粒細(xì)胞集落刺激因子在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用進(jìn)展2026不孕癥已成為全球公共衛(wèi)生關(guān)注的重要問題，據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，全球約15%的育齡夫婦面臨生育困難［1］。輔助生殖技術(shù)的發(fā)展為解決這一問題提供了有效途徑，但臨床中仍存在反復(fù)種植失?。≧IF）、薄型子宮內(nèi)膜、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)（RSA）等難題，制約著妊娠成功率的提升［2-4］。G-CSF作為一種經(jīng)典的造血生長因子，近年來在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的作用逐漸受到關(guān)注［5］。其在卵母細(xì)胞成熟和正常胚胎發(fā)育、子宮內(nèi)膜容受性建立及母-胎界面穩(wěn)態(tài)維持中展現(xiàn)出潛在價值，成為生殖醫(yī)學(xué)研究的新熱點(diǎn)［5-7］。本文旨在綜述G-CSF在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用進(jìn)展，為生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的臨床實(shí)踐與基礎(chǔ)研究提供參考。1

G-CSF概述G-CSF是一種由174個氨基酸組成的糖蛋白，分子質(zhì)量約為18～20ku，主要由骨髓基質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生［8］。G-CSF需與特異性受體結(jié)合方可發(fā)揮生物學(xué)作用。人G-CSF受體為跨膜蛋白，由813個氨基酸組成，相對分子質(zhì)量介于130000~150000之間，因G-CSFRmRNA存在不同剪接方式，導(dǎo)致胞外區(qū)、跨膜區(qū)或胞內(nèi)區(qū)氨基酸序列不同，進(jìn)而形成5種不同的受體異構(gòu)體［9］。G-CSF的正常生理功能主要是通過與靶細(xì)胞表面的G-CSF受體結(jié)合，激活JAK/STAT、MAPK等信號通路，刺激骨髓中性粒細(xì)胞的增殖、分化與釋放，增強(qiáng)中性粒細(xì)胞的吞噬和殺菌能力，在機(jī)體抗感染免疫中發(fā)揮核心作用［10］。近年研究發(fā)現(xiàn)，G-CSF在卵巢顆粒細(xì)胞、子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞、侵襲性絨毛外滋養(yǎng)層細(xì)胞及蛻膜基質(zhì)細(xì)胞等生殖組織細(xì)胞也可分泌，在生殖系統(tǒng)中的功能逐漸被揭示［11-13］。2

G-CSF在生殖過程中的作用機(jī)制2.1

對卵母細(xì)胞和胚胎發(fā)育的影響

G-CSF在卵母細(xì)胞成熟過程中具有重要的調(diào)控作用。研究表明，高質(zhì)量卵母細(xì)胞的卵泡液中G-CSF水平顯著升高，其可能通過促進(jìn)卵母細(xì)胞內(nèi)mRNA的穩(wěn)定性和翻譯效率，改善減數(shù)分裂進(jìn)程［14］。此外，G-CSF通過局部旁分泌方式增強(qiáng)卵母細(xì)胞對外源促性腺激素刺激的反應(yīng)，從而促進(jìn)其成熟，并提升成熟卵母細(xì)胞的受精能力［5］。在胚胎發(fā)育方面，小鼠胚胎培養(yǎng)液中添加G-CSF可顯著提高卵裂率和囊胚形成率，并增加囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞數(shù)量［15］。豬體外受精模型則顯示，G-CSF通過激活抗氧化通路、減少活性氧損傷，從而改善胚胎活力［16］。臨床研究亦證實(shí)了其潛在價值。針對卵巢儲備功能減退患者，G-CSF預(yù)處理不僅提高了受精率、胚胎質(zhì)量和新鮮胚胎移植的著床率，而且還顯著改善了臨床妊娠率和持續(xù)妊娠率［6］。2.2

