ICS65.020.20

CCSB30DB3207

連云港市地方標(biāo)準(zhǔn)

DB3207/T1045—2023

大球蓋菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

TechnicalcodeofpracticeforStrophariarugosoannulataspawnproduction

2023-12-22發(fā)布2024-01-01實(shí)施

連云港市市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB3207/T1045—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由連云港市農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出并組織實(shí)施與監(jiān)督。

本文件由連云港市農(nóng)業(yè)科學(xué)院歸口。

本文件起草單位：連云港市農(nóng)業(yè)科學(xué)院、連云港市農(nóng)作物技術(shù)指導(dǎo)站。

本文件主要起草人：蘇文英、紀(jì)偉、孫瀟瀟、劉曉梅、胡曙鋆、任立凱、秦裕營。

I

DB3207/T1045—2023

大球蓋菇菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了大球蓋菇菌種生產(chǎn)、環(huán)境要求、設(shè)備設(shè)施、母種生產(chǎn)、原種和栽培種生產(chǎn)、標(biāo)簽、貯

存及留樣等技術(shù)流程要點(diǎn)。

本文件適用于大球蓋菇母種、原種、栽培種菌種制作。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB4806.7食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品接觸用塑料材料及制品

GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)

GB/T12728食用菌術(shù)語

NY/T528食用菌菌種生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

NY/T1731食用菌菌種良好作業(yè)規(guī)范

NY/T1935食用菌栽培基質(zhì)質(zhì)量安全要求

3術(shù)語和定義

GB/T12728界定的以及下列術(shù)語和定義適用于本文件。

母種stockculture

經(jīng)各種方法選育得到的具有結(jié)實(shí)性的菌絲體純培養(yǎng)物及其繼代培養(yǎng)物，以玻璃試管為培養(yǎng)容器和使

用單位，也稱一級種、試管種。

原種motherspawn

由母種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。常以塑料菌種瓶或聚丙烯塑料袋為容器。

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栽培種spawn

由原種移植、擴(kuò)大培養(yǎng)而成的菌絲體純培養(yǎng)物。常以塑料菌種瓶或聚丙烯塑料袋為容器。栽培種只

能用于栽培，不可再次擴(kuò)大繁殖菌種。

4菌種生產(chǎn)環(huán)境要求

菌種生產(chǎn)應(yīng)選擇地勢平坦，通風(fēng)良好，環(huán)境清潔，交通便利，靠近水源的場所。場地環(huán)境條件符合

NY/T528規(guī)定。

5設(shè)備設(shè)施

根據(jù)生產(chǎn)需要應(yīng)配備超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱、拌料機(jī)、裝袋機(jī)、高壓滅菌鍋或常壓滅菌鍋等設(shè)備。

各級菌種生產(chǎn)有各自隔離的原材料庫、拌料室、滅菌室、冷卻室、接種室、培養(yǎng)室、儲(chǔ)存室等設(shè)施。菌

種生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備應(yīng)符合NY/T1731的規(guī)定。

6母種生產(chǎn)

培養(yǎng)基配方

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）：馬鈴薯200g（用浸出汁），葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL，

pH自然。

容器

試管規(guī)格18mm×180mm或者20mm×200mm。

分裝及滅菌

分裝培養(yǎng)基至試管長度的1/4處，用硅膠塞封口，每10只試管為1把，牛皮紙包裹硅膠塞，扎緊，試

管口朝上放置，在121℃～123℃(0.10MPa～0.12MPa)滅菌20min。

擺斜面

2

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滅菌結(jié)束后在潔凈的環(huán)境中擺斜面，管口一端墊高，使管內(nèi)培養(yǎng)基自然傾斜凝固，要求斜面長度不

超過試管長度的2/3。

接種

按照無菌操作在超凈工作臺或接種箱內(nèi)接種，封口做好標(biāo)記。

培養(yǎng)

接種好的試管放置在24℃～26℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，定期檢查，觀察菌絲長勢、濃密程度、發(fā)菌

