第四章藥物含量測定技術12滴定分析技術儀器分析技術藥物含量測定技術酸堿滴定法碘量法亞硝酸鈉法非水溶液滴定法紫外-可見分光光度法高效液相色譜法氣相色譜法第二節(jié)儀器分析技術儀器分析技術一、紫外-可見分光光度法二、高效液相色譜法三、氣相色譜法儀器分析技術儀器分析法是利用精密儀器對待測物質的理化性質進行測定，根據(jù)測定產生的信號進行定性、定量分析的一類分析方法在藥品檢驗中，儀器分析方法廣泛運用于藥物的物理常數(shù)測定、鑒別、雜質限量檢查及含量測定等各方面，是藥物質量檢驗的重要方法根據(jù)分析原理的不同，儀器分析法可分為電化學分析法、光譜法、色譜法及質譜法四類有什么特點？1.2.3.一、紫外-可見分光光度法分光光度法是利用待測物質在特定波長處或一定波長范圍內對光的選擇性吸收特征而建立的一種分析方法，屬于光譜分析技術根據(jù)測定波長不同，可分為：紫外分光光度法可見分光光度法紅外分光光度法所用的儀器有紫外-可見分光光度計、紅外分光光度計。其中紫外-可見分光光度法應用最廣泛（二）吸收光譜吸收光譜或稱吸收曲線，是以波長（λ，nm）為橫坐標、吸光度（A）為縱坐標所繪制的曲線請指出圖中的吸收峰和最大吸收波長λmax。？（三）紫外-可見分光光度計紫外-可見分光光度計，是在紫外-可見光區(qū)可任意選擇不同波長的光測定吸光度的儀器主要部件包括：光源、單色器、比色皿、檢測器、訊號處理與顯示器

幾部分組成？比色皿：是用于盛放待測溶液的部件，要求配對使用，匹配的比色皿厚度和透光性應相同。光學玻璃制成的比色皿只能用于可見光區(qū)；熔融石英制成的比色皿適用于紫外光區(qū)，也可用于可見光區(qū)

有兩個相互平行的透光面和兩個不透光面（三）紫外-可見分光光度計根據(jù)朗伯-比爾定律，供試溶液的吸光度A與濃度C之間成正比關系，即

。若已知吸收系數(shù)

，通過測定吸光度A即可計算供試溶液的濃度C，根據(jù)濃度求出藥物的含量

（四）含量測定二、高效液相色譜法高效液相色譜法（highperformanceliquidchromatography，

HPLC），又稱高效液相層析，其基本方法是用高壓輸液泵將流動相泵入到裝有填充劑的色譜柱，注入的供試品被流動相帶入柱內進行分離后，各成分先后進入檢測器，數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄色譜圖并進行數(shù)據(jù)處理，得到測定結果由于應用了各種特性的微粒填料和加壓的液體流動相，本法具有分離性能高、分析速度快的特點（一）色譜法術語1.相相是指一個均勻體系，相與相之間有界面分開。如：固體與液體形成的固-液兩相；互不相溶的兩種液體，比如水和乙醚，形成液-液兩相2.固定相固定在某一支持物上的相，如固定在薄層板上或玻璃柱中的吸附劑硅膠即為固定相3.流動相與固定相互不相溶的液體或氣體，又稱洗脫劑或展開劑4.液相色譜流動相為液體的色譜為液相色譜

（二）基本原理（二）基本原理實現(xiàn)不同組分分離主要是依靠色譜柱與流動相待分離的混合物隨流動相進入色譜柱后，由于不同組分在固定相與流動相中的吸附力、溶解度、離子交換能力不同而導致流動速度不同，或由于不同組分分子大小不同，流經固定相的途徑不同，最終不同組分流出色譜柱的時間各不相同，實現(xiàn)依照一定的順序流出色譜柱而實現(xiàn)分離由于固定相的不同，高效液相色譜法按分離原理不同可分為吸附色譜法、分配色譜法、離子交換色譜法、分子排阻色譜法（三）技術參數(shù)技術1.色譜曲線是以檢測器輸出的電信號強度為縱坐標，時間為橫坐標所繪制的曲線，又稱色譜圖2.基線是在操作條件下，沒有組分流出時的流出曲線。穩(wěn)定的基線應是平行于橫軸的直線3.色譜峰是指色譜曲線上突起的部分

