胞質、細胞器、細胞膜)產生不同的光強差異,從而在視野中呈現出明暗不同的圖像。雖然細胞間隙也存在折射率的差異,但在相差顯微鏡下通常難以清晰觀察到。因此,可以使用相差顯微鏡觀察到細胞核、細胞質、細胞器和細胞膜等細胞結構。3.WesternBlot實驗中,包括哪些主要步驟()A.蛋白質樣品制備B.SDSPAGE電泳C.轉膜D.抗體孵育E.化學發(fā)光檢測答案:ABCDE解析:WesternBlot實驗是一種用于檢測特定蛋白質的常用方法,其主要包括以下步驟:首先進行蛋白質樣品制備,然后通過SDSPAGE電泳將蛋白質分離,接著將分離的蛋白質轉移到膜上(轉膜),再用特異性抗體進行孵育(抗體孵育),最后通過化學發(fā)光或熒光等方式進行檢測(化學發(fā)光檢測)。因此,以上都是WesternBlot實驗的主要步驟。4.細胞凋亡的形態(tài)特征包括()A.細胞體積縮小B.細胞膜完整性好C.核染色質濃縮D.膜孔形成E.DNA片段化答案:ACDE解析:細胞凋亡是一系列程序性細胞死亡過程,其形態(tài)特征包括細胞體積縮小、細胞膜完整性好(早期)、核染色質濃縮、膜孔形成(晚期內吞小體釋放內容物)以及DNA片段化(形成寡核小體)。細胞凋亡與細胞壞死不同,其細胞膜通常保持完整,不會像壞死那樣破裂。因此,細胞凋亡的形態(tài)特征包括細胞體積縮小、核染色質濃縮、膜孔形成和DNA片段化,而細胞膜完整性好是早期特征。5.流式細胞術可以用于哪些方面的分析()A.細胞計數B.細胞周期分析C.細胞凋亡檢測D.細胞表型分析E.細胞分選答案:ABCDE解析:流式細胞術是一種可以對單個細胞進行快速、多參數定量分析的技術,其應用范圍非常廣泛。它可以用于細胞計數、檢測細胞大小和顆粒度、分析細胞周期、檢測細胞凋亡、分析細胞表面標記和細胞內熒光強度等細胞表型信息,并且可以根據設定的參數進行細胞分選。因此,以上都是流式細胞術可以用于分析的方面。6.免疫熒光實驗中,需要使用哪些試劑()A.固定液B.通透液C.一抗D.二抗E.熒光染料答案:ABCDE解析:免疫熒光實驗是一種利用熒光標記的抗體檢測細胞內特定蛋白質的方法,其通常需要經過固定、通透、封閉、一抗孵育、二抗孵育、熒光染料孵育等步驟。固定液用于固定細胞結構和抗原,通透液用于使抗體進入細胞內部,一抗和二抗分別用于特異性結合目標抗原和信號放大,熒光染料用于顯色觀察。因此,以上都是免疫熒光實驗中通常需要使用的試劑。7.細胞培養(yǎng)過程中,無菌操作的重要性體現在()A.防止細胞污染B.保證細胞活力C.確保實驗結果可靠D.減少實驗誤差E.節(jié)約實驗成本答案:ABCD解析:細胞培養(yǎng)過程中,無菌操作是保證實驗成功的關鍵。污染會導致細胞生長異常,甚至死亡,影響實驗結果的準確性。無菌操作可以防止細胞污染,保證細胞在純凈的環(huán)境中生長,從而保證細胞活力,確保實驗結果的可靠,并減少因污染引起的實驗誤差。雖然無菌操作可能需要額外的設備和步驟,但其對于保證實驗質量和結果的可靠性至關重要,并非單純?yōu)榱斯?jié)約成本。8.制作電鏡樣品時,需要進行哪些處理()A.固定B.脫水C.包埋D.切片E.染色答案:ABCDE解析:制備電鏡樣品需要經過一系列復雜的過程,以獲得高分辨率的細胞結構圖像。通常需要先將樣品進行固定,使其結構穩(wěn)定;然后進行脫水,去除水分;接著將樣品包埋在樹脂中,制成塊狀;再通過超薄切片機將樣品切成極薄的切片;最后對切片進行染色,使細胞結構在電子束下能夠被觀察到。因此,以上都是制作電鏡樣品時通常需要進行處理的步驟。9.細胞計數常用的方法包括()A.血球計數板法B.自動細胞計數儀法C.MTT法D.活細胞計數法E.流式細胞術法答案:ABDE解析:細胞計數是細胞培養(yǎng)和研究中常用的基本操作,常用的方法包括血球計數板法、自動細胞計數儀法、活細胞計數法(如trypanblue染色法)和流式細胞術法等。MTT法主要用于檢測細胞活力,通過測量細胞代謝活性來反映細胞數量,但其并非直接計數細胞的方法。