DB13T11272009中華鱉穿孔病防治技術(shù)規(guī)范1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了中華鱉（Trionyxsinensis）穿孔病的診斷方法、預(yù)防措施和治療技術(shù)要求。本標(biāo)準(zhǔn)適用于中華鱉養(yǎng)殖過程中穿孔病的防治工作。2規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T18407.42001農(nóng)產(chǎn)品安全質(zhì)量無公害水產(chǎn)品產(chǎn)地環(huán)境要求NY50712002無公害食品漁用藥物使用準(zhǔn)則NY50722002無公害食品漁用配合飼料安全限量NY50732006無公害食品水產(chǎn)品中有毒有害物質(zhì)限量3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3.1中華鱉穿孔病由嗜水氣單胞菌（Aeromonashydrophila）感染引起的，以中華鱉體表出現(xiàn)圓形或不規(guī)則穿孔病灶為主要特征的細(xì)菌性疾病。3.2病原體指能夠引起中華鱉穿孔病的嗜水氣單胞菌，革蘭氏陰性短桿菌，大小為0.51.0μm×1.03.0μm，具鞭毛，能運動。3.3潛伏期從病原體侵入中華鱉機(jī)體到出現(xiàn)臨床癥狀的時間段，一般為37天。3.4感染率在特定養(yǎng)殖群體中，感染穿孔病的中華鱉數(shù)量占總數(shù)量的百分比。3.5死亡率在特定養(yǎng)殖群體中，因穿孔病死亡的中華鱉數(shù)量占總感染數(shù)量的百分比。4病原學(xué)4.1病原特征嗜水氣單胞菌屬于弧菌科氣單胞菌屬，為革蘭氏陰性桿菌，菌體大小為0.51.0μm×1.03.0μm，單個或成對排列，無莢膜，無芽孢，具極生單鞭毛，能運動。在普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上形成圓形、光滑、濕潤、邊緣整齊、半透明的灰白色菌落，直徑約23mm。在血瓊脂平板上呈β溶血。4.2生理生化特性嗜水氣單胞菌為兼性厭氧菌，最適生長溫度為2530℃，pH范圍為5.59.0，最適pH為7.27.6。氧化酶陽性，接觸酶陽性，能發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不發(fā)酵肌醇，能還原硝酸鹽，甲基紅試驗陽性，VP試驗陽性，吲哚試驗陽性，精氨酸雙水解酶陽性，賴氨酸脫羧酶陽性，鳥氨酸脫羧酶陰性。4.3抗原結(jié)構(gòu)嗜水氣單胞菌具有O抗原（菌體抗原）和H抗原（鞭毛抗原），目前已發(fā)現(xiàn)超過100種O血清型和60多種H血清型。引起中華鱉穿孔病的嗜水氣單胞菌主要為O:11、O:16、O:19和O:34等血清型。4.4毒力因子嗜水氣單胞菌的主要毒力因子包括：a)氣溶素：一種孔道形成毒素，能溶解紅細(xì)胞，破壞細(xì)胞膜；b)蛋白酶：包括絲氨酸蛋白酶和金屬蛋白酶，能降解組織蛋白；c)細(xì)胞毒素：直接損傷宿主細(xì)胞；d)脂多糖：具有內(nèi)毒素活性，可引起發(fā)熱和炎癥反應(yīng)；e)黏附素：幫助細(xì)菌黏附于宿主細(xì)胞表面；f)鞭毛：增強(qiáng)細(xì)菌的運動性和侵襲力。5流行病學(xué)5.1流行特點中華鱉穿孔病在全國各主要養(yǎng)鱉地區(qū)均有發(fā)生，以長江流域和珠江流域發(fā)病較為嚴(yán)重。該病全年均可發(fā)生，但以510月水溫較高時為流行高峰期，其中79月發(fā)病率最高。發(fā)病水溫一般為2032℃，最適發(fā)病水溫為2530℃。