2025年核酸培訓試題及答案一、單項選擇題（每題2分，共30題）1.新型冠狀病毒核酸檢測采樣時，咽拭子正確的采樣部位是（）A.舌面中后1/3B.雙側(cè)腭弓、咽后壁及扁桃體隱窩C.軟腭懸雍垂D.口腔頰黏膜答案：B解析：根據(jù)《新型冠狀病毒肺炎防控方案（第十版）》，咽拭子采樣應在被采集者兩側(cè)咽扁桃體稍微用力來回擦拭至少3次，然后再在咽后壁上下擦拭至少3次，確保采集到有效上皮細胞。2.核酸檢測樣本保存液常用的類型是（）A.生理鹽水B.病毒裂解液（含胍鹽）C.肝素抗凝劑D.枸櫞酸鈉答案：B解析：病毒裂解液（如含異硫氰酸胍的保存液）可有效滅活病毒，保護核酸不被降解，是核酸檢測樣本的標準保存液。生理鹽水無法滅活病毒且易導致核酸降解，肝素會抑制PCR反應，枸櫞酸鈉多用于凝血檢測。3.核酸檢測實驗室生物安全等級應為（）A.BSL-1B.BSL-2C.BSL-3D.BSL-4答案：B解析：新型冠狀病毒屬于第二類病原微生物，根據(jù)《病原微生物實驗室生物安全管理條例》，開展其核酸檢測的實驗室應達到生物安全二級（BSL-2）標準，需配備生物安全柜、高壓滅菌器等設備。4.核酸提取過程中，若發(fā)現(xiàn)離心管破裂，正確的處理流程是（）A.直接用紙巾擦拭后繼續(xù)操作B.立即停止操作，用75%酒精覆蓋污染區(qū)域，靜置10分鐘后清理C.佩戴手套直接清理碎片，更換離心管后繼續(xù)D.啟動應急程序，報告實驗室負責人，使用含氯消毒液（有效氯2000mg/L）覆蓋污染區(qū)30分鐘后清理答案：D解析：核酸提取區(qū)屬于高風險區(qū)域，若發(fā)生樣本泄漏，需使用高濃度含氯消毒液（2000mg/L）覆蓋污染區(qū)域至少30分鐘，殺滅可能存在的病毒，同時報告負責人以便記錄和追溯。5.實時熒光定量PCR儀的校準周期通常為（）A.每月1次B.每季度1次C.每半年1次D.每年1次答案：C解析：根據(jù)《臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》，PCR儀需每半年進行一次校準，包括溫度準確性、均勻性及熒光信號強度的驗證，確保檢測結果的準確性。6.核酸檢測結果判讀時，Ct值的含義是（）A.熒光信號達到閾值時的擴增循環(huán)數(shù)B.樣本中病毒載量的絕對值C.擴增產(chǎn)物的濃度D.反應體系的pH值答案：A解析：Ct（CycleThreshold）值指PCR擴增過程中熒光信號首次超過設定閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)次數(shù)，與初始模板量的對數(shù)成反比，是判斷陽性結果的關鍵指標。7.咽拭子采樣時，被采集者出現(xiàn)刺激性咳嗽，采樣人員應（）A.迅速完成采樣后離開B.暫停采樣，待被采集者平復后繼續(xù)C.要求被采集者屏住呼吸完成采樣D.佩戴N95口罩+面屏，保持1米以上距離答案：B解析：采樣過程中若被采集者出現(xiàn)咳嗽、嘔吐等反應，需暫停操作，待其恢復后再繼續(xù)，避免因動作過快導致采樣不規(guī)范或樣本污染。同時采樣人員需做好防護，但無需中斷后遠離。8.核酸檢測實驗室分區(qū)中，屬于“污染區(qū)”的是（）A.試劑準備區(qū)B.樣本處理區(qū)C.擴增分析區(qū)D.