2025年大學(xué)生物學(xué)（基因工程基礎(chǔ)）試題及答案

（考試時(shí)間：90分鐘滿分100分）班級(jí)______姓名______第I卷（選擇題，共40分）答題要求：每題只有一個(gè)正確答案，請(qǐng)將正確答案的序號(hào)填在括號(hào)內(nèi)。(總共20題，每題2分，每題只有一個(gè)正確答案，請(qǐng)將正確答案的序號(hào)填在括號(hào)內(nèi))w1.基因工程誕生的理論基礎(chǔ)不包括以下哪項(xiàng)？（）A.DNA是遺傳物質(zhì)的證明B.DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的確立C.遺傳密碼的破譯D.蛋白質(zhì)工程的發(fā)展w2.限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA后產(chǎn)生的末端不包括（）A.黏性末端B.平末端C.5’突出末端D.3’突出末端w3.以下哪種載體常用于大腸桿菌基因克??？（）A.質(zhì)粒載體B.噬菌體載體C.人工染色體載體D.病毒載體w4.基因工程中常用的DNA連接酶是（）A.T4DNA連接酶B.TaqDNA連接酶C.EcoliDNA連接酶D.以上都不是w5.感受態(tài)細(xì)胞制備的常用方法不包括（）A.CaCl2法B.電擊法C.熱激法D.酶解法w6.以下關(guān)于PCR技術(shù)的說法錯(cuò)誤的是（）A.需要模板DNAB.需要引物C.需要dNTPD.不需要DNA聚合酶w7.核酸分子雜交技術(shù)不包括（）A.Southern雜交B.Northern雜交C.Western雜交D.原位雜交w8.基因文庫構(gòu)建過程中，以下哪種方法用于將外源DNA片段導(dǎo)入宿主細(xì)胞？（）A.轉(zhuǎn)化B.轉(zhuǎn)導(dǎo)C.轉(zhuǎn)染D.以上都是w9.用于篩選重組子的方法不包括（）A.抗生素抗性篩選B.藍(lán)白斑篩選C.核酸雜交篩選D.蛋白質(zhì)電泳篩選w10.基因表達(dá)載體不包含以下哪個(gè)元件？（）A.啟動(dòng)子B.終止子C.增強(qiáng)子D.核糖體結(jié)合位點(diǎn)w11.以下哪種蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)常用于真核生物蛋白表達(dá)？（）A.大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)B.酵母表達(dá)系統(tǒng)C.昆蟲細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)D.哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)w12.蛋白質(zhì)純化過程中，常用的層析方法不包括（）A.離子交換層析B.凝膠過濾層析C.親和層析D.紙層析w13.基因治療的策略不包括（）A.基因置換B.基因修復(fù)C.基因沉默D.基因突變w14.以下關(guān)于基因工程安全性的說法錯(cuò)誤的是（）A.重組DNA技術(shù)可能導(dǎo)致基因擴(kuò)散B.轉(zhuǎn)基因生物可能對(duì)生態(tài)環(huán)境造成影響C.基因治療不會(huì)有任何風(fēng)險(xiǎn)D.應(yīng)加強(qiáng)基因工程的安全性評(píng)估w15.基因工程在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用不包括（）A.培育轉(zhuǎn)基因作物B.提高農(nóng)作物抗蟲性C.改良農(nóng)作物品質(zhì)D.改變農(nóng)作物的光合作用機(jī)制w16.以下哪種工具酶可用于合成cDNA？（）A.逆轉(zhuǎn)錄酶B.DNA聚合酶C.RNA聚合酶D.限制性核酸內(nèi)切酶w17.基因工程中常用的宿主細(xì)胞不包括（）A.大腸桿菌B.酵母C.植物細(xì)胞D.病毒w18.以下關(guān)于基因克隆的說法正確的是（）A.只能克隆原核生物基因不能克隆真核生物基因B.基因克隆就是將基因?qū)胨拗骷?xì)胞C.基因克隆是指對(duì)特定基因進(jìn)行分離、擴(kuò)增和表達(dá)的過程D.