一致性，及時(shí)挑出有雜菌污染的大球蓋菇菌種。

7原種、栽培種生產(chǎn)

培養(yǎng)料配方

配方一：麥粒88%，麩皮10%，石灰1%，石膏1%，含水量60%～65%；

配方二：木屑78%，麩皮10%，豆粕10%，石灰1%，石膏1%，含水量60%～65%。

原料選擇

原材料要求干燥、新鮮、無蟲蛀、無霉變，其中木屑應(yīng)使用闊葉樹木屑，避免使用針葉樹木屑。麥

粒要選用顆粒飽滿，新鮮無蟲蛀無雜質(zhì)的優(yōu)質(zhì)籽粒。原材料應(yīng)符合NY/T1935的要求。

原料預(yù)處理

麥粒、木屑應(yīng)提前浸泡預(yù)濕。生產(chǎn)用水應(yīng)符合GB5749的要求。

容器

原種采用容積750ml的帶蓋聚丙烯塑料瓶或14cm（折徑）×28cm（長度）×0.5mm（厚度）的

聚丙烯塑料袋，塑料瓶材質(zhì)應(yīng)符合GB4806.7的規(guī)定。栽培種使用上述規(guī)格的聚丙烯塑料袋即可。

裝袋（瓶）

將栽培基質(zhì)充分混合攪拌均勻，含水量達(dá)到配方要求，采用裝袋（瓶）機(jī)或人工進(jìn)行裝袋（瓶），

每袋（瓶）裝培養(yǎng)基質(zhì)500g～600g，塑料袋用無棉蓋體套環(huán)封口，培養(yǎng)基質(zhì)裝袋（瓶）后4h內(nèi)進(jìn)行

滅菌。

3

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滅菌

采用高壓滅菌的方式，培養(yǎng)料滅菌條件為121℃～123℃維持2h；采用常壓滅菌方法的條件為在3

h之內(nèi)使滅菌溫度達(dá)到100℃，維持10h～12h后，利用余熱再封閉8h～10h。

冷卻

滅菌結(jié)束后將培養(yǎng)料推入冷卻室進(jìn)行冷卻，當(dāng)培養(yǎng)瓶（袋）中料溫降至20℃以下準(zhǔn)備接種。

接種

采用臭氧消毒劑對接種間進(jìn)行30min以上臭氧消毒。超凈工作臺或接種箱在接種前紫外燈照射30

min，接種時(shí)采用75%酒精對接種工作臺、工具、雙手進(jìn)行表面擦拭消毒。嚴(yán)格按無菌操作接種，每支

試管母種可轉(zhuǎn)接6～8袋（瓶）原種，每袋（瓶）原種可轉(zhuǎn)接50～60袋栽培種。

培養(yǎng)

接種完的原種或栽培種及時(shí)移至培養(yǎng)室進(jìn)行避光培養(yǎng)，培養(yǎng)室溫度為20℃～22℃，菌絲快要長滿

菌袋時(shí)，將培養(yǎng)溫度降低至18℃。培養(yǎng)過程中定期檢查，觀察菌絲長勢、濃密程度、發(fā)菌一致性，及

時(shí)挑出污染的大球蓋菇菌種。

8標(biāo)簽、貯存及留樣

標(biāo)簽

每支、瓶（袋）菌種應(yīng)貼標(biāo)簽注明菌種種類、品種、級別、接種日期、生產(chǎn)單位等。

貯存

原種、栽培種長滿后需及時(shí)使用，生產(chǎn)中未及時(shí)使用的菌種存放于0℃～4℃避光、低溫環(huán)境，貯

存期不超過40d。

留樣

整個(gè)過程做好入庫、記錄、留樣工作。按照NY/T528規(guī)定各級菌種都應(yīng)留樣備查，留樣的數(shù)量應(yīng)以

每個(gè)批號母種3～5支，原種和栽培種5～7瓶（袋）