緩沖區(qū)答案：B解析：樣本處理區(qū)（核酸提取區(qū)）直接接觸原始樣本，屬于污染區(qū)；試劑準備區(qū)為清潔區(qū)，擴增分析區(qū)為半污染區(qū)，緩沖區(qū)為過渡區(qū)域。9.醫(yī)療廢物處理時，核酸檢測使用的一次性采樣管、吸頭應裝入（）A.黃色醫(yī)療廢物袋，雙層封裝B.黑色生活垃圾袋C.紅色感染性廢物袋D.藍色可回收袋答案：A解析：核酸檢測產(chǎn)生的廢物屬于感染性醫(yī)療廢物，需使用黃色醫(yī)療廢物袋，采用“鵝頸結”雙層封裝，標簽注明“新冠核酸檢測廢物”及產(chǎn)生時間。10.核酸檢測室內(nèi)質(zhì)控品的選擇應（）A.使用弱陽性樣本B.使用強陽性樣本C.使用陰性質(zhì)控D.同時包含陰性質(zhì)控和陽性質(zhì)控答案：D解析：室內(nèi)質(zhì)控需同時設置陰性質(zhì)控（無目標核酸）和陽性質(zhì)控（含已知濃度目標核酸），以驗證檢測過程的特異性和敏感性，避免假陰或假陽。11.采樣人員脫防護服的正確順序是（）A.摘手套→摘面屏→脫防護服→摘帽子→摘口罩B.摘面屏→摘手套→脫防護服→摘帽子→摘口罩C.脫防護服→摘手套→摘面屏→摘帽子→摘口罩D.摘帽子→摘面屏→脫防護服→摘手套→摘口罩答案：B解析：脫防護服的關鍵是避免污染內(nèi)層衣物和皮膚。正確順序為：先摘面屏（從后向前取下），再摘外層手套（注意內(nèi)面朝外包裹），然后脫防護服（自上向下卷脫，避免接觸污染面），最后摘帽子和口罩（手不接觸口罩外表面）。12.核酸檢測中，若同一批次樣本出現(xiàn)多個“Ct值38-40”的結果，首先應（）A.直接判定為陽性B.復核樣本，重新檢測C.判定為陰性D.上報疾控中心答案：B解析：Ct值38-40屬于灰區(qū)，可能因樣本中核酸量極低或檢測誤差導致。需重新提取核酸并檢測，若重復結果仍≥38且曲線符合要求，需結合臨床癥狀綜合判斷。13.低溫冰箱（-20℃）保存核酸樣本的最長時間為（）A.3天B.7天C.14天D.30天答案：B解析：根據(jù)《新型冠狀病毒核酸檢測技術指南》，樣本在-20℃下可保存7天，-70℃可保存1個月以上，長期保存需使用-80℃冰箱。14.核酸提取儀的日常維護不包括（）A.清潔加樣針B.校準分液體積C.更換PCR反應管D.檢查廢液缸液面答案：C解析：PCR反應管屬于消耗品，無需作為提取儀的維護項目。提取儀維護重點是加樣系統(tǒng)的準確性（清潔、校準）和廢液處理（避免堵塞）。15.采樣時，若被采集者為2歲兒童，正確的采樣方法是（）A.由家長固定兒童頭部，使用成人拭子快速采樣B.使用兒童專用拭子，輕柔擦拭咽后壁1次C.家長佩戴口罩協(xié)助固定兒童，采樣人員動作輕柔，避免刺激D.拒絕采樣，建議采用鼻拭子答案：C解析：兒童采樣需家長協(xié)助固定，使用兒童拭子（更短、更細），擦拭咽后壁2-3次，動作輕柔。鼻拭子可能引起更強烈不適，非首選。16.核酸檢測實驗室空氣消毒的常用方法是（）A.紫外線照射30分鐘B.甲醛熏蒸12小時C.過氧乙酸噴霧D.臭氧消毒60分鐘答案：A解析：實驗室空氣消毒首選紫外線照射（≥30分鐘），操作簡便且無殘留。甲醛熏蒸因毒性大已較少使用，過氧乙酸多用于物體表面消毒，臭氧消毒需密閉環(huán)境且對設備有腐蝕性。17.