因此,細胞計數常用的方法包括血球計數板法、自動細胞計數儀法、活細胞計數法(基于顯微鏡觀察和染色)和流式細胞術法。10.細胞融合技術可以用于哪些方面()A.制備雜交瘤細胞B.創(chuàng)建基因工程細胞C.研究細胞遺傳學D.生產單克隆抗體E.模擬體內細胞融合答案:ABCD解析:細胞融合技術是指將兩個或多個不同的細胞融合成一個細胞的過程。該技術可以用于制備雜交瘤細胞(A),通過融合B淋巴細胞和骨髓瘤細胞,可以篩選出能夠產生特異性抗體的雜交瘤細胞,進而用于生產單克隆抗體(D)。細胞融合技術也可以用于創(chuàng)建基因工程細胞(B),例如將不同物種的細胞融合,可以將外源基因導入宿主細胞中。此外,細胞融合技術還可以用于研究細胞遺傳學(C),例如通過融合不同染色體數目的細胞,可以研究染色體數目的變化對細胞功能的影響。雖然細胞融合可以模擬體內自然發(fā)生的細胞融合現象(E),但其應用主要體現在上述幾個方面。11.細胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基中通常包含哪些成分()A.葡萄糖B.氨基酸C.維生素D.無機鹽E.生長因子答案:ABCDE解析:細胞培養(yǎng)培養(yǎng)基需要提供細胞生長和繁殖所需的多種營養(yǎng)成分。通常包含碳源(如葡萄糖)、氮源(如氨基酸)、無機鹽、微量元素、維生素等基本成分,以及促進細胞生長和分化的生長因子、激素等。這些成分共同構成了完整的細胞培養(yǎng)環(huán)境,支持細胞的正常生理活動。12.使用相差顯微鏡觀察細胞時,可以觀察到哪些細胞結構()A.細胞核B.細胞質C.細胞器D.細胞膜E.細胞間隙答案:ABCD解析:相差顯微鏡通過利用相差板和聚光器產生的光程差,使不同折射率的細胞結構(如細胞核、細胞質、細胞器、細胞膜)產生不同的光強差異,從而在視野中呈現出明暗不同的圖像。雖然細胞間隙也存在折射率的差異,但在相差顯微鏡下通常難以清晰觀察到。因此,可以使用相差顯微鏡觀察到細胞核、細胞質、細胞器和細胞膜等細胞結構。13.WesternBlot實驗中,包括哪些主要步驟()A.蛋白質樣品制備B.SDSPAGE電泳C.轉膜D.抗體孵育E.化學發(fā)光檢測答案:ABCDE解析:WesternBlot實驗是一種用于檢測特定蛋白質的常用方法,其主要包括以下步驟:首先進行蛋白質樣品制備,然后通過SDSPAGE電泳將蛋白質分離,接著將分離的蛋白質轉移到膜上(轉膜),再用特異性抗體進行孵育(抗體孵育),最后通過化學發(fā)光或熒光等方式進行檢測(化學發(fā)光檢測)。因此,以上都是WesternBlot實驗的主要步驟。14.細胞凋亡的形態(tài)特征包括()A.細胞體積縮小B.細胞膜完整性好(早期)C.核染色質濃縮D.膜孔形成(晚期內吞小體釋放內容物)E.DNA片段化答案:ACDE解析:細胞凋亡是一系列程序性細胞死亡過程,其形態(tài)特征包括細胞體積縮小、核染色質濃縮、膜孔形成(晚期內吞小體釋放內容物)以及DNA片段化(形成寡核小體)。細胞凋亡與細胞壞死不同,其細胞膜通常保持完整(早期),不會像壞死那樣破裂。因此,細胞凋亡的形態(tài)特征包括細胞體積縮小、核染色質濃縮、膜孔形成和DNA片段化,而細胞膜完整性好是早期特征。15.流式細胞術可以用于哪些方面的分析()A.細胞計數B.細胞周期分析C.細胞凋亡檢測D.細胞表型分析E.細胞分選答案:ABCDE解析:流式細胞術是一種可以對單個細胞進行快速、多參數定量分析的技術,其應用范圍非常廣泛。它可以用于細胞計數、檢測細胞大小和顆粒度、分析細胞周期、檢測細胞凋亡、分析細胞表面標記和細胞內熒光強度等細胞表型信息,并且可以根據設定的參數進行細胞分選。因此,以上都是流式細胞術可以用于分析的方面。16.免疫熒光實驗中,需要使用哪些試劑()A.固定液B.通透液C.封閉液D.一抗E.熒光染料答案:ABCDE解析:免疫熒光實驗是一種利用熒光標記的抗體檢測細胞內特定蛋白質的方法,其通常需要經過固定、通透、封閉、一抗孵育、二抗孵育、熒光染料孵育等步驟。