ICS13300

CCSA.80

中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T46249—2025

化學(xué)品快速雄激素干擾活性報(bào)告試驗(yàn)

Chemicals—RaidandroendisrutionactivitreorterRADARassa

pgpyp()y

2025-10-05發(fā)布2026-02-01實(shí)施

國家市場監(jiān)督管理總局發(fā)布

國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T46249—2025

目次

前言

…………………………Ⅲ

引言

…………………………Ⅳ

范圍

1………………………1

規(guī)范性引用文件

2…………………………1

術(shù)語定義和縮略語

3、………………………1

試驗(yàn)原理

4…………………2

受試物信息

5………………2

參比物

6……………………3

儀器設(shè)備

7…………………3

方法概述

8…………………3

試驗(yàn)準(zhǔn)備

9…………………5

試驗(yàn)過程

10…………………7

試驗(yàn)的有效性

11……………8

數(shù)據(jù)與報(bào)告

12………………9

試驗(yàn)報(bào)告

13………………11

附錄規(guī)范性試驗(yàn)條件

A()………………13

附錄資料性最佳成像設(shè)置條件的確定校準(zhǔn)

B()………14

附錄資料性收集胚胎馴化和批量收集

C():…………18

附錄資料性日本青鳉胚胎孵化所需的培養(yǎng)基化學(xué)特性

D()…………19

附錄資料性鑒別正常與異常游離胚胎的拍攝方法

E()………………20

附錄資料性胚胎定位

F()………………21

附錄資料性試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析方法

G()……………22

參考文獻(xiàn)

……………………24

Ⅰ

GB/T46249—2025

前言

本文件按照標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第部分標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則的規(guī)定

GB/T1.1—2020《1:》

起草

。

請(qǐng)注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識(shí)別專利的責(zé)任

。。

本文件由全國危險(xiǎn)化學(xué)品管理標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC251)。

本文件起草單位上海交通大學(xué)北京師范大學(xué)科之華檢驗(yàn)檢測福建有限公司江蘇省產(chǎn)品質(zhì)量

:、、()、

監(jiān)督檢驗(yàn)研究院生態(tài)環(huán)境部南京環(huán)境科學(xué)研究所生態(tài)環(huán)境部華南環(huán)境科學(xué)研究所生態(tài)環(huán)境部固體

、、、

廢物與化學(xué)品管理技術(shù)中心南京財(cái)經(jīng)大學(xué)中國科學(xué)院廣州能源研究所中檢科健天津檢驗(yàn)檢測有

、、、()

限責(zé)任公司江蘇雅信昆成檢測科技有限公司

、。

本文件主要起草人于云江劉濟(jì)寧彭穎王蕾劉洪英顧愛國劉曉建范德玲向明燈楊倩

:、、、、、、、、、、

周麗麗丁潔劉建梅張璐丁豐黃建梅周彤楊暢王雪芬楊光超王柳紅李國晨張文軒文武

、、、、、、、、、、、、、、

方齊樂李良忠劉新會(huì)劉春艷

、、、。

Ⅲ

GB/T46249—2025

引言

本文件利用攜帶spg1gfp遺傳構(gòu)建體的轉(zhuǎn)基因品系日本青鳉Oryziaslatipes的

-(,Japanesemedaka)

胚胎在多孔板上測定受試物是否具有雄激素干擾活性簡稱試驗(yàn)

,,RADAR(RapidAndrogenDisruption

ActivityReporterassay)。

由于日本青鳉雌激素受體和雄激素受體與人的相關(guān)受體表現(xiàn)出構(gòu)象保守性因此本文

(ER)(AR),

件采用攜帶spg1gfp基因遺傳構(gòu)建體的轉(zhuǎn)基因品系日本青鳉Oryziaslatipes作為受試生物該遺

-(),

傳構(gòu)建體包含與綠色熒光蛋白的報(bào)告基因偶聯(lián)的spiggin1基因的啟動(dòng)子Spiggin基因是一

(GFP)。

種糖蛋白黏液狀膠質(zhì)蛋白的編碼基因該糖蛋白產(chǎn)自于性成熟的雄性三棘刺魚Gasterosteusaculea-

(),(

tus腎臟本文件中使用的spg1gfp轉(zhuǎn)基因品系是在驅(qū)動(dòng)編碼序列表達(dá)的起始密碼子的上游

)。-GFP

攜帶的三棘刺魚spiggin1基因啟動(dòng)子日本青鳉和三棘刺魚中的spiggin1基因都具有組

4.159kb。

織特異性spg1gfp轉(zhuǎn)基因品系完全復(fù)制了spiggin1的特性因此僅限在腎臟中腎中特異性

,-,GFP()

