單元提優(yōu)小測基礎(chǔ)過關(guān)

第3章基因工程

一、選擇題（共20題，每題3分，共60分）

1.在現(xiàn)代刑偵領(lǐng)域、親子鑒定、死者遺骸確定等社會事務(wù)中，DNA指紋技術(shù)發(fā)

揮著越來越重要的作用，在此過程中，如何提取DNA并進行鑒定則尤為重要,

下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實驗的敘述，錯誤的是（）

A.過濾液沉淀過程在4°C冰箱中進行是為了防止DNA降解

B.離心研磨液是為了加速DNA的沉淀

C.在一定溫度下，DNA遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍色

D.粗提取的DNA中可能含有蛋臼質(zhì)

2.（2023?重慶市萬州第二高級中學(xué)聯(lián)考模擬）杲課題組為得到青蒿素產(chǎn)量高的新

品系，將青蒿素合成過程的某一關(guān)鍵酶基因加s導(dǎo)入普通青蒿，其過程如下圖所

示，下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

提取青篙素的1_nz▲KR.含a源閃的的2

RNA----------->cDNA--------------DNA片段----------

黯，承組質(zhì)粒，農(nóng)‘聞》青篙

質(zhì)粒a—酶2一>

A.可依據(jù)標記基因?qū)心康幕虻霓r(nóng)桿菌進行篩選

B.酶1、酶2和酶3作用的化學(xué)鍵都是磷酸酯鍵

C.農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的目的基因能轉(zhuǎn)移到青蒿染色體DNA上

D.可應(yīng)用DNA分子雜交技術(shù)檢測導(dǎo)入的fps基因是否過量表達

3.纖維素酶廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品發(fā)酵、造紙、廢水處理等領(lǐng)域。研究人員利用

蛋白質(zhì)工程將細菌纖維素酶的第137、179、194位相應(yīng)氨基酸替換為賴氨酸后,

纖維素酶熱穩(wěn)定性得到了提高。下列有關(guān)該技術(shù)說法錯誤的是（）

A.經(jīng)改造后的纖維素酶熱穩(wěn)定性提高這一性狀可遺傳

B.對纖維素酶的改造是通過直接改造mRNA實現(xiàn)的

C.改造纖維素酶也需要構(gòu)建基因表達載體

D.蛋白質(zhì)工程可以改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)或者制造新的蛋白質(zhì)

4.科研人員用基因工程的方法從大腸桿菌細胞內(nèi)獲得了干擾素，干擾素主要用于

治療慢性甲型和乙型肝炎。下列說法正確的是（）

A.干擾素是一種具有干擾病毒復(fù)制作用的糖蛋白

B.轉(zhuǎn)錄干擾素基因需要用到解旋酶和RNA聚合解

C.發(fā)酵生產(chǎn)的干擾素屬于大腸桿菌的初生代謝產(chǎn)物

D.只要檢測出大腸桿菌細胞中含有干擾素基因就可用于生產(chǎn)干擾素

5.葡萄糖異構(gòu)酶能將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖，其最適溫度約為60C,生產(chǎn)上常用于高

果糖漿的生產(chǎn)?？茖W(xué)家將葡萄糖異構(gòu)酶的第138位甘氨酸用脯氨酸替代，結(jié)果它

的最適溫度提高了約10C。下列有關(guān)說法正確的是（）

A.蛋白質(zhì)工程只能改造或制造自然界已有的蛋白質(zhì)

B.編碼葡萄糖異構(gòu)酶的基因的核糖核酸序列會有相應(yīng)的改變

C.經(jīng)改造后的葡萄糖異構(gòu)酶熱穩(wěn)定性提高這一性狀不可遺傳

D.改造后的葡萄糖異構(gòu)酶在60℃時生產(chǎn)高果糖漿的效率可能低于70℃時的

6.以菜花為材料提取DNA時，需將材料進行研磨，研磨液的成分常含有SDS（蛋

白質(zhì)變性劑）、EDTA（DNA酶抑制劑，穩(wěn)定DNA活性）、Tris（緩沖劑）。下列

有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.若選擇雞血細胞為材料，則省去了研磨過程

B.SDS可以使蛋白質(zhì)變性，便于DNA與蛋白質(zhì)分離

C.EDTA可以防止DNA水解成核糖核甘酸

D.Tris可以調(diào)節(jié)溶液中的pH

7“篩選”是生物技術(shù)與工程中常用的技術(shù)手段。下列說法錯誤的是（）

A.培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉時，需要從分子水平及個體水平進行篩選

B.單倍體育種時，需要對Fi的花藥進行篩選后才可繼續(xù)進行組織培養(yǎng)