樣本運輸時，冷鏈箱的溫度應控制在（）A.0-4℃B.4-8℃C.8-12℃D.12-16℃答案：A解析：核酸樣本運輸需在2-8℃條件下（最佳0-4℃），使用冰袋或冷藏箱維持溫度，避免反復凍融導致核酸降解。18.核酸檢測結果審核時，需重點核對的信息不包括（）A.樣本編號與申請單是否一致B.檢測儀器的運行狀態(tài)C.操作人員的簽名D.被檢測者的聯(lián)系方式答案：D解析：結果審核需確保樣本信息（編號、姓名、類型）與檢測記錄一致，儀器狀態(tài)正常（如PCR儀無故障報警），操作人員簽字確認。被檢測者聯(lián)系方式屬于隱私信息，非審核必要內(nèi)容。19.發(fā)生職業(yè)暴露（如樣本濺入眼睛）時，應立即（）A.用生理鹽水沖洗15分鐘，報告負責人B.用75%酒精擦拭眼睛C.自行涂抹眼藥水D.繼續(xù)完成操作后處理答案：A解析：暴露后需立即用大量生理鹽水或清水沖洗暴露部位（眼睛至少15分鐘），并及時報告實驗室負責人，啟動暴露后預防措施（如核酸檢測、健康監(jiān)測）。20.核酸檢測試劑盒的性能驗證不包括（）A.靈敏度B.特異性C.穩(wěn)定性D.包裝顏色答案：D解析：試劑盒驗證需評估靈敏度（最低檢測限）、特異性（無交叉反應）、穩(wěn)定性（不同保存條件下的性能），包裝顏色不影響檢測結果，非驗證內(nèi)容。21.咽拭子采樣時，拭子插入深度應為（）A.1-2cmB.3-5cmC.5-7cmD.7-10cm答案：B解析：成人咽拭子插入深度約3-5cm（從口腔到咽后壁的距離），兒童適當縮短，確保拭子接觸到目標區(qū)域。22.核酸擴增時，反應體系中Mg2+濃度過高會導致（）A.擴增效率降低B.非特異性擴增C.引物二聚體減少D.Ct值偏大答案：B解析：Mg2+是Taq酶的激活劑，濃度過高會增強酶活性，導致非特異性結合（如引物二聚體），影響結果準確性。23.采樣管標簽信息應包含（）A.檢測單位名稱B.采樣人員工號C.被采集者姓名、采樣時間D.試劑盒批號答案：C解析：標簽需包含唯一識別信息（姓名、身份證號/編號）、采樣時間、樣本類型，確?？勺匪?。檢測單位、人員工號、試劑盒批號屬于實驗室內(nèi)部記錄內(nèi)容。24.核酸檢測中，“N基因”和“ORF1ab基因”同時陽性的意義是（）A.可能為疫苗接種后反應B.提示樣本污染C.支持新型冠狀病毒感染D.結果無效答案：C解析：新型冠狀病毒核酸檢測通常檢測兩個靶基因（如N和ORF1ab），雙陽性可排除假陽性，支持感染；單陽性需復核。25.實驗室純水機的水質(zhì)要求為（）A.電導率≤5μS/cmB.電導率≤1μS/cmC.電導率≤0.1μS/cmD.電導率≤0.05μS/cm答案：B解析：核酸檢測用純水需符合《分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法》（GB/T6682-2008）一級水標準，電導率≤0.1μS/cm（25℃），但實際實驗室常用二級水（電導率≤1μS/cm），因一級水成本高且易受環(huán)境影響。26.采樣人員手衛(wèi)生應采用（）A.流動水洗手B.速干手消毒劑擦拭C.先洗手再用速干手消毒劑D.無需手衛(wèi)生答案：C解析：采樣過程中，每完成一例采樣后，需先用流動水洗手（去除可見污染物），再用含醇速干手消毒劑擦拭（殺滅微生物），確保手衛(wèi)生符合《醫(yī)務人員手衛(wèi)生規(guī)范》。27.