對子宮內(nèi)膜的作用

G-CSF在子宮內(nèi)膜中具有潛在調(diào)控作用。G-CSF可通過多種途徑促進(jìn)子宮內(nèi)膜修復(fù)與增厚。一方面，G-CSF能促進(jìn)子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞和上皮細(xì)胞增殖［17］，上調(diào)血管內(nèi)皮生長因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）等促血管生成因子的表達(dá)［18］；另一方面，它可誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向子宮內(nèi)膜細(xì)胞分化，補(bǔ)充內(nèi)膜細(xì)胞來源［3］；此外，G-CSF還可促進(jìn)子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞蛻膜化［19］，并減少子宮內(nèi)膜細(xì)胞凋亡。粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（GM-CSF）可通過募集巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，間接調(diào)控血管生成相關(guān)基因（如Mmp9、Bv8）［20］，通過促進(jìn)血管新生來改善子宮內(nèi)膜血供。G-CSF可直接上調(diào)白血病抑制因子（leukemiainhibitoryfactor，LIF）的表達(dá)，激活胚胎著床相關(guān)信號通路［21］；G-CSF還可通過MAPK/ERK通路特異性上調(diào)HOXA10，促進(jìn)子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞的分化成熟，從而改善子宮內(nèi)膜容受性，為胚胎黏附創(chuàng)造條件［20］。2.3

對母-胎界面的調(diào)節(jié)作用

母-胎界面的免疫耐受是妊娠維持的基礎(chǔ)。在促進(jìn)母-胎界面形成方面，G-CSF可通過促進(jìn)LIF、VEGF等細(xì)胞因子的表達(dá)來調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的蛻膜化［14］。G-CSF可通過激活PI3K/Akt信號通路增加人滋養(yǎng)層細(xì)胞系細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-2和VEGF的表達(dá)與分泌，從而增強(qiáng)人滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲能力［22］。在母胎循環(huán)建立方面，G-CSF可通過增強(qiáng)PI3K/AKT信號通路活性促進(jìn)Bcl-2和VEGF的表達(dá)，減少細(xì)胞凋亡并增加血管內(nèi)皮細(xì)胞的管腔容量［23］。此外，G-CSF還能通過促進(jìn)細(xì)胞運(yùn)動并誘導(dǎo)肌動蛋白骨架重構(gòu)，調(diào)控滋養(yǎng)層細(xì)胞的遷移。在體外培養(yǎng)條件下，G-CSF可誘導(dǎo)滋養(yǎng)層細(xì)胞出現(xiàn)偽足生長、細(xì)胞體收縮以及尾端與周圍基質(zhì)黏著解離等遷移表型，從而促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞侵入子宮螺旋動脈，助力胎盤血液循環(huán)的建立［24］。G-CSF可通過促進(jìn)蛻膜自然殺傷（dNK）細(xì)胞募集，減低其細(xì)胞毒性，并減少干擾素（INF）-γ和白細(xì)胞介素（IL）-18等促炎因子的產(chǎn)生［24］。同時，G-CSF可使血清Th1/Th2平衡向Th2偏移，誘導(dǎo)Treg細(xì)胞發(fā)育，并動員骨髓Treg細(xì)胞遷移至蛻膜［24］。此外，G-CSF能夠抑制巨噬細(xì)胞（MΦs）向M1表型極化，促進(jìn)M2表型形成，并下調(diào)MΦs中IFN-γ受體表達(dá)和IL-6的產(chǎn)生，從而維持母-胎界面的免疫耐受狀態(tài)，保護(hù)胎兒免受母體免疫系統(tǒng)攻擊［24］。3