C.制備單克隆抗體時，需要從分子水平篩選能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞

D.胚胎移植前，需要對通過體外受精或其他方式得到的胚胎進行質(zhì)量篩選

8.通過引物設(shè)計，運用PCR技術(shù)可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變，如圖為基因工

程中獲取突變基因的過程，其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因

片段配對，但不影響引物與模板鏈的整體配對，反應(yīng)體系中引物1和引物2分別

設(shè)計增加限制酶a和限制前b的識別位點。有關(guān)敘述正確的是（）

引物1

A.限制酶a和限制酶b的識別位點分別加在引物1和引物2的3,端

B.PCR反應(yīng)體系中需要加入脫氧核甘酸、耐高溫的DNA聚合酶、Ca2+等

C.第2輪PCR中，引物1與圖中②結(jié)合并形成兩條鏈等長的突變基因

D.在第3輪PCR結(jié)束后，同時含引物I和引物2的DNA占3/4

9.熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中的DNA含量，其原理是在PCR反應(yīng)體

系中加入引物的同時，加入與某條模板鏈互補的熒光探針，當(dāng)子鏈延伸至探針處

時會水解探針并生成熒光分子，即DNA每擴增一次，就有一個熒光分子生成,

熒光監(jiān)測系統(tǒng)隨時接收熒光信號的變化，如圖所示。下列說法錯誤的是（）

熒光定WTCR

A.在反應(yīng)體系中，檢測到的熒光信號越強則消耗的引物越多

B.1個DNA分子經(jīng)過3次循環(huán)會得到8個兩條鏈等長的DNA分子

C.PCR所用引物1和引物2均是由脫氧核甘酸組成的

D.人工設(shè)計合成的引物1的堿基序列不能與引物2的互補配對

10.家畜胚胎的性別鑒定技術(shù)對畜牧業(yè)發(fā)展具有重要意義?？蒲腥藛T利用PCR技

術(shù)同時擴增優(yōu)質(zhì)奶牛Y染色體上雄性決定基因（SRY）和常染色體上的路蛋白基

因（CSN/S/）,進行早期胚胎的性別鑒定，并將鑒定后的胚胎進行移植。下圖為

限制酶AlulBamHISmalSau3AI

AGlCTG'GATCCCCC'GGG(ATC

TCfGACCTAGfGGGG^CCCTAGf

—AGGATCA——CCCGATC(p—T

iiiin

—TCT——GGGG——ACTAG

①②③④⑤

A.BamHI切割的是氫鍵，Alu\切割的是磷酸二酯鍵

B.Sau3XI和BamHI切割產(chǎn)生的片段能夠相連，但連接后的片段兩者都不能再

切割

C.相同的DNA分子被Sau3\I識別并切割的概率一般高于BamHI

D.T4DNA連接酶即能連接①③，也能連接②⑤，但后者連接效率低

14.基因工程中需使用特定的限制酶切割基因載體，以便其與目的基因連接形成

基因表達載體。研究人員將相同的基因載體分組并進行相應(yīng)酶切處埋（如表所示）,

其中限制酶H1和H2識別序列不同。各組基因載體經(jīng)酶切處理后，進行瓊脂糖凝

膠電泳檢測，實驗結(jié)果如圖所示。下列說法錯誤的是（）

相應(yīng)酶切處理M甲乙丙

點樣孔

甲限制酶H1l.Okb

0.8kb

0.6kb

乙限制酶H2

0.4kb

0.2kb

丙限制酹H1-H2

A.該基因載體最有可能為環(huán)狀DNA分子

B.限制酶H1與H2在該載體上都有識別和切割位點

C.限制酶H1與H2在該載體上的酶切位點最短相距0.2kb

D.限制酶作用于該載體時會直接導(dǎo)致氫鍵和磷酸二酯鍵的斷裂

15.限制酶a和b的識別序列和切割位點如下圖所示，下列說法正確的是（）

Ba酣b

II

—AGATCT——GGATCC—

—TCTAGA——CCTAGG—

A.酶a與酶b切斷的化學(xué)鍵不完全相同

B.酶a與酶b切出的DNA片段具有平末端

C酶a與酶b切出的DNA片段不能相互連接

D.—個DNA分子中可能有多個酶a與酶b的識別序列

16.如圖是利用基因工程技術(shù)構(gòu)建重組表達載體的過程示意圖，其中PstI.