（三）技術參數(shù)技術4.保留時間（tR）是指從進樣開始到某個組分的色譜峰頂點的時間間隔。是色譜法的基本定性參數(shù)5.峰面積（A）是色譜曲線與基線間包圍的面積。是色譜法的定量參數(shù)（三）技術參數(shù)技術6.峰高是色譜峰頂點至基線的距離7.峰寬

峰寬有峰底寬和半高峰寬之分。半高峰寬為峰高一半處的峰寬8.拖尾因子（T）

是衡量色譜峰是否對稱的指標。T在0.95~1.05之間的色譜峰為對稱峰，小于0.95者為前沿峰，大于1.05者為拖尾峰（三）技術參數(shù)技術9.分離度

是相鄰兩組分色譜峰保留時間之差與兩色譜峰峰寬均值之比，又稱分辨率，是色譜法的分離效能指標。除另有規(guī)定外，分離度應大于1.5（四）高效液相色譜儀高效液相色譜儀高壓輸液系統(tǒng)（儲液瓶、高壓泵）、進樣器、色譜柱檢測器數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（計算機及色譜工作站）

幾部分組成？（四）高效液相色譜儀核心部件：色譜柱

色譜柱是實現(xiàn)分離的核心部件，一般采用直形不銹鋼柱管填充固定相組成。在藥品檢驗中常用內徑3.9mm或4.6mm，長15~20cm的分析柱色譜柱內填充的固定相最為常用的是化學鍵合固定相，例如：十八烷基硅烷鍵合硅膠，簡稱ODS或C18柱。色譜柱性能的好壞直接關系到分離效能，對色譜柱的性能可用一定試驗條件下的柱壓、理論板數(shù)n等指標來評價

（四）高效液相色譜儀（五）操作流程1.流動相制備2.供試品溶液制備3.色譜條件及系統(tǒng)適應性試驗4.進樣、測定及計算5.清洗和關機三、氣相色譜法氣相色譜法（gaschromatography，GC）系采用氣體為流動相（載氣）流經裝有填充劑的色譜柱進行分離測定的色譜方法主要用于維生素E等藥物及其制劑的含量測定、溶劑殘留量的檢查、乙醇量測定以及一些揮發(fā)性雜質檢查等不同組分在氣相色譜上的分離主要依靠與固定相的作用力或溶解能力不同而實現(xiàn)氣相色譜的流動相只起到運輸樣品通過色譜柱的作用，因此稱為載氣物質或其衍生物氣化后，被載氣帶入色譜柱進行分離，各組分先后進入檢測器，用數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄色譜信號

（一）基本原理（二）氣相色譜儀氣相色譜儀氣流控制系統(tǒng)進樣系統(tǒng)色譜柱檢測器信號記錄系統(tǒng)溫度控制系統(tǒng)點滴積累1.紫外-可見分光光度法測定含量時，含量計算的依據(jù)是。含量測定常采用吸收系數(shù)法2.紫外-可見分光光度計由五部分組成，石英比色皿應配對使用3.高效液相色譜法分離的核心部件是色譜柱。常用的色譜柱是C18柱，其填充的固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠，簡稱ODS。C18柱常用的流動相系統(tǒng)是甲醇-水，甲醇比例不能低于5%一、單項選擇題（A型題）1.廣泛用于酸、堿、酯類藥物含量測定的滴定分析方法是（

）A.酸堿滴定法B.碘量法C.非水溶液滴定法

D.沉淀滴定法E.配位滴定法2.滴定度T的單位是（

）A.mgB.mlC.mg/mlD.mg*mlE.無單位目標檢測一、單項選擇題（A型題）3.石蕊、酚酞是下列哪種滴定分析中常用的指示劑（）A.酸堿滴定法B.非水堿量法C.亞硝酸鈉法D.碘量法E.配位滴定法4.直接碘量法測定的藥物應是（