核酸檢測結果“陰性”的判定標準是（）A.Ct值≥40或無擴增曲線B.Ct值≤35C.僅一個靶基因陽性D.擴增曲線不典型答案：A解析：根據(jù)《新型冠狀病毒肺炎診療方案（第十版）》，陰性結果定義為檢測靶標（如N、ORF1ab）均無Ct值或Ct值≥40，且內(nèi)參基因（如RP）擴增正常（排除樣本抑制）。28.醫(yī)療廢物暫存時間不得超過（）A.12小時B.24小時C.48小時D.72小時答案：C解析：《醫(yī)療廢物管理條例》規(guī)定，醫(yī)療廢物在暫存點的存放時間不超過48小時，需由有資質(zhì)的單位及時清運。29.核酸提取過程中，“磁珠法”的原理是（）A.磁珠與核酸特異性結合，通過磁場分離B.磁珠吸附蛋白質(zhì)，保留核酸C.磁珠破壞細胞膜釋放核酸D.磁珠提高PCR反應效率答案：A解析：磁珠法利用磁珠表面的硅羥基與核酸的磷酸基團結合，在高鹽低pH條件下吸附核酸，低鹽高pH條件下釋放，通過磁場分離實現(xiàn)核酸純化。30.采樣環(huán)境的空氣消毒應在（）A.采樣前30分鐘B.采樣過程中C.采樣結束后立即D.采樣結束后30分鐘答案：C解析：采樣環(huán)境需在每次采樣結束后立即進行空氣消毒（如紫外線照射30分鐘或過氧乙酸噴霧），避免環(huán)境殘留病毒導致交叉污染。二、多項選擇題（每題3分，共10題）1.核酸檢測采樣前的準備工作包括（）A.檢查采樣管有效期及保存液量B.確認被采集者身份信息C.準備個人防護裝備（PPE）D.提前30分鐘關閉采樣點門窗答案：ABC解析：采樣前需核對樣本管（有效期、保存液無滲漏）、確認被采集者信息（避免錯采）、穿戴合格PPE（如N95口罩、面屏、防護服）。關閉門窗可能影響通風，非必要操作。2.屬于核酸檢測質(zhì)量控制措施的有（）A.每批次檢測包含陰性質(zhì)控B.定期校準PCR儀C.記錄檢測過程的溫濕度D.使用不同批號試劑盒交叉驗證答案：ABCD解析：質(zhì)量控制涵蓋人員、設備、試劑、環(huán)境等多方面，包括室內(nèi)質(zhì)控（陰陽對照）、設備校準、環(huán)境監(jiān)測（溫濕度）及不同試劑驗證（避免試劑盒特異性問題）。3.咽拭子采樣的注意事項包括（）A.被采集者采樣前2小時避免進食B.采樣時拭子避免接觸舌面、牙齒C.采樣后立即將拭子插入保存液，折斷柄部D.每采一人更換手套答案：ABCD解析：采樣前2小時禁食可減少嘔吐風險；拭子接觸其他部位可能導致污染；及時保存可防止核酸降解；一人一換手套避免交叉污染。4.核酸檢測實驗室“三區(qū)兩緩”包括（）A.試劑準備區(qū)B.樣本處理區(qū)C.擴增分析區(qū)D.緩沖區(qū)答案：ABCD解析：標準PCR實驗室分區(qū)為試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增分析區(qū)，各區(qū)之間設緩沖區(qū)（如試劑準備區(qū)與樣本處理區(qū)之間的緩沖1，樣本處理區(qū)與擴增區(qū)之間的緩沖2），防止交叉污染。5.樣本運輸過程中需記錄的信息有（）A.運輸時間B.運輸溫度C.運輸人員D.樣本數(shù)量答案：ABCD解析：運輸記錄需包含時間（起運和到達時間）、溫度（途中溫度監(jiān)測）、人員（運輸者姓名）、樣本數(shù)量（核對是否完整），確?？勺匪?。6.核酸檢測結果異常的可能原因包括（）A.