5.2傳染源傳染源主要包括：a)患病和死亡的中華鱉；b)帶菌中華鱉（包括康復(fù)鱉和隱性感染鱉）；c)被病原菌污染的水體、底泥和養(yǎng)殖設(shè)施；d)攜帶病原的野生水生動物；e)被污染的飼料和工具。5.3傳播途徑5.3.1水平傳播a)經(jīng)口感染：中華鱉攝食被病原菌污染的飼料或飲水；b)經(jīng)皮膚感染：病原菌通過中華鱉體表損傷的皮膚或黏膜侵入；c)經(jīng)鰓感染：病原菌通過鰓部侵入血液循環(huán)系統(tǒng)；d)接觸傳播：健康鱉與患病鱉直接接觸或通過養(yǎng)殖設(shè)施間接接觸。5.3.2垂直傳播嗜水氣單胞菌可通過親鱉的生殖系統(tǒng)垂直傳播給子代，導(dǎo)致稚鱉早期感染。5.4易感動物5.4.1主宿主中華鱉（Trionyxsinensis）是該病的主要宿主，各年齡段均可感染，其中稚鱉和幼鱉易感性最高，成鱉次之，親鱉相對較低。5.4.2其他易感動物除中華鱉外，嗜水氣單胞菌還可感染多種水生動物，包括：a)其他鱉類：如中華草龜、黃喉擬水龜?shù)?；b)魚類：如鯉魚、鯽魚、草魚、鰱魚、鳙魚等；c)兩棲類：如青蛙、蠑螈等；d)其他水生動物：如蝦、蟹等。5.5誘發(fā)因素下列因素可誘發(fā)或加重中華鱉穿孔病的發(fā)生：a)水質(zhì)惡化：氨氮、亞硝酸鹽、硫化氫等有害物質(zhì)含量超標(biāo)；b)水溫劇變：短時間內(nèi)水溫波動超過5℃；c)密度過高：養(yǎng)殖密度超過適宜范圍，造成應(yīng)激反應(yīng)；d)營養(yǎng)不良：飼料營養(yǎng)不均衡或變質(zhì)；e)操作不當(dāng)：捕撈、運輸、分塘等操作造成機(jī)械損傷；f)其他疾病：寄生蟲病或其他細(xì)菌性疾病繼發(fā)感染；g)環(huán)境應(yīng)激：噪音、震動、光照等環(huán)境因素突然改變。6臨床癥狀與病理變化6.1臨床癥狀中華鱉穿孔病的臨床癥狀主要表現(xiàn)為：a)早期癥狀：病鱉活動減少，食欲下降，反應(yīng)遲鈍，常單獨趴伏于池邊或食臺上，不愿下水。b)體表癥狀：在背甲、腹甲、裙邊及四肢皮膚等部位出現(xiàn)圓形或不規(guī)則形白色小點，逐漸擴(kuò)大形成直徑28mm的潰瘍性病灶，病灶邊緣微隆起，中央凹陷，呈穿孔狀，嚴(yán)重時可穿透甲殼，露出下方的肌肉組織。c)行為癥狀：病鱉常出現(xiàn)異常行為，如頻繁上岸、爬行困難、游泳姿態(tài)異常等。d)其他癥狀：嚴(yán)重感染時，病鱉體重減輕，生長停滯，繼發(fā)感染其他疾病，最終因衰竭而死亡。6.2病理變化6.2.1肉眼病變a)體表病變：病灶處甲殼溶解，肌肉組織外露，呈灰白色或淡黃色，周圍組織充血、出血。b)內(nèi)臟病變：肝臟腫大，呈土黃色或灰白色，表面有出血點；脾臟腫大，呈暗紅色；腎臟腫大，表面有出血點；腸道充血，腸壁變薄，腸內(nèi)充滿黃色黏液。6.2.2組織病理學(xué)變化a)皮膚病變：表皮層壞死脫落，真皮層炎性細(xì)胞浸潤，膠原纖維斷裂，血管擴(kuò)張充血。b)肝臟病變：肝細(xì)胞變性、壞死，肝索結(jié)構(gòu)紊亂，匯管區(qū)炎性細(xì)胞浸潤。c)脾臟病變：脾臟白髓萎縮，紅髓充血，淋巴細(xì)胞減少，網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞增生。d)腎臟病變：腎小管上皮細(xì)胞變性、壞死，腎小球萎縮，間質(zhì)炎性細(xì)胞浸潤。e)腸道病變：腸黏膜上皮細(xì)胞脫落，固有層炎性細(xì)胞浸潤，腸腺結(jié)構(gòu)破壞。7診斷方法7.1臨床診斷根據(jù)中華鱉的流行病學(xué)特點、臨床癥狀和病理變化可進(jìn)行初步診斷。當(dāng)出現(xiàn)典型的穿孔病灶時，可初步診斷為中華鱉穿孔病。7.2病原學(xué)診斷7.2.1病原分離a)無菌操作取病鱉病灶邊緣組織或內(nèi)臟器官（肝、脾、腎）。