固定液用于固定細胞結構和抗原,通透液用于使抗體進入細胞內部,封閉液用于封閉非特異性結合位點,一抗和二抗分別用于特異性結合目標抗原和信號放大,熒光染料用于顯色觀察。因此,以上都是免疫熒光實驗中通常需要使用的試劑。17.細胞培養(yǎng)過程中,無菌操作的重要性體現在()A.防止細胞污染B.保證細胞活力C.確保實驗結果可靠D.減少實驗誤差E.節(jié)約實驗成本答案:ABCD解析:細胞培養(yǎng)過程中,無菌操作是保證實驗成功的關鍵。污染會導致細胞生長異常,甚至死亡,影響實驗結果的準確性。無菌操作可以防止細胞污染,保證細胞在純凈的環(huán)境中生長,從而保證細胞活力,確保實驗結果的可靠,并減少因污染引起的實驗誤差。雖然無菌操作可能需要額外的設備和步驟,但其對于保證實驗質量和結果的可靠性至關重要,并非單純?yōu)榱斯?jié)約成本。18.制作電鏡樣品時,需要進行哪些處理()A.固定B.脫水C.包埋D.超薄切片E.染色答案:ABCDE解析:制備電鏡樣品需要經過一系列復雜的過程,以獲得高分辨率的細胞結構圖像。通常需要先將樣品進行固定,使其結構穩(wěn)定;然后進行脫水,去除水分;接著將樣品包埋在樹脂中,制成塊狀;再通過超薄切片機將樣品切成極薄的切片(超薄切片);最后對切片進行染色,使細胞結構在電子束下能夠被觀察到。因此,以上都是制作電鏡樣品時通常需要進行處理的步驟。19.細胞計數常用的方法包括()A.血球計數板法B.自動細胞計數儀法C.活細胞計數法(如TrypanBlue染色法)D.流式細胞術法E.顯微鏡直接計數法答案:ABCDE解析:細胞計數是細胞培養(yǎng)和研究中常用的基本操作,常用的方法包括血球計數板法、自動細胞計數儀法、活細胞計數法(如基于顯微鏡觀察和染色的TrypanBlue染色法)、流式細胞術法和顯微鏡直接計數法等。這些方法各有優(yōu)缺點,可根據實驗需求選擇合適的方法。因此,以上都是細胞計數常用的方法。20.免疫組化實驗中,影響結果的因素包括()A.抗體質量B.溫度C.pH值D.孵育時間E.背景染色答案:ABCDE解析:免疫組化實驗是一種利用抗體檢測組織或細胞中特定蛋白質的方法,其結果受多種因素影響??贵w質量直接影響結合的特異性和強度,溫度和pH值影響抗體與抗原的結合效率,孵育時間過長或過短都會影響結果,背景染色過強會干擾結果的判讀。因此,以上都是影響免疫組化實驗結果的因素。三、判斷題1.細胞培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基的pH值應保持在7.27.4之間。()答案:正確解析:細胞培養(yǎng)對環(huán)境的pH值有嚴格要求。大多數哺乳動物細胞最適生長的pH值范圍在7.27.4之間。培養(yǎng)基中通常加入碳酸氫鈉,通過與CO2反應來緩沖pH值的變化。因此,維持培養(yǎng)基pH值在7.27.4之間是保證細胞正常生長和代謝的關鍵。2.使用相差顯微鏡觀察細胞時,細胞核通常比細胞質顯得更亮。()答案:錯誤解析:相差顯微鏡利用相差板和聚光器產生的光程差,使不同折射率的細胞結構呈現出不同的光強差異。細胞核的折射率通常高于細胞質,根據相差原理,高折射率的結構會使得通過的光線發(fā)生更大的偏折,導致光線減弱,因此在相差顯微鏡下,細胞核通常比細胞質顯得更暗,而不是更亮。3.WesternBlot實驗中,SDSPAGE電泳的原理是根據蛋白質分子量的大小進行分離。()答案:正確解析:SDSPAGE(十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳)是WesternBlot實驗中用于分離蛋白質的關鍵步驟。SDS是一種陰離子去污劑,能夠與蛋白質分子結合,并賦予其負電荷,同時使蛋白質變性并展開成線性構象。在電場作用下,蛋白質分子主要根據其分子量的大小進行分離,分子量較小的蛋白質遷移速度較快,分子量較大的蛋白質遷移速度較慢。