G-CSF在生殖醫(yī)學(xué)臨床中的應(yīng)用3.1

在薄型子宮內(nèi)膜患者中的應(yīng)用

2011年Gleicher等［12］首次報道G-CSF宮腔灌注用于治療體外受精-胚胎移植（IVF-ET）周期合并薄型子宮內(nèi)膜的患者。在該病例系列中，4例既往對雌激素及血管擴(kuò)張劑治療無反應(yīng)的患者，于凍融胚胎移植（FET）周期移植前2~9d接收G-CSF宮腔灌注。結(jié)果顯示，灌注48h后子宮內(nèi)膜增厚到7.3~10.2mm，且全部患者在移植后成功妊娠，其中1例因異位妊娠終止妊娠。隨后美國、伊朗、波蘭、印度、韓國和中國等多個國家相繼開展了不同類型研究（包括隊列研究、前瞻性、回顧性、隨機(jī)及非隨機(jī)試驗(yàn)），共計14項［25-38］。其中13項采用宮腔灌注給藥，以單次300μg為主，少數(shù)研究使用100μg或150μg。給藥時間點(diǎn)多樣，包括人絨毛膜促性腺激素（hCG）扳機(jī)日、取卵日或激素補(bǔ)充治療（HRT）周期中特定時間點(diǎn)，僅1項采用皮下注射［33］。在9項報告子宮內(nèi)膜厚度的研究中，7項顯示G-CSF可使子宮內(nèi)膜平均增厚0.8～3.527mm，2項未見明顯改善。另12項研究報道妊娠率在治療前后變化范圍為1.03%～37%?？傮w來看，這14項研究在薄型子宮內(nèi)膜的定義、給藥劑量與時機(jī)等方面存在差異，部分研究未能觀察到顯著增厚或妊娠結(jié)局改善，提示療效具有一定不確定性。2023年發(fā)表的1篇隨機(jī)對照試驗(yàn)（RCT）薈萃分析顯示，G-CSF可增加接受IVF-ET的薄型子宮內(nèi)膜患者的臨床妊娠率和子宮內(nèi)膜厚度，但本薈萃分析納入文獻(xiàn)中G-CSF的給藥方法和劑量不同，胚胎移植周期不同以及妊娠結(jié)局的標(biāo)準(zhǔn)定義不一致［39］。此外，現(xiàn)有研究中關(guān)于G-CSF應(yīng)用后的取卵率、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)、不良事件和并發(fā)癥發(fā)生情況的統(tǒng)計數(shù)據(jù)很少，因此無法對G-CSF的安全性進(jìn)行薈萃分析，臨床應(yīng)用仍需謹(jǐn)慎并進(jìn)一步驗(yàn)證。3.2

在RIF患者中的應(yīng)用

2016年，伊朗率先開展了一項隨機(jī)雙盲安慰劑對照試驗(yàn)，納入100例RIF患者，在新鮮周期取卵日或FET孕酮起始日行宮腔灌注300μg/mLG-CSF。結(jié)果顯示，G-CSF可顯著提高胚胎種植率，但對臨床妊娠率和自然流產(chǎn)率無明顯影響［40］。隨后，2018年伊朗另一項隨機(jī)對照試驗(yàn)納入52例RIF患者，并于新鮮周期囊胚移植前30min皮下注射300μgG-CSF。結(jié)果提示，RIF患者的臨床妊娠率（56.2%vs.40.0%）及活產(chǎn)率（53.1%vs.35.0%）均有升高趨勢，雖因樣本量有限未達(dá)顯著統(tǒng)計學(xué)差異，但初步證實(shí)G-CSF安全性良好且未增加流產(chǎn)風(fēng)險［41］。2020年，一項納入157例RIF患者的RCT研究評估了宮腔內(nèi)灌注G-CSF對子宮內(nèi)膜厚度正?；颊叩寞熜АＫ谢颊呔邮軜?biāo)準(zhǔn)卵胞質(zhì)內(nèi)單精子注射（ICSI）并于胚胎培養(yǎng)第3或第5天進(jìn)行新鮮胚胎移植，干預(yù)為hCG扳機(jī)日宮腔灌注30mIU/mLG-CSF。結(jié)果顯示，G-CSF對子宮內(nèi)膜正常的RIF患者子宮內(nèi)膜厚度、臨床妊娠率及活產(chǎn)率均未產(chǎn)生顯著影響［42］。2023年，一篇納入14項RCT、共1387例RIF患者的Meta分析顯示，G-CSF可提高胚胎種植率及臨床妊娠率，但納入研究間存在一定異質(zhì)性。異質(zhì)性主要來源于G-CSF的給藥途徑和劑量差異、胚胎移植周期不同以及妊娠結(jié)局定義不一致［39］。2025年一篇覆蓋25項RCT、共3035例RIF的網(wǎng)狀Meta分析進(jìn)一步比較了宮腔灌注G-CSF、富血小板血漿（PRP）、外周血單核細(xì)胞（PBMC）、hCG及空白對照的療效，結(jié)果顯示在提高臨床妊娠率方面，PRP以累積排名曲線下面積的百分比（SUCRA）84.5%位列第一，PBMC76.5%次之，G-CSF以65.7%居第三；在活產(chǎn)率排序中，G-CSFSUCRA為58.0%，同樣位于PRP與PBMC之后，但仍顯著優(yōu)于hCG及空白對照，提示G-CSF仍是改善RIF患者妊娠結(jié)局的有效備選方案之一，不過PRP與PBMC可能具有更優(yōu)潛力［43］。2024年，Jiang等［44］發(fā)表的網(wǎng)絡(luò)薈萃分析納入14項隨機(jī)對照試驗(yàn)、共1360例RIF患者，比較皮下注射、宮腔灌注G-CSF的療效與安全性。結(jié)果顯示，皮下注射和宮腔灌注G-CSF均能顯著改善RIF患者的胚胎植入率和臨床妊娠率，與宮腔灌注G-CSF相比，皮下注射G-CSF可能是RIF患者更佳的給藥方式?？傮w而言，現(xiàn)有證據(jù)支持G-CSF在改善RIF患者種植與妊娠結(jié)局方面具有一定價值，但最佳給藥途徑、時機(jī)及適用人群尚待進(jìn)一步高質(zhì)量研究明確。3.3