樣本采集不規(guī)范（如拭子未接觸目標部位）B.試劑過期或保存不當C.PCR儀溫度偏差D.實驗室環(huán)境污染答案：ABCD解析：采樣不規(guī)范（樣本量不足）、試劑失效（如引物降解）、儀器故障（溫度不準影響擴增）、環(huán)境污染（氣溶膠導致假陽）均可能導致結果異常。7.生物安全柜的使用規(guī)范包括（）A.操作前紫外線消毒30分鐘B.操作時手臂緩慢移動，避免擾動氣流C.操作后用75%酒精清潔臺面D.長期不用時保持關閉答案：ABC解析：生物安全柜使用前需紫外線消毒，操作時避免快速動作破壞氣流屏障，結束后清潔臺面。長期不用時應定期開機維護（如每周運行30分鐘），避免濾膜受潮。8.核酸檢測中“內(nèi)參基因”的作用是（）A.驗證樣本采集質(zhì)量（如是否含人類細胞）B.排除PCR抑制物干擾C.確定病毒載量D.區(qū)分不同病毒答案：AB解析：內(nèi)參基因（如人RP基因）用于檢測樣本中是否存在人類基因組DNA，若內(nèi)參無擴增，提示樣本采集失敗或存在PCR抑制物（如肝素、血紅蛋白）。9.采樣人員的防護裝備應包括（）A.N95/KN95口罩B.一次性醫(yī)用橡膠手套（雙層）C.防護服（醫(yī)用隔離防護服）D.護目鏡或防護面屏答案：ABCD解析：根據(jù)《新冠病毒核酸采樣培訓方案》，采樣人員需穿戴醫(yī)用防護口罩（N95及以上）、護目鏡/面屏、醫(yī)用隔離防護服、雙層手套（內(nèi)層檢查手套，外層外科手套）。10.醫(yī)療廢物處理的正確操作是（）A.感染性廢物與病理性廢物分開包裝B.廢物袋達到3/4滿時封口C.標簽注明“感染性廢物”及產(chǎn)生科室D.由實驗室人員自行焚燒處理答案：ABC解析：醫(yī)療廢物需分類包裝（感染性、病理性等），袋裝量不超過3/4，標簽信息完整。焚燒處理需由具有《危險廢物經(jīng)營許可證》的單位完成，實驗室不得自行處理。三、判斷題（每題2分，共10題）1.核酸檢測采樣時，被采集者可佩戴口罩至采樣前瞬間取下。（）答案：√解析：被采集者應在采樣前瞬間取下口罩，減少暴露時間，采樣后立即佩戴，降低感染風險。2.核酸提取時，不同樣本的吸頭可重復使用，只要未接觸其他物質(zhì)。（）答案：×解析：核酸提取需嚴格一人一管一吸頭，避免交叉污染，重復使用吸頭可能導致樣本間核酸污染，引發(fā)假陽性。3.PCR反應體系配置時，可在樣本處理區(qū)進行。（）答案：×解析：試劑配置應在試劑準備區(qū)（清潔區(qū)）完成，樣本處理區(qū)（污染區(qū)）可能存在核酸氣溶膠，導致試劑污染。4.樣本保存液出現(xiàn)少量沉淀時，可搖勻后繼續(xù)使用。（）答案：√解析：部分保存液（如含胍鹽）可能因低溫出現(xiàn)沉淀，搖勻溶解后不影響性能，若沉淀無法溶解或出現(xiàn)變色，需廢棄。5.核酸檢測結果報告中，可僅填寫“陽性”或“陰性”，無需注明Ct值。（）答案：×解析：根據(jù)《醫(yī)療機構臨床基因擴增檢驗實驗室管理辦法》，結果報告需包含檢測方法、檢測靶標、Ct值（或定性結果），以便臨床醫(yī)生評估病毒載量。6.采樣人員脫防護服時，可直接用手接觸防護服外表面。（）答案：×解析：脫防護服時應避免手接觸外表面（污染面），需通過內(nèi)翻的方式脫下，防止污染內(nèi)層衣物或皮膚。7.核酸檢測實驗室的地面消毒可使用500mg/L含氯消毒液。