）A.氧化性藥物B.還原性藥物C.中性藥物

D.酸性藥物E.無機藥物目標檢測目標檢測一、單項選擇題（A型題）5.非水滴定法測定堿性藥物含量時，常用的滴定液是（

）A.高氯酸B.高碘酸C.三氯醋酸

D.甲醇鈉E.冰醋酸6.在非水滴定中，溶解弱堿性藥物以增強其堿性，常用的溶劑是（

）A.乙二胺B.二甲基甲酰胺C.冰醋酸

D.甲醇E.乙醚一、單項選擇題（A型題）7.配制硫代硫酸鈉滴定液時使用新煮沸冷卻的蒸餾水，目的是（

）A.除去CO2B.除去O2C.殺滅嗜硫菌D.A+B+CE.獲取雙蒸水目標檢測一、單項選擇題（A型題）8.氫化可的松的含量測定是利用其在242nm波長處測定吸光度，在測定時（

）A.應該使用玻璃比色皿和鎢燈

B.應該使用石英比色皿和氘燈

C.應該使用玻璃比色皿和氘燈

D.應該使用石英比色皿和鎢燈

E.可使用任何材質的比色皿和燈源目標檢測一、單項選擇題（A型題）9.A=

CL式中的C是（

）A.百分吸收系數(shù)B.摩爾吸收系數(shù)C.液體的厚度

D.待測溶液的百分濃度(g/100ml)E.被測溶液的濃度(g/ml)10.采用紫外-可見分光光度法測定藥物含量時，為了減少測定誤差，應調整溶液的濃度使吸光度（

）A.盡量大B.在0.3～0.7之間C.大于0.7D.大于1.0E.在0.7～1.2之間目標檢測一、單項選擇題（A型題）11.以十八烷基硅烷鍵合硅膠為固定相的反相色譜系統(tǒng)，流動相中有機溶劑的比例應不低于（

）A.0.5%B.5%C.10%D.15%E.20%目標檢測一、單項選擇題（A型題）12.下列含量測定方法中，可利用“待測組分與對照品的濃度之比等于其峰面積之比”計算待測組分含量的是（

）A.紫外-可見分光光度法的對照品比較法

B.紫外-可見分光光度法的吸收系數(shù)法

C.高效液相色譜法的面積歸一化法

D.高效液相色譜法的內標法

E.高效液相色譜法的外標法目標檢測目標檢測一、單項選擇題（A型題）13.高效液相（或氣相）色譜儀中實現(xiàn)分離的核心部件是（

）A.輸液泵B.進樣器C.色譜柱D.檢測器

E.色譜工作站14.高效液相色譜法中常使用的C18柱的固定相屬于（

）A.化學鍵合固定相B.吸附劑C.離子交換樹脂

D.葡聚糖凝膠E.聚丙烯酰胺凝膠目標檢測一、單項選擇題（A型題）15.除另有規(guī)定外，氣相色譜法進行藥物分析所用的載氣均指（

）A.空氣B.氫氣C.氦氣D.CO2E.氮氣目標檢測二、配伍選擇題（B型題）[16-20]A.酸堿滴定法B.非水堿量法C.碘量法

D.亞硝酸鈉滴定法E.紫外分光光度法16.具有還原性的藥物如維生素C的含量測定可采用（

）17.有機弱堿的含量測定可采用（

）

18.酸性較強的芳香酸

的含量測定可采用（

）

19.有苯環(huán)和共軛結構的有機化合物含量測定可采用（

）

20.芳香第一胺類藥物的含量測定可采用（

）

目標檢測二、配伍選擇題（B型題）[21-25]A.RfB.HPLCC.ODSD.tRE.GC21.比移值的符號（

）22.保留時間的符號（

）23.氣相色譜的簡稱（

）24.十八烷基硅烷鍵合硅膠的簡稱（

）25.高效液相色譜法的簡稱（）目標檢測三、多項選擇題（X型題）26.用紫外分光光度法測定維生素B12含量的操作過程包括（

）

A.稱量樣品B.溶解、稀釋C.測定吸光度

D.記錄峰面積E.計算含量27.比色皿使用時應該注意（

）A.裝溶液2～3mlB.配對使用C.潤洗2～3遍

D.手拿毛玻璃面E.用擦鏡紙擦拭目標檢測三、多項選擇題（X型題）28.用紫外分光光