4.流式細胞術可以用于對細胞進行精確的物理分離,即細胞分選。()答案:正確解析:流式細胞術不僅能夠對細胞進行快速、多參數的定量分析,如細胞計數、細胞大小、顆粒度、細胞周期、凋亡狀態(tài)等,還可以根據設定的參數進行細胞分選。通過激光照射細胞并檢測散射光和熒光信號,可以選擇性地將目標細胞從混合細胞群體中分離出來,獲得純度較高的特定細胞群體。5.免疫熒光實驗中,封閉液的主要作用是增強抗原抗體結合。()答案:錯誤解析:免疫熒光實驗中,封閉液的主要作用是阻斷細胞或組織樣本上非特異性結合位點,防止抗體與這些位點非特異性結合,從而降低背景染色,提高實驗結果的特異性。增強抗原抗體結合通常是通過優(yōu)化抗體濃度、孵育條件等來實現的,而不是通過封閉液。6.細胞培養(yǎng)過程中,完全無菌的環(huán)境是不必要的,只要防止污染即可。()答案:錯誤解析:細胞培養(yǎng)對環(huán)境要求非常嚴格,需要在一個完全無菌的環(huán)境中進行,以防止微生物污染。污染不僅會影響細胞生長,甚至會導致細胞死亡,使實驗結果無效。因此,細胞培養(yǎng)必須在超凈工作臺或生物安全柜等具備無菌操作條件的設備中進行,并嚴格遵守無菌操作規(guī)程。7.制作電鏡樣品時,脫水過程是為了去除樣品中的水分,使其適合包埋。()答案:錯誤解析:制作電鏡樣品時,脫水過程是為了逐漸去除樣品中的水分,使其從水相轉變?yōu)榉撬啵渲啵?,以便于后續(xù)的包埋。這個過程是為了使樣品能夠被樹脂完全浸透,并保持其結構穩(wěn)定,為后續(xù)的切片和觀察做準備。脫水通常是一個逐步進行的過程,以防止樣品因快速失水而收縮或變形。8.細胞凋亡過程中,細胞膜完整性會逐漸破壞,導致細胞內容物泄露。()答案:正確解析:細胞凋亡是一個程序性的細胞死亡過程,其特征之一是細胞膜完整性逐漸破壞,形成膜孔(membranepores),導致細胞內的離子、酶和其他內容物泄露到細胞外。這一過程有助于將凋亡細胞與周圍環(huán)境隔離,避免引發(fā)炎癥反應。細胞膜的破壞是區(qū)分凋亡與壞死的標志之一。9.MTT法可以用于檢測細胞的DNA含量。()答案:錯誤解析:MTT(3(4,5dimethylthiazol2yl)2,5diphenyltetrazoliumbromide)法是一種檢測細胞活性的方法。活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶可以將MTT還原為水溶性的甲臜(formazan),通過測量甲臜的生成量可以反映細胞的代謝活性,進而評估細胞的活力。MTT法檢測的是細胞的代謝活性,而不是DNA含量。10.細胞密度過高會導致細胞接觸抑制,影響細胞生長。()答案:正確解析:細胞接觸抑制(contactinhibition)是指當細胞在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基中生長到一定程度,相互接觸后,其增殖會受到抑制的現象。這是細胞正常的生長調節(jié)機制之一。細胞密度過高會導致細胞間緊密接觸,激活接觸抑制信號通路,從而抑制細胞周期進程,使細胞停止分裂,影響細胞群體的生長和增殖。四、簡答題1.簡述細胞培養(yǎng)過程中無菌操作的基本要求。答案:細胞培養(yǎng)過程中無菌操作的基本要求包括:①操作環(huán)境:在超凈工作臺或生物安全柜內進行操作,保持操作臺面和周圍環(huán)境清潔、干燥;②個人防護:穿戴潔凈工作服、口罩和手套,限制人員流動;③器械滅菌:所有進入培養(yǎng)環(huán)境的器械(如吸管、培養(yǎng)瓶、移液器等)必須經過高壓蒸汽滅菌或其他有效滅菌方法處理;④培養(yǎng)基和添加物:使用無菌的培養(yǎng)基和添加物,配制和分裝時需在無菌
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