Sma1、EcoRI、ApaI為四種限制酶。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

PstISnui1EcoRI

含抗原基一

因的DNA抗原基因

氏質(zhì)粒為氏砥1

抗青霉飛/1

索基因

A.需要用限制酶PstI和EcoRI來切割質(zhì)粒

B.表達載體中的抗青霉素基因在受體細胞中能復(fù)制

C.表達載體中目的基因的上游有起始密碼子

D.基因表達載體中抗青霉素基因作為標記基因

17.《詩經(jīng)》中“投我以木瓜，報之以瓊瑤”的詩句。番木瓜易感染番木瓜環(huán)斑病毒

（PRSV）而獲病。我國華南農(nóng)業(yè)大學(xué)的科研人員利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，成功培育出

轉(zhuǎn)基因番木瓜“華農(nóng)一號”，大致流程如圖所示。下列分析錯誤的是（）

轉(zhuǎn)基因番

木瓜植株

A.過程①稱為逆轉(zhuǎn)錄，此過程中用到的酶有逆轉(zhuǎn)錄酶等

B.過程②用限制酶BamHI在Ti質(zhì)粒切開一個切口暴露出兩個游離的磷酸基團

C.過程③將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌之前，需先用Ca2+載體處理農(nóng)桿菌

D.過程⑤產(chǎn)生的木瓜植株即使有抗PRSV基因也不一定具有抗PRSV的性狀

18.下列有關(guān)生物工程描述正確的有（）

①植物體細胞雜交技術(shù)可打破生殖隔離，培育出的新品種一定不是單倍體

②利用普通植物莖尖進行植物組織培養(yǎng)可以培育出抗病毒植株

③在植物體細胞雜交過程中可采用質(zhì)壁分離實驗檢測制備的原生質(zhì)體的活性

④通過對引物的設(shè)計，運用PCR技術(shù)可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變、在目的基

因兩端增加限制酶識別位點等目的

⑤在試管牛培育過程中需用物理或化學(xué)法激活重陶胚，使其完成分裂和發(fā)育

⑥在“克隆羊''、"試管羊''和"轉(zhuǎn)基因羊''的形成過程中，一般都有卵母細胞的參與

⑦設(shè)計試管嬰兒與試管嬰兒的區(qū)別是前者在胚胎植入前需進行遺傳學(xué)診斷

⑧把目的基因?qū)胪艿氖芫?，待培養(yǎng)成早期胚胎后再移植到雌蛙體內(nèi)

A.五項

B.四項

C.二項

D.兩項

19.下列相關(guān)實驗的敘述，正確的是（）

A.在光合色素的提取實驗中，添加CaCCh有助于研磨更加充分

B.低溫和秋水仙素都能誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，但原理不同

C蛋白質(zhì)可與雙縮胭試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)

D.電泳時，DNA分子在凝膠中的遷移速率僅與分子本身大小有關(guān)

20.某遺傳病由一對等位基因控制，致病基因有兩種類型突變，每種突變基因所

編碼的蛋白質(zhì)分子量不同，其系譜圖及相關(guān)蛋白質(zhì)電泳結(jié)果如圖。下列說法正確

的是（）

A.該病為常染色體或伴X染色體隱性遺傳病

B.IH-1、HI-2相應(yīng)蛋白質(zhì)的電泳條帶相同

C.III-3攜帶的致病基因來自1-2的可能性為1/2

D.顯性基因的堿基數(shù)目大于降性基因的堿基數(shù)目

二、非選擇題（共4大題，40分）

21.纖維素酶廣泛應(yīng)用在紡織、能源、食品等領(lǐng)域，提高纖維素酶的熱穩(wěn)定性可

提高反應(yīng)溫度，加快降解速度研究耐熱纖維素酶在工業(yè)生產(chǎn)上具有重要意義。嗜

熱梭菌是一種高溫厭氧細菌，其產(chǎn)生的p-葡萄糖昔酶（bglB）是一種耐熱纖維素

酶，科研人員將“g/B基因轉(zhuǎn)入大腸桿菌，構(gòu)建了耐高溫的纖維素酶大腸桿菌。

回答下列問題：

（1）利用PCR擴增bglB基因時，每次循環(huán)一般分為變性、和三

步，其中變性的目的是。

（2）下圖為質(zhì)粒的限制酶酶切圖譜。班加基因不含圖中限制酶識別序列。為使

PCR擴增的像4基因重組進該質(zhì)粒，餓基因兩端需要分別引入和

限制酶的設(shè)別序歹L將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌前，一般先用Ca2+處理