b)將病料接種于普通營養(yǎng)瓊脂平板、血瓊脂平板和TCBS瓊脂平板，28℃培養(yǎng)2448小時。c)觀察菌落形態(tài)特征，挑取可疑菌落進(jìn)行純化培養(yǎng)。7.2.2病原鑒定a)形態(tài)學(xué)鑒定：對純化菌株進(jìn)行革蘭氏染色，鏡檢觀察菌體形態(tài)。b)生理生化鑒定：對分離菌株進(jìn)行氧化酶、接觸酶、糖發(fā)酵等生理生化試驗。c)血清學(xué)鑒定：采用玻片凝集試驗或試管凝集試驗進(jìn)行血清學(xué)分型。d)分子生物學(xué)鑒定：采用PCR方法擴(kuò)增16SrRNA基因或其他特異性基因片段，進(jìn)行序列測定和比對分析。7.3鑒別診斷a)中華鱉腐皮病：主要由嗜水氣單胞菌、溫和氣單胞菌等引起，表現(xiàn)為皮膚潰爛，但不形成穿孔病灶。b)中華鱉白點?。河烧婢腥疽?，表現(xiàn)為體表出現(xiàn)白色小點，但不形成潰瘍和穿孔。c)中華鱉紅脖子病：由嗜水氣單胞菌等引起，表現(xiàn)為頸部充血、發(fā)紅，但不形成穿孔病灶。d)中華鱉水霉?。河伤咕腥疽穑憩F(xiàn)為體表附著白色棉絮狀菌絲，但不形成穿孔病灶。8預(yù)防措施8.1養(yǎng)殖環(huán)境管理a)池塘選擇：選擇水源充足、水質(zhì)良好、排灌方便的地點建池，池塘面積以15畝為宜，水深1.01.5m。b)池塘消毒：放養(yǎng)前用生石灰100150kg/畝或漂白粉1015kg/畝全池潑灑消毒，710天后方可放養(yǎng)。d)底質(zhì)管理：定期清除池底殘餌和糞便，每23年進(jìn)行一次池塘清淤，淤泥厚度不超過20cm。8.2苗種管理a)苗種選擇：選擇體質(zhì)健壯、無病無傷、規(guī)格整齊的苗種，避免從疫區(qū)引進(jìn)苗種。b)苗種消毒：放養(yǎng)前用3%5%食鹽水或1020mg/L高錳酸鉀溶液浸泡1015分鐘。c)放養(yǎng)密度：根據(jù)池塘條件和管理水平合理控制放養(yǎng)密度，一般稚鱉放養(yǎng)密度為2030只/m2，幼鱉為510只/m2，成鱉為23只/m2。d)分級飼養(yǎng)：根據(jù)中華鱉的生長情況及時進(jìn)行分級飼養(yǎng)，避免大小混養(yǎng)造成相互殘食。8.3飼養(yǎng)管理a)飼料選擇：選用營養(yǎng)均衡、質(zhì)量可靠的配合飼料，符合NY50722002的要求。b)投喂管理：定時、定量、定點投喂，日投喂量為鱉體重的3%5%，分23次投喂，根據(jù)水溫、天氣和攝食情況適當(dāng)調(diào)整投喂量。c)飼料衛(wèi)生：飼料應(yīng)存放在干燥、通風(fēng)、陰涼處，防止霉變和污染，禁止投喂變質(zhì)飼料。d)投喂工具：投喂工具應(yīng)定期消毒，避免交叉感染。8.4疫病監(jiān)測a)日常觀察：每天觀察中華鱉的活動、攝食和生長情況，發(fā)現(xiàn)異常及時處理。b)定期檢查：每月抽樣檢查中華鱉的健康狀況，重點檢查體表有無損傷和病灶。c)病原監(jiān)測：定期檢測水體和中華鱉體內(nèi)的病原菌，及時發(fā)現(xiàn)疫情隱患。d)疫情報告：發(fā)現(xiàn)疫情應(yīng)及時向當(dāng)?shù)厮a(chǎn)技術(shù)推廣部門報告，并采取相應(yīng)防控措施。8.5免疫預(yù)防a)疫苗接種：在流行季節(jié)前，對中華鱉進(jìn)行嗜水氣單胞菌疫苗接種，提高免疫力。b)免疫增強(qiáng)劑：在飼料中適量添加免疫增強(qiáng)劑，如β葡聚糖、維生素C、維生素E等，增強(qiáng)中華鱉的抗病能力。c)中草藥預(yù)防：定期在飼料中添加具有抗菌、抗病毒作用的中草藥，如黃連、黃芩、金銀花等。9治療方法9.1治療原則a)早期發(fā)現(xiàn)，及時治療，防止病情擴(kuò)散。