表達(dá)

。

本文件的目的在于鑒定受試物在雄激素軸上是否具有潛在活性而不是為了獲得用于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的

,

毒性數(shù)據(jù)例如無觀察效應(yīng)濃度或效應(yīng)濃度本文件可用于指導(dǎo)經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織關(guān)于內(nèi)

()。(OECD)

分泌干擾物試驗(yàn)框架的第層級(jí)見參考文獻(xiàn)第號(hào)試驗(yàn)指南中試驗(yàn)結(jié)果在類群間的解

3,[33],OECD150

釋和外推

。

本文件只能采用spg1gfp轉(zhuǎn)基因品系日本青鳉如需使用基于spiggin1啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)表達(dá)

-,GFP

或報(bào)告基因的其他轉(zhuǎn)基因品系則需要進(jìn)行完整的方法驗(yàn)證以調(diào)整相關(guān)有效性標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)計(jì)分析和熒光

,,、

閾值

。

本試驗(yàn)的終點(diǎn)為誘導(dǎo)單個(gè)胚胎發(fā)出熒光與對(duì)照組相比當(dāng)胚胎暴露于受試物后會(huì)激活或抑制遺

。,

傳構(gòu)建體的轉(zhuǎn)錄時(shí)胚胎會(huì)表達(dá)更多或更少的從而表現(xiàn)出相應(yīng)更強(qiáng)或更弱的熒光另一種條件

,GFP,。

為在有或無α甲基α二氫睪酮作為激動(dòng)劑的情況下對(duì)受試物進(jìn)行試驗(yàn)由

,17--5-(17MT,3μg/L,AR)。

于胚胎階段產(chǎn)生的雄激素水平較低因此可在暴露溶液中添加用于檢測對(duì)可利用性有影

,17MT,17MT

響的受試物或?qū)Ρ憩F(xiàn)出拮抗作用的受試物濃度篩選試驗(yàn)確定聯(lián)合暴露的合適濃

,AR。17MT17MT

度為和所選濃度對(duì)促雄激素和抗雄激素的參考受試物有最高的敏感度

3μg/L5μg/L,(3μg/L)。

Ⅳ

GB/T46249—2025

化學(xué)品快速雄激素干擾活性報(bào)告試驗(yàn)

1范圍

本文件描述了化學(xué)品快速雄激素干擾活性報(bào)告的試驗(yàn)方法

。

本文件適用于試驗(yàn)和評(píng)價(jià)受試物的雄激素干擾活性用于測定受試物在含有s1-轉(zhuǎn)基因品系

,pggfp

日本青鳉Orziaslaties胚胎中的熒光強(qiáng)度也適用于不揮發(fā)或低揮發(fā)性能被精確測定的所有受

(yp);、

試物

。

本文件不適用于易揮發(fā)的受試物

。

注若用于測試混合物不明復(fù)雜物質(zhì)或多組分物質(zhì)則對(duì)其成分進(jìn)行表征例如其成分的化學(xué)特性定量

:、(UVCB),,,、

情況和物質(zhì)特性

。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款其中注日期的引用文

。,

件僅該日期對(duì)應(yīng)的版本適用于本文件不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于

,;,()

本文件

。

化學(xué)品快速生物降解性呼吸計(jì)量法試驗(yàn)

GB/T21801

化學(xué)品快速生物降解性改進(jìn)的試驗(yàn)

GB/T21802MITI(Ⅰ)

化學(xué)品快速生物降解性消減試驗(yàn)

GB/T21803DOC

化學(xué)品快速生物降解性密閉瓶法試驗(yàn)

GB/T21831

化學(xué)品快速生物降解性二氧化碳產(chǎn)生試驗(yàn)

GB/T2