基因克隆不需要載體w19.用于檢測(cè)基因表達(dá)水平的方法不包括（）A.RT-PCRB.Northern雜交C.WesternblotD.基因芯片w20.基因工程中常用的標(biāo)記基因不包括（）A.抗生素抗性基因B.熒光蛋白基因C.綠色熒光蛋白基因D.血紅蛋白基因第II卷（非選擇題，共60分）w21.（10分）簡(jiǎn)述基因工程的基本操作流程。w答案：基因工程基本操作流程包括：獲取目的基因，可通過從生物基因組中分離、PCR擴(kuò)增、化學(xué)合成等方法；構(gòu)建基因表達(dá)載體，將目的基因與載體連接；將重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞，常用方法有轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)染等；篩選重組子，利用抗生素抗性、藍(lán)白斑等篩選方法；對(duì)篩選出的陽性克隆進(jìn)行鑒定和分析，如測(cè)序、酶切分析等；最后進(jìn)行目的基因的表達(dá)和功能研究，可在不同表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)并純化蛋白進(jìn)行功能驗(yàn)證。w22.（10分）比較質(zhì)粒載體、噬菌體載體和人工染色體載體的特點(diǎn)及應(yīng)用。w答案：質(zhì)粒載體是最常用的載體，具有較小的分子量，易于操作和改造，常用于大腸桿菌基因克隆和表達(dá)，可攜帶較小的外源基因片段。噬菌體載體能容納較大的外源DNA片段，常用于構(gòu)建基因文庫等，如λ噬菌體載體。人工染色體載體可容納非常大的DNA片段，適用于大片段基因的克隆和分析，如酵母人工染色體（YAC）、細(xì)菌人工染色體（BAC）等，在基因組研究等方面有重要應(yīng)用。w23.（10分）材料：研究人員欲將某植物的抗蟲基因?qū)肓硪恢参镏?，以提高其抗蟲能力。簡(jiǎn)述其可能采用的基因工程方法及步驟。w答案：首先獲取抗蟲基因，可從植物基因組中分離或通過PCR擴(kuò)增。然后構(gòu)建基因表達(dá)載體，將抗蟲基因與合適的載體連接，載體上要有啟動(dòng)子、終止子等元件。接著通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法或基因槍法等將重組載體導(dǎo)入受體植物細(xì)胞。之后篩選含有抗蟲基因的轉(zhuǎn)化細(xì)胞，可利用抗生素抗性篩選等方法。最后對(duì)轉(zhuǎn)化植株進(jìn)行鑒定和檢測(cè)，如通過PCR檢測(cè)抗蟲基因是否整合，通過抗蟲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其抗蟲能力。w24.（15分）材料：某實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建了一個(gè)基因文庫，包含了某生物的全部基因?，F(xiàn)要從中篩選出目的基因。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)篩選方案并說明原理。w答案：篩選方案：首先利用核酸雜交技術(shù)，如Southern雜交。將構(gòu)建基因文庫時(shí)提取的基因組DNA進(jìn)行酶切后電泳分離，轉(zhuǎn)移到膜上。然后制備目的基因的探針，用探針與膜上的DNA片段進(jìn)行雜交。原理：核酸分子雜交的原理是堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。目的基因的探針與含有目的基因的DNA片段能特異性結(jié)合，通過檢測(cè)雜交信號(hào)，就可以找到含有目的基因的克隆，從而篩選出目的基因。w25.（15分）材料：在基因工程藥物研發(fā)中，需要表達(dá)和純化一種藥用蛋白。簡(jiǎn)述表達(dá)該蛋白的過程及純化策略。w答案：表達(dá)過程：首先構(gòu)建含有該藥用蛋白基因的表達(dá)載體，載體上要有合適的啟動(dòng)子、終止子等元件。將表達(dá)載體導(dǎo)入合適的宿主細(xì)胞，如大腸桿菌、酵母或哺乳動(dòng)物細(xì)胞等。根據(jù)宿主細(xì)胞