大腸桿菌細胞，F(xiàn)l的是。

XhoI

HindHI

仰生素啟動子-NdeT

阿基因終與-XbaI

-BamWI

、氏oRI

KpnIXbaI

注：圖中限制薛的識別序列及切割溫度對bglB酶活性的影響

形成的黏性末端均不相同

圖1圖2

（3）將篩選到的轉(zhuǎn)物/8基因大腸桿菌進行耐高溫實驗，結(jié)果如圖2所示。在工

業(yè)生產(chǎn)上，為提高纖維素降解速率，最好將溫度控制在℃0

22.科學(xué)家利用基因編輯與克隆技術(shù)培育了十余種基因編輯豬，用于異種器官移

植研發(fā)。下圖為基因編輯豬的培育流程?；卮鹣铝袉栴}：

（1）為了收集1號豬更多的卵母細胞，通常進行的處是,

并將收集到的卵母細胞培養(yǎng)至O

（2）進行基因編輯時，要對2號豬的器官供體基因進行改造，寫出兩種改造的

思路，,進

行這種改造的目的是,將重組DNA導(dǎo)入受體細胞通常采用

的是技術(shù)。

（3）進行基因編輯前，通常要利用PCR技術(shù)擴增基因，該技術(shù)中需要用至I」“引

物”，“弓|物”是指。

（4）獲得的重組細胞通常要采用物理或化學(xué)方法激活，其目的

23.某科研所將菊花的花色基因C導(dǎo)入牡丹葉肉細胞來培育具有新型花色的牡丹,

流程如圖所示，其中Pst\>EcoRI、Sma\是三種限制酶，圖中箭頭所指部位為各

自的酶切位點?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問題。

（1）限制酶S〃口I（填“可以”或“不可以”）被選擇用于切割花色基因

C所在的DNA片段和質(zhì)粒。基因工程中，目的基因和載體通常用相同的限制酶進

行切割，其原因是___________________________________________________

（2）圖中①過程利用了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，當(dāng)植物體受到損傷時，傷口處的細胞會

分泌大量吸引農(nóng)桿菌向這些細胞移動。構(gòu)建基因表達載體時，需要

將花色基因C插入Ti質(zhì)粒的T-DNA中，T-DNA可將花色基因C轉(zhuǎn)移至______

檢測溝建的基因表達載體是否導(dǎo)入葉肉細胞，需在培養(yǎng)葉肉細

胞的培養(yǎng)基中加入。

（3）②過程為,其目的是讓已經(jīng)分化的細胞失去其特有的結(jié)構(gòu)

與功能而轉(zhuǎn)變成未分化細胞。③過程主要是將②過程得到的愈傷組織轉(zhuǎn)接到分化

培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，誘導(dǎo)產(chǎn)生甲。若甲可以作為制造人工種子的材料，則甲可表

示（答出兩點即可）。和常規(guī)種子相比，人工種子

具有的優(yōu)點有（答出兩點即可）。

24.（2023?遼寧葫蘆島高二聯(lián)考）科學(xué)家欲通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲取生產(chǎn)人溶菌酶的

轉(zhuǎn)基因山羊，過程如圖所示，其中編號①~⑨表示過程。4種限制酶的識別序列及

切割位點如表所示?；卮鹣铝袉栴}：

成纖維細胞

BamEIBgllHmdinXbal

段!］序加口切SI位點GXGATCCAIGATCTAlAGCTTTiCTAGA

（1）若B為目的基因，則B是用限制酶和切割而來

的。將目的基因和質(zhì)粒連接時選用酶進行處理。

（2）⑨過程在受體母羊體內(nèi)進行，在將早期胚胎移入受體母羊前，需要配對受

體進行處理，原因是。早期胚胎移入受體

母羊后，受體母羊（填“需要”或“不需要”）注射免疫抑制劑。

（3）圖中涉及的生物技術(shù)有（答出3項）.