（）答案：×解析：實驗室污染區(qū)（樣本處理區(qū)）地面需使用2000mg/L含氯消毒液，清潔區(qū)可使用500mg/L，根據(jù)污染風險調(diào)整濃度。8.樣本運輸時，冷鏈箱內(nèi)冰袋需與樣本直接接觸以確保低溫。（）答案：×解析：冰袋應包裹防水袋，避免融化后污染樣本，樣本與冰袋之間用吸水材料隔開。9.核酸檢測中，“假陰性”可能因樣本中病毒載量過低導致。（）答案：√解析：若樣本中病毒核酸量低于檢測下限（如疾病早期或恢復期），可能出現(xiàn)假陰性，需結合臨床癥狀和復檢判斷。10.實驗室廢棄的PCR反應管屬于化學性廢物。（）答案：×解析：PCR反應管接觸過樣本，屬于感染性醫(yī)療廢物，需按感染性廢物處理。四、簡答題（每題5分，共6題）1.簡述咽拭子采樣的正確操作步驟。答案：①核對被采集者身份，指導其頭部微仰，張大嘴，發(fā)出“啊”音（必要時用壓舌板）；②取出咽拭子，避免觸碰其他物品；③將拭子越過舌根，在兩側(cè)咽扁桃體稍微用力擦拭至少3次，然后在咽后壁上下擦拭至少3次；④迅速將拭子放入采樣管，拭子頭完全浸入保存液中，折斷尾部（保留管內(nèi)部分），旋緊管蓋；⑤做好標記，放入密封袋。2.核酸檢測實驗室如何避免氣溶膠污染？答案：①分區(qū)操作，各區(qū)物品專用，避免交叉使用；②樣本處理時使用帶濾芯的吸頭，避免液體倒吸；③擴增后避免打開反應管；④定期進行環(huán)境消毒（如紫外線照射、過氧乙酸熏蒸）；⑤設置排風系統(tǒng)，確保氣流從清潔區(qū)流向污染區(qū)；⑥實驗結束后，用75%酒精擦拭臺面，清空廢液缸并消毒。3.簡述核酸檢測結果審核的要點。答案：①核對樣本信息（姓名、編號、類型）與申請單是否一致；②檢查質(zhì)控結果（陰性質(zhì)控無擴增，陽性質(zhì)控Ct值在預期范圍內(nèi)）；③確認檢測儀器狀態(tài)（無故障報警，校準在有效期內(nèi)）；④觀察擴增曲線（是否呈S型，基線、閾值設置是否合理）；⑤對于灰區(qū)結果（Ct值38-40），需復核并結合臨床信息；⑥審核人員簽字確認后發(fā)布報告。4.采樣過程中，若被采集者突然嘔吐，應如何處理？答案：①立即停止采樣，采樣人員退至安全距離（1米以上）；②待被采集者清理嘔吐物后，更換一次性帽子、面屏及外層手套；③用含氯消毒液（有效氯2000mg/L）覆蓋污染區(qū)域（嘔吐物、地面）30分鐘，然后用吸水材料清除，再用500mg/L含氯消毒液擦拭；④被采集者更換清潔口罩后重新采樣；⑤記錄事件經(jīng)過及處理措施。5.簡述核酸提取儀的日常維護內(nèi)容。答案：①每日清潔加樣針（用75%酒精擦拭），避免殘留物堵塞；②每周檢查廢液缸液面，及時傾倒并消毒；③每月校準分液體積（用電子天平稱量分液量，誤差≤5%）；④每季度更換泵管（避免老化導致液體殘留）；⑤每年由專業(yè)人員維護光學系統(tǒng)（如檢測熒光模塊靈敏度）；⑥記錄維護時間、內(nèi)容及操作人員。6.醫(yī)療廢物分類中，核酸檢測相關廢物包括哪些類別？如何處理？答案：①感染性廢物：采樣拭子、采樣管、防護服、手套、口罩等，使用黃色醫(yī)療廢物袋雙層封裝，標簽注明“新冠核酸檢測廢物”；②損傷性廢物：破碎的離心管、玻璃碎片等，放入專用利器盒（3/4滿時封口）；③化學性廢物：廢棄的核酸提取試劑（如含有機溶劑），