b)內(nèi)服外用相結(jié)合，綜合治療。c)科學(xué)用藥，輪換用藥，避免產(chǎn)生耐藥性。d)治療期間加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，改善養(yǎng)殖環(huán)境。9.2藥物治療9.2.1外用藥物a)全池潑灑：用0.20.3mg/L強(qiáng)氯精或0.30.5mg/L二氧化氯全池潑灑，連用35天。b)藥?。河?015mg/L恩諾沙星或1015mg/L氟苯尼考藥浴，每次3060分鐘，每天1次，連用35天。c)局部處理：對病灶處用碘伏或高錳酸鉀溶液消毒，然后涂抹抗菌藥膏，如紅霉素軟膏、氯霉素軟膏等。9.2.2內(nèi)服藥物a)抗生素治療：按每kg體重每天2030mg恩諾沙星或1015mg氟苯尼考拌料投喂，連用57天。b)磺胺類藥物治療：按每kg體重每天80100mg磺胺甲噁唑拌料投喂，連用57天。c)中草藥治療：在飼料中添加5%10%的抗菌中草藥制劑，如黃連解毒散、板藍(lán)根散等，連用710天。9.3生態(tài)治療a)改善水質(zhì)：通過換水、增氧、使用水質(zhì)改良劑等措施改善水質(zhì)環(huán)境。b)調(diào)整密度：適當(dāng)降低養(yǎng)殖密度，減少應(yīng)激反應(yīng)。c)生物防治：在池塘中投放光合細(xì)菌、芽孢桿菌等有益微生物，抑制病原菌繁殖。d)調(diào)整飼料：適當(dāng)減少投喂量，增加維生素和礦物質(zhì)的添加，提高中華鱉的抵抗力。9.4治療注意事項a)藥物選擇：應(yīng)選擇對嗜水氣單胞菌敏感的藥物，并符合NY50712002的規(guī)定。b)用藥劑量：嚴(yán)格按照藥物說明書的推薦劑量使用，避免過量或不足。c)用藥時間：一般選擇在上午910點或下午45點投喂藥物，此時中華鱉攝食活躍。d)停藥期：嚴(yán)格遵守藥物的停藥期規(guī)定，確保水產(chǎn)品質(zhì)量安全。e)療效觀察：治療期間密切觀察中華鱉的反應(yīng)和病情變化，及時調(diào)整治療方案。10養(yǎng)殖場衛(wèi)生防疫管理10.1衛(wèi)生管理a)場區(qū)衛(wèi)生：保持養(yǎng)殖場環(huán)境整潔，定期清理場區(qū)垃圾和雜物。b)工具消毒：養(yǎng)殖工具應(yīng)定期消毒，不同池塘的工具應(yīng)分開使用，避免交叉感染。c)人員管理：工作人員進(jìn)入養(yǎng)殖區(qū)應(yīng)穿戴專用工作服和鞋靴，并進(jìn)行消毒處理。d)車輛管理：外來車輛進(jìn)入養(yǎng)殖場應(yīng)進(jìn)行消毒處理，避免帶入病原。10.2防疫管理b)病死鱉處理：病死鱉應(yīng)及時撈出，進(jìn)行深埋或焚燒處理，禁止隨意丟棄。c)疫情處理：發(fā)生疫情時，應(yīng)立即隔離病鱉，對養(yǎng)殖水體和設(shè)施進(jìn)行徹底消毒，防止疫情擴(kuò)散。d)防疫記錄：建立完整的防疫記錄，包括消毒記錄、用藥記錄、疫情記錄等，便于追溯和分析。10.3人員培訓(xùn)a)技術(shù)培訓(xùn)：定期對養(yǎng)殖人員進(jìn)行技術(shù)培訓(xùn)，提高其疾病防控意識和技能。b)健康管理：工作人員應(yīng)定期體檢，患有傳染性疾病的人員不得從事養(yǎng)殖工作。c)應(yīng)急預(yù)案：制定疫情應(yīng)急預(yù)案，明確疫情報告、隔離、消毒、治療等應(yīng)急處理程序。11記錄與檔案管理11.1生產(chǎn)記錄a)苗種記錄：記錄苗種來源、數(shù)量、規(guī)格、放養(yǎng)時間、放養(yǎng)密度等信息。b)飼料記錄：記錄飼料種類、來源、投喂量、投喂時間等信息。c)水質(zhì)記錄：定期記錄水溫