參考答案

1.B【解析】過濾液沉淀過程在4℃冰箱中進行可以使酶的活性降低?？梢苑乐?/p>

DNA降解，A正確；離心研磨液是為了加速細胞膜、細胞器、一些較大雜質(zhì)等

的沉淀，B錯誤；在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺試劑呈現(xiàn)藍色，C正確；粗

提取的DNA中可能含有蛋白質(zhì)，D正確。

2.D【解析】為了提高基因工程的成功率，可依據(jù)標記基因?qū)心康幕虻?/p>

農(nóng)桿菌進行篩選，A正確；酶I促進逆轉(zhuǎn)錄的過程，故為逆轉(zhuǎn)錄前，醐2、醐3

用于切割目的基因和質(zhì)粒，為限制酶和DNA連接酶，都能連接兩個核甘酸之間

的磷酸二酯鍵，B正確；目的基因能轉(zhuǎn)移到青蒿染色體DNA上，C正確；檢測

導(dǎo)入的?s基因是否過量表達，必須檢測轉(zhuǎn)基因青蒿植株中的青蒿素產(chǎn)量，若產(chǎn)

量增高，則說明達到了目的，D錯誤。

3.R【解析】蛋白質(zhì)T程是對基因進行修飾改造或重新合成，然后進行表達，

改造后的蛋白質(zhì)的性狀能遺傳給子代，A正確；對纖維素酶的改造需要以基因工

程為基礎(chǔ)，是通過修改基因或創(chuàng)造合成新基因來實現(xiàn)的，B錯誤；蛋白質(zhì)工程是

對基因進行修飾改造或重新合成，然后進行表達，須構(gòu)建基因表達載體,C正確；

蛋白質(zhì)工程可以改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造新的蛋白質(zhì)，以滿足人類生產(chǎn)和生活的

需要蛋白質(zhì)，D正確。

4.A［正確］干擾素是一種具有干擾病毒復(fù)制作用的糖蛋白，A正確；轉(zhuǎn)錄干擾

素基因需要用到RNA聚合酶，不需要解旋酶，B錯誤；發(fā)酵生產(chǎn)的干擾素（細

胞生命活動不需要的產(chǎn)物）屬于大腸桿菌的次級代謝產(chǎn)物，C錯誤；大腸桿菌細

胞中有干擾素基因不一定表達，需要檢查有沒有產(chǎn)生干擾素，D錯誤。

5.D【解析】蛋白質(zhì)工程通過對基因修飾或基因合成，既能改造現(xiàn)有的蛋白質(zhì)，

又能制造新的蛋白質(zhì)，A錯誤；編碼葡萄糖異構(gòu)酶的基因是DNA上的片段，應(yīng)

該是脫氧核糖核甘酸序列會有相應(yīng)的改變，B錯誤；葡萄糖異構(gòu)酶熱穩(wěn)定性提高

這一性狀，是通過改變基因的序列獲得的，可以遺傳，C錯誤；改造后的葡萄糖

異構(gòu)酶最適溫度約為70℃,在60℃時生產(chǎn)高果糖漿的效率可能低于70c時的，

D正確。

6.C【解析】雞血細胞懸浮液作為實驗材料?，利用細胞吸水漲破的原理，省去

了研磨過程，A正確；SDS是蛋白質(zhì)變性劑，可使蛋臼質(zhì)結(jié)構(gòu)變得松散，使染色

體中DNA和蛋白質(zhì)分離，B正確；DNA的基本單位是脫氧核甘酸，EDTA是

DNA酶抑制劑，可以防止DNA水解成脫氧核甘酸，Tris是緩沖劑，可調(diào)節(jié)溶液

中的pH,D正確。

7.檢測轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的染色體DNA上是否插入了目的基因或者目的基因是否

成功轉(zhuǎn)錄和翻譯，需用進行分子水平檢測，檢測抗蟲棉的抗蟲效果，需要進行個

體水平檢測，A正確；單倍體育種時，不需對Fi的花藥進行篩選，直接利用植

株產(chǎn)生的花藥進行離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，B錯誤；利用抗原一抗體雜交的原