不明原因復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的治療

2009年，Scarpellini等［45］首次進(jìn)行了將G-CSF用于治療URSA的隨機(jī)雙盲對照試驗(yàn)研究，納入68例URSA在排卵后的第6天開始皮下注射1μg/（kg·d）的G-CSF，直至妊娠第9周結(jié)束，結(jié)果顯示，G-CSF組活產(chǎn)率達(dá)82.8%，顯著優(yōu)于對照組的48.5%，在第5~9周，G-CSF組患者的β-hCG水平也顯著高于對照組和健康人群，被視為陽性標(biāo)桿。2019年，英國一項多中心、隨機(jī)、雙盲、安慰劑對照臨床研究，將干預(yù)推遲到“血β-hCG陽性后”開始皮下注射日劑量130μg的G-CSF，探討其治療150例URSA患者的有效性和安全性，遺憾的是該研究并未發(fā)現(xiàn)在妊娠開始即使用G-CSF能夠提高妊娠率和活產(chǎn)率，提示“著床后啟動”可能錯過關(guān)鍵窗口，但該研究也存在局限性，納入的研究對象僅為診斷為URSA的患者，并未對患者的相關(guān)免疫學(xué)指標(biāo)進(jìn)行檢查，所以患者是否為免疫功能異常導(dǎo)致的RSA并不明確［4］。2023年Mu等［46］在其系統(tǒng)綜述與薈萃分析中指出，綜合7項隨機(jī)對照試驗(yàn)、共1633例URSA患者的數(shù)據(jù)顯示，宮腔或靜脈給予G-CSF可顯著提高臨床受孕率，尤其在排卵期內(nèi)給藥及亞洲人群中效應(yīng)更為突出；盡管活產(chǎn)率呈升高趨勢，但未達(dá)統(tǒng)計學(xué)差異。作者同時強(qiáng)調(diào)，G-CSF治療并未增加母體不良事件風(fēng)險，提示該方案總體安全。因此，Mu等建議在排卵期行宮腔灌注G-CSF可作為URSA患者提高受孕機(jī)會的有效且相對安全的輔助策略，但仍需更大樣本研究以進(jìn)一步驗(yàn)證其對活產(chǎn)率的最終影響。3.4

在其他生殖相關(guān)疾病中的應(yīng)用探索

在未破裂卵泡黃素化綜合征（LUFS）中，G-CSF可能通過促進(jìn)卵泡壁細(xì)胞的增殖與溶解，改善卵泡破裂功能。一項小樣本研究顯示，LUFS患者在促排卵后期注射G-CSF可使排卵率提高約20%［47］。對于慢性子宮內(nèi)膜炎患者，宮腔灌注G-CSF可通過抑制炎癥因子［如腫瘤壞死因子（TNF）-α、白細(xì)胞介素（IL）-6］的釋放，減輕內(nèi)膜炎癥反應(yīng)，促進(jìn)子宮內(nèi)膜修復(fù)［48］，臨床數(shù)據(jù)顯示其治療有效率可達(dá)70%以上。4

臨床應(yīng)用的安全性與爭議目前普遍認(rèn)為G-CSF的短期應(yīng)用安全性較好，但長期或大劑量使用仍存在一定風(fēng)險，需予以關(guān)注。急性期常見不良反應(yīng)為骨痛、腰背痛或關(guān)節(jié)痛，多為輕-中度，呈劑量依賴性，可在給藥后1～2d出現(xiàn)，持續(xù)2～3d［49］。血液學(xué)方面常見一過性白細(xì)胞升高，少數(shù)病例出現(xiàn)輕度血小板減少或貧血，通常為可逆性［49］。有報道于使用G-CSF連續(xù)數(shù)日后出現(xiàn)脾腫大，極少數(shù)并發(fā)自發(fā)性脾破裂并導(dǎo)致腹腔出血［50］。在高劑量應(yīng)用或合并感染時，可能誘發(fā)毛細(xì)血管滲