理（即抗體檢測）對獲得的雜交瘤細胞進行篩選，屬于分子水平的篩選，C正確；

胚胎移植前，需要對通過體外受精或其他方式得到的胚胎進行質(zhì)量篩選，以便選

擇發(fā)育良好的胚胎進行移植，提高移植后胚胎的成活率，D正確。

8.D【解析】DNA的合成方向是從子鏈的5,端向3,端延伸的，據(jù)此可知，圖

中限制酶a和限制酶h的識別位點分別加在引物I和引物2的5端,A錯誤:PCR

反應(yīng)體系中需要加入模板、脫氧核昔酸、耐高溫的DNA聚合酶和擴增緩沖液（含

Mg2+）等物質(zhì)，B錯誤；第2輪PCR中，引物1與圖中②結(jié)合形成兩條鏈不等

長的突變基因，因為圖中②是由引物2開始直到完整的DNA單鏈，而引物1與

該模板鏈的復(fù)性過程并沒有從該模板DNA單鏈的一端開始，C錯誤；在第3輪

PCR結(jié)束后，會產(chǎn)生23=8個DNA分子，其中含有模板的DNA分子有2個只含

有一個引物，則同時含引物1和引物2的DNA占3/4,D正確。

9.B【解析】當(dāng)子鏈延伸至探針處時會水解探針并生成熒光分子，即DNA每

擴增一次，就有一個熒光分子生成，則檢測到的熒光信號越強，說明合成的子鏈

越多，消耗的引物就越多，A正確；PCR第一個循環(huán)，引物與模板互補，此時

變成兩個模板，但因為模板很長，沒有什么終止擴增，所以第一個循環(huán)擴增出來

的新片段很長；第二個循環(huán)以新的長片段為模板進行，但新片段的一端是引物開

頭的，所以笫二個循環(huán)得到的片段就是我們需要的長度，但只是只有兩條單鏈,

所以還不能分離出目的基因；第三個循環(huán)，當(dāng)以第二個循環(huán)得到的新片段為模板

時，因為這個片段的長度就是需要擴增的長度，所以當(dāng)?shù)谌齻€循環(huán)完成時，得到

2個兩條鏈等長的DNA分子，B錯誤；PCR所用引物1和引物2均是由脫氧核

甘酸組成的單鏈，可以與模板DNA的兩端堿基互補配對，C正確；人工設(shè)計合

成的引物1的堿基序列不能與引物2的互補配對，否則不能與模板DNA配對,

則不能進行PCR,D正確。

10.D【解析】對牛胚胎進行性別鑒定時，宜取囊胚期的滋養(yǎng)層細胞，A正確;

本實驗利用PCR技術(shù)進行DNA復(fù)制，因此需要根據(jù)牛的SRY和CSN1S1序列設(shè)

計2對引物，PCR過程一般是預(yù)變性-變性-復(fù)性-延伸，B正確；在胚胎移植

前需要對受體牛進行同期發(fā)情處理，以保證胚胎移植入相同的生理環(huán)境，C正確;

題中利用PCR技術(shù)同時擴增Y染色體上雄性決定基因CSRY）和常染色體上的

酪蛋白基因（CSN1S1）并進行電泳，雌性個體沒有SRY,只有一條帶，雄性有

兩條帶，因此1、2、4是雌性，3、5是雄性，D錯誤。

H.B【解析】用3H標記氨基酸，探明分泌蛋白的合成與分泌過程，A正確；

蛋白質(zhì)一般不含P，所以用不同顏色的熒光標記法分別標記人、小鼠細胞膜上的

蛋白質(zhì)證明細胞膜具有流動性，B錯誤；檢測目的基因是否成功導(dǎo)入受體細胞可

用DNA分子雜交技術(shù)，其原理就是用放射性同位素標記的DNA探針與待測

DNA進行堿基互補配對，C正確；單克隆抗體具有特異性，用放射性同位素標

記的單克隆抗體可對腫瘤細胞進行靶向放療，D王確。

12.A【解析】氨茉青霉素抗性基因和報告基因均可作為標記基因，鑒別并篩選

含有目的基因的細胞，但報告基因中的內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA序列在農(nóng)桿菌中

不能被切除，“報告基因''的表達產(chǎn)物不具相應(yīng)的活性，無法催化無色物質(zhì)K呈

現(xiàn)藍色，所以含氨辛吉霉素的培養(yǎng)基能將成功導(dǎo)入表達載體的農(nóng)桿菌篩選出來,

而含無色物質(zhì)K的培養(yǎng)基卻不能篩選出成功導(dǎo)入表達載體的農(nóng)桿菌，A錯誤；

農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并且整合到受體細胞染色體

的DNA上，根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點，將目的基因（基因G）插入到Ti質(zhì)粒的

T-DNA上，通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因（基因G）整合到愈傷

組織細胞的染色體DNA上，B正確；根據(jù)提供信息可知，報告基因的產(chǎn)物能催

化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍色，因此篩選2需要用無色物質(zhì)K處理愈傷組織并篩選出

呈現(xiàn)藍色的組織，C正確；為從個體水平上檢測圖中玉米植株A是否具有抗除

草劑性狀，可采用的方法是用相應(yīng)除草劑噴泗待喇玉米植株，D正確。

13.C【解析】BcuMI與Alu1切割的均是磷酸二酯鍵。A錯誤；BamWI切割

G|GATCC,Sciu3KI切割［GATC,故二者切割后產(chǎn)生的黏性末端是相同的，因

此二者切割后產(chǎn)生的黏性末端能夠相連，連接后仍然存在GATC的序列，能被

Sait3AI切割，但是BamHI不一定能切割,B錯誤;被Sau3AI比于BamHI

的識別序列越短，DNA含有的該酶識別位點就越多，因此在相同的DNA分子中

Sc1143AI酶的識別位點一般明顯要比BamWI酶多，C正確；T4DNA連接酶既可

以連接黏性末端也可以連接平末端，而圖中①、⑤屬于平末端，②⑤是黏性末端，

T4DNA連接酶連接平末端時效率較低，D錯誤。

14.D【解析】由圖可知，當(dāng)僅用一種限制酶切割載體時，僅產(chǎn)生一種長度的

DNA片段，因此該載體最有可能為環(huán)狀DNA分子，A正確；當(dāng)用一種限制酶切

割載體時，產(chǎn)生的DNA片段等長，而用兩種限制酶同時切割時，產(chǎn)生兩種長度

的DNA片段，所以兩種限制酶在該載體上都有前切位點，B正確；用兩種限制

酶同時切割載體時，產(chǎn)生0.6kb和0.2kb兩種長度的DNA片?段，所以兩種限制

酶的酶切位點最短相距0.2kb,C正確；限制酶切割載體時直接破壞的是作用位

點上兩個脫氧核糖核甘酸之間的磷酸二酯鍵，D錯誤。

15.D【解析】限制酶作用的化學(xué)鍵相同，都是磷酸二酯鍵，A錯誤；酶a和酶

b的切割位點都在中軸線兩側(cè)，切出的DNA片段具有黏性末端，B錯誤；據(jù)圖

可知，兩種酶的黏性末端都是-GATC.，醐a與酶b切出的DNA片段能相互連接，

C錯誤；一個DNA分子中含有多個脫氧核昔酸序列，故一個DNA分子中可能

有多個酶a與酶b的識別序列，D正確。

16.C【解析】據(jù)圖可知，限制酶Smal的識別序列位于目的基因上，因此表達

載體構(gòu)建時不能用限制酶S，MI切割,而應(yīng)用限制酶Ps/I、EcoRi進行切割，

A正確；表達載體中的抗青霉素基因?qū)儆跇擞浕颍瑯擞浕驊?yīng)在受體細胞中能

穩(wěn)定存在且遺傳給下一代，B正確；密碼子是mRNA上決定氨基酸的三個相鄰

堿基，表達載體中目的基因的上游有啟動子，是RNA聚合酶結(jié)合的位點，C錯

誤；基因表達載體中抗青霉素基因作為標記基因，能將成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒篩的受

體細胞選出來，D正確。

17.C【解析】過程①是以RNA為模板合成DNA的過程，為逆轉(zhuǎn)錄，需要逆

轉(zhuǎn)錄酶，A正確；質(zhì)粒為環(huán)狀DNA分子，用限制酶BamHI在Ti質(zhì)粒切開一個

切口將暴露出兩個游離的磷酸基團，B正確；過程③將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌之前,

需先用Ca2+（不是C0載體）處理農(nóng)桿菌，使其容易吸收周圍的DNA分子，C

錯誤；由于導(dǎo)入的目的基因不一定表達，因此過程⑤產(chǎn)生的木瓜植株即使有抗

PR5V基因也不一定具有抗PRSV的性狀，D正確。

18.B【解析】植物體細胞雜交技術(shù)能打破生殖隔離，克服遠緣雜交不親和的障

礙，由于其遺傳物質(zhì)來自兩個細胞，故新品種一定不是單倍體，①正確；由于莖

尖部位基本不含病毒或病毒很少，故采用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)可以培養(yǎng)脫毒植株,

但不能抗病毒，②錯誤；原生質(zhì)體無細胞壁，故不能對原生質(zhì)體采用質(zhì)壁分離實

驗檢測制備的原生質(zhì)體的活性，③錯誤；PCR是一項體外擴增DNA的技術(shù)，通

過對引物的設(shè)計，運用PCR技術(shù)可以實現(xiàn)目的基因的定點誘變、在目的基因兩

端增加限制酶識別位點等目的，④正確;⑤試管牛是體外受精、胚胎移植形成的，

不需要用物理或化學(xué)方法激活重構(gòu)胚。⑤錯誤；"克隆羊’’（將細胞核移植到去核

卵細胞中）、“試管羊”（精子和卵細胞在體外受精）、“轉(zhuǎn)基因羊”（將目的基因?qū)?/p>

入受精卵中，而受精卵由精子和卵細胞結(jié)合而成）在形成過程中一般都有卵（母）

細胞的參與，⑥正確：設(shè)計試管嬰兒是在早期胚胎移入母體子宮之前，對胚胎進

行遺傳學(xué)診斷，選出無遺傳疾病的胚胎植入母體子宮；試管嬰兒在胚胎植入前無

需進行遺傳學(xué)診斷，⑦正確；蛙屬于卵生動物，體內(nèi)無子宮，因此無法完成，服胎

移植，⑧錯誤。綜上分析，有四項正確的。B正確，ACD錯誤。

19.C【解析】在光合色素的提取實驗中，添加Si（h,有助于研磨更加充分，CaCO3

是保護葉綠素，A錯誤；低溫和秋水仙素都能誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，原理相同，

都是抑制紡錘體的形成，B錯誤；蛋白質(zhì)可與雙縮腺試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反

應(yīng)，雙縮服試劑可以用來鑒定蛋白質(zhì)的有無，C正確；電泳時，DNA分子在凝

膠中的遷移速率與分子本身大小、電荷性狀以及大小等有關(guān)，D錯誤。

20.C【解析】由圖中H-1、H-2正常，而后代III/患病，可知該病為隱性遺傳

病。又由H?3患病母親，生出正常兒子川-3,可知該病為常染色體隱性遺傳病。A

錯誤；HI-1的致病基因來自11-1、H-2,H-2的致病基因來自1-1,IH-2的致病基

因來自11-3、II-4,II-3的致病基因來自I-I和1-2,由電泳結(jié)果可知1-1和1-2

的致病基因不同，II-I和II-4的致病基因不同，因此[0-1、III-2相應(yīng)蛋白質(zhì)的電

泳條帶可能不相同，B錯誤；山-3只有一個致病基因來自1[?3,而11?3的致病基

因來自1-1和1-2,因此W?2攜帶的致病基因來自II-2的可能性為1/2,C正確;

圖是蛋白質(zhì)電泳結(jié)果，不能判斷基因的長度，D錯誤。

21.（1）復(fù)性延伸將雙鏈DNA解聚為單鏈（2）NdeIBamHI使大揚桿

菌細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)（3）60

【解析】（1）PCR是一項在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，每

次循環(huán)?一般包括：①高溫變性：將雙鏈DNA解聚為單鏈；②低溫復(fù)性：引物結(jié)

合到互補鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。（2）根據(jù)啟動子和終止子的生理

作用可知，目的基因應(yīng)導(dǎo)入啟動子和終止子之間,圖中看出，兩者之間存在于三

種限制酶切點，但是由于XaI在質(zhì)粒上不止一個酶切位點，因此為使PCR擴

增的聞必基因重組進該質(zhì)粒，擴增的物/B基因兩端需分別引入M/eI和BcuMI

不同限制酶的識別序列。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌前，一般先用Ca2+處理大腸桿

菌